中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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左归丸对去卵巢大鼠股骨中核心结合因子α1 mRNA表达的影响
目的:观察左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠股骨中核心结合因子α1 mRNA表达的影响,探讨其对骨质疏松的防治机制.方法:280只SPF级SD雌性大鼠,分为3组:正常组40只、假手术组40只、其余采取双侧背部卵巢切除术进行绝经后骨质疏松症造模.21 d后,随机分为5组:模型组、尼尔雌醇组、左归丸高、中、低剂量组.左归丸高、中、低剂量组分别给予ig6.4,3.2,1.6 g·kg-1剂量的左归丸混悬液,1次/d;尼尔雌醇组ig尼尔雌醇混悬液0.21 mg·kg-1,每周1次.于连续给药60,120,180 d,分别取大鼠左后肢股骨近端1/3部分,采用RT-PCR方法测定核心结合因子α1的mRNA表达水平.结果:与正常组比较,模型组股骨中核心结合因子α1 mRNA水平明显降低(P＜0.01)；和模型组比较,给药60,120,180 d的左归丸各剂量组,股骨中核心结合因子α1 mRNA水平显著升高(P＜0.05).结论:骨组织中核心结合因子α1 mRNA表达水平的下调可能是PMOP发生的重要机制之一,左归丸能够上调骨组织中核心结合因子α1 mRNA表达,从而有效防治骨质疏松.
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紫草素通过氧化胁迫诱导K562细胞凋亡
目的:研究紫草素(shikonin)诱导人红白血病细胞(K562)凋亡作用并初步探讨其机制.方法:噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)染色法检测紫草素对K562细胞的增殖抑制作用；Hoechst 33258和吖啶橙(acridine orange,AO)/溴化乙啶(ethidium bromide,EB)染色法观察细胞凋亡形态；反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测与凋亡相关基因:B细胞淋巴因子基因2相关X蛋白(B-cell lymphoma gene 2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴因子基因2同源3结构域相互作用基团死亡促进因子(BH3 interacting domain death agonist,Bid)、B细胞淋巴因子基因xL(B-cell lymphoma gene xL,Bcl-xL)、p53上调凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)、B细胞淋巴因子基因2同源拮抗因子(B-cell lymphoma gene 2 homologous antagonist,Bak)、B细胞淋巴因子-w(B-cell lymphoma-w,Bcl-w)、B细胞淋巴因子基因2相关死亡促进因子(B-cell lymphoma gene 2 associated death promoter,Bad)信使核糖核酸(Messenger RNA,mRNA)表达的变化；荧光染料二乙酸-2',7'-二氯荧光素盐(oxalic acid-2',7'-dichlorofluorescein,DCFHDA)分析细胞内总活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的变化；荧光染料5-氯甲基二已酸荧光素(5-chloromethylfluorescein diacetate,CMFDA)分析细胞内还原型谷胱甘肽(reduced glutathione hormone,GSH)含量的变化.结果:①0.2～1.6 mg·L-1的紫草素对K562细胞增殖呈浓度依赖性抑制；②0.2～0.5 mg·L-1的紫草素处理组细胞出现明显凋亡特征；③0.2～0.5 mg·L-1的紫草素处理组促凋亡蛋白Bid,Bad,Bak,PUMA,Bax的mRNA表达显著增加,抑制凋亡蛋白Bcl-w和Bcl-xL的mRNA表达明显下调；④0.2～0.5 mg·L-1的紫草素处理组,细胞内总活性氧含量升高,还原型谷胱甘肽含量降低.结论:紫草素有较强的抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的作用,该过程伴随细胞内氧化还原状态的改变,紫草素诱导的K562细胞的凋亡与细胞内氧化胁迫有关.
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动脉粥样硬化秽浊痰阻证动物模型的研究
目的:建立动脉粥样硬化秽浊痰阻证发病特点相符合的病证结合动物模型,为后续的临床研究提供载体.方法:将60只载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为4组,即高脂饲料复合寒燥环境的模型组、高脂饲料组、寒燥环境组和正常对照组.过程中记录小鼠体重、情绪、大小便、毛发及舌象等生物表征,12周时眼球取血,用酶比色法检测血清甘油三酯、总胆固醇,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白；脱臼处死小鼠,分离主动脉瓣至髂肾动脉分支动脉组织,观察细胞形态学变化.用SPSS17.0对量化后指标进行统计分析.结果:高脂饮食复合寒燥环境组小鼠表现为行动迟缓,抑郁状态,进食进水较少,体重增长不明显,舌质多见暗红或暗紫色；模型组小鼠主动脉中膜明显增生,平滑肌细胞排列紊乱并向内膜突起,大量粥样斑块形成,管腔明显狭窄,可见少量泡沫细胞,大量胆固酵结晶形成；高胆固醇饲料和寒燥环境对ApoE基因敲除小鼠的血脂升高的促进作用不显著.结论:高脂饲料喂养复合寒燥环境干预建立动脉粥样硬化秽浊痰阻证的方法是可行的,可成功建立与动脉粥样硬化秽浊痰阻证生物表征和部分生物学基础相似的病证结合模型.
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万寿菊茎叶中2种黄酮类化合物的体外抗肿瘤活性
目的:研究万寿菊茎叶中两种黄酮类化合物4'-甲氧基-泽兰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山柰酚-3,7-O-α-L-双鼠李糖苷(化合物Ⅱ)的抗肿瘤活性.方法:人胃癌细胞SGC7901与人肝癌细胞SMMC7721经20,40,80,120,160μmol·L-1的两种化合物作用24,48,72 h后,使用MTT法测定抑制率,并以5-氟脲嘧啶作为阳性对照.使用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法观察浓度为160 μmol·L-1的两种化合物作用于细胞密度为1×106个/mL的2种肿瘤细胞48 h细胞形态学变化及细胞凋亡情况.结果:不同浓度的两种黄酮类化合物均可抑制人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞SMMC7721的增殖,且呈现浓度与时间依赖性.化合物Ⅰ作用这2种癌细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为111.7,330.4 mg·L-1.化合物Ⅱ作用这两种癌细胞48 h的IC50分别为683.8,464.7 mg·L-1.2种化合物作用肿瘤细胞后细胞形态发生改变,并有部分细胞发生凋亡.结论:万寿菊茎叶中分离的2种黄酮类化合物具有体外抗肝癌和胃癌活性.
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清肠化湿方对小鼠骨髓来源树突状细胞生物学特性的影响
目的:针对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)活动期病机组成“清肠化湿、调气和血、敛疡生肌”的清肠化湿方,通过体外实验,观察其对小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DC)抗原提呈功能的影响,探讨该方治疗UC的作用机制.方法:以核因子-κB基因圈套寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)转染24 h后的DC生物学特性为对照,观察10 mg·L-1清肠化湿方孵育24h后DC(细胞密度1×106/mL)细胞的生物学特性的改变,确立清肠化湿方通过抑制NF-κB的表达影响DC的抗原提呈功能.实验分为空白组,ODN转染组,清肠化湿方组,脂多糖(LPS)组,ODN转染+LPS组,清肠化湿方+LPS组6组.流式细胞术检测各组DC表面标志抗原CD11c,共刺激分子CD40,MHCⅡ的表达,免疫荧光法检测各组NF-κB核转位情况.结果:清肠化湿方+ LPS组与LPS组CD40、MHCⅡ比较,P＜0.05；各组与LPS组NF-κB核转位情况相比较,P＜0.05.说明清肠化湿方有效降低了DC表面抗原CD40、MHCⅡ共刺激分子的表达,抑制了NF-κB的活化入核.结论:清肠化湿方通过抑制NF-κB的表达,影响DC成熟与分化,下调抗原提呈功能,从而降低炎症反应,是其治疗UC的主要机制.
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茜草和茜草炭对正常大鼠凝血-纤溶系统的影响
目的:研究茜草和茜草炭对正常Wistar大鼠凝血-纤溶系统的影响,通过其药理作用探讨它们的止血化瘀机制.方法:将Wistar大鼠随机分为6组,每组7只,分别为茜草和茜草炭水煎制低剂量、高剂量组(含生药5.0,10.0 g·kg-1),阳性对照组(氨甲苯酸0.6 g·kg-1),空白对照组(生理盐水10 mL·kg-1).灌胃7d,用ELISA法检测大鼠血浆中组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)和纤溶酶原(PLG)活性.结果:和空白对照组比较,茜草在实验剂量下均能提高t-PA的活性,且高剂量时提高t-PA的活性更显著(P＜0.01).高剂量茜草炭能使大鼠t-PA活性提高(P＜0.05),但其作用低于高剂量茜草组.低剂量时对大鼠t-PA活性影响不显著.茜草和茜草炭对PAI和PLG的活性影响均不显著.结论:茜草高、低剂量均能提高t-PA的活性,且在高剂量时提高更显著,进而影响凝血-纤溶系统,从而发挥其止血化瘀作用.茜草炭对纤溶系统也有一定作用,但可能是多种酶的综合作用.茜草和茜草炭对凝血-纤溶系统药理作用效果不同,进而影响它们的临床使用.
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活骨丹胶囊对大鼠血液流变学及部分生化指标的影响
目的:研究活骨丹胶囊对实验大鼠激素性股骨头坏死模型的血液流变学、血脂、血钙、骨代谢等指标的影响.方法:取清洁级健康SD大鼠60只,雌雄各30只,按体重随机分成空白组,模型组,阳性对照药仙灵骨葆胶囊组(0.28 g·kg-1),活骨丹胶囊高、中、低剂量组(1.80,0.90,0.45 g·kg-1).除空白组外,各组每周1次大腿内侧im醋酸泼尼松龙(24.5 mg·kg-1),连续8周造模,在造模的同时,各给药组均灌胃给药,模型组和空白组给予等量蒸馏水,预防性灌胃给药8周后取血测定大鼠全血黏度,血浆黏度,血沉K值,血清总胆固醇(CHO),甘油三酯(TG)的含量,血清碱性磷酸酶(ALP),酸性磷酸酶(ACP),血钙(Ca),血磷(P)的含量.结果:与空白组比较,模型组中高、中、低各组切变率下的全血黏度均显著升高(P＜0.01),血沉K值及血浆黏度均显著升高(P＜0.01),血清中CHO,TG,ALP的含量均显著升高(P＜0.01),血清Ca含量升高(P＜0.05).与模型组比较,活骨丹胶囊各剂量组可明显增加血清中的Ca,P含量,同时降低ALP和ACP的活性,降低全血黏度,血浆黏度及血脂,差异有显著性意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论:活骨丹对于骨质破坏所引起的ALP,ACP升高有一定的拮抗作用,同时能降低血脂,调节血清中的Ca,P沉积,增加骨密度.
