中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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玛咖多糖对D-半乳糖衰老模型小鼠免疫器官的保护作用
目的:研究玛咖多糖对D-半乳糖(D-gal)所致亚急性衰老小鼠免疫器官氧化损伤的保护作用及其作用机制.方法:50只ICR小鼠随机分为5组,分别为正常组,D-gal模型组,玛咖多糖低、中、高剂量组.每日ihD-半乳糖500 mg· kg-造模,玛咖多糖给药组另ig玛咖多糖溶液(75,150,300 mg· kg-1),连续造模给药56 d测定小鼠血清或肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),单胺氧化酶(MAO)活性及丙二醛(MDA)含量,透射电镜下观察玛咖多糖对D-gal损伤小鼠胸腺组织影响,并用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测脾脏组织p53,SOD2,CAT在mRNA水平表达情况.结果:与正常组比较,模型组细胞出现脾窦扩张,核周间隙大,染色质边集,部分细胞出现凋亡,模型组小鼠血清SOD,CAT活性明显降低,MDA含量明显升高,小鼠肝脏中SOD,GSH-Px活性明显降低,MAO活性及MDA含量明显升高,小鼠脾脏组织p53 mRNA明显升高,SOD2,CAT mRNA明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,玛咖多糖中、高剂量组胸腺组织中淋巴细胞分布较为均匀,核周分界清晰,胞浆内无空泡,玛咖多糖给药组能明显提高小鼠血清SOD,CAT活性,明显降低MDA含量,明显升高SOD,GSH-Px活性,降低MAO活性及MDA含量,玛咖多糖高剂量组明显下调小鼠脾脏p53mRNA水平,中、高剂量组明显升高CAT mRNA水平,高剂量组明显升高SOD2mRNA水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:玛咖多糖对致衰老模型小鼠免疫器官有保护作用,可能机制是提高抗氧化酶活性及抗氧化酶在基因水平的表达,降低老化相关酶活性.
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补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢Bcl-2/Bax表达的影响
目的:观察补肾调冲方对雷公藤多苷片所致卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)雌性大鼠卵巢性激素水平和卵巢中B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2),促进凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated Xprotein,Bax)蛋白及mRNA表达的影响,探讨补肾调冲方的预防作用.方法:SD雌性大鼠42只,随机分为正常组,模型组,结合雌激素组,补肾调冲方预防高、中、低剂量组.运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中雌二醇(estradiol,E2),卵泡刺激素(follicule-stimulating hormone,FSH),黄体生成素(luteinizing hormone,LH),孕酮(progesterone,P)水平.蛋白质免疫印迹(Western blot)法和逆转录-聚合酶链式方应(RT-PCR)法检测卵巢组织中Bcl-2,Bax蛋白和mRNA的表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠FSH,LH含量明显升高,E2的含量明显降低,卵巢组织中Bcl-2蛋白及mRNA的表达明显降低,Bax蛋白及mRNA的表达明显升高(P＜0.01);补肾调冲方各给药组和结合雌激素组E2的含量均高于模型组(P＜0.01),其中补肾调冲方低、中、高剂量和结合雌激素组E2含量与正常组比较,差异无统计学意义.补肾调冲方各给药组和结合雌激素组FSH,LH的含量均低于模型组(P＜0.01);低、中、高剂量组和结合雌激素组FSH,LH含量与正常组比较,差异无统计学意义.各组与正常组P含量比较差异无统计学意义.补肾调冲方预防低、中、高剂量组和结合雌激素组Bcl-2蛋白及mRNA的表达明显高于模型组(P＜0.01);Bax蛋白及mRNA的表达明显低于模型组(P＜0.01).结论:补肾调冲方对卵巢具有一定的保护作用,可以预防卵巢早衰的发生.其作用机制可能与补肾调冲方中某些中药能够调节卵巢性激素水平,维持Bcl-2,Bax的平衡,降低卵泡闭锁的速度,抑制卵泡的过度凋亡,改善卵巢的功能.
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鳖甲煎丸对小鼠Matrigel种植体新生血管的影响
目的:研究鳖甲煎丸对小鼠血管生成及新生血管结构的影响,并探讨可能的作用机制.方法:取Balb/c小鼠32只,采用碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)诱导小鼠腹壁Matrigel种植体方法进行血管生成实验,Matrigel与b-FGF,肝素混合后植入小鼠腹壁正中区域皮下,将小鼠随机分成鳖甲煎丸高、低剂量组(12,6 mg·kg-1),正常组,内皮抑素组(5 mg·kg-1),每组8只,在Matrigel种植前3d,各组分别给予不同的实验药物,连续给药8d,第8天取出Matrigel,测量Matrigel种植体中血红蛋白含量,并进行苏木素-伊红(HE)染色及免疫组织化学染色,进行微血管计数(MDC),并观察微血管结构特征及发育阶段.结果:鳖甲煎丸高、低剂量组血红蛋白含量及MDC均低于正常组,且鳖甲煎丸低剂量组血红蛋白含量及MDC较高剂量组低;HE染色显示鳖甲煎丸低剂量及高剂量组可见散在新生血管,新生血管数量较正常组少;CD34免疫组化显示鳖甲煎丸组内皮细胞数量较正常组减少,且血管结构模糊、内皮细胞着色变浅,且鳖甲煎丸低剂量组细胞数低于鳖甲煎丸高剂量组.结论:鳖甲煎丸对新生血管具有抑制作用,抑制作用强度与浓度有关,低剂量鳖甲煎丸抑制血管生成作用强于高剂量鳖甲煎丸.
