中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位: 国家中医药管理局
- 主办单位: 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1005-9903
- 国内刊号: 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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四妙勇安汤对血栓闭塞性脉管炎大鼠的保护作用
目的:探讨四妙勇安汤(SMYA)对血栓闭塞性脉管炎(TAO)大鼠血脂、血液流变学的影响.方法:将实验大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、脉络宁阳性对照组(2.7 g,kg-1),SMYA高、中、低剂量组(24.3,16.2,8.1 g·kg-1).采用大鼠股动脉注射月桂酸钠法建立TAO大鼠模型,造模后24 h灌胃给予相应药物15 d后,观察SMYA对TAO大鼠血脂、血液流变学指标的影响.结果:SM YA可显著降低TAO模型大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL),升高高密度脂蛋白(HDL),其中SMYA高剂量组HDL含量为(0.50±0.08) mmol· L-1,组间比较差异有显著性(P <0.05,P<0.01和P<0.001);SMYA显著降低TAO模型大鼠全血黏度(高、中、低切)及血沉值,组间比较差异有显著性(P <0.05,P<0.01,P<0.001).结论:SMYA可改善TAO大鼠血脂水平和血液流变学,对TAO具有一定的防治作用.
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二苯乙烯苷联合PDTC抗H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡
目的:研究二苯乙烯苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG)联合吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为正常对照组、模型组(300 μmol·L-1H2O2)、TSG组(10 μmol·L-1TSG+300μmol·L-1H2O2)、联合预处理组(75μmol·L-1PDTC+10 μmol·L-1TSG+300 μmol·L-1H2O2)、PDTC组(75 μmol·L-1 PDTC+300 μmol·L-1H2O2),采用MTT法检测细胞增殖率,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3,核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,模型组细胞凋亡率增加,细胞增殖率降低;Caspase-3,NF-κB蛋白表达增加,差异均有显著性(P<0.01).与模型组相比,经TSG或PDTC预处理后,细胞的增殖率增加,细胞凋亡率降低;Caspase-3,NF-κB蛋白表达显著减少(P<0.01).联合预处理组与PDTC组或TSG组相比,细胞活力增加,细胞凋亡率下降;Caspase-3,NF-κB蛋白表达进一步减少(P<0.01).结论:PDTC或TSG预处理可抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,PDTC可联合TSG协同发挥抗H2O2诱导的内皮细胞凋亡,其机制与抑制NF-κB、Caspase-3的表达有关.
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广西小叶红叶藤不同极性溶剂提取物体外抗氧化活性
目的:研究小叶红叶藤Rourea microphylla不同溶剂提取物的抗氧化活性.方法:用冷浸法制备小叶红叶藤乙酸乙酯提取物(EAE)、丙酮提取物(AE)和乙醇提取物(EE),采用紫外分光光度法测定DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除率2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率和铁离子还原能力,对小叶红叶藤3种提取物体外抗氧化活性进行考察.结果:小叶红叶藤乙醇提取物(EE)抗氧化能力强,其ABTS+自由基及DPPH自由基半清除浓度(IC50)分别为0.66,0.60 g·L-1,还原能力强弱的顺序为EE> EAE> AE,与各提取物总黄酮含量一致.结论:小叶红叶藤提取物特别是乙醇提取物具有作为天然抗氧化剂和功能性食品进行研究和开发的潜力.
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桂郁金水提物对大鼠肝胞浆和微粒体内Ⅱ相脱毒酶的影响
目的:研究桂郁金水提物对大鼠肝胞浆液和微粒体内Ⅱ脱毒酶的影响.方法:雄性SD大鼠,桂郁金水提液按(生药剂量)0.81,2.43,7.29 g·kg-13个剂量组,灌胃给药,1次/d,连续3周,末次给药后,动物取血,分离血清,测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),摘除肝脏,差速离心法制备肝脏胞浆液及微粒体,测定胞浆液的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)和微粒体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶(UGT)的活性.结果:桂郁金水提液对大鼠体重增长和肝脏指数及血清ALT,AST含量均无明显影响;桂郁金各剂量组明显降低Cr含量(P<0.01);中、高剂量组明显降低了BUN含量(P<0.01).在肝胞浆液,与对照组比较,桂郁金各剂量组对CAT和GR的活性没有明显影响;桂郁金各剂量均明显增高GSH-Px活性(P<0.01);桂郁金中、高剂量明显增高SOD活性(P <0.01,P<0.05).在肝微粒体中,与对照组比较,桂郁金各剂量组对UGT的活性没有显著的影响;桂郁金各剂量均明显增高GST活性(P<0.05).结论:桂郁金对大鼠肝脏和肾脏没有毒性,对肾脏可能还具有保护作用.桂郁金可诱导胞浆液和微粒体内脱毒酶的功能,具有抗氧化作用,并能加速体内毒性代谢物的排除,增加肝脏的解毒能力.
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补阳还五汤和星蒌承气汤促进脑缺血大鼠神经修复和对肝肾功能的保护研究
目的:观察补阳还五汤和星蒌承气汤对脑缺血大鼠神经功能修复的作用,并从对谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的影响观察其对肝肾功能的保护作用.方法:SD大鼠120只随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、星蒌承气汤和补阳还五汤组;线栓法制备大脑中动脉阻塞模型;大鼠灌胃用药14 d,分别于14,28 d进行神经功能评测,检测大鼠肝肾功能变化.结果:与假手术组相比,模型组大鼠14,28 d神经功能评分均明显降低,AST,ALT,Cr,BUN明显升高.与模型组相比,各药物组大鼠14、28 d神经功能评分均明显升高,28 d AST,ALT水平降低;星蒌承气汤降低14 dAST水平作用明显,补阳还五汤降低28 d Cr作用明显.与尼莫地平及星蒌承气汤组比较,28 d补阳还五汤组神经功能评分明显升高,Cr显著降低.与14 d组比较,各药物组大鼠28 d神经功能评分均明显升高;28 d补阳还五汤组AST,ALT,Cr降低明显.结论:脑缺血后大鼠神经功能的自然修复缓慢,补阳还五汤和星萎承气汤对脑缺血远期的神经修复具有促进作用,以补阳还五汤的作用尤为明显;脑缺血可引起肝肾功能受损,星萎承气汤和补阳还五汤在缺血后不同时期保护肝肾功能的作用存在差异,其中以补阳还五汤保护肝肾功能的作用尤为全面而显著.