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合欢花总黄酮的抗抑郁作用及其机制研究
目的:研究合欢花总黄酮的抗抑郁作用,并初步探讨其抗抑郁作用机制.方法:将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸文拉法辛组(0.012 5 g·kg-1)、合欢花总黄酮(0.10,0.05,0.025 g·kg-1)剂量组.应用孤养加慢性不可预见性应激建立抑郁症模型,造模同时ig给药,每天1次,连续给药21 d,正常组、模型组ig等体积蒸馏水.用旷场实验法测定各组大鼠行为变化,TUNEL原位杂交检测海马CA3区神经元细胞凋亡.结果:与正常组比较:模型组大鼠旷场实验3 min内水平运动、垂直运动得分均明显降低(P ＜0.05或P＜0.01),海马CA3区神经元凋亡细胞数、阳性细胞率均显著增加(P＜0.01)；与模型组比较:盐酸文拉法辛组、合欢花总黄酮(0.10,0.05,0.025 g·kg-1)剂量组旷场实验3 min内水平运动、垂直运动得分均明显增高(P ＜0.05或P＜0.01),海马CA3区神经元凋亡细胞数及阳性细胞率均明显减少(P＜0.05).结论:合欢花总黄酮具有抗抑郁作用,其机制可能与拮抗CA3区海马神经元细胞凋亡有关.
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蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响
目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态及软骨细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1g·kg-1· d-1,蚁龙通痹汤生药0.6 g·kg-1.d-1,溶于10 mL生理盐水中灌胃,每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量,并用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,分析软骨中凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax表达情况.结果:与正常组比较,模型组动物关节液IL-1β和TNF-α含量、软骨细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax、关节外在表现和软骨病理组织学均出现明显变化；与模型组比较,蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组各项指标均有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05).蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,显著降低软骨细胞凋亡率,提高Bcl-2/Bax而达到对软骨组织保护的作用.
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麻黄加术汤对呼吸道合胞病毒感染小鼠血清IL-2,IFN-γ的影响
目的:探讨麻黄加术汤对寒湿环境因素下的呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠血清白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)含量的影响以及在生态医学思想下寒湿环境、中西药物与机体免疫状态之间的相关性研究.方法:借助人工气候箱,模拟寒湿外邪环境,采用呼吸道合胞病毒0.1 mL滴鼻感染,麻黄加术汤0.472 5 g·mL-、利巴韦林5.625 g·L-1灌胃,通过ELISA法检测血清IL-2,IFN-γ的含量.结果:与正常组相比,病毒模型组和寒湿组均使小鼠IL-2,IFN-γ含量显著下降(均P＜0.001),寒湿外邪与病毒感染对小鼠IL-2,IFN-γ含量的影响有交互作用(P＜0.001和P＜0.05).与病毒模型组和寒湿+病毒模型组分别相比,麻黄加术汤和利巴韦林均使小鼠IL-2,IFN-γ含量显著升高(P ＜0.001),而IL-2含量在中、西药组间无显著性差异,但IFN-γ含量的提高,在病毒+麻黄加术汤组显著低于病毒+利巴韦林组(P＜0.001)；与病毒+麻黄加术汤组比较,寒湿+病毒+麻黄加术汤组IFN-γ含量显著降低(P＜0.01).结论:寒湿外邪与病毒感染均可以使小鼠免疫力下降,西药抗病毒、中药散寒祛湿的麻黄加术汤均可以改善寒湿环境下病毒感染小鼠免疫状态.
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补青颗粒防治大鼠D-乳糖性白内障的研究
目的:观察补青颗粒对大鼠半乳糖性白内障的防治作用.方法:用SD大鼠复制半乳糖白内障模型.实验分为6组:空白对照组无特殊处理；模型对照组每日ip注射50％ D-半乳糖溶液(10g·kg-1),连续15d,制成白内障动物模型；阳性对照组同模型组处理的同时每天给予障眼明片混悬液0.02g·kg-1 ig至实验结束；补青颗粒高、中、低剂量组处理同模型组且每天分别给予0.8,0.4,0.2 g·kg-1的剂量ig至实验结束.分别记录实验前及造模起第3,7,14天晶状体的混浊程度,实验结束时检测各组晶体超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果:对照组晶状体始终透明,模型组第3天晶体开始发生混浊,补青颗粒3个剂量组晶体混浊的速度及程度在3,7,14天均明显低于模型组(P＜0.05),SOD活性显著高于模型组(P＜0.05),MDA含量显著低于模型组(P＜0.05).结论:补青颗粒具有较好的防治大鼠半乳糖性白内障的作用.
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菟丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴性激素水平的影响
目的:探讨丝子总黄酮对排卵障碍大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴性激素水平的影响.方法:将大鼠分为对照组(C)、模型组(M)、菟丝子黄酮低、高剂量组(CCLD,CCHD)以及阳性对照枸橼酸氯米芬组(PC),采用羟基脲以300 mg· kg-1ig连续进行10 d制作排卵障碍大鼠模型,用不同剂量菟丝子总黄酮(10,20 mg· kg-)及阳性对照,4.5 mg· kg-ig连续5d干预.放射免疫法观察并比较大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)以及孕激素(P)水平的变化.结果:与C组相比,M组血清FSH,LH,E2及P水平显著降低(均P＜0.05),其中FSH由(8.18±1.37) U·L-1降低至(4.22±0.94) U·L-1；LH由(17.25±5.36) U·L-1降低至(7.81±1.39) U·L-1；E2由(48.59±8.11) μg·L-1降低至(23.18±7.62) μg·L-1;p由(16.02±4.83) μg·L-1降低至(5.94±1.02) μg·L-1(均P ＜0.05).与M组相比,CCLD,CCHD以及PC组血清FSH,LH,E2及P水平显著升高(均P＜0.05).其中PC组与CCHD组FSH,LH,E2及P水平较CCLD组升高更为明显(均P＜0.05).结论:菟丝子黄酮可显著改善排卵障碍大鼠HPO轴性激素水平,且以高剂量更为有效.
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玉郎伞多糖对快速老化小鼠额叶和海马神经元Caspase-3表达及活性的影响
目的:考察玉郎伞多糖(YLSP)对快速老化(SAMP8)小鼠额叶、海马神经细胞半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达及活性的影响.方法:选择6月龄SAMP8小鼠,随机分为模型组,石杉碱甲组(0.02 mg·kg-1),YLSP低、高剂量组(45,180mg·kg-1),选择6月龄正常老化小鼠(SAMR1)作为对照组,以上各组每日上午ig给药1次,连续40 d,于末次给药的次日应用免疫组织化学方法检测额叶和海马Caspase-3的表达变化及神经细胞凋亡情况,测定Caspase-3活性.结果:SAMP8小鼠额叶和海马Caspase-3阳性细胞数分别为(46.00±5.30),(51.36±3.28)个,Caspase-3活性分别为2 380±193,2 473±241,均较对照组显著升高(4.90±0.60),(6.14 ±0.53)；(437±76),(521±79) (P ＜0.01)；与模型组相比,石杉碱甲组、YLSP低、高剂量组额叶和海马Caspase-3阳性细胞数(23.48±3.46,27.86 ±4.04；24.54±3.55,30.60±2.62；17.98±2.97,23.90±2.58)及Caspase-3活性(1323±126,1 456±130；1 397±133,1 483±147；987±79,1 091±95)明显低于模型组(P＜0.01)；与石杉碱甲组、YLSP低剂量组比较,YLSP高剂量组的额叶和海马Caspase-3阳性细胞数及Caspase-3活性显著降低(P＜0.05).结论:表明YLSP降低Caspase-3表达及活性,减少SAMP8小鼠脑部神经细胞凋亡.
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6'-羟基爵床素A对HepG2细胞内质网应激及胞内Ca2+的影响
目的:研究新型抗肿瘤药物6'-羟基爵床素A(6'-hydroxy justicidin A,JR6)对HepG2细胞的内质网应激及胞内钙离子浓度变化的影响及其意义.方法:HepG2细胞经过终浓度分别为0,0.615,2.45,9.8 μmol· L-的JR6处理24h后采用实时定量RT-PCR技术、蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中X-盒结合蛋白1(XBP-1) mRNA,IRE1 α(inositol-requiring enzyme-1α),GRP78/BiP(glucose regulated protein/BiP),及Bcl-2(B cell leukemia 2)蛋白表达量的变化.激光扫描共聚焦显微镜测JR6作用24h后细胞内静息钙浓度变化及IP3R钙泵抑制剂光溜海绵素C干预后JR6的作用变化.结果:IRE1,XBP-1 mRNA,Bip,Bcl-2蛋白的表达量均与JR6剂量负相关.高剂量组的各蛋白表达量与空白组相比,均下降了40％左右.共聚焦显微镜观察结果显示JR6引起细胞内钙离子浓度升高了2倍左右；加入IP3R钙泵抑制剂后,JR6不能引起细胞内钙升高.结论:JR6通过内质网钙泵IP3R升高细胞内的钙浓度,破坏细胞内的钙稳态；同时引起了内质网应激,并抑制了未折叠蛋白反应的相关因子.
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17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对大鼠凝血功能和血小板聚集的影响
目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对体内外血小板聚集和凝血功能的影响.方法:将50只SD大鼠随机分为5组:对照组(含0.5％ DMSO的生理盐水),YLSC低、中、高剂量组(2.5,5,10 mg·kg-1),阳性药阿司匹林组(10 mg·kg-1).尾静脉注射相应药物1周后,腹主动脉采血,分别加入二磷酸腺苷(ADP)、胶原和花生四烯酸(AA)诱导血小板聚集,测定大鼠体内外血小板聚集率；同时观察YLSC对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响.结果:与对照组相比,YLSC能显著抑制ADP和胶原诱导的大鼠体内、外血小板大聚集率(P＜0.05或P＜0.01),大抑制率分别为38.4％,42.5％,对AA诱导的血小板聚集无明显抑制作用；YLSC能显著延长大鼠血浆TT,APTT(与对照组比较,P＜0.05或P＜0.01),对PT无显著影响.结论:YLSC具有对抗血小板聚集和抗凝血作用.