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虎杖提取物及其有效部位的大鼠抗痛风性关节炎试验
目的:观察虎杖提取物及其有效部位对痛风性关节炎的治疗作用.方法:SD大鼠随机等分为空白组,模型组,秋水仙碱组(0.28 mg· kg-1),虎杖提取物高、中、低剂量组(260,130,65 mg· kg-1),蒽醌有效部位组(11 mg·kg-1),二苯乙烯有效部位组(650 mg·kg-1),连续灌胃给药14 d,每天1次.第12天给药1h后,采用大鼠右侧后肢踝关节腔注射尿酸钠溶液0.2 mL制备大鼠痛风性关节炎模型,造模后于不同时间点计算肿胀度.运用比色法测定大鼠血清中尿酸(UA)与黄嘌呤氧化酶(XOD)水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠踝关节滑膜组织的病理变化.结果:与空白组比较,模型组大鼠踝关节肿胀度显著增加.与模型组比较,秋水仙碱组和虎杖提取物高、中剂量组均能显著减轻肿胀度,蒽醌有效部位组在2,4h能显著降低肿胀度,二苯乙烯有效部位组在2,4,8,12,24,48 h均能显著降低肿胀度.与空白组比较,模型组UA和XOD水平显著增加.与模型组比较,虎杖提取物各剂量组能不同程度地降低UA和XOD水平,二苯乙烯和蒽醌有效部位可降低血UA和XOD水平.HE染色发现虎杖提取物及其有效部位能改善滑膜组织病理的变化.结论:虎杖提取物的抗痛风性关节炎可能是二苯乙烯和蒽醌共同作用的结果.
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氧化苦参碱对醛固酮诱导心肌细胞损伤的保护作用
目的:研究氧化苦参碱(OMT)对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的保护作用,并分析其对盐皮质激素受体(MR)转录和表达的影响.方法:采用胰酶消化差速贴壁法分离纯化新生Sprague-Dawley(SD)大鼠原代心肌细胞,采用肌钙蛋白和肌动蛋白免疫细胞化学法鉴定心肌细胞及其纯度,并建立ALD诱导的细胞损伤模型.采用噻唑蓝(MTT)法确定ALD导致心肌细胞损伤的佳作用浓度与时间.实验分为空白组(无血清培养基),ALD组(佳刺激浓度组),OMT高剂量(ALD+100 mg·L-1OMT)组和OMT低剂量(ALD +50 mg·L-10MT)组.OMT预保护2h,继续加入ALD共同作用36 h,并用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)外漏检测分析OMT对ALD诱导心肌细胞膜损伤的保护作用.逆转录-PCR (RT-PCR)分析MR mRNA水平.免疫印迹法(Western blot)检测MR和醛固酮合成酶(CYP11 B2)的蛋白表达.结果:16 mg·L-1 ALD诱导心肌细胞36 h后能显著引起细胞损伤,OMT(50,100 mg·L-1)能够抑制ALD诱导的细胞活力下降及LDH外漏量升高.同时,OMT(50,100mg· L-1)能够抑制ALD诱导的MR mRNA水平和蛋白表达升高,上调CYP11 B2蛋白表达.结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制ALD-MR系统激活有关.
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木香挥发油诱导人白血病细胞MV4-11凋亡及其作用机制的探讨
目的:以人急性髓性白血病MV4-11细胞为研究对象,探讨木香挥发油对MV4-11细胞增殖与凋亡抑制作用及其作用机制.方法:以质量浓度分别为3,6,12,25,50,100 mg·L-1的木香挥发油作用于人急性髓性白血病MV4-11细胞不同时间,另设空白组,采用噻唑蓝(MTT)法检测木香挥发油对其增殖抑制作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin V-FITC,PI双染及PI单染法应用流式细胞术检测细胞凋亡和周期,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测蛋白激酶B(AKT),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)凋亡蛋白的表达.结果:木香挥发油对MV4-11细胞的半抑制浓度(IC50)为13.33 mg·L-1;木香挥发油作用于MV4-11细胞24h后可使细胞核皱缩,染色质凝聚,形成明显的凋亡小体;与空白组比较,木香挥发油G0/G1期和G2/M期细胞明显减少,S期细胞明显增多(P ＜0.05,P＜0.01);与空白组比较,12,25,50,100,150 mg·L-1木香挥发油能诱导MV4-11细胞凋亡(P＜0.05);与空白组比较,25,50,100,150 mg·L-1木香挥发油可抑制AKT的磷酸化,并促进Caspase-3蛋白的降解(P ＜0.05,P＜0.01).结论:木香挥发油能抑制人白血病细胞MV4-11细胞的增殖,其作用机制可能与抑制AKT活性进而诱导细胞凋亡效应有关.
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二十五味松石丸对家兔内毒素性肝损伤的影响及形态学观察
目的:以内毒素攻击肝组织,造成肝损伤家兔模型,探讨二十五味松石丸对家兔内毒素性肝损伤的影响,并观察家兔肝脏组织形态学变化.方法:将30只家兔随机分为5组,分别为模型组,二十五味松石丸高、中、低剂量组(0.5,0.167,0.06 g·kg-1),地塞米松组(0.005 g·kg-1),每组6只,每日ig给药1次,连续5d,模型组和地塞米松组分别以等量生理盐水ig,在第5天灌药前分别用内毒素攻击预先ig的家兔,比较各组家兔于造模12 h内的死亡情况,检测各组家兔体温、血常规以及肝功能情况,并采用苏木素-伊红(HE)观察各组家兔肝脏组织病理学变化.结果:二十五味松石丸高剂量能降低内毒素血症家兔血清总胆红素及丙氨酸氨基转移酶,肝脏病理损伤明显减轻,二十五味松石丸低剂量能降低内毒素血症家兔血清天门冬氨酸氨基转移酶以及血液白细胞总数,与模型组比较均具有明显的统计学差异(P＜0.05).结论:二十位味松石丸对家兔内毒索性肝损伤具有一定的保护作用.