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白屈菜提取物中生物碱的镇痛抗炎作用研究
目的:研究白屈菜提取物的镇痛抗炎作用.方法:小鼠分别ig给予白屈菜提取物低、中、高剂量(0.1,0.2,0.4g·kg-1)1次,采用扭体法、热板法、福尔马林致痛模型,观察白屈菜提取物的镇痛作用.按以上剂量连续7d,采用小鼠二甲苯耳肿胀模型和小鼠腹腔毛细血管通透性实验,观察其抗炎作用;通过纳洛酮拮抗实验,初步验证其镇痛机制.结果:白屈菜提取物可明显抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应次数和扭体反应鼠数(P<0.05),提高小鼠光热辐射致疼痛反应的痛阈值;高剂量组对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用(P<0.01).结论:白屈菜提取物具有显著镇痛抗炎作用,其镇痛作用不受纳洛酮拮抗,主要是外周性的.
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活血化瘀中药对COPD血管重塑的干预作用
目的:观察慢性阻塞性肝病(COPD)模型大鼠应用活血化瘀药物后肺血管的病理变化,探讨活血化瘀中药对COPD血管重塑的干预作用.方法:用气管内注入脂多糖(LPS)及烟熏方法制作慢性阻塞性肺疾病模型.第29 ~ 42天,H组大鼠腹腔注射川青溶液8 mg·kg-1,每天1次,C组大鼠给予等体积生理盐水.于第6周处死3组大鼠,观察COPD模型大鼠应用活血化瘀药物后肺血管的病理变化.结果:C组和H组均有COPD特征性改变,但程度不同.H组血管平滑肌细胞轻度增生,管壁轻度增厚,血管平滑肌细胞厚度/血管壁厚度比值、血管壁面积/血管面积比值与N组、C组比较均有显著差异(P<0.01).电镜下观察N组内皮细胞、基底膜、线粒体、板层小体正常;C组则出现明显变化,内皮细胞吞饮小泡增多,线粒体水肿或空泡变性,胞核有明显固缩倾向,毛细血管腔内见多形核白细胞堵塞;H组内皮细胞、基底膜、线粒体、板层小体基本正常,毛细血管腔内可见少量多形核白细胞.结论:活血化瘀药物能够延缓或者改善COPD大鼠模型的血管重塑,指导临床慢阻肺从瘀论治,根据其发展过程中的不同阶段并结合病情和体质进行辨证施治,灵活地运用活血化瘀药物,科学地看待活血化瘀在防治慢阻肺中的重要作用,以提高临床疗效.
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左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫视网膜c-fos表达的影响
目的:研究左旋多巴甲酯(LDME)对剥夺性弱视猫视网膜细胞凋亡情况以及c-fos表达及其分布的特点,并探讨其作用机制.方法:健康2周龄幼猫30只随机分成6组:模型对照组及正常对照组,左旋多巴阳性对照组,LDME低、中、高剂量组,每组5只.除了正常组,各组幼猫于4周龄时单纯缝合左眼建立剥夺性弱视,12周后打开缝合眼并开始给药,每天灌胃LDME 20,40,80 mg· kg-1,阳性组为左旋多巴40 mg· kg-1,正常组与模型组为等量生理盐水,持续30 d.TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡情况,经原位杂交技术、免疫组化检测视网膜中c-fos mRNA和c-fos蛋白的表达.结果:与模型对照组比较,LDME明显减少弱视猫视网膜组织的细胞凋亡指数(P <0.05或P<0.01),显著上调c-fos mRNA在视网膜中的表达(P<0.05或P<0.01),同时增加c-fos免疫阳性细胞数量(P<0.05或P<0.01).结论:左旋多巴甲酯有效地保护剥夺性弱视造成的视网膜损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡以及促进c-fos表达有关.
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黄芪和丹参提取物配伍对大鼠心肌梗死后心肌组织病理变化的影响
目的:探讨黄芪和丹参提取物配伍对心肌梗死大鼠心肌组织病理变化的影响.方法:成功构建大鼠心梗模型后,随机分为模型组、黄芪组、丹参组、黄芪-丹参配伍组,每组8只大鼠,另设假手术组8只.术后48 h,黄芪、丹参及黄芪-丹参配伍组大鼠,均按20 mg· kg-1灌胃,其中黄芪-丹参配伍组,黄芪、丹参提取物按照1∶1配伍;对照组和假手术组给予生理盐水20 mL·kg-1灌胃.8周后测定大鼠的血流动力学变化;应用HE染色分析左心室心肌细胞组织形态学变化;采用Masson染色法检测左心室心肌胶原纤维;应用免疫组化法检测左心室心肌组织蛋白激酶D1(PKD1)的表达情况.结果:血流动力学检测结果表明,与模型组相比,假手术组、黄芪组-丹参组及黄芪丹参配伍组心脏左室收缩压(LVSP)、左室内压曲线大上升和下降速率(±dp/dt)均显著升高(P<0.01),左室舒张末压(LVEDP)均显著降低(P<0.01),与丹参组相比,黄芪丹参配伍组LVSP,±dp/dt均明显升高(P<0.05).HE染色分析,模型大鼠心肌细胞坏死严重,成纤维细胞增多,伴有炎症细胞浸润;黄芪、丹参单体组,细胞形态略显模糊,核肥大,成纤维细胞轻度增生,炎症细胞减少;黄芪-丹参配伍组细胞形态较清晰,成纤维细胞和炎症细胞少见.Masson染色结果表明,模型组大鼠心肌以胶原组织为主,各治疗组大鼠以红色心肌组织为主,间杂以胶原组织.免疫组化分析表明,模型组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达极其明显(P<0.01);和模型组相比,黄芪-丹参组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达明显下调(P<0.01),但仍清晰可见;和黄芪、丹参单体组相比,黄芪-丹参配伍组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达进一步下调(P<0.05).结论:黄芪-丹参配伍可明显改善心肌梗死后异常的血液流变学指标及组织的病理学病变,其作用机制可能与调控心肌组织PKD1蛋白的表达相关.