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温胆汤对精神分裂症模型鼠血清SOD,MDA,NO,PKC的影响
目的:研究温胆汤(由半夏、茯苓、竹茹、枳实、陈皮、炙甘草配伍)对精神分裂症模型鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及蛋白激酶C(PKC)含量的影响.方法:将50只清洁级SD大鼠随机分为5组:正常组(A)、模型组(B)、温胆汤高剂量组(C)、温胆汤中剂量组(D)、温胆汤低剂量组(E),每组10只.在造模前,C,D,E组连续ig温胆汤,每次给药20 mL· kg-1(C,D,E组剂量相当于生药40,20,10 g·kg-1)；A、B组用等量生理盐水ig,1次/d,共21 d.在后1次给药2h后,B,C,D,E组一次性左侧腹腔ip MK801 0.6 mg· kg-1,建立精神分裂症模型；一般状况观察3d后,处死大鼠,取血清检测.采用生化方法测定血清SOD,MDA和NO含量的改变,用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测血清中PKC的含量.结果:与模型组比较,温胆汤各组均不同程度改善了模型鼠的一般状况,并且明显降低血清MDA,NO的含量(P ＜0.05或P＜0.01),升高SOD的活性(P＜0.05或P＜0.01),减轻了氧自由基引起的病理损伤.温胆汤各组显著降低血清PKC的含量(P＜0.05或P＜0.01).结论:温胆汤可减轻精神分裂症模型鼠的病理损害,对氧自由基引起的损伤具有一定的保护；降低PKC浓度,从而对缝隙连接通讯(GJIC)的功能起到调节作用.
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回乳抑增Ⅰ号对实验性乳腺增生大鼠的作用及其机制研究
目的:研究回乳抑增Ⅰ号对实验性乳腺增生大鼠的影响,并探讨其作用机制.方法:80只大鼠随机分为正常组、疾病模型组、病证结合模型组、三苯氧胺组(1.57 mg·kg-1)、乳癖散结组(0.50 g·kg-1)和回乳抑增Ⅰ号高、中、低(31.6,15.80,7.9 g·kg-1)剂量组.采用肌肉注射苯甲酸雌二醇联合黄体酮的方法复制乳腺增生大鼠模型,在疾病模型基础上用鼠夹夹尾复制病证结合模型,造模后给予不同剂量药物治疗,连续4周.测定乳房直径、体重和血清激素(ELISA法检测)等指标,显微镜下观察各组大鼠乳腺组织病理形态学变化.结果:与病症结合模型组比较,回乳抑增Ⅰ号高剂量能显著缩小大鼠乳房直径(P＜0.01),恢复大鼠体重(P＜0.01)；明显降低血清雌二醇(P＜0.01)、泌乳素(P＜0.05)、促卵泡激素(P＜0.05)、促性腺激素释放激素(P＜0.01)和5-羟色胺(P＜0.05)；提高孕酮(P＜0.05),促黄体生成素(P＜0.01)；显著减轻乳腺小叶数、小叶内腺泡数和分泌物.结论:回乳抑增Ⅰ号能显著改善血清激素水平的紊乱,抑制乳腺增生的发生.
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排钱草总生物碱对人肝星状细胞增殖及肝纤维化相关胶原蛋白、细胞因子的影响
目的:观察排钱草总生物碱对人肝星状细胞系Lx-2增殖及分泌肝纤维化相关胶原、细胞因子的影响.方法:Lx-2细胞调整细胞密度为1.0×105个/mL,以0.1 mL/孔接种于37℃培养,设空白对照组,排钱草总生物碱100,75,55,40,30,20,15,10 mg·L-1组,给药48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测Lx-2细胞增殖；Lx-2细胞调整细胞密度为1×105个/mL,以0.1mL/孔接种于37℃培养,设空白对照及秋水仙碱(6.25 mg·L-1),排钱草总生物碱40,20,10 mg·L-1组,给药48 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测Lx-2细胞上清液Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)和转化生长因子β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子(PDGF)含量.结果:与对照比较,排钱草总生物碱在质量浓度为100,75,55,40,30,20,15,10 mg·L-1能够浓度依赖性的抑制Lx-2细胞增殖,抑制率分别为49.4％,25.9％,24.7％,15.3％,15.3％,12.9％,2.35％,1.18％；与对照相比,排钱草总生物碱40 mg·L-1能显著抑制COLⅠ,COLⅢ,COLⅣ和TGFβ1,PDGF的分泌(P＜0.05或者P＜0.01).结论:排钱草总生物碱对Lx-2细胞的增殖和COLⅠ,COLⅢ,COLⅣ,TGFβ1,PDGF的分泌有抑制作用.
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宣肺化痰方标准煎剂与煮散剂药理作用对比
目的:对比观察宣肺化痰方标准煎剂及煮散剂的药理作用.方法:大鼠分为8组,分别灌入等体积蒸馏水、急支糖浆、宣肺化痰方标准煎剂高、中、低剂量(含生药46.80,23.40,11.70 g·kg-1)、宣肺化痰方煮散剂高、中、低剂量(含生药23.40,11.70,5.85 g·kg-1),观察对小鼠毛细血管通透性的影响、对氨水致小鼠咳嗽的影响、对磷酸组胺诱发豚鼠哮喘的影响、对小鼠气管酚红排泌的影响、对慢性支气管炎大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响.结果:宣肺化痰方标准煎剂和煮散剂均能显著降低小鼠毛细血管通透性；延长小鼠咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数；延长豚鼠引喘潜伏期；增加小鼠气管酚红排泌量；升高慢性支气管炎大鼠血清SOD活性,降低MDA含量.宣肺化痰方标准煎剂和煮散剂比较,两者在同剂量组级别(高、中、低)之间作用无显著性差异.结论:宣肺化痰方标准煎剂和煮散剂均有显著抗炎、止咳、平喘和化痰作用,两者作用无显著性差异.
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狗肝菜不同相对分子质量多糖对D-GlaN致大鼠急性肝损伤的保护作用
目的:探讨狗肝菜不同相对分子质量多糖对大鼠D-半乳糖胺(D-GlaN)致急性肝损伤的保护作用.方法:采用透析的方法将狗肝菜多糖分为＜6 kD,＞6kD＜10kD(6kD～10kD),＞10 kD,以及总多糖组.D-GlaN (500 mg·kg-1)ip诱导大鼠急性肝损伤模型,动物处死后测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT)活性,制备肝组织匀浆测定其中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)含量,取肝、脾脏称重,计算脏器指数,对数据进行统计分析,并观察大鼠肝脏组织形态学变化.结果:与模型组比较,狗肝菜总多糖和相对分子质量＜6 kD给药组能显著降低大鼠血清中AST,ALT活性(P＜0.01)；各给药组均能降低肝匀浆MDA含量(P＜0.01或P＜0.05),均能有效升高肝组织匀浆中GSH-Px活性(P＜0.01或P＜0.05),降低肝脏指数(P＜0.01或P＜0.05),减轻肝脏病理损伤.结论:狗肝菜各多糖给药组均有一定保肝作用,且以相对分子质量＜6 kD效果佳.
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紫菀丸对血热出血大鼠血液流变性、凝血时间及肺部的影响
目的:考察紫菀丸对血热出血模型大鼠血液流变性、凝血时间及肺部的影响.方法:SD大鼠随机分为6组,分别为空白对照组,模型对照组,云南白药组(0.5 g·kg-1),紫菀丸高、中、低(5,2.5,1.25 g·kg-1)剂量组.将供试品按每日20 mL·kg-1的剂量灌胃(ig),2次/d,给药7d.除空白对照组外,其余组复制血热出血大鼠模型,并比较紫菀丸对其血液流变性、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白含量(FIB)以及肺部的影响.结果:模型对照组较空白对照组有显著性差异,明显升高全血黏度,血浆黏度,TT,APTT明显延长,PT显著缩短,FIB含量显著增加.紫菀丸中剂量组能够显著降低血热出血模型大鼠的全血黏度,血浆黏度,APTT,TT,明显增加FIB的含量.紫菀丸高剂量组能明显缩短TT,紫菀丸低剂量组能显著延长PT.紫菀丸中剂量组依次为全血黏度200 s-1(5.87±0.24) mPa·s,30 s-1(7.60±0.36) mPa·s,5 s-1(13.70±0.51) mPa·s,1 s-1(32.38±2.06) mPa·s,APTT(17.11 ±0.78)s,TT(30.07±2.00) s,FIB(5.56±0.14) g·L-1；紫菀丸高剂量组为TT(30.74±2.96)s;紫菀丸低剂量组为PT(14.63±1.14)s;与模型对照组比较P＜0.05或P＜0.01.在肺体征方面,紫菀丸能够改善血热出血大鼠肺部损伤的相关症状,中剂量效果好,其次是高、低剂量.结论:紫菀丸中剂量组能够改善血热出血大鼠异常的血液流变学指标,通过影响内、外源性凝血酶及纤维蛋白原来达到止、凝血效果,紫菀丸高剂量组对部分血液流变学和凝血指标有一定的效果.紫菀丸剂量组对模型组大鼠肺部的损伤都有一定的治疗作用.
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加味丹参饮含药血清诱导BMSCs移植IRI大鼠对心肌bFGF的影响
目的:观察加味丹参饮(JWDSY)含药血清诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs),移植于心肌缺血再灌注损伤(IRI)大鼠梗死心肌边缘后,对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响.方法:全骨髓贴壁法培养BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD90,CD34,CD45.传至P3代时,用JWDSY含药血清诱导3d.建立大鼠心肌IRI造模,在心肌梗死区边缘移植血清诱导的细胞悬液.3,7,14 d后,取心肌组织用免疫组化法检测心肌细胞bFGF表达.结果:JWDSY血清组bFGF的积分吸光度(IA)在3,7,14d后分别升高至5 758.18±465.17,6 589.61±432.89,8 015.62±366.34;与模型组差异有统计学意义(P＜0.05),且随时间逐渐升高,比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:JWDSY血清诱导的BMSCs移植于IRI大鼠心梗区边缘后,可以改善心肌组织的病理学形态,增加心肌细胞bFGF蛋白表达,提示JWDSY含药血清诱导的BMSCs对IRI大鼠的心肌细胞有一定的保护作用.
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黄芩苷对人肺腺癌A549细胞的体内外研究
目的:探讨黄芩苷在体外对人肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移、对脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)新生血管形成的影响,在体内对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.方法:调整细胞密度为1×104/mL,应用25,50,100,200,400 μmol·L-1黄芩苷作用于A549细胞24,48,72 h,采用MTT法检测黄芩苷对A549细胞的增殖抑制作用；Transwell小室法观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对A549细胞侵袭及迁移的影响；小管形成实验观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对HUVEC小管形成的影响；将A549细胞移植瘤裸鼠分为黄芩苷高剂量组(100 mg·kg-1)、黄芩苷低剂量组(50 mg·kg-1)、溶剂对照组、顺铂组(1 mg· kg-1),前3组通过ig方式给予,连续21 d；顺铂组ip连用10 d.观察黄芩苷对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.结果:①黄芩苷能抑制A549细胞增殖,其增殖抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖性,24,48,72 h的IC50分别为100.77,75.02,55.81 μmol·L-1.②25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制A549细胞的侵袭及迁移,从而抑制癌细胞转移.③25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制HUVEC小管生成,与对照组比较具有统计学意义(P＜0.05).④体内实验表明50 mg·kg-黄芩苷对A549细胞移植瘤具有一定的抑制作用.结论:黄芩苷体外可以抑制A549细胞的增殖、侵袭、迁移,抑制HUVEC小管形成,体内对A549细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用.