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护肾通淋汤对肾结石ESWL术后肾损伤的保护作用
目的:观察护肾通淋汤对肾结石体外冲击波碎石(ESWL)术后肾损伤的保护作用及对血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平的影响.方法:128例肾结石患者随机分为对照组(63例)和观察组(65例).两组均采用ESWL治疗,术后给予抗感染等对症处理,对照组口服排石颗粒,20 g/次,3次/d,连续服用14 d;观察组口服护肾通淋汤,1剂/d,连续服用14 d.记录腰痛减轻时间和肉眼血尿消失时间;于ESWL术后当天,7d,14 d采取B超检测排石情况;于术后12 h,7d,14 d检测SOD,MDA,β2微球蛋白(β2-MG),尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)水平.结果:观察组有效率为93.85％,高于对照组的82.54％ (P ＜0.05);观察组腰痛减轻时间和肉眼血尿消失时间均短于对照组(P ＜0.01);ESWL治疗后7,14 d,观察组SOD水平显著高于对照组(P＜0.01),MDA水平低于对照组(P＜0.01);观察组NAG,β2-MG和CysC水平均低于同期对照组(P＜0.01).结论:护肾通淋汤用于肾结石ESWL术后患者,能缩短病程,提高临床疗效,减少并发症,并能抗氧化,减轻肾实质损伤,促进ESWL术后患者的康复.
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真武汤合逍遥散加减治疗慢性心力衰竭伴发抑郁阳气亏虚兼肝气郁结证
目的:探讨真武汤合逍遥散加减治疗慢性心力衰竭伴发抑郁症的临床疗效,及对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),N末端B型利钠肽原(NT-proBNP),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平的影响.方法:将148例患者随机分为对照组和观察组.对照组口服路优泰,1片/次,3次/d.观察组口服真武汤合逍遥散加减,1剂/d.疗程12周.进行治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD),汉密尔顿焦虑量表(HAMA),匹兹堡失眠质量指数(PSQI)和明尼苏达心衰生活质量调查表(MLHFQ)评分;采用超声心动图检测治疗前后左室舒张末期内径(LVED),收缩末期内径(LVSD),左心室射血分数(LVEF)和心输出量(C0),进行治疗前后Lee氏心衰评分;检测治疗前后AngⅡ,NT-proBNP,IL-6,TNF-α和hs-CRP水平.结果:观察组心衰疗效总有效率、郁症疗效总有效率、中医证候疗效总有效率高于对照组(P＜0.05,P＜0.01);观察组治疗后HAMD,HAMA,PSQI,MLHFQ量表评分均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组LVED,LVSD和Lee氏评分低于对照组,LVEF和CO高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组AngⅡ,NT-proBNP,IL-6,TNF-α和hs-CRP水平低于对照组(P＜0.01).结论:采用真武汤合逍遥散治疗慢性心力衰竭伴抑郁障碍患者,能改善患者的心衰和抑郁症状,提高患者生活质量,调节AngⅡ,NT-proBNP介质和炎症介质水平,对于心衰和抑郁均有显著疗效.
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涤浊化痰汤治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证临床观察
目的:探讨涤浊化痰汤对急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)痰瘀阻肺证患者肺功能和炎症因子的影响,并探讨其作用机制.方法:156例AECOPD患者随机分为对照组和观察组.对照组给予控制性氧疗,抗感染,激素,支气管舒张剂等综合治疗措施.对照组给予异丙托溴铵气雾剂,4次/d,1次2喷;注射用头孢米诺钠,2g/次,静脉滴注,2次/d;口服乙酰半胱氨酸颗粒,0.4g/次,3次/d.观察组在对照组的基础上加用涤浊化痰汤,1剂/d.两组疗程均为2周.检测治疗前后肺功能,记录第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)和第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1％);动脉血气分析指标包括血氧分压(Pa02),二氧化碳分压(PaC02)和血氧饱和度(SaO2),治疗前后各检测1次;痰瘀阻肺证评分、呼吸困难严重程度采用改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)和慢阻肺患者自我评估测试(CAT),治疗前后各评价1次;检测治疗前后核转录因子-κB(NF-κB),血清白细胞介素-10(IL-10),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平.结果:观察组临床疗效总有效率高于对照组(P＜0.05);观察组气流受限严重程度的肺功能分级低于对照组(P＜0.05);治疗后观察组痰瘀阻肺证,mMRC,CAT评分低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组FEV1和FEV1/FVC均高于对照组(P＜0.01).治疗后观察组PaCO2低于对照组,PaO2和SaO2高于对照组(P＜0.01).治疗后观察组NF-κB,TNF-α和hs-CRP水平低于对照组,IL-10高于对照组(P＜0.01).结论:在西医常规治疗的基础上,加用涤浊化痰汤治疗AECOPD痰瘀阻肺证能进一步减轻临床症状,改善肺功能,减轻炎症反应,提高临床疗效.
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芍药汤加减保留灌肠联合美沙拉嗪肠溶片治疗大肠湿热证溃疡性结肠炎
目的:探讨芍药汤加减保留灌肠联合美沙拉嗪肠溶片的中西医结合方案治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效及对免疫炎症反应的影响.方法:将160例符合条件的UC患者随机按数字表法分为对照组和观察组各80例.对照组采用美沙拉嚷肠溶片,吞服勿咀嚼,1 g/次,4次/d;及氢化可的松琥珀酸钠盐灌肠液100 ～ 200 mg,保留灌肠.观察组采用美沙拉嗪肠溶片内服及芍药汤加减保留灌肠.两组保留灌肠每周5d,休息2d,均连续治疗8周.进行治疗前后Sutherland疾病活动指数,Baron评分,Geboes指数和大肠湿热证评分;采用IBDQ量表评价患者治疗前后生活质量;检测治疗前后肿瘤坏死因子-α(TN F-α),白细胞介素-4(IL-4),IL-1β,IL-10,转化生长因子-β(TGF-β)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)水平.结果:观察组疾病综合疗效总有效率为90％,高于对照组的76.25％,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组中医证候总有效率为92.5％,高于对照组的75％,差异有统计学意义(P＜0.01);治疗后观察组Sutherland疾病活动指数,Baron评分,Geboes指数和大肠湿热证评分均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组IBDQ量表之肠道症状、全身症状、情感能力、社会能力4个维度评分和总分均高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组血清IL-1β和TNF-α水平低于对照组,IL-4和IL-10高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组TGF-β高于对照组,MMP-1低于对照组(P＜0.01).结论:芍药汤加减保留灌肠联合美沙拉嗪肠溶片口服治疗活动期大肠湿热型UC患者,能改善临床症状,提高肠黏膜愈合,提高患者的生活质量,调节患者的免疫功能和炎症反应.