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栀子抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究
目的:研究栀子中α-葡萄糖苷酶活性抑制成分.方法:采用4-硝基酚-α-D-吡喃葡糖苷(PNPG)法,反应体系为67 mmol·L-1磷酸钾缓冲液870 μL,1 g·L-1谷胱甘肽溶液25 μL,2.74 U· mL-1α-葡萄糖苷酶溶液35 μL,15 mmol·L-1pNPG溶液70μL,0.1 mol·L-1 Na2CO3溶液4 mL,测定栀子各提取部位对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用.结果:栀子总提取物、环烯醚萜类、栀子黄色素类在质量浓度50.0,100.0 g·L-1时能显著抑制α-葡萄糖苷酶的活性,抑制率分别为61.47%,83.20%;34.27%,55.73%;78.13%,96.93%.结论:栀子提取物对α-葡萄糖苷酶有抑制作用,有效部位可能为环烯醚萜类和栀子黄色素类.
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配伍禁忌半夏、贝母对乌头汤抗氧化活性的影响
目的:考察乌头汤中加入半夏、贝母对抗氧化活性的影响,从抗氧化活性角度验证乌头反半夏与贝母的科学性.方法:分别以FRAP法测定总抗氧化活性,对DPPH·的清除能力测定清除自由基的活性.对比乌头汤中加入生半夏、川贝母与乌头汤的抗氧化活性,同时考察单煎制川乌、制川乌分别与反药及其他组方药配伍的抗氧化活性.结果:乌头汤与生半夏、川贝母配伍均会对抗氧化活性有一定的抑制作用,其中与川贝母的配伍降低作用为明显.结论:乌头汤与生半夏,川贝母配伍会降低其抗氧化活性.
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溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型ITF基因和MUC2蛋白表达的影响
目的:观察溃结灵含药血清对人克隆结肠腺癌(Caco-2)细胞损伤模型肠三叶因子(ITF)基因和MUC2蛋白表达的影响.方法:三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法复制溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,采用UC模型大鼠血清刺激Caco-2细胞,造成细胞损伤模型,分别用荧光实时定量-PCR (RT-PCR)法及免疫组化法检测溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型ITF mRNA及MUC2蛋白表达的影响.结果:与正常血清组ITF mRNA MUC2蛋白相对表达量(1.00±0.11),(8.62±3.16)比较,模型血清组(1.20±0.16,11.22±2.37),均明显增高(P <0.05,P<0.01);与模型血清组比较,溃结灵含药血清组ITF mRNA(1.76±0.37)及MUC2蛋白表达量(13.94±2.59)均明显增高(P <0.05,P <0.05).结论:溃结灵含药血清可上调Caco-2细胞损伤模型ITF基因和MUC2蛋白表达.
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高脂血症合并脑缺血对模型大鼠炎症因子的影响
目的:比较复合脑缺血模型和单纯脑缺血模型在不同时间炎症反应变化,分析高脂血症炎症因素对缺血脑组织的影响.方法:动物随机分为正常组、高脂对照组、假手术组、高脂假手术组、单纯缺血组和复合缺血组.取材时间是模型组脑缺血手术后3d和7d.采用高脂饲料饲养大鼠,复制经典的高脂血症动物模型,检测大鼠血清中血脂的含量以确定模型成功;复制大脑中动脉缺血模型,观察大鼠脑部缺血损伤情况.采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血模型,观察大鼠脑部缺血损伤情况.用酶联免疫法(ELISA)检测血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)T、C-反应蛋白(creactive protein,CRP)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平.结果:MCP-1,TNF-α和CRP在复合脑缺血组和单纯脑缺血组与相应假手术组组内比较,脑缺血组在缺血3,7d血清含量均多于相应的假手术组,差异显著(P<0.05);复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较,MCP-1,TNF-α在复合脑缺血组在缺血3,7d血清含量均增多,差异显著(P <0.05);CRP在复合脑缺血组织3d血清含量均增多(P<0.05),缺血7d血清含量均降低(P<0.05).SOD在复合脑缺血组和单纯脑缺血组与相应假手术组组内比较,脑缺血组在缺血3,7d活性均降低,差异显著(P<0.05);复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较,复合脑缺血组在缺血3d活性降低,差异显著(P<0.05).结论:高脂血症条件下,炎症因子在缺血不同时期既有累积现象,又有特异性的表达,这可能在脑缺血恢复期有助于损伤的修复.