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兔儿伞总黄酮抗炎作用研究
目的:观察兔儿伞总黄酮的抗炎作用.方法:以二甲苯致小鼠耳肿胀模型、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加模型,棉球诱发小鼠肉芽肿及小鼠气囊炎模型,观察兔儿伞总黄酮对不同炎症模型的抗炎作用.动物均分为模型(生理盐水)组、地塞米松(2.0 mg· kg-1)组、兔儿伞总黄酮高、中、低(400,200,100 mg·kg-1)组,1次/d,灌胃给药,连续7d.结果:兔儿伞总黄酮各剂量组能显著降低小鼠毛细血管通透性(P＜0.01)；兔儿伞总黄酮高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀有抑制作用,肿胀抑制率51.55％ (P ＜0.01)；兔儿伞总黄酮能减轻小鼠肉芽肿,兔儿伞总黄酮各剂量组气囊渗出液中前列腺素E2(PGE2)和白细胞数含量低于对照组(P＜0.01).结论:兔儿伞总黄酮具有较强的抗炎作用,其抗炎作用可能与其降低血管通透性、抑制PGE2的生物合成或释放有关.
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鬼箭羽药材的指纹图谱
目的:建立鬼箭羽药材HPLC指纹图谱,对谱图中主要色谱峰进行指认,并比较不同部位药材指纹图谱的异同.方法:采用DiamonsilTM C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长254 nm,柱温30℃.采用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004 A版》软件进行相似度评价,计算9批药材相似度.结果:通过对9批不同产地鬼箭羽药材指纹图谱的研究,标定出23个共有色谱峰,其中8个共有峰得到指认.利用HPLC指纹图谱相似度评价软件评价,9批药材的相似度在0.824 ～0.957,其中6批药材相似度＞0.900.鬼箭羽不同药用部位的HPLC色谱图有较大差异.结论:不同产地鬼箭羽药材质量存在一定差异,但大部分具有较好相似性.不同药用部位成分有较大差异,应结合临床疗效规范品种和用药部位,并制定相关质量控制标准.
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蜂斗菜中蜂斗菜内酯类成分
目的:对中药蜂斗菜全草的化学成分进行分离鉴定,并为后期的体外活性筛选提供样品.方法:用色谱法和波谱法对蜂斗菜全草甲醇提取液的化学成分进行分离鉴定.结果:从乙酸乙酯部位中分离得到5个化合物:valerilactones A(1),蜂斗菜内酯-Ⅴa(2),蜂斗菜内酯-Ⅳa(3),蜂斗菜内酯-Ⅲa(4),合膜蜂斗菜螺内酯(5).结论:化合物1,2,3,4为首次从该植物中分离得到,其中化合物1为首次从蜂斗菜属植物中分离得到.
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毛细管电泳法同时测定清肺抑火丸中盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱含量
目的:建立同时测定清肺抑火丸中盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱含量的毛细管电泳法.方法:以盐酸伪麻黄碱为内标,采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱(75 μm×55 cm,有效长度47 cm),运行缓冲液100 mmol·L-1磷酸二氢钠溶液+40％乙醇(pH 5.75),分离电压23 kV,重力进样15 s(高度15 cm),检测波长208 nm.结果:盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱分别在40.5～81.0,0.896～3.584,6.0～36.0 mg·L-1线性关系良好,回收率分别为96.0％,100.5％,97.8％,RSD均＜1.85％.结论:该方法专属性强、结果准确可靠、重复性好,可用于清肺抑火丸的质量控制.
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HPLC同时测定骨愈注射液中三七总皂苷和淫羊藿苷含量
目的:建立骨愈注射液中三七总皂苷和淫羊藿苷的含量测定方法.方法:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,3.5 μm),流动相乙腈-水,梯度洗脱,体积流量1.0 mL· min-1,检测波长203 nm,柱温25℃.结果:淫羊藿苷线性范围1.06～10.60 μg,平均回收率为100.2％,RSD 1.54％,三七皂苷R1线性范围0.42 ～ 4.20 μg,平均回收率100.6％,RSD1.89％,人参皂苷Rg1线性范围1.90～18.97 μg,平均回收率99.9％,RSD 1.09％,人参皂苷Re线性范围0.18 ～1.78 μg,平均回收率100.8％,RSD 1.96％,人参皂苷Rb1线性范围2.23 ～ 22.34 μg,平均回收率101.4％,RSD 1.83％,人参皂苷Rd线性范围0.45～4.53 μg,平均回收率101.2％,RSD 2.37％.结论:方法准确可靠,适用于同时测定骨愈注射液中三七总皂苷和淫羊藿苷含量.
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大血藤的HPLC指纹图谱
目的:建立大血藤的HPLC指纹图谱方法,为其质量控制提供参考.方法:采用HPLC Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-甲醇(1∶1)为A相,0.1％磷酸水为B相,流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,梯度洗脱,在280 nm波长下测定大血藤、鸡血藤及五香血藤的指纹图谱,应用系统聚类分析对不同市场购买的大血藤药材进行分类.结果:建立了大血藤药材HPLC指纹图谱的分析方法,标定了22个共有峰,指认了3个峰,分别为红景天苷、原儿茶酸和大黄酸.大血藤、五香血藤和鸡血藤药材的指纹图谱相似度差异明显.11批不同市场购买的大血藤药材分为3类.结论:方法简便、准确、重复性好,可用于大血藤的鉴别研究和质量控制.
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HPLC测定中风回春胶囊中丹酚酸B的含量
目的:建立中风回春胶囊中丹酚酸B的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量,色谱柱为Phenomenex C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈-1％甲酸溶液(40∶ 60),流速1 mL· min-1,检测波长286 nm,进样量10 μL,柱温30℃.结果:丹酚酸B在7.9～196.5 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 9),平均加样回收率为99.06％,RSD1.54％.结论:建立的方法简便、准确、重复性好,可用于中风回春胶囊的质量控制.
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HPLC测定田七跌打风湿软膏中盐酸小檗碱的含量
目的:建立田七跌打风湿软膏中盐酸小檗碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent TC-C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钠(用磷酸调节pH 3.0)(25∶ 75)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长265 nm.结果:盐酸小檗碱在0.043 74～0.437 4 mg与峰面积呈良好的线性关系,Y=0.000 2X +0.007 1(r=0.999 9)；平均回收率99.34％,RSD 1.73％.结论:方法简便、可靠、准确,专属性强,可用于该制剂的质量控制.
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不同产地叶下珠药材中总酚含量测定
目的:建立不同产地叶下珠药材中总酚的含量测定方法.方法:以柯里拉京为对照品,三氯化铁-铁氰化钾为显色剂,检测波长744 nm,采用UV测定11个不同产地叶下珠药材中总酚的含量.结果:柯里拉京在0.604 ～ 3.02 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 1),平均加样回收率99.79％,RSD 2.72％.不同产地叶下珠药材中总酚质量分数5.00％ ～ 12.16％.结论:该方法简单准确、重复性好,可用于叶下珠药材中总酚含量的测定.
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紫外光谱检测掺入四物汤的西药成分(Ⅱ)
目的:利用紫外(UV)吸收光谱检测掺入中药制剂四物汤中的西药成分.方法:在四物汤溶液中分别掺入9种西药成分,使用加权相关分析法分析掺入前后的UV光谱变化.结果:6种西药成分掺入四物汤后可以引起UV光谱的明显变化,Spearman'sp ＜0.94;另外3种对UV光谱的影响甚微,Spearman'sp＞0.95.结论:UV光谱可以作为一种快速过筛试验用于鉴别中药制剂的西药成分.
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HPLC同时测定龙胆中4种活性成分含量
目的:建立HPLC同时测定龙胆中龙胆苦苷、马钱酸、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷含量的方法.方法:Inertsil ODS-SP柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.4％磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0～ 40 min,10％ ～ 30％A),流速为1.0 mL·min-1,柱温25℃,检测波长240 nm.结果:龙胆苦苷、马钱酸、獐芽菜苦苷和獐芽菜苷的线性范围分别为1.0～20 μg (r=0.999 7),1.0～20μg(r=0.999 6),1.0～20 μg(r=0.999 5),0.1～2.0 μg(r=0.999 5);平均加样回收率分别为98.9％,99.7％,99.1％,99.3％.结论:该方法准确、灵敏、可靠、重复性好,可用于龙胆的质量控制研究.
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开口箭ISSR-PCR实验反应体系条件的优化
目的:建立与优化药用植物开口箭ISSR-PCR实验反应体系.方法:以开口箭DNA为材料,分析了Mg2+,dNTP,引物及Taq DNA聚合酶浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响.结果:确立了稳定的、可重复的开口箭ISSR佳反应体系,即在10 μL的PCR反应体系中,含1 × buffer,2 U Taq DNA聚合酶,2 mmol·L-1 MgCl2,0.2 mmol·L-1 dNTP,0.75 μL引物.结论:从80条简单序列重复区间(ISSR)通用引物中筛选出了16条条带清晰稳定的引物,设置了不同的引物退火温度,为进一步进行开口箭的遗传多样性分析的研究奠定了基础.
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射干地龙颗粒质量标准
目的:建立射干地龙颗粒的质量标准,为其质控提供依据.方法:采用薄层色谱法对组方中药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定组方中次野鸢尾黄素的含量.结果:确定了制剂中射干、地龙、北豆根及五味子的薄层鉴别方法,在选定的薄层色谱条件下,色谱斑点分离较好；采用C18反相柱,以乙腈-0.2％磷酸水为流动相,检测波长为266 nm,建立了本制剂中次野鸢尾黄素的含量测定方法,得到其线性为0.342 2～86.60 mg· L-1,回归方程为A =51 639C +7 222(R2 =0.999 5,n=10).平均回收率为99.04％,RSD 1.27％.结论:所建立的方法简便、准确、专属性强、重复性好,可有效地控制射干地龙颗粒的质量.
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桂枝汤水提液中总多糖含量的测定
目的:建立分光光度法测定桂枝汤水提液中总多糖含量的方法.方法:以葡萄糖为对照品,苯酚-硫酸比色法测定桂枝汤水提液中总多糖的含量.结果:葡萄糖在19.62 ～ 117.70 mg·L-1与吸光度成良好线性关系,平均回收率为99.3％,RSD 2.5％ (n =6).结论:该方法简便易行,重复性良好,可作为桂枝汤水提液中总多糖含量测定的方法.