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通络清空汤辨治偏头痛急性发作期的疗效及作用机制
目的:探讨通络清空汤辨治偏头痛急性发作期的临床疗效及对血清5-羟色胺(5-HT),P物质(SP),内皮素(ET),同型半胱氨酸(Hcy)和一氧化氮(N0)水平的影响.方法:将121例符合要求的患者随机按数字表法分为观察组60例和对照组61例.对照组采用布洛芬片和苯甲酸利扎曲普坦片治疗;观察组西医治疗同对照组,加用通络清空汤辨证治疗.两组疗程均为4周.评价即时镇痛效应,采用偏头痛残疾程度评估问卷(MIDAS)评价生活质量,对头痛程度、发作次数、持续时间、伴随症状等主要症状进行评分,检测治疗前后5-HT,SP,ET,NO和Hcy水平.结果:观察组即时疗效有效率为83.33％,高于对照组的63.93％ (P ＜0.05);观察组近期临床疗效总有效率为93.33％,优于对照组的80.33％ (P ＜0.05);治疗后2,3,5,7h观察组VAS评分均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01);治疗后观察组主要症状,MIDAS评分低于对照组(P＜0.01);与健康对照组比较,两组偏头痛患者治疗前5-HT水平均明显下降,SP,ET,NO和Hcy水平明显升高(P＜0.01),治疗后观察组5-HT水平高于对照组(P＜0.01);治疗后观察组SP,ET,NO和Hcy水平均低于对照组(P＜0.01).结论:在西医常规治疗的基础上,采用通络清空汤辨证治疗偏头痛急发作期患者能快速止痛,减少疼痛发作,改善生活质量,即时疗效和近期疗效均优于单纯西医治疗,其作用机制可能与调节神经-内分泌因子和血管内皮功能有关.
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消癥饮治疗子宫内膜异位症临床观察及机制探讨
目的:探讨消癥饮治疗子宫内膜异位症(EMS)疼痛(气滞血瘀证)的疗效及对基质金属蛋白酶(MMP)-3,MMP-9,血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响.方法:108例患者随机分成对照组(53例)和观察组(55例).两组均口服孕三烯酮胶囊,2.5 mg/次,2次/周,连续服用6个月.对照组口服散结镇痛胶囊,4粒/次,3次/d.观察组口服消癥饮,每日1剂.两组每月服药28 d,连续治疗6个月,经期不停药.检测治疗前后血清癌抗原125(CA125)和CA199水平,检测治疗前后血清MMP-3,MMP-9,VEGF和TNF-α水平;进行治疗前后疼痛症状、体征评分和子宫内膜异位症生存质量量表(EHP-5)评分.结果:治疗后观察组视模拟(VAS)、痛经、盆腔痛、盆腔压痛、骶韧带触痛结节评分均显著低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组CA125和CA199水平明显低于对照组(P＜0.05);治疗后观察组血清MMP-3,MMP-9,VEGF,TNF-α水平明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.01);治疗后观察组EHP-5量表疼痛、情绪状态、控制感、性生活、不孕和治疗效果评分显著低于对照组(P＜0.01);观察组临床疗效总有效率高于对照组(p＜0.05).结论:消癥饮能显著改善EMS患者疼痛,提高患者生活质量,降低血清CA125,CA199,MMP-3,MMP-9,VEGF和TNF-α水平,从而促进疾病的康复.
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黄藤的研究进展
黄藤是我国的传统中药,其有效成分黄藤素具有疗效显著、副作用低的特征,药用植物黄藤具有越来越广的应用价值.本文通过对国内外相关文献进行整理与分析,综述了黄藤的化学成分和药理作用的新研究进展,为深入研究黄藤素的化学成分和药理作用提供参考信息.目前的研究表明,黄藤主要含有生物碱、内酯,还含有少量的萜类、醛类、挥发油等化学成分,其中主要的生物碱有黄藤素(盐酸巴马汀)、药根碱,内酯类成分主要以黄藤内酯为主.药理活性研究表明,黄藤的提取物和其所含的化学成分具有抗炎、抑菌、抗病毒、增强免疫力、提高记忆等药理作用,并且关于药理活性的研究主要集中在黄藤素,被当代医学称为是“植物抗生素”.随着国内外对黄藤素的新作用靶点、新疗效的发现,未来黄藤素的国际市场需求很大.但是对于黄藤素的抗炎、抑菌的作用机制尚缺乏相应的深入研究,而且关于黄藤的化学成分研究也有待进一步深入,这也限制了黄藤资源综合的开发利用.本文对黄藤的化学成分和药理活性进行系统的综述,这将为黄藤的深入研究提供参考,也有利于充分开发利用天然药物资源,拓宽黄藤在开发植物药方面新的发展前景,也为黄藤安全、有效的应用于临床提供科学的依据.