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补肾方胚胎期干预子代成年大鼠IGT及其胰岛素抵抗、瘦素抵抗的研究
目的:通过大鼠胚胎发育期予补肾方干预,以研究中医补肾方在胚胎发育期干预能否预防高脂饮食诱发的子代成年大鼠糖耐量低减(IGT)及其对胰岛素、瘦素的影响.方法:将孕鼠分为正常对照组、模型组、左归丸组、右归丸组、八珍汤组,在孕1~19 d,各用药组分别以左归丸、右归丸、八珍汤灌胃(ig,20 g·kg-1,20 mL·kg-1),正常对照组和模型组以生理盐水灌胃.除正常对照组外,其余各组子鼠均于6周龄开始高脂饲料喂养,12周后测各组子鼠空腹血糖(FBG)、糖负荷后2h血糖(2hBG)、血清空腹胰岛素、瘦素.结果:与模型组比较,左归丸组2hBG明显降低(P<0.05);八珍汤组和右归丸组2hBG无明显降低.左归丸组、右归丸组、八珍汤组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较模型组显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05).左归丸组和右归丸组血清瘦素显著低于模型组(P <0.01,P<0.01);而八珍汤组血清瘦素水平与模型组相比无显著性差异.结论:左归丸与右归丸胚胎期干预都可对抗高脂饮食引发子代成年大鼠胰岛素抵抗、瘦素抵抗,但对IGT的预防作用以左归丸为优.八珍汤组对抗胰岛素抵抗、瘦素抵抗作用相对弱,也未能预防高脂饮食引起的子鼠IGT的发生.
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决明子乙醇提取物对高脂血症模型大鼠瘦素及神经肽Y的影响
目的:观察决明子乙醇提取物对实验性高脂血症模型大鼠血脂、血糖、瘦素(leptin)及神经肽Y(NPY)的影响,探讨决明子治疗高脂血症的机制.方法:采用高脂饲料饲喂的方法建立高脂血症大鼠模型.造模成功后,随机分为5组,模型组,阳性对照组(血脂康,0.15 g·kg-1),决明子低、中、高剂量组(4,8,16 g·kg-1),各组均按10 mL·kg-1体积ig给予相应药物,并设正常对照组,连续ig4周.给药期间继续饲喂高脂饲料.末次给药后,采血,全自动生化仪测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三醋(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、葡萄糖(Glu)的含量,ELISA法测定血清中leptin,NPY的含量.结果:与模型组比较,决明子乙醇提取物高、中剂量组能明显降低大鼠血清中TC,TG,LDL-C,Glu的含量,显著升高HDL-C的含量(P<0.01).高脂血症模型大鼠leptin,NPY水平明显升高,决明子乙醇提取物高、中剂量可显著降低大鼠leptin,NPY水平(P<0.01).结论:决明子乙醇提取物可有效改善高脂血症模型大鼠的血糖及血脂水平,其可能通过调节leptin-NPY系统来实现.
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蒙药祛“热”凉性方剂给旺-9对四氯化碳诱导大鼠急性肝衰竭的影响
目的:观察蒙成药给旺-9对四氯化碳诱导大鼠急性肝衰竭的影响.方法:采用灌胃法给30%四氯化碳(COl4)(4 mL·kg-1)诱导大鼠急性肝衰竭模型.造模24 h时分别检测正常组、模型组、蒙成药给旺-9低、中、高剂量组(1.3,2.6,3.9g· kg-1)血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的活性以及肝指数和胃匀浆中的胃蛋白酶等指标.结果:模型组与正常组比较对血清AST,ALT均有极明显增高(均P<0.01);NO,胃蛋白酶和肝指数均有明显的增高(P<0.05).各给药组与模型组比较,蒙成药给旺-9低剂量组对血清NO,胃蛋白酶均明显降低(均P<0.05).蒙成药给旺-9中剂量对血清AST,ALT均明显降低(分别为P<0.01,P<0.05);NO,胃蛋白酶和肝指数也有明显降低(均P <0.05).蒙成药给旺-9高剂量对血清AST,ALT均明显降低(分别为P<0.01或P<0.05);NO,胃蛋白酶和肝指数也有明显降低(P<0.05).结论:蒙药祛“热”凉性方剂给旺-9对CCl4诱导的大鼠急性肝衰竭有明显的保护作用,中剂量组效果佳.
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赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清OPG/RANKL水平的影响
目的:观察赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响,探讨TSTR治疗类风湿性关节炎的机制.方法:SD大鼠,随机取10只作为空白对照,其余大鼠采用弗氏完全佐剂制备关节炎模型,将造模成功的关节炎大鼠随机分为模型对照组、TSTR 40,80,160 mg·kg-1·d-1剂量组、雷公藤多苷12 mg·(kg·d)-1阳性对照组.各组分别ig给予相应的药物,模型对照组ig等容积的水.连续ig给药21 d后处死.采用ELISA法检测血清OPG,RANKL水平.结果:TSTR各剂量组大鼠血清RANKL水平分别为(98.74 ±10.17),(87.81±17.78),(77.75±14.61) pmol·L-1,均显著低于模型组(120.80±12.14) pmol·L-1(P <0.05或P<0.01);TSTR各剂量组血清OPG水平分别为(71.67 ±2.62),(77.50 ±0.93),(91.04±7.26) pmol·L-1,均显著高于模型组(53.64 ±3.46)pmol·L-1(P<0.05或P<0.0l);TSTR各剂量组OPG/RANKL比值分别为0.71 ±0.08,0.89±0.17,1.13 ±0.24,显著高于模型对照组0.43±0.06(P<0.05或P<0.01).结论:TSTR可能通过影响OPG/RANKL系统而对破骨细胞功能产生影响,从而防治骨破坏.