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复方苦蛇黄洗剂质量标准
目的:建立复方苦蛇黄洗剂的质量标准.方法:采用薄层色谱(TLC)法对制剂中的苦参、蛇床子、黄柏进行定性鉴别；采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中苦参碱的含量.结果:TLC显色清晰且阴性对照无干扰,苦参碱在0.308 ～3.080 μg与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为99.52％,RSD 0.55％.结论:所建标准可用于复方苦蛇黄洗剂的质量控制.
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带不连续进样方式的电感耦合等离子体质谱联用法测定川乌药材中重金属元素含量
目的:测定毒性药材生川乌中的重金属及有害元素残留.方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)建立了毒性药材生川乌中重金属及有害元素测定方法.结果:在优化的实验条件下,5种元素方法的检出限为0.003～0.386 μg·L-1,回收率为80.75％～111.41％.结论:方法灵敏、快速、准确、简便,适于川乌药材中重金属及有害元素的测定.
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款冬花的高效毛细管电泳指纹图谱
目的:建立款冬花的高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱,为款冬花的质量控制提供依据.方法:采用未涂层毛细管柱(75 μm×57 cm,有效长度50 cm)为分离通道,以30 mmol·L-1硼砂(含甲醇25％,pH 8.8)溶液为背景电解质,分离电压20 kV,检测波长214 nm,柱温25℃.结果:测定了15批款冬花药材的高效毛细管电泳指纹图谱,确定了26个共有峰并指认了6个峰.结论:该方法操作简单、准确可靠,为科学评价款冬花药材的质量提供依据.
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蒙药益智温肾十味丸质量标准
目的:建立蒙药益智温肾十味丸的显微、薄层、理化鉴别方法和高效液相含量测定方法,提高其质量控制水平.方法:在显微镜下观察本品粉末,以种皮厚壁细胞、石细胞群和体壁碎片为指标,鉴别本品中益智、苦石莲、冬葵果和方海；提取挥发油,点样于硅胶GF254薄层板上,环己烷-乙酸乙酯(9∶1)展开,以标准药材为对照,鉴别本品中的益智；理化方法鉴别白硇砂中氯化铵和方海中碳酸钙.对荜茇中胡椒碱进行含量监控,用ODS填充的色谱柱,甲醇-水(77∶ 23)为流动相,343 nm波长下测定.结果:方法可有效鉴别本品中益智、苦石莲、冬葵果、方海和白硇砂5味药材,高效液相含量测定方法在0.040 4～0.282 8 μg线性良好(r=0.999 9),胡椒碱的平均回收率为98.1％,RSD 0.62％,含量限度为不得少于1.4 mg·g-1.结论:该方法可有效控制本品质量.
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HPLC同时测定扶正固本颗粒中黄芩苷和淫羊藿苷
目的:建立扶正固本颗粒中黄芩苷和淫羊藿苷的含量测定方法.方法:采用HPLC法,以乙腈-0.2％磷酸溶液梯度洗脱,色谱柱为日旭AQ C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流速1.0 mL· min-1,柱温25℃,检测波长270 nm.结果:黄芩苷在0.756～10.08 μg,淫羊藿苷在0.299～39.92 μg与峰面积呈良好线性关系,相关系数分别为1.000 0,0.999 6；方法平均回收率分别为101.40％(RSD 1.41％),101.02％(RSD 1.08％).结论:方法简便、准确、重复性好,可作为扶正固本颗粒质量控制方法.
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五类新药苍术总萜醇的化学成分
目的:对中药5类新药苍术总萜醇的化学组成进行研究.方法:通过气相色谱-质谱联用技术对苍术总萜醇的化学成分进行分析、鉴定.结果:从苍术总萜醇中鉴定出20个组分,其中相对含量＞1％的组分为茅术醇、β-桉叶醇、γ-桉叶醇、榄香醇和2,3-Dihydro-1-oxo-phenalene,且茅术醇和β-桉叶醇两组分的相对含量之和为87％.结论:苍术总萜醇中茅术醇和β-桉叶醇两组分含量高.苍术总萜醇除含有倍半萜醇类成分外,还含有倍半萜烯类成分.茅术醇是质子泵抑制剂,β-桉叶醇是组胺H2受体阻断剂,两个倍半萜醇类化合物协同作用而抑制胃液分泌,从而发挥抗溃疡的作用.
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HPLC同时测定清肺抑火丸中3个苷类成分
目的:建立清肺抑火丸中3个苷类成分的含量标准.方法:采用HPLC,同时以2个检测波长对清肺抑火丸中的黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷进行定量分析.Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm)；流动相甲醇(A)-1％甲酸溶液(B)-乙腈(C)梯度洗脱,检测波长238,278 nm.结果:黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷分别在0.165～1.650,0.106 ～1.060,0.035 ～0.350 μg(r ＞0.999 7)线性关系良好,平均回收率＞96.75％,RSD＜ 2.05％.结论:该方法同时进行黄芩苷、京尼平苷、京尼平龙胆二糖苷的定量分析,可作为清肺抑火丸的质量控制标准.
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HPLC-ELSD测定地黄不同炮制品中单糖含量
目的:建立HPLC-ELSD测定地黄不同炮制品中单糖含量方法,研究不同炮制方法对熟地黄单糖含量的影响.方法:采用高效液相色谱法,以蒸发光散射检测器进行检测,Prevail carbohydrate ES色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(75∶25),流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,ELSD条件漂移管温度65℃,空气流速2.5 L·min-1,增益1.结果:D-葡萄糖平均回收率为98.24％,RSD 2.18％；D-果糖平均回收率为98.37％,RSD 2.11％；生地、炆制地黄、清蒸地黄、酒炖地黄中单糖含量分别为1.62％,(27.22±2.74)％,(9.63±2.05)％,(16.97±2.62)％.结论:该方法操作简便,可靠稳定,结果准确；地黄炮制品中单糖含量远远高于生地黄,炆制地黄中单糖含量高于其他两种炮制方法,为阐明其炮制机理提供实验依据.
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HPLC测定通关藤中ZP-7通关藤苷元B的含量
目的:建立HPLC测定通关藤药材中ZP-7通关藤苷元B([11α-O-(2-甲基丁酰基)-12β-O-乙酰基通关藤苷元B])含量的方法,并对不同产地的药材进行测定.方法:采用Agilent TC-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-水(35∶65),流速1.0 mL· min-1,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL.结果:ZP-7通关藤苷元B的线性范围为3.183～7.427 μg(r=0.999 4),平均回收率99.95％(RSD 0.83％).结论:方法准确,重复性好,专属性强,可控制药材的质量.
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三黄汤制炉甘石中盐酸小檗碱的含量测定
目的:建立三黄汤制炉甘石中盐酸小檗碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法.lichrospher C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸溶液(46∶ 64)(每100 mL含0.1 g十二烷基硫酸钠),流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长350 nm.结果:盐酸小檗碱的进样量在0.042 0～ 0.525 μg线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为95.24％,RSD 1.33％.3批三黄汤制炉甘石中盐酸小檗碱的含量分别为0.326％,0.347％,0.373％.结论:方法准确、灵敏、重复性好,可作为三黄汤制炉甘石中盐酸小檗碱的含量测定方法.
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怀山药、怀地黄及其“对药”中多糖的单糖组成及含量比较
目的:采用1-苯基-3-甲基-5-吡啶酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)建立了多种单糖的分离模式,应用于怀山药、怀地黄单味药材及其“对药”中多糖的单糖含量测定,并对怀山药、怀地黄单味药材和配伍药对中的单糖组成及其含量进行了比较.方法:以Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,以0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 6.7)-乙腈(83∶ 17)为流动相,检测波长254 nm,流速1 mL·min-1,柱温30℃.结果:怀山药和怀地黄单味药及其“对药”3种多糖水解后均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,但未检测到岩藻糖.与山药多糖和地黄多糖相比,怀山药和怀地黄“对药”中多糖的单糖组分甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸和葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的含量在山药多糖和地黄多糖之间.结论:该方法操作简便快速、结果准确可靠,可用于分析药品及食品中多糖中的单糖组成和含量.
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中西医结合保守治疗异位妊娠48例
目的:探讨中西医结合保守治疗异位妊娠的疗效.方法:96例异位妊娠患者随机分为观察组和对照组各48例.对照组甲氨蝶呤(MTX)50 mg·m-2,深部肌注1次.观察组在对照组的基础上采用少腹逐瘀汤加减口服,并根据人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平调整处方,1剂/d,常规水煎分2次服用,疗程4周.监测生命体征、血β-HCG水平及B超监测包块变化情况,并进行输卵管通畅实验.结果:观察组保守成功率(91.66％)优于对照组(72.92％)(P＜0.05)；观察组β-HCG复常时间、腹痛消失时间及子宫直肠陷凹积液吸收时间均明显短于对照组(P＜0.05)；治疗后观察组包块小于对照组(P＜0.01)；观察组输卵管通畅率(89.65％)优于对照组(70.37％)(P＜0.05).结论:中西医结合保守治疗异位妊娠能促进病灶包块吸收、促进输卵管通畅、保留生育功能,且安全性高,值得临床推广使用.
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合并用药对丹红注射液安全性的影响
目的:探讨合并用药与丹红注射液安全性的关系,为临床用药提供参考依据.方法:“多中心、大样本”医院集中监测法研究10 409例使用丹红注射液住院患者的合并用药情况,并对相关资料进行挖掘和分析.结果:丹红注射液与化学药物合并使用占用药总数的99.7％,依次为心脑血管疾病用药、神经与精神疾病用药、肠外肠内营养与调节水、电解质、酸碱平衡药、内分泌代谢疾病用药等,丹红注射液不良反应(ADR)与口腔科疾病用药,风湿免疫与骨科疾病用药,肠外肠内营养与调节水、电解质、酸碱平衡药,皮肤科疾病用药存在正相关.结论:丹红注射液ADR与合并用药的种类及数量存在一定相关性,应加强丹红注射液与相关类型药物合并用药的安全性监测.
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补肾通络方对糖尿病周围神经病变氧化应激影响
目的:观察补肾通络方对糖尿病周围神经病变(DPN)氧化应激影响.方法:将48例DPN患者随机分为治疗组30例,对照组18例,两组均给予常规治疗+硫辛酸针,治疗组在对照组基础上配合补肾通络方治疗,疗程90 d.观察患者临床疗效及血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)、神经传导速度、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化.结果:治疗后总有效率治疗组83.3％,对照组为66.7％,两组比较差异显著(P＜0.05).两组治疗后空腹血糖(FBG),HbA1c,TG,CHOL较治疗前显著下降(P＜0.05)；且治疗组TG,CHOL下降明显优于对照组(P＜0.05).治疗后两组运动神经传导速度(MNCV)、感觉神经传导速度(SNCV)较治疗前明显提高(P＜0.01,P＜0.05)；治疗组提高明显优于对照组(P＜0.01).治疗后两组MDA较治疗前明显下降,SOD较治疗前明显提高(P ＜0.01,P＜0.05)；治疗组MDA下降、SOD提高明显优于对照组(P＜0.01).结论:在对照组治疗基础上配合补肾通络方治疗DPN可以提高临床疗效,改善血脂代谢,降低氧化应激反应,提高神经传导速度.