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水苏碱药理作用研究进展
水苏碱是中药益母草的主要成分之一,益母草全草含生物碱0.11％ ～2.09％,其中水苏碱为0.59％～1.72％,为其主要成分,目前上市的益母草口服液、益母草颗粒、益母草膏等,均以水苏碱作为质量控制的指标性成分,水苏碱亦能人工合成,近年来其药理研究比较丰富.本文通过检索近10年国内外有关水苏碱的药理研究文献,综述水苏碱的药理活性,结果显示水苏碱具有兴奋子宫、抗炎、改善血液流变学、抗血栓等多种药理作用,提示具有开发价值,也为其进一步开发提供参考.
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党参不同配伍研究进展
中药配伍是组成方剂的基础和核心,也是研究方剂的关键.党参是我国常用的大宗药材,党参配伍后具有广泛的应用价值,主要表现出协同作用或者拮抗作用,终影响临床效果.因此,党参的配伍研究具有很高的价值.近年来,广大药学工作者对党参配伍进行了很多实验研究,本文综述了近年来国内外学者对党参配伍的相关研究,并进行整理和分析,随着我国科学技术的发展,各种研究方法的引入以及现代高新技术手段的使用,将会更有力的揭示、阐述党参及其组方的配伍特点及内在规律,这将促进中药现代化的发展,为党参的进一步研究和临床应用奠定良好的基础,也为党参的应用研究和研究党参的科学工作者提供参考依据.
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多指标综合评分法优选柴芍肠宁颗粒的提取工艺
目的:采用多指标综合评分法优选柴芍肠宁颗粒的提取工艺,为该制剂的生产工艺提供技术参数.方法:采用正交试验法,以出膏率和芍药苷、盐酸小檗碱、柠檬酸提取量为定量指标,小鼠小肠推进率、小鼠腹泻指数为药理指标,考察溶剂用量、提取时间、提取次数对提取效果的影响,通过综合评分法优选柴芍肠宁颗粒的提取工艺.结果:乌梅单煎的优提取工艺条件为加10倍量水提取2次,每次1h;柠檬酸提取量154.17 mg·g-1,出膏率31.27％.其余药味的佳提取工艺条件为加10倍量水提取3次,每次1h;芍药苷、盐酸小檗碱提取量分别为3.97,0.66 mg·g-1,出膏率26.36％,小肠推进率61.97％,腹泻指数0.98.结论:该提取工艺设计合理、稳定可行,对柴芍肠宁颗粒的生产工艺制定具有一定的指导意义.
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紫花牡荆素壳聚糖微球的制备及体外释药性能考察
目的:制备紫花牡荆素壳聚糖微球,优化其制备工艺,并考察其体外释放性质.方法:以山梨糖醇酐单油酸酯和聚山梨酯-80为乳化剂,液体石蜡为油相,戊二醛作交联剂,采用乳化交联法制备紫花牡荆素壳聚糖微球.利用Design-Expert8.0.6软件优化紫花牡荆素壳聚糖微球的制备工艺,扫描电镜观察目标微球形态,动态透析法检测目标微球的体外释药性能.结果:紫花牡荆素壳聚糖微球佳制备工艺条件为油水相比例6∶1,交联时间3h,转速1 400 r·min-1;目标微球形态较圆整、粒径分布较为均匀,平均粒径7.92μm,载药量29.20％,包封率39.23％.紫花牡荆索壳聚糖微球在4 h的药物累计释放率26.75％,之后释药平缓,释放变慢,48 h的药物累计释放率95％.微球在磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4)中的释放遵循Higuchi方程.结论:优化的制备工艺简单易行.紫花牡荆素壳聚糖微球载药量较高,具有一定的缓释作用.
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阿魏酸脂质体的体外释放度考察
目的:通过优化处方和工艺制备缓释、长效的阿魏酸脂质体植入制剂.方法:采用HPLC测定阿魏酸含量,流动相乙腈-0.1％磷酸(22∶78),检测波长324 nm.运用醋酸钙主动载药技术制备阿魏酸脂质体,使用透析法考察阿魏酸脂质体的释放度.通过单因素试验考察磷脂材料、胆固醇含量、粒径及不同血液成分对阿魏酸脂质体释放度的影响,利用温敏凝胶技术进一步延长阿魏酸脂质体的缓释效果.结果:阿魏酸脂质体选择氢化大豆磷脂(HSPC)为脂质体膜材,HSPC与胆固醇的摩尔比4∶1,超声时间1 min,脂质体平均粒径397.7 nm,可实现12 h缓释效果,血液成分能够加速脂质体的释放但不同血液成分无显著性差异.采用温敏凝胶技术可延长阿魏酸脂质体的缓释效果,体外释药符合Higuchi方程且持续释放时间＞48 b.结论:胎牛血清和大鼠血浆可替代人血清用于阿魏酸脂质体的释放度考察.通过控制脂质体的处方与工艺因素,并结合温敏凝胶技术可实现阿魏酸脂质体的缓释、长效.
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基于药物靶点从传统中药库中高通量虚拟筛选HIV-1整合酶抑制剂
目的:运用虚拟筛选技术从传统中药数据库(traditional Chinese medicine database platform,TCMSP)中寻找HIV-1整合酶的中药小分子抑制剂.方法:以整合酶与细胞因子LEDGF/P75相互作用位点为靶点,运用分子对接技术进行首轮筛选,然后运用ADME/T预测进行第二轮筛选,后基于靶点与药物相互作用位点进行第三轮筛选.结果:以原配体(4-[(5-bromo-4-{[2,4-dioxo-3-(2-oxo-2-phenylethyl)-1,3-thiazolidin-5-ylidene] methyl}-2-ethoxyphenoxy)-methyl]-benzoic acid,D77)为阳性对照,筛选出2个类药性良好的天然小分子化合物,二者与HIV-1整合酶亲和力及相互作用基团均优于D77(新型的HIV-1整合酶抑制剂),并且确定了它们的中草药来源.结论:成功建立一整套高通量虚拟筛选HIV-1整合酶抑制剂的策略,该研究结果可促进从传统中药库中提取、设计以及实验合成新的抗艾滋病药物.