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葛根总黄酮逆转链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠胰腺损伤的研究
目的:研究葛根总黄酮逆转链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠胰腺损伤.方法:STZ(150 mg·kg-1)ip复制糖尿病小鼠模型,随机分成5组:模型组、二甲双胍阳性组及葛根总黄酮低、中、高剂量组.ig给予葛根总黄酮80,160,240 mg·kg-1,阳性组给予二甲双胍80 mg·kg-1,持续给药14 d.采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)水平.放射免疫法检测空腹血清胰岛素(FIns)及胰岛素抵抗(IR)水平.ELISA法检测胰腺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)活性和丙二醛(MDA)含量.HE染色观察胰腺细胞病理学的变化.Western blot法检测胰脏血红素加氧酶1 (HO-1)的表达.结果:与模型组比较,葛根总黄酮有效降低糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.01).恢复胰岛素水平,改善IR(P <0.01).增加胰腺GSH-Px、SOD活性,同时降低ROS,MDA水平(P<0.01).逆转STZ致糖尿病小鼠胰岛β细胞损伤.有效下调胰腺HO-1蛋白表达(P<0.01).结论:葛根总黄酮对STZ致糖尿病小鼠胰腺损伤有保护作用,机制可能与改善血糖代谢和抗氧化应激有关.
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中药复方双术油抗肿瘤机制的研究
目的:探讨复方双术油(BELY)体内外抗肿瘤作用及其机制.方法:设置空白组、阴性对照组、分别采用CCK-8法检测BELY(1 00,80,60,40,20,10,5 mg·L-1)对肿瘤细胞株K562,乳腺癌细胞系MDA-MB-231,人结直肠腺癌细胞LOVO和人肝癌细胞HepG2的抗增殖作用;建立小鼠S180及H22皮下肿瘤模型,设空白组(NS)、溶媒对照组(1%DMSO)和顺铂组(DDP,1 mg·kg-1)、BELY低、中、高剂量组(100,200,400 mg· kg-1).DDP ip给药,其余ig给药.末次给药24 h后颈椎脱臼处死小鼠,剥取瘤块、胸腺和脾脏并称重,计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数;ELISA法测定移植瘤血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,探讨BELY对荷瘤小鼠免疫功能的影响;流式细胞仪测定BELY对荷瘤小鼠外周血CD4+/CD8+的影响.结果:BELY对HepG2,K562,Lovo,MDA231均有一定的生长抑制作用,并有良好的量效关系.BELY显著抑制S180和H22的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数、脾指数和体重.与空白组比较,BELY可明显升高小鼠血清中IL-2,IL-6,IL-12和TNF-α的水平,外周血CD4+/CD8+明显升高(P<0.01或P<0.05).结论:BELY既可以抑制肿瘤细胞生长,又可通过增强免疫从而达到双相抗肿瘤的作用.
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三七总皂苷对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8炎症因子及小胶质细胞的影响
目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)炎症因子及小胶质细胞的影响.方法:采用SAMP8小鼠,将其随机分为模型组、PNS高剂量组(200 mg·kg-1)、PNS低剂量组(100 mg·kg-1)和石杉碱甲组(0.3 mg·kg-1),8只/组,模型组ig给予给药组相同容积的双蒸水.每天ig 1次,连续给药2个月.用ELISA双抗体夹心法法测定PNS对各组SAMP8小鼠血清中的细胞因子白介素(IL)-1β,IL-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)及补体(C1q)表达的影响;HE染色光镜观察小胶质细胞的形态变化.结果:PNS高剂量组的IL-1β(23.14± 12.58) ng·L-1水平低于模型组(47.44 ng·L-1) (P<0.05);IL-6 PNS高、低剂量组(243.3±133.9),(269.0±75.1)ng·L-1低于模型组(582.5±144.6) ng·L-1(P<0.05);模型组小鼠血清中补体C1q (280.4 ±49.75) mg·L-1含量均高于阳性组C1q(144.71±21.78) mg·L-1和PNS高剂量组C1q(187.7±65.56) mg·L-1;模型组小鼠海马区的小胶质细胞被激活,吞噬神经细胞;用药组海马区小胶质细胞没有被激活,为静息状态.血清中TNF-α各组间无显著差异.结论:PNS对SAMP8小鼠的免疫炎症反应有一定的抑制作用.
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柴胡皂苷对无水乙醇致胃黏膜损伤的保护作用
目的:研究柴胡皂苷对大鼠无水乙醇致胃黏膜损伤的保护作用及其机制.方法:将大鼠分成对照组、模型组、柴胡皂苷组(0.047 g·kg-1)和奥美拉唑组(0.012 g·kg-1).给药2周后,采用无水乙醇灌胃建立大鼠胃黏膜损伤模型,以溃疡指数、病理损伤程度评价柴胡皂苷对胃黏膜的保护作用;采用酶联免疫法,测定无水乙醇致胃黏膜损伤大鼠血清中前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),探讨柴胡皂苷的胃黏膜保护作用机制.结果:柴胡皂苷给药组溃疡指数明显低于模型组(P<0.01);组织病理学积分判定结果,柴胡皂苷组与模型组比较有统计学差异(P<0.05);血清PGE2明显高于模型组(P<0.01),SOD明显高于模型组(P<0.01),MDA明显低于模型组(P<0.01).结论:柴胡皂苷具有明显的胃黏膜损伤保护作用,可能与抑制胃酸分泌及抗自由基损伤有关.