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中医辨证分型治疗股骨头坏死
目的:讨论中医辨证分型在治疗股骨头坏死中的临床应用.方法:选取股骨头坏死气滞血瘀型,肝肾亏虚型以及湿热内阻型患者各30例,按辨证分型治疗3个月为1个疗程,3个疗程后比较疗效和Harris髋关节评分.结果:肝肾亏虚型股骨头坏死患者的总有效率(83.33％)明显高于气滞血瘀型(60.00％)和湿热内阻型(56.67％)(P＜0.05)；治疗后3组Harris髋关节评分与治疗前对比,均P＜0.01；治疗后,肝肾亏虚型Harris髋关节评分与肝肾亏虚型、湿热内阻型比较,P＜0.05,肝肾亏虚型优于其他两型.结论:以辨证、辨病相结合的原则按中医辨证分型治疗股骨头坏死可提高治疗效果.
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心肾双补强心方对慢性心衰患者心功能、血浆BNP及相关指标的影响
目的:观察心肾双补强心方对40例慢性心衰患者的临床疗效及心功能、血浆脑钠肽(BNP)等相关指标的影响.方法:将40例慢性心衰患者双盲法随机分为两组.两组基础治疗相同,均给予低盐饮食,卧床休息,必要时吸氧并根据病情口服常规西药(ACEI、利尿剂、血管扩张剂、洋地黄制剂、β受体阻滞剂)等.治疗组在此基础上加用心肾双补强心方治疗,煎煮取汁150 mL,每日2次.8周为1疗程.观察记录患者治疗前后的症状、舌苔、脉象的变化及心脏超声检查指标,左室舒张末期内径(LVEDD)、收缩末期内径(LVESD)、射血分数(EF);BNP、血浆内皮素(ET)及一氧化氮(N0)含量的测定,并记录治疗前后安全性指标,如血压、心电图、肝肾功能、血流变、血、尿常规.详细记录用药过程中的不良反应.结果:加服心肾双补强心方慢性心衰患者的血浆ET,LVEDD,LVESD,NO均较服用前明显降低(P＜0.05),BNP水平显著降低(P＜0.01),射血分数EF明显上升(P＜0.01).结论:心肾双补强心方是治疗慢性心衰疗效可靠、服用安全的药物,无任何毒副作用,其对提高患者的生活质量,减少病死率有着及其重要的临床意义.
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补阳还五汤配合依达拉奉治疗急性缺血性脑卒中48例
目的:观察补阳还五汤配合依达拉奉治疗急性缺血性脑卒中的临床疗效.方法:将96例急性缺血性脑卒中患者随机分为治疗组和对照组各48例.对照组采用静脉滴注依达拉奉30 mg,每日2次；治疗组在对照组的基础上加用补阳还五汤,水煎服,每日1剂.疗程均为15 d.比较观察两组治疗后临床疗效、神经系统功能缺损评分(NIHSS)、日常生活能力指数评分(ADL,Barthel指数)及中医证候积分.结果:治疗后治疗组与对照组总有效率分别为95.83％,77.08％,愈显率分别为81.25％,47.92％,经比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；治疗后治疗组的NIHSS,ADL评分及中医证候积分明显优于对照组,差别均有显著统计学意义(P＜0.05).结论:补阳还五汤配合依达拉奉治疗急性缺血性脑卒中疗效确切,值得临床推广应用.
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护心方治疗急性心肌梗死33例
目的:探讨护心方对急性心肌梗死(AMI)后患者心室重构和心功能的影响.方法:66例AMI患者随机分为观察组和对照组.两组均给予临床常规治疗.观察组加用护心方口服,疗程8周.采用心脏彩超检测治疗前后心功能,并检测治疗前后血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),转化生长因子β1(TGFβ1),超氧化物歧化酶(SOD),血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)和醛固酮(ALD)水平,并观察治疗前后气滞血瘀证积分.结果:治疗后观察组左心室舒张末期内径(LVDd),左心室舒张末期容积(LVEDV),左室收缩末期容积(LVSDV),心脏指数(CI)及左心室射血(LVEF)均较治疗前明显改善(P ＜0.05,P＜0.01),其中LVEDV和LVEF的改善优于对照组(P＜0.05)；观察组治疗后AngⅡ,PⅢNP,ALD及TGFβ1均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),SOD高于对照组(P＜0.05)；观察组治疗后心前区刺痛、气促、心悸、胸闷、易怒及气滞血瘀均明显低于对照组(P＜0.01).结论:护心方能防治心肌梗死后心室重构,并能改善临床症状,改善心功能.
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治偏痛胶囊治疗偏头痛的疗效及对血浆5-羟色胺的影响
目的:探讨治偏痛胶囊治疗偏头痛的疗效及对血浆5-羟色胺(5-HT)的影响.方法:将124例偏头痛患者随机分为观察组和对照组各62例.对照组采用氟桂利嗪胶囊,5 mg/次,每晚服用1次；观察组采用治偏痛胶囊,4粒/次,3次/d,口服.治疗期间若发生难以忍受疼痛,均可采用布洛芬片,0.1g/次,口服.两组疗程均为8周.观察头痛发作次数、头痛发作天数、头痛发作程度等临床症状；经颅多普勒(TCD)检测血液速度；检测血浆5-HT水平.结果:观察组总有效率(90.32％)优于对照组(77.41％)(P＜0.05)；观察组证候疗效总有效率(91.93％)优于对照组(75.81％)(P＜0.05)；治疗后观察组头痛发作次数、头痛发作程度及头痛发作天数均低于对照组(P＜0.01)；治疗后观察组血浆5-HT水平升高,优于对照组(P＜0.01)；观察组在研究期间止痛药使用量低于对照组(P＜0.01)；观察组双侧大脑中动脉(MCA),大脑前动脉(ACA),大脑后动脉(PCA),椎动脉的颅内段(VA)和基底动脉(BA)的血流速度均低于对照组(P＜0.01).结论:治偏痛胶囊能降低颅内动脉平均血流速度,改善偏头痛临床症状,治疗偏头痛疗效显著,其作用机制可能与提高患者血浆5-HT含量有关.
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中医辨证维持治疗对晚期非小细胞肺癌化疗后的生存质量及无进展生存期的影响
目的:探讨中医辨证维持治疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗后生存质量及无进展生存期的影响.方法:76例晚期NSCLC患者随机分成观察组39例和对照组37例.两组均采用一线化疗方案4～6周.对照组定期随访.观察组采用中医辨证治疗.随访统计无疾病进展生存期(PFS),于治疗前及治疗后12周评价患者生活质量及临床症状.结果:治疗后观察组躯体功能、角色功能情绪功能和整体生活质量评分均高于对照组(P＜0.05)；治疗后观察组疲乏、呼吸困难、失眠、食欲丧失积分低于对照组(P＜0.05)；观察组PFS(7.2±1.32)个月,优于对照组的(4.4±0.57)个月(P＜0.01)；治疗后观察组咳嗽、咯痰、痰中带血、气短、胸痛、口干咽燥、神疲乏力、食欲不振、失眠等评分均明显低于对照组(P＜0.01).结论:中医辨证维持治疗化疗后晚期NSCLC,能改善患者生存质量,改善临床症状,并能延长患者的PFS期.
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芪参益气滴丸对慢性心力衰竭患者心功能及血浆超敏C反应蛋白和B型脑钠肽的影响
目的:探讨芪参益气滴丸对慢性心力衰竭(CHF)患者心功能及血浆超敏C反应蛋(hs-CRP)和B型脑钠肽(BNP)的影响.方法:120例患者随机分为治疗组和对照组,均给予抗心力衰竭常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用芪参益气滴丸,疗程12周.治疗前后用彩色多普勒测定心功能指标左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD);测定血浆hs-CRP和BNP水平.结果:两组患者治疗12周后临床疗效比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；两组治疗后心功能指标LVEF,LVESD,LVEDD水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01)；两组治疗后hs-CRP,BNP水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:CHF患者在常规治疗基础上加用芪参益气滴丸治疗,可明显降低血浆hs-CRP及BNP水平,同时降低LVESVI,LVEDVI,增加LVEF,改善心功能.
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闭合性骨折早期应用中药熏洗、外敷的疗效观察
目的:探讨早期应用中药熏洗、外敷治疗闭合性骨折的疗效.方法:120例四肢闭合性骨折随机分为观察组和对照组各60例.两组均常规复位和固定,口服独一味胶囊,3粒/次,3次/d,疗程4周.对照组采用局部物理治疗,疗程4周,观察组采用中药熏洗(1次/d,共7d)+中药外敷(1次/d,共4周).于治疗前及治疗后7d对疼痛、压痛、瘀斑、功能障碍及肿胀进行评价,观察不良反应及并发症.结果:观察组治疗后疼痛、压痛、瘀斑、功能障碍及肿胀评分均低于对照组(P＜0.01)；观察组总有效率(100％)优于对照组(88.3％)(P＜0.05)；观察组出现张力性水泡少于对照组(P＜0.05).结论:早期应用中药熏洗、外敷治疗闭合性骨折,能明显改善早期疼痛、肿胀及功能障碍,并能提高临床疗效,减少并发症.
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微粉化增溶技术在残黄片工艺中的应用
目的:考察微粉化残黄片的体外溶出度及退黄药效作用,优选微粉化残黄片的超微粉粒度.方法:以小檗碱为指标,采用HPLC测定不同粉碎粒度的微粉残黄片在不同时间段的小檗碱溶出量,计算累计溶出度,观察溶出情况；采用4％ ANIT造成大鼠高黄疸模型,按给药方案给药,股动脉取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、谷氨酰转肽酶(γ-GT)等血清生化指标,评价不同粉碎粒度的微粉残黄片的退黄效果.以体外溶出及退黄效果综合优选微粉化残黄片的超微粉粒度.结果:随粉碎目数的增加,黄连中小檗碱的累计溶出率增加,200目和300目60 min时累计溶出率可分别达94.86％,96.18％；在退黄效果方面,200目残黄片可显著降低ALT,AST和γ-GT,且作用强于100,150,300目的残黄片,在降低ALT和γ-GT作用上甚至优于对照药熊去氧胆酸片.综合残黄片的外观性状及生产实际,确定佳微粉粒度200目.结论:以体外溶出及退黄效果综合优选微粉化残黄片的超微粉粒度是一种简便、可行的试验设计方法,可推广应用.