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热毒宁注射液治疗手足口病的系统评价
目的:系统评价热毒宁注射液治疗手足口病的临床疗效及安全性,为临床治疗提供循证参考.方法:采用Cochrane系统评价方法,全面检索Cochrane Library,CBM,CNKI,Wanfang等数据库,查找热毒宁注射液治疗手足口病相关的随机对照试验(RCT),采用RevMan 5.2软件进行Meta分析.结果:共24项随机对照研究符合纳入标准,其中热毒宁VS利巴韦林17项,合计2 412例患者,热毒宁联合利巴韦林VS利巴韦林7项,合计891例患者.Meta分析结果显示,与利巴韦林相比,热毒宁治疗手足口病的临床总有效率更高[OR =4.71,95％CI(3.46,6.42),P＜0.000 01],退热时间[WMD=-1.20,95％ CI(-1.44,-0.95),P＜0.000 01],皮疹消退时间[WMD=-1.51,95％CI(-1.95,-1.07),P＜0.000 01],口腔疱疹或溃疡消退时间[WMD=-1.36,95％ CI(-1.76,-0.97),P＜0.000 01],平均住院时间[WMD=-2.81,95％ CI(-3.79,-1.82),P＜0.000 01]均短于利巴韦林,差异均具有统计学意义.与利巴韦林单药治疗相比,热毒宁与利巴韦林联合用药在临床总有效率[OR=5.48,95％ CI(3.06,9.80),P＜0.000 01],退热时间[WMD=-1.70,95％ CI(-2.05,-1.35),P＜0.000 01],皮疹消退时间[WMD=-1.91,95％ CI(-2.99,-0.83),P＜0.000 01],口腔疱疹或溃疡消退时间[WMD=-1.81,95％CI(-2.09,-1.53),P＜0.000 01],平均住院时间[WMD=-2.32,95％CI(-3.59,-1.05),P=0.000 3]更有优势,差异均具有统计学意义.纳入的24项研究中热毒宁的不良反应较利巴韦林表现轻微,使用更为安全.结论:当前证据表明热毒宁联用利巴韦林与单用热毒宁治疗手足口病的疗效优于单用利巴韦林,且安全性良好.但由于纳入的研究质量有限,尚需设计更多大样本、高质量的临床试验进一步验证.
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古代医家应用海洋中药海螵蛸临床用药经验模式分析
目的:挖掘海洋中药海螵蛸历代发展所积累的临床用药经验,为海螵蛸的临床应用和研发提供基础.方法:以《中医方剂大辞典》,《中华医典》作为方剂基本信息来源,筛选包含海洋中药海螵蛸方剂,应用频数分析及关联规则挖掘技术和关联网络构建技术进行分析.结果:共筛选方剂721首,涉及中药662味,与海螵蛸配伍频率高的单味药为龙骨、当归、赤石脂,与鳖甲、附子配合多治疗疟疾,与当归配合治疗带下病;与蒲黄等配合治疗崩漏.关联网络显示,妇科和五官科病症如崩漏、带下病和脓耳等节点聚集性非常高,从混睛障节点的网络关系图可以看出,海螵蛸配伍冰片、白丁香等,以膏剂外用来治疗混睛障.结论:论文挖掘了历代医家积累的海螵蛸在功效主治、临床用量用法、配伍规律等方面的用药经验,补充了对海洋中药的认识,为海洋中药现代临床应用和新药研发提供了参考和基础.
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基于中医传承辅助系统的毕荣修教授治疗激素性股骨头坏死处方规律探析
目的:分析毕荣修教授门诊及病房治疗激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)方剂的处方规律.方法:收集并严格筛选毕荣修教授治疗SANFH的方剂,使用中医传承辅助系统(v2.5)软件进行逐一录入并进行数据处理,对筛选出的治疗SANFH的方剂,进行处方规律分析.结果:筛选出符合要求的61首治疗SANFH的处方,确定了处方中药物出现的常用药物和4味核心药物以及6首新处方等.结论:治疗SANFH应以补养肝肾、活血化瘀为主要治法,并根据不同兼证,酌情配伍具有行气止痛、益气养阴、接骨续筋等功效的药物,以达到标本同治的目的.中医传承辅助系统对于分析名中医处方用药规律具有科学性、实用性,能够客观全面地总结分析名中医的临证经验,对于中医药的传承与发展具有重大意义.
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甘草干预雷公藤内酯酮的代谢组学分析
目的:研究甘草对雷公藤内酯酮代谢组学的影响,发现雷公藤内酯酮毒性生物标记物及受甘草回调的表征雷公藤内酯酮毒性的减毒生物标记物,探讨雷公藤内酯酮毒性及甘草对雷公藤内酯酮的减毒作用机制.方法:将30只SD大鼠随机等分为空白组、雷公藤内酯酮单独给药组、雷公藤内酯酮与甘草联用组,雷公藤内酯酮给药剂量0.7 mg·kg-1,联用组在腹腔注射给予雷公藤内酯酮注射液前2h按剂量3 mL·kg-1灌胃给予甘草溶液,连续给药7d.收集各组尿液进行UPLC-Q-TOF-MS测定,采用主成分分析(PCA)和正交偏小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对样品数据进行对比分析.结果:发现雷公藤内酯酮毒性生物标记物7个,4个生物标记物鉴定为泛酸、犬尿喹啉酸、色氨酸和粪卟啉,另3个生物标记物结构待定.其中受甘草回调的减毒生物标记物4个,已确认结构的为色氨酸,其余3个结构待定.结论:雷公藤内酯酮的毒性机制可能与其干扰了机体的能量代谢、色氨酸代谢、卟啉代谢等途径有关,甘草的减毒作用与其对这些代谢途径的回调有关.