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肾茶总黄酮对大鼠慢性非细菌性前列腺炎的影响
目的:研究肾茶总黄酮(TFC)对大鼠慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用及机制.方法:将成年雄性SD大鼠随机分成6组,每组10只,即正常对照组、模型组、塞来昔布组(阳性组250 mg· kg-1)、肾茶总黄酮低、中、高剂量组(100,200,400mg·kg-1),除正常组外,大鼠去势后,皮下注射苯甲酸雌二醇0.25 mg·kg-1,建立大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型,空白组和模型组给予等量生理盐水,灌胃,1次/d,连续给药30 d后,观察肾茶总黄酮对大鼠前列腺液中白细胞数(WBC)、卵磷脂小体密度、前列腺指数的影响,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血清和前列腺组织匀浆内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的表达.结果:肾茶总黄酮组能降低前列腺炎大鼠前列腺液中白细胞数和前列腺指数,增加卵磷脂小体密度(P<0.01或P<0.05);并能降低大鼠血清和前列腺组织匀浆TNF-α,IL-8水平.结论:肾茶总黄酮对大鼠非细菌性前列腺炎有明显的治疗作用,其机制可能与降低TNF-α,IL-8的水平有关.
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健脾益气活血汤对自发性高血压大鼠血管内皮舒缩因子表达的影响
目的:观察健脾益气活血汤对自发性高血压大鼠(SHR)收缩压及血管内皮舒缩因子表达的影响.方法:采用随机对照方法,将60只24周龄SHR分为SHR组(给予蒸馏水)、培哚普利组(培哚普利,0.4 mg·kg-1·d-1)、培哚普利联合中药组(培哚普利0.4 mg·kg-1·d-1+中药健脾益气活血汤20 g·kg-1·d-1,ig,中加西组)、健脾益气活血汤高、中、低剂量组(40,20,10 g·kg-1 ·d-1,ig),每组10只,以同龄同种系正常血压的京都种大鼠(WKY)10只作为WKY组(给予蒸馏水).BP-98A型智能无创血压计监测大鼠尾动脉收缩压变化;治疗6周后腹主动脉取血测定血浆一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)、内皮源性超极化因子(EDHF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素l(ET-1)浓度.结果:与SHR组收缩压(207.5±16.7) mmHg相比,培哚普利组(165.8±10.2)mmHg,中加西组(160.4 ±16.5) mmHg明显降低(P<0.01).SHR组血浆NO(5.3±.1.6) μmol·L-1,PGI2(27.2±6.3) ng·L-1、EDHF(106.7±3.2) ng·L-1浓度低于WKY组(33.8 ±7.5) μmol·L-1,(842.9 ±218.6),(347.0±44.4) ng·L-1,(P<0.01);培哚普利组、中加西组、中药高、中剂量组血浆NO,PGI2,EDHF浓度高于SHR组;SHR组大鼠血浆ET-1 (77.1±13.9) ng·L-1,AngⅡ(21.0±2.6)μg·L-1浓度高于WKY组(20.8±1.9) ng·L-1,(1.1±0.3) ng·L-1,(P<0.05);培哚普利组、中加西组、中药高、中、低剂量各组大鼠血浆ET-1,AngⅡ浓度明显低于SHR组,(P<0.01).结论:健脾益气活血汤可调控血管内皮舒缩因子的分泌与释放平衡,改善血管内皮功能,降低收缩压,减轻血压增高引起的血管内皮功能障碍.
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小柴胡汤对功能性消化不良大鼠血管活性肠肽、胃排空及小肠推进率的影响
目的:观察小柴胡汤对功能性消化不良(FD)大鼠血管活性肠肽(VIP)、胃排空及小肠推进率的影响.方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、小柴胡汤组和多潘立酮组,每组12只.采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节的方法造模,每天1次,连续3周.造模结束后,分别对4组大鼠进行相应被试因素的灌胃处理14 d.灌胃结束后,分别测定各组VIP、胃内残留率及小肠推进率.结果:与空白组相比,模型组大鼠血清VIP含量及胃内残留率明显升高,小肠推进率显著降低,且均有显著性差异(P <0.05或P<0.01);与模型组相比,小柴胡汤组和多潘立酮组大鼠血清VIP含量及胃内残留率显著降低,小肠推进率明显升高,且均有显著性差异(P <0.05或P<0.01).结论:小柴胡汤可降低FD模型大鼠血清中VIP的含量,加速胃排空及小肠推进率.
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通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2,Bax的影响
目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和机制.方法:98只SD大鼠通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据Longa评分(≥2分)随机分为7组,分别为正常对照组、假手术组、模型组、尼莫地平组、通络化痰高、中、低剂量组.于术后第1天开始分别给予蒸馏水(正常对照组、假手术组、模型组)、尼莫地平(32.4 mg·kg-1)和通络化痰胶囊高、中、低剂量组(648,324,162 mg·kg-1)灌胃治疗,并于术后第1,2,3,5,7天行Narrow-Alley Corner Test检测脑缺血损伤大鼠神经功能的改变,术后第8天行4%多聚甲醛(pH 7.0)灌注固定后断头取脑,观察脑组织病理学的改变,利用TUNEL法检测缺血半暗带神经细胞凋亡水平的变化,利用免疫组化技术测定缺血半暗带Bcl-2相关x蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达水平的改变.结果:模型组大鼠Narrow-Alley Corner Test得分较正常对照组和假手术组显著增加(P<0.01),尼莫地平组和通络化痰胶囊组得分较模型组降低(P<0.01,P<0.05).缺血后大鼠脑组织损伤明显,尼莫地平组和通络化痰胶囊组的损伤减轻.模型组较正常对照组和假手术组神经细胞凋亡增多、缺血半暗带Bax和Bcl-2表达增加(P<0.01).尼莫地平组和通络化痰胶囊组较模型组神经细胞凋亡减轻、缺血半暗带Bax表达减少,Bcl-2表达增强(P<0.01).结论:通络化痰胶囊可促进脑缺血损伤大鼠损伤后神经功能障碍的恢复,减轻神经元病理损害,其机制可能与其促进缺血半暗带Bcl-2表达,抑制Bax表达,从而减少细胞凋亡水平有关.