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不同接受液对药物体外透皮试验的影响
目的:考察不同接受液对药物体外透皮试验的影响.方法:以5-氟脲嘧啶为模型药物,用生理盐水配制一定浓度牛血清白蛋白(BSA)、苄泽98(Brij98)、泊洛沙姆188、聚山梨酯80(tween-80)、乙醇、γ-环糊精及十二烷基硫酸钠溶液(SDS)作透皮试验接受液,正常操作条件处理大鼠皮肤12 h后,换以生理盐水并加入药物后测定模型药物的透皮吸收参数；利用扫描电镜观察上述接受液对大鼠皮肤角质层的影响.结果:3％ BSA,6％ Brij98,低浓度泊洛沙姆188、tween-80、乙醇、γ-环糊精对药物透皮吸收参数均无明显影响,但后四者在高浓度条件下表现出一定影响,离子型表面活性剂SDS对大鼠皮肤影响较为严重.结论:体外透皮试验接受液可加入3％ BSA,6％ Brij98,低浓度的泊洛沙姆188,tween-80,乙醇及γ-环糊精以增加药物溶解度,但浓度不宜过大；离子型表面活性剂可能对药物透皮吸收有一定影响,应慎重添加.
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均匀设计优选维药行气那尼花颗粒挥发油的β-环糊精包合工艺
目的:优化行气那尼花颗粒中挥发油的β-环糊精(β-CD)包合工艺.方法:采用饱和水溶液法制备行气那尼花颗粒挥发油β-CD包合物.以挥发油包合率和包合物收得率为综合评价指标,采用均匀试验考察挥发油与β-CD的比例、包合温度、包合时间对包合工艺的影响.应用XRD,DSC,IR,UV及TLC对制备的包合物进行表征.结果:佳包合工艺为挥发油与β-CD比例1∶11,包合温度60℃,包合时间1h,挥发油包合率达96.84％.表征试验证实,挥发油β-CD包合物已经形成.结论:行气那尼花挥发油β-CD包合物制备工艺稳定可行,可推广于产业化应用.
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小儿腹泻外敷凝胶膏剂的制备及质量控制
目的:制备小儿腹泻外敷凝胶膏剂,并建立其质量控制方法.方法:以吴茱萸、胡椒、丁香、肉桂提取物为主药,聚丙烯酸钠和卡波姆为凝胶骨架成分制备凝胶膏剂；采用TLC鉴别方中胡椒、丁香、肉桂,HPLC测定吴茱萸碱含量.结果:制备的凝胶膏剂成型性好,具有适宜的机械强度和黏附性.TLC中检出胡椒、丁香、肉桂,分离度好、专属性强,阴性对照无干扰.HPLC吴茱萸碱在0.05～0.4 μg与峰面积呈良好线性关系,平均回收率99.3％ (RSD 1.01％).结论:该制备工艺稳定合理,建立的质量控制方法准确、可靠、专属性强,可用于该制剂的质量评价.
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正交试验法优选熄风通脑胶囊提取工艺
目的:优选熄风通脑胶囊的提取工艺.方法:以芍药苷提取量和浸膏得率为指标,选取加水量、浸泡时间、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验法优选熄风通脑胶囊中赤芍等10味饮片的水提取工艺；以浸膏得率为指标,选取乙醇体积分数、乙醇用量、浸泡时间、回流时间为考察因素,采用正交试验法优选熄风通脑胶囊中三七的醇提取工艺.结果:佳水提工艺为加10倍量水浸泡0.5h煎煮2次,每次1.Sh;佳醇提工艺为加6倍量70％乙醇浸泡0.5h,回流提取3次,提取时间分别为1.5,1,1h.结论:优选的提取工艺稳定可行,可推广于大生产应用.
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四妙勇安汤中哈巴苷提取率的拆方分析
目的:考察四妙勇安汤不同拆方中哈巴苷的提取率变化,探讨其配伍规律.方法:将四妙勇安汤拆方分为8组,采用HPLC测定哈巴苷含量,色谱条件为SunFireTMC18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相0.1％磷酸水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,分析哈巴苷的提取率变化.结果:哈巴苷回归方程Y=1.22 ×106X+3 218.75(r =0.999 8),线性范围0.065 3 ～0.457μg,平均回收率96.81％ (RSD 1.83％)；哈巴苷提取率顺序为全方＞玄参＞拆方.结论:四妙勇安汤不同拆方均使哈巴苷的提取率降低,显示出全方合煎的优势,哈巴苷可能是四妙勇安汤发挥药效的有效组分之一.
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不同大孔树脂富集山茱萸中环烯醚萜苷的效果比较
目的:考察不同类型大孔树脂对山茱萸中环烯醚萜苷类成分的分离效果.方法:采用HPLC测定山茱萸中马钱苷及莫诺苷的含量,考察不同大孔吸附树脂分离山茱萸中环烯醚萜苷类成分的有效性.结果:马钱苷、莫诺苷的回归方程依次为y=17.245X+ 13.362(r=0.999 9),Y=15.468X-41.275(r=1.000 0)；线性范围分别为21.75～435,35.8 ～716 μg；加样回收率分别为98.27％,96.29％.HPD-400型大孔树脂的分离效果好.结论:选取马钱苷和莫诺苷含量为指标筛选富集环烯醚萜苷的大孔树脂类型是可行的,研究结果为分离山茱萸中有效部位的后续研究提供实验依据.
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茵栀黄分散片中3种活性成分的体外溶出度比较
目的:建立同时测定茵栀黄分散片中黄芩苷、绿原酸与栀子苷的体外溶出测定方法,并考察三者溶出特点.方法:以250 mL蒸馏水为溶出介质,采用桨法,转速50 r·min-1,通过HPLC测定茵栀黄分散片中绿原酸、栀子苷与黄芩苷的溶出度,计算累积溶出度,溶出曲线采用相似因子(f2)进行相似性比较.结果:以绿原酸为参比成分时,栀子苷与黄芩苷的f2分别为89.23,48.35；以栀子苷为参比成分,黄芩苷的f2=46.98.结论:以蒸馏水为溶出介质时,茵栀黄分散片中绿原酸与栀子苷具有相似的溶出特点,但与黄芩苷的溶出特点不同.
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红曲霉液体培养法制备姜黄素的工艺优化
目的:优选红曲霉液体培养法制备姜黄素的工艺条件.方法:以天然姜黄为原料,姜黄素得率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察发酵时间、料液比、营养比和发酵液pH对制备工艺的影响.结果:佳制备工艺为发酵时间5d,料液比1 g·L-1,营养比1/6,发酵液pH 4,姜黄素得率达0.43％.结论:优选的制备工艺稳定可行、效率高.
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丹参总酮缓释微丸的制备及处方工艺优化
目的:制备丹参总酮缓释微丸并优选其处方工艺.方法:采用固体分散体增溶技术及流化床上药技术制备载药丸芯,选取丙烯酸树脂NE30D(Eudragit NE30D)对载药丸芯进行包衣,通过单因素试验考察包衣增重、致孔剂种类和用量、抗黏剂、熟化时间和温度对包衣工艺的影响.结果:优选的包衣工艺为Eudragit NE30D包衣增重5％,以20％乳糖为致孔剂,50％滑石粉为抗黏剂,熟化时间12 h,熟化温度40℃,包衣微丸呈良好缓释效果,体外释药过程基本符合一级释药模型.结论:流化床上药法和流化床包衣法可用于制备丹参总酮缓释微丸,其体外释药缓慢、平衡.
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正交试验优选复方黑骨藤提取工艺
目的:优选复方黑骨藤的提取工艺.方法:以总生物碱得率和干膏得率的综合评分为指标,采用正交设计考察乙醇体积分数、固液比、提取时间、提取次数对复方黑骨藤提取工艺的影响.结果:佳提取工艺为药材粗粉加6倍量70％乙醇提取3次,每次1h.结论:优选的提取工艺稳定可行,可用于复方黑骨藤新制剂的制备.
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正交设计优化康视明合剂的提取工艺
目的:优选康视明合剂的提取工艺.方法:以葛根素、芍药苷含量为指标,采用HPLC测定指标成分含量,通过正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响.结果:佳提取工艺为加10倍量水提取3次,每次60 min.结论:该优选工艺稳定可行,可推广于康视明合剂的工业化生产应用.
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超临界CO2流体萃取-精馏联用技术提取脱酸月见草油的工艺优选
目的:优选超临界CO2流体萃取-精馏联用技术(SCFEF)提取脱酸月见草油的工艺条件.方法:以得油率和γ-亚麻酸含量为指标,采用单因素试验考察萃取压力、萃取温度、分离压力和分离温度对月见草油提取工艺的影响.比较SCFEF与超临界CO2流体萃取技术(SCFE)提取的月见草油质量差异.结果:优选的脱酸月见草油提取工艺参数为萃取压力22 MPa,萃取温度308 K,分离压力10～12 MPa,分离温度321 K,CO2用量45 kg,脱酸月见草油得率16.7％～18.1％,酸值0.85～1.21 mg KOH·g-1,所得脱酸月见草油各项理化指标均优于SCFE所得月见草油.结论:SCFEF通过将萃取、分离与纯化工序耦合,可做到一步提取脱酸月见草油.
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中药材水提液pH测定中仪器示值总误差的不确定度评定
目的:评定中药材水提液pH测定中仪器示值总误差的不确定度.方法:选取pH一级标准物质,采用标准溶液测量法进行评定.结果:影响pH计示值总误差不确定度的主要因素包括测量重复性、标准溶液及液接界电势,不确定度U95=0.012 pH.结论:该pH计示值总误差测量结果的不确定度评定方法准确可靠,可为中药材水提液的pH定值分析方法研究及其不确定度评定提供实验依据.
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岗松总黄酮的纯化工艺优选
目的:优选岗松总黄酮的大孔吸附树脂纯化工艺.方法:以总黄酮吸附率和洗脱率为指标,采用UV测定总黄酮含量,筛选佳大孔吸附树脂,并通过单因素试验考察岗松总黄酮的大孔树脂纯化工艺.结果:采用AB-8型大孔吸附树脂对岗松总黄酮进行纯化,其佳工艺条件为上样液生药质量浓度0.3 g·mL-1,上样流速1 BV·h-1,上样体积3 BV,加50％乙醇5BV以2 BV·h-1的流速洗脱,总黄酮纯度达52.33％.结论:优选的工艺合理可行,适用于工业化生产.
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抗癌中成药处方规律研究
目的:探索治疗癌症中成药的处方规律.方法:收录122种用于治疗癌症的中成药,分析其处方组成及功能主治,总结其处方规律.结果:经统计,治疗癌症的中成药处方中,补气药、活血化瘀药、清热解毒药和行气药使用频率较高,功能与主治以补益、活血、清热、解毒为主.结论:治疗癌症的中成药处方以补虚药、活血化瘀药为主药,辅以清热、行气、化痰等药；治疗原则以活血化瘀、清热解毒、化痰软坚治其标,益气养阴固其本等进行抗癌治疗.