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栀子炭疽病病原菌鉴定及抑菌药剂筛选
目的:明确引起栀子炭疽病病原菌种类,研究常用杀菌剂对病原菌菌丝生长的抑制作用,为病害防治提供依据.方法:采集江西省不同地区栀子炭疽病病叶标本,采用常规组织分离法进行病原菌的分离与纯化,基于柯赫氏法则,检测病原菌的致病性,采用形态观察、显微鉴定、真菌rDNA-ITS序列分析,系统的鉴定病原菌,选取常用的11种抑菌剂对其进行室内药剂毒力测定,并建立抑制率与药剂浓度的相关回归方程;筛选出有明显抑菌作用的药剂,为防治该病的发生提供理论依据.结果:从收集的栀子炭疽病病原菌感染的叶片中分离纯化得到11个菌株,经致病性测定和科赫氏验证确定使栀子发病快且病情严重的菌株,通过形态和显微鉴定并对扩增得到的rDNA-ITS序列进行Blast对比分析,确定该病害为茎点霉菌Phoma.sp.选用的药剂中武夷菌素、链霉素和寡糖链蛋白无明显的抑菌效果,多菌灵的抑菌效果好,回归方程为Y=79.97X-1.75[r=0.965,半大效应浓度(EC50)=0.65 mg·L-1],其次为咪鲜三环唑和五硝多菌灵,回归方程分别为y=6.142X+ 19.47 (r=0.902,EC50=4.97 mg·L-1),Y=6.1X+ 17.23(r=0.93,EC50=5.37 mg·L-1),其他药剂呈现不同程度的抑菌效果.结论:确定了栀子炭疽病病原菌并筛选出了抑制病原菌的有效药剂.
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新疆鼠尾草二萜醌类成分含量测定及抗血小板聚集作用
目的:研究新疆鼠尾草中荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌抗血小板聚集作用,并建立同时测定其中荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮3个主要有效成分含量的方法.方法:应用比浊法测定荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌体外抗血小板聚集作用;采用HPLC同时测定荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮的含量.结果:荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌高、中剂量组抑制凝血酶诱导的血小板聚集作用与生理盐水组比较均有显著性差异,且与质量浓度呈明显的剂量依赖性;荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮进样量分别在0.31 ～4.56 μg(r =0.999 6),0.01～0.24 μg(r=0.999 4),0.4～6.0μg(r=0.999 5)与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.3％(RSD 2.0％),100.6％(RSD 3.1％),102.5(RSD 1.6％).结论:新疆鼠尾草中荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌表现出显著抑制血小板聚集作用;建立的HPLC含量测定方法简便快速,结果准确可靠、重复性好,可用于新疆鼠尾草药材的质量控制与评价.
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珍珠明目滴眼液中16种元素的测定与分析
目的:考察原料的质量和制剂工艺对珍珠明目滴眼液中微量元素的影响,为制剂质量控制和质量安全提供依据.方法:采用微波消解电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS),对7批珍珠(层、母)粉和7家企业102批珍珠明目滴眼液样品中的铅、镉、砷、汞、铜、镁、铝、钾、钙、铬、锰、锌、锶、钯、钡、钨16种微量元素的含量进行测定.结果:各元素呈现良好的线性关系(r ＞0.999),回收率在78.6％～97.6％,RSD在2.5％～9.5％,表明该方法准确可靠.结论:结果显示部分样品砷汞含量超标;少数企业成品中微量元素含量与其他企业存在明显的差异,且同一企业生产的成品微量元素含量也存在较大波动.
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生脉散中人参、麦冬和五味子提取物体外抗氧化作用
目的:明确生脉散中人参、麦冬和五味子提取物的体外抗氧化作用.方法:采用超氧阴离子(O2-·),过氧化氢(H2O2)和过氧硝基(ONOO-)生成体系,以离线方式分析生脉散中的人参、麦冬和五味子清除3种活性氧(ROS)的作用,并在此基础上,采用HPLC-鲁米诺-H2O2-发光强度(CL)和HPLC-鲁米诺-邻苯三酚-CL,HPLC-鲁米诺-ONOO--CL联用技术在线分析生脉散中的人参、麦冬和五味子直接清除O2-·,H2O2和ONOO-的作用,明确生脉散直接清除ROS的物质基础和抗氧化作用特点.结果:生脉散中人参、麦冬和五味子对于3种ROS具有直接清除作用的活性成分主要集中在亲水性部位,亲脂性部位成分直接清除ROS作用较弱.结论:通过3种ROS在线清除体系,明确了生脉散中人参、麦冬和五味子中直接清除ROS的成分,且直接清除ROS可能并不是生脉散的主要作用,为后期生脉散在心肌缺血损伤中作用机制的研究提供依据以及新思路.
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九味熄风颗粒生物碱类成分指纹图谱建立及其多指标成分定量分析
目的:建立九味熄风颗粒的指纹图谱,并同时测定其中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱.方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱,以甲醇-0.1％三乙胺为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长246nm.对10批九味熄风颗粒进行了指纹图谱及含量测定研究,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价软件”(2004A)进行分析.结果:得到分离度、重复性均较好的九味熄风颗粒指纹图谱,共标示出13个共有峰,各批次样品相似度＞0.96;通过对照品比对,确定了4个成分,分别为钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱,并对其进行定量分析.结论:该方法快速、简便、准确,可作为全面评价该制剂质量的有效方法之一.
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近红外光谱用于甘草中甘草苷、甘草酸及水分测定
目的:运用近红外光谱(NIR)技术检测甘草药材中的甘草苷、甘草酸及水分.方法:采用积分球漫反射扫描近红外光谱,以TQ Analyst软件进行数据分析,建立甘草中甘草苷、甘草酸及水分测定的NIR.结果:甘草苷的预测均方根误差(RMSEP)为0.165,预测集相关系数(RP)0.986 8;交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.393,校正集相关系数(Rv)0.904 6.甘草酸的RMSEP=0.166,Rp=0.995 5;RMSECV=0.575,Rv=0.954 0.水分的RMSEP=0.137,Rp=0.995 2;RMSECV=0.498,Rv =0.931 9.结论:该方法快速、简便.可以用于甘草中甘草苷、甘草酸及水分的含量测定.