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赤雹果总有机酸对大鼠离体子宫平滑肌的作用及机制研究
目的:观察赤雹果总有机酸(FTDBP)对大鼠离体子宫平滑肌活力的影响.方法:选用8周龄Wistar雌性未孕大鼠,以子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度指标,计算子宫平滑肌活力及FTDBP的半数抑制浓度(IC50).以盐酸普萘洛尔、盐酸苯海拉明、盐酸雷尼替丁、硫酸阿托品为阻断剂,观察FTDBP对子宫平滑肌作用与β,H1,H2,M受体的关系,探讨FTDBP对子宫平滑肌的作用机制.结果:与模型组比较,FTDBP剂量组(0.032,0.064,0.128 g·L-1)和元胡止痛片组对缩宫素所致大鼠离体子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度和活力均有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),IC50为0.100 24 g·L-1;与模型组比较,硫酸阿托品组大鼠子宫平滑肌的收缩频率、幅度和活力差异无统计学意义.结论:FTDBP对大鼠子宫平滑肌活力有明显的抑制作用,其作用是通过抑制M受体实现的,与H1,H2,β受体无关.
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不同干燥方法对川芎不同部位丁苯酞含量的影响
目的:研究不同干燥方法对川芎不同部位丁苯酞含量的影响.方法:采用高效液相色谱法测定不同干燥方法的川芎不同部位中丁苯酞的含量.结果:丁苯酞在进样量0.515 2 ~5.152 0μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),定量限为5.515 2 mg·L-1,平均回收率为100.1%,RSD 1.10% (n =9);川芎不同部位丁苯酞的含量从高到低为根茎>茎>叶;不同干燥方法对川芎不同部位丁苯酞含量有一定影响.结论:川芎不同部位的丁苯酞含量不同,川芎全株宜选用晒后烘干的干燥方法.
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HPLC同时测定苦豆子总碱中8种生物碱含量
目的:建立苦豆子总碱中生物碱的含量测定方法.方法:采用HPLC,乙腈-0.05 mol· L-1磷酸二氢钾(三乙胺调pH >6.45),梯度洗脱,柱温35℃,检测波长205 nm,流速1.0 mL·min-1.结果:8种生物碱分离良好,8种生物碱含量>50%.结论:该方法简便,可以作为苦豆子总碱的含量测定方法,比原标准中的滴定法测定总碱含量更方便、精确.
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UPLC-MS定性定量检测稳糖安胶囊中降糖类化学药品
目的:建立UPLC-MS方法,快速定性定量检测稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品.方法:采用超高效液相色谱串联四极杆质谱仪,色谱条件:Agela Venusil-C18(2.1 mm×50 mm,3μm)色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-0.01 mol·L-1乙酸铵(50∶50),流速0.2 mL· min-1.质谱条件:ESI源,多反应检测(MRM),监测离子对(m/z):瑞格列奈(453.4→86.0,453.4→230.3)、格列美脲(491.4→ 126.2,491.4→352.3)、格列本脲(494.2→168.5,494.2→368.9)、吡格列酮(357.2→119.0,357.2→134.1)、格列齐特(342.2→90.9,324.2→109.9)、格列吡嗪(446.2→92.6,446.2→102.6)、苯乙双胍(206.2→59.7,206.2→104.6)、二甲双胍(130.1→60.0,130.1→71.0).以保留时间和定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量.结果:8种降糖化学药品瑞格列奈、格列美脲、格列本脲、盐酸吡格列酮、格列齐特、格列吡嗪、盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍分别在4.056 ~ 129.792,13.912 ~ 125.184,3.92 ~ 125.44,3.944 ~ 126.208,4.056 ~ 129.792,4.232 ~ 135.424,4.072 ~130.304,4.264 ~136.448 ng·L-1均呈现良好的线性关系(r>0.999);平均加样回收率均在98.18 ~100.95%;8种降糖化学药品含量重复性试验RSD <2.95%.结论:方法定性可靠、定量准确,且快速简便,可用于稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品检测.
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HPLC同时测定不同产地葛根中6种主要异黄酮类成分的含量
目的:建立同时测定葛根药材中6种主要异黄酮类成分含量的HPLC方法.方法:采用RP-HPLC法,Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱;流动相:甲醇-0.1%枸橼酸溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长250 nm.结果:3’-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、染料木苷、芒柄花苷、大豆苷元的线性范围分别为76.2~1 016,65.8 ~1 316,85.6 ~1712,49.98 ~499.8,21.94 ~219.4,48.5 ~485 ng,相关系数(R2)均大于0.999 6,6种成分的平均加样回收率分别为99.73%(RSD 0.6%),100.48% (RSD 1.11%),100.37% (RSD 0.79%),100.28%(RSD 1.07%),99.96% (RSD 1.22%),97.36%(RSD 1.59%).结论:方法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于葛根药材中6种主要异黄酮类成分的含量测定.
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忍冬叶化学成分研究
目的:研究忍冬叶的化学成分.方法:采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法等进行分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构.结果:从忍冬叶中分离鉴定了7个化合物,分别为香叶木素(1),槲皮素(2),苜蓿素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),芦丁(5),忍冬苦苷A(6),忍冬苦苷B(7).结论:所有化合物均首次从忍冬叶中分离得到.