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炎琥宁联合利巴韦林治疗手足口病的系统评价
目的:评价炎琥宁与利巴韦林治疗手足口病的疗效和安全性.方法:计算机检索Pubmed,CENTRAL,CBM,CNKI,VIP和万方等中英文数据库,纳入随机对照文献(RCT),由两名评价员独立选择试验和评价质量后,提取有效数据进行Meta分析.结果:共纳入26个RCT,病例共3 571例.Meta分析结果显示,炎琥宁联合利巴韦林治疗手足口病在总有效率[OR=5.72,95％ CI(4.17,7.85)]、退热时间[MD=-1.16,95％ CI(-1.46,-0.85)]、疱疹消退时间[MD=-1.56,95％ CI(-1.87,-1.25)]、溃疡消退时间[MD=-1.11,95％ CI(-1.47,-0.75)]等方面均优于对照组(P＜0.05).结论:炎琥宁联合利巴韦林对治疗手足口病可能有一定疗效,但还需进行更多高质量的RCT才能对其疗效得出肯定性结论.
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麻杏石甘汤防治甲型H1N1流感分子机制的生物信息学分析
目的:通过构建分子网络及解析生物学通路,探讨麻杏石甘汤防治甲型H1N1流感的分子机制.方法:查找麻杏石甘汤中药成分的有效化合物,在PubChem数据库中检索有效成分的靶蛋白,在Gene数据库中查找甲型H1N1流感的相关基因,运用Ingenuity Pathway Analysis (IPA)软件对二者进行构图和解析.结果:查找到麻杏石甘汤的靶蛋白186个,甲型H1N1流感相关基因7个.二者的分子网络复杂,生物功能多样,在共同作用的8条生物通路中,有4条通路为细胞免疫相关通路:病毒模式识别受体信号通路、巨噬细胞白介素12(IL-12)信号和生产通路、蛋白激酶(PKR)在干扰素诱导的抗病毒反应中作用通路、肿瘤坏死因子受体Ⅰ(TNFR1)信号通路.麻杏石甘汤可以调节细胞免疫相关通路中的Toll样受体9(TLR9)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、核苷酸结合的寡聚结构域2受体(NOD2)等多个位点.结论:麻杏石甘汤可以通过干预细胞免疫相关通路中的多个位点起到防治甲型H1N1流感的作用.
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升阳益胃汤方证相关性的文本挖掘
目的:明确升阳益胃汤的主治疾病谱及临床应用指征,为下一步的动物实验造模提供一定的依据,同时为指导临床提供理论基础.方法:采用文献信息挖掘方法,选取2012年9月以前公开发表于国内各种中医药期刊杂志的临床文献及医案文献进行统计和分析.结果:采用上述方法进行收集、筛选和整理后得到升阳益胃汤临床文献96篇,其中包含病例数共计909例,其所涉及的疾病种类中以消化系统疾病为主,共313例,占34.4％.其辨证的主要临床使用指征为①核心指征:大便溏泄、食少纳呆、神疲乏力；②主要指征:小便频数、面色无华、四肢不适；③舌象:舌淡苔白或胖大有齿痕；④脉象:脉细弱或濡.其常用加味药物主要配伍补益、固涩、理气化湿、消食之药.
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LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中4种黄连生物碱的含量
目的:建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱含量的方法.方法:采用ACQUITYUPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm ×50 mm,1.7 μm),流动相乙腈-水(含2 mmoL乙酸铵和0.05％甲酸),流速0.3 mL·min-1,柱温30℃,以士的宁为内标,血浆样品用4倍量乙腈萃取并沉淀蛋白,用电喷雾离子化(ESI)和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测,选择离子对为药根碱m/z338.227→m/z 322.824；黄连碱m/z 320.244→m/z 291.996；巴马汀:m/z 352.243→m/z308.016;小檗碱:m/z336.227→m/z 277.981；士的宁:m/z 335.264→m/z 184.017.结果:药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为1.01 ～ 505,1.06～530,1.13～565,1.07 ～535 μg·L-1；定量下限分别为0.539 2,0.646 3,0.761 5,0.197 1 μg·L-1；平均回收率分别为103.90％,101.50％,101.58％,115.54％；日内和日间精密度、稳定性的RSD均＜10％.结论:建立的方法准确、灵敏、特异、简便,适用于大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱的同时测定及药动学研究.
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甘草对雷公藤甲素与雷公藤内酯酮体内代谢成分的影响
目的:研究甘草对雷公藤甲素与雷公藤内酯酮体内代谢成分的影响.方法:采用LC-MS/MS研究雷公藤甲素和雷公藤内酯酮单独给药及与甘草联合给药后在大鼠血浆中相应代谢成分,比较单独给药及联合给药后代谢产物种类和生成量的差异.结果:在雷公藤甲素单独给药组及其与甘草联合给药组的大鼠血浆中,均发现4个代谢产物:m/z([M+H]+)359,359,375,377,其中羟基氧化代谢产物(m/z359)生成量较大.在雷公藤内酯酮单独给药组及其与甘草联合给药组的大鼠血浆中,均发现代谢产物3个:m/z([M +H]+)375,397,413,其中羟基化代谢产物(m/z 375)生成量较大,在联合给药组的大鼠血浆中还发现1个单独给药组中没有的代谢产物m/z([M +H]+)413.联合给药组比单独给药组的各代谢产物生成量大.结论:雷公藤甲素和雷公藤内酯酮单独给药及其与甘草联合给药后,大部分代谢产物相同,其中氧化代谢产物为主要代谢产物.甘草可加速雷公藤甲素和雷公藤内酯酮的体内代谢,为阐明甘草对雷公藤的减毒增效作用机制提供参考.
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基于GC-TOFMS的虚寒证原发性痛经患者尿液代谢组学
目的:比较虚寒证原发性痛经患者与正常组尿液内源性代谢物的差异,从整体角度阐释其病理生理学机制,深化中医整体观在现代实验研究中的应用.方法:采用病证结合模式,基于气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOFMS)技术,以N-甲基-N-三甲基-硅基三氟乙酰胺(MSTFA)作为衍生化试剂,检测虚寒证原发性痛经患者及正常组月经周期第2天(MC2)尿液代谢产物,得出两组总离子流色谱图(TIC),结合非监督的主成分分析(PCA)进行多维统计分析,寻找两组的差异性代谢产物.结果:虚寒组与正常组比较,差异代谢产物有果糖、麦芽糖、阿拉伯呋喃糖、异柠檬酸、乳酸、马尿酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、软脂酸、硬脂酸、原藻醇12种.与正常组比较,虚寒组升高的有乳糖,降低的有果糖、麦芽糖、阿拉伯呋喃糖、异柠檬酸、马尿酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸,软脂酸、硬脂酸、原藻醇.结论:虚寒证原发性痛经组与正常组尿液的差异代谢物质涉及到糖、氨基酸、脂酸代谢及肠道微生物菌群.
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复方脑忆源片主要成分淫羊藿苷在Caco-2细胞模型上的转运研究
目的:对复方脑忆源片中主要成分淫羊藿苷进行转运研究,阐明吸收特点.方法:利用Caco-2细胞模型,对复方脑忆源片中主要成分淫羊藿苷(ICA)进行体外转运,并通过高效液相(Luna Kromasil C18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5μm)；流动相乙腈∶水(30∶70)；流速1.0 mL· min-1；检测波长270 nm；)测定单体、药材及复方中的淫羊藿苷转运后的含量.结果:淫羊藿苷在小肠吸收转运过程随时间增长而增加,可能会被Caco-2细胞中的P-gp转运蛋白外排.与淫羊藿单体和淫羊藿提取物中的淫羊藿苷比较,脑忆源片可显著提高淫羊藿苷的转运,同时可降低淫羊藿苷的外排作用.结论:在脑忆源片中,由于淫羊藿苷外排减少,可认为通过复方配伍后,方中的其他药物抑制了淫羊藿苷的外排,使其可以更好的发挥药理作用.
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宁夏六盘山栽培黄芩适宜采收期研究
目的:确定宁夏六盘山栽培黄芩的适宜采收期.方法:通过HPLC比较测定不同生长期采集的不同株龄的栽培黄芩中黄芩苷的含量,同时比较醇溶性浸出物的含量.结果:栽培黄芩中黄芩苷的含量10月份高,醇溶性浸出物的含量在7～9月份增长较快、在10月份达高,3年生黄芩根重(10月份)较2年生重.结论:综合分析栽培黄芩中黄芩苷的含量、醇溶性浸出物的含量及其生物量,栽培黄芩适宜的采收期为第3年的10月份.
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UPLC-DAD法研究栽培两面针不同生长期不同部位有效成分的动态累积
目的:研究栽培两面针有效成分在不同生长期及不同药用部位的动态累积规律,以期为两面针合理用药及人工优质栽培提供理论依据.方法:采用UPLC-DAD法,测定栽培两面针药材不同生长期、不同药用部位(根、茎、枝)中氯化两面针碱含量变化.结果:两面针根、茎、枝不同部位中均含有氯化两面针碱,但含量差异较大,依次为根＞茎＞枝条；不同部位、不同生长期两面针药材中氯化两面针碱含量呈规律变化,出现两个较明显的高峰及一个低谷,即5,10 ～ 11月含量较高,6月含量低.结论:两面针不同生长期,不同部位有效成分累积分布不同,根据其含量变化规律,建议两面针佳采收期在栽培第3年的10 ～ 11月,药用部位为根部.两面针全株植物均具有一定的药用价值.
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鹰爪花茎和叶中内生真菌的组织化学定位与分子鉴定
目的:研究鹰爪花Artabotrys hexapetalus茎叶的显微结构及其内生真菌在组织内的分布特点及种类鉴定.方法:采用石蜡永久制片法对鹰爪花的显微结构进行研究,细胞化学法确定内生真菌的分布,平板分离法对内生真菌分离培养,通过rDNA中内转录间隔区(ITS)序列进行分类鉴定.结果:鹰爪花茎次生构造由周皮、皮层和维管柱组成,韧皮部纤维成层分布；叶为异面叶,主脉维管束为外韧型,具纤维组成的维管束鞘；茎和叶多个组织有内生菌分布.共分离鉴定18株内生真菌,其中拟茎点霉Phomopsis spp.是鹰爪花内生真菌优势菌群,占分离总数的61.1％,其次为胶孢刺盘孢Colletotrichum gloeosporioides.结论:鹰爪花茎和叶显微特征明显,其内生真菌的分布无明显组织特异性,拟茎点霉为鹰爪花内生真菌的优势种群.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