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液质联用色谱法同时测定降糖类中成药中9种非法添加的化学成分
目的:建立高效液相色谱法同时测定降糖类中成药中9种非法添加的化学成分.方法:采用C18色谱柱,以甲醇-0.1 mol·L-1乙酸铵溶液梯度洗脱,检测波长235 nm,柱温35℃,同时进行全波长扫描(190 ～400 nm),并对可疑成分进行质谱确认.结果:9种对照品在各自浓度范围内,呈现良好的线性关系(r≥0.999 9),精密度、稳定性、检出限、定量限、回收率均符合规范,并检出降糖宁中非法添加了格列本脲.结论:该方法简便快速准确,适用于上述降糖类化学成分的检测.
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UPLC测定多伞阿魏中倍半萜烯香豆素(DAW22)的含量
目的:利用超高效液相色谱法测定了分布于新疆的不同生长时期多伞阿魏中DAW22的含量.方法:采用固相萃取(SPE)净化,测定条件Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),以甲醇-1％甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速0.2 mL·mL-1,柱温30℃,波长316 nm,进行含量测定.结果:DAW22进样量在6.21～124.2 ng(r=1.000 0)与其峰曲线下面积呈良好的线性关系,平均回收率99.81％,RSD 2.0％,生长在5月9日的多伞阿魏植株中DAW22的含量高.结论:建立的多伞阿魏中DAW22的质量控制研究方法准确、可靠、重复性好,能够用于多伞阿魏的质量控制.
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苍术炒焦前后对湿阻中焦模型大鼠AQP2,AQP3含量的影响
目的:探讨苍术炒焦前后对湿阻中焦模型大鼠水通道蛋白2(AQP2)和AQP3含量的影响,为苍术炒焦机制研究提供参考.方法:将动物分成空白组,湿阻中焦模型组,生苍术高、中、低剂量组(3 459.2,1 729.6,864.8 mg· kg-1)及焦苍术高、中、低剂量组(剂量同生品)和香砂胃苓丸阳性组(1 729.6 mg·kg-1),连续灌胃给药7d.利用紫外分光光度法和酶联免疫法分别检测给药前后大鼠尿液中AQP2含量和结肠黏膜中AQP3含量.结果:与空白组比较,模型组尿液中AQP2含量增加,结肠黏膜中AQP3含量降低,两者间的差异均具有极显著性意义.与模型组比较,各给药组大鼠尿液中AQP2含量均降低,且生品组AQP2含量较焦品组低;结肠黏膜中AQP3含量均增加,且焦品组含量高于生品组.结论:苍术的生品与焦品均有祛湿止泻作用,生苍术祛湿作用强于焦品,焦苍术止泻作用强于生品.
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枳壳挥发油提取工艺优选及其化学成分GC-MS分析
目的:优选水蒸气蒸馏法提取枳壳挥发油的工艺,分析粉碎度对枳壳挥发油化学成分的影响.方法:采用正交试验确定水蒸气蒸馏法提取枳壳挥发油的工艺条件,以挥发油提取率为评价指标,粉碎度、加水量、浸泡时间、提取时间为考察因素.采用GC-MS对枳壳粉碎度为24目和50目所提取的挥发油进行化学成分鉴定.结果:佳水蒸气蒸馏法工艺条件为枳壳粉碎度24目,加11倍量水浸泡0.5h,提取7h.从24目枳壳粉末挥发油中鉴定出45个组分,50目中鉴定出39个组分,分别占其挥发油总量的99.46％和99.53％.结论:优化的提取工艺重复性好、挥发油提取率较高且成分种类多,适用于枳壳挥发油的提取.
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星点设计-效应面法优选蜜糠炙黄芪的炮制工艺
目的:优选蜜糠炙黄芪的炮制工艺,为该饮片的应用与推广提供参考.方法:以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、总黄酮及水溶性浸出物含量的总评“归一值”(OD)为评价指标,采用星点设计考察炼蜜用量、炒制时间、炒制温度对蜜糠炙黄芪炮制工艺的影响,对结果进行多元线性回归和二项式拟合,利用效应面法选择较佳炮制工艺条件并进行预测分析.结果:蜜糠炙黄芪佳炮制工艺为黄芪样品40 g加炼蜜9.6g,炒制时间4 min,炒制温度210℃.黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、总黄酮质量分数及水溶性浸出物分别为0.058％,0.035％,3.28％,48.2％,OD预测值与真实值的偏差1.7％.绪论:星点设计-效应面法优选的蜜糠炙黄芪炮制工艺简便可行、预测性良好.
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苍术麸炒前后的专属性HPLC特征指纹图谱
目的:比较苍术麸炒前后专属性HPLC特征图谱,明确特征性图谱差异性,为苍术生品和麸炒品提供专属性质量评价指标.方法:取10批生苍术和对应麸炒苍术饮片的正己烷提取物进行HPLC分析,流动相色谱乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm.以苍术素色谱峰为参照峰,构建了10批苍术生晶和麸炒品的HPLC指纹图谱的共有模式.结果:苍术生品和麸炒品HPLC中有26个共有峰,各共有峰相对保留时间基本相同,RSD均＜0.5％;但相对峰面积有明显差异:第47.36 min和第46.35 min色谱峰的峰面积比值在生品中＞1,但在麸炒品中却＜1;第51.70 min和第49.25 min色谱峰的峰面积比值在生品中＜1,但在麸炒品中却＞1.结论:苍术生品和麸品的色谱特征峰差异明显、结果稳定、专属性强,可作为生苍术和麸炒苍术饮片的定性鉴别特征之一.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