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运用近红外技术建立藿香正气胶囊中厚朴酚的定量模型
目的:采用近红外光谱技术建立藿香正气胶囊中厚朴酚含量快速测定的方法.方法:以高效液相色谱法测定109批次藿香正气胶囊中厚朴酚含量,近红外光谱法采集近红外光谱数据,结合偏小二乘法(PLS)建立厚朴酚的定量模型.结果:建立的厚朴酚校正模型相关系数(R2)、内部交叉验证均方差、校正均方差分别为0.945 6,0.054 3,0.024 5.经外部验证,预测均方差为0.045 9,平均回收率为101.26%.结论:建立的近红外定量模型稳定,准确可靠,可快速对藿香正气胶囊中厚朴酚的含量进行测定.
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蜜麸炒僵蚕的质量标准研究
目的:建立蜜麸炒僵蚕的质量标准.方法:按照中国药典规定的相应方法进行显微鉴别、水分测定、灰分测定、浸出物测定和含量测定研究,以CIE-LAB色度值为指标,采用色彩色差计测量僵蚕炮制前后颜色的变化,薄层鉴别在已有方法基础之上适当改进,效果良好.结果:研究表明,僵蚕炮制前后显微鉴别特征变化不大.炮制后水分含量约为6.0%,总灰分含量均值为5.4%,酸不溶性灰分含量为0.12%,水溶性浸出物含量均值为21.4%,醇溶性浸出物含量为13.44%.薄层鉴别显示炮制品和生品甲醇提取物没有太大差别,但色彩差别较明显,蜜麸炒僵蚕的总色度值均值为47.269,而生品僵蚕的总色度值的均值为60.595.以L*,a*,b*值为指标,蜜麸炒僵蚕的L*值的数值范围为45.984±3.998,a*值的数值范围为8.315±2.149,b*的数值范围为8.949±3.322.蜜麸炒僵蚕中指标性成分草酸铵的含量初步定为不低于4.0%.结论:除色差鉴别外,本质量标准的各项要求及结果均在中国药典规定的生品僵蚕质量标准范围内,因此可作为蜜麸炒僵蚕质量标准研究的参考.
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附子的化学成分研究
目的:研究附子的化学成分.方法:通过反复硅胶柱色谱和重结晶的方法分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定结构.结果:分离得到9个化合物,分别为美沙乌头碱(1)、海帕乌头碱(2)、宋果灵(3)、去氢松果灵(4)、一枝蒿乙素(5)、penduline(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、单棕榈酸甘油酯(9).结论:化合物5,6,8,9为首次从该植物中分离得到.
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苦杏仁中苦杏仁苷的存在形式及其影响因素
目的:探讨苦杏仁中苦杏仁苷的存在形式及温度与酸碱对苦杏仁苷异构化的影响.方法:采用高效液相色谱法测定苦杏仁在不同煎煮温度下L-苦杏仁苷与D-苦杏仁苷的峰面积,同时用该法定性考察酸碱对苦杏仁苷单体异构化的影响.结果:苦杏仁中的苦杏仁苷在不同温度段内具有不同的异构化表现;苦杏仁苷单体在醋酸中未发生异构化,而在氨水、氢氧化钠的作用下均可发生异构化.结论:随着煎煮温度的上升,苦杏仁中L-苦杏仁苷与D-苦杏仁苷的峰面积比值逐渐增加;苦杏仁苷单体能在酸性环境中稳定存在,而碱是导致其发生异构化的因素之一.
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海南黄灯笼辣椒不同提取物化学成分GC-MS分析
目的:研究海南黄灯笼辣椒不同提取物中的化学成分,确定不同类型化学成分的合适提取溶剂.方法:海南黄灯笼辣椒分别用石油醚、乙酸乙酯和95%乙醇提取,提取物经GC-MS分析,比较不同提取物中所含化学成分的差异.结果:海南黄灯笼辣椒石油醚、乙酸乙酯和95%乙醇提取物中主要包含脂肪酸类、酰胺类(辣椒素和二氢辣椒素)、烃类、甾醇类和维生素类等几大类化合物.其中脂肪酸的含量在3种提取物中分别为63.40%,60.66%,16.16%,酰胺类(辣椒素和二氢辣椒素)为16.82%,27.64%,42.05%.结论:提取海南黄灯笼辣椒中的脂肪酸类以及一些小极性的烃类化合物宜用石油醚,提取酰胺类宜用选用95%乙醇.
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亲水液相色谱-三重四极杆质谱检测河豚鱼肝中的河豚毒素
目的:建立河豚鱼肝中河豚毒素(TTX)的亲水液相色谱-三重四极杆质谱联用(LC-MS-MS)定量检测方法.方法:样品经匀浆,超声,乙腈沉淀离心后,取上清液进样测定.极性聚酰胺键合硅胶柱InnovationTMHP Amide (100 mm×3.0mm,5μm),流动相乙腈-0.3%甲酸(体积比为70∶30),流速为0.5 mL· min-1;柱温30℃,进样量5 μL.选择正离子多反应监测(MRM)模式,[M+H]*,m/z 320.1162.1进行定量分析.结果:TTX的线性范围为0.031 3 ~2.00 mg·L-1(r =0.999 9);检测限(S/N =3)为3.0 pg,加样回收率在96.3% ~ 103.0%.结论:该法灵敏度高,重复性好,简便快速,适用于河豚毒素的测定.
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不同纯化方法对金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分含量的影响
目的:考察不同纯化方法对金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分的影响.方法:应用醇沉法、石硫法、石硫醇法、大孔树脂吸附法及萃取法等对金银花进行提取纯化,并采用高效液相色谱法测定其中6种咖啡酰奎宁酸类成分的含量.结果:萃取法所得金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分的含量高,总咖啡酰奎宁酸含量达83.91%.结论:萃取法是制备金银花提取物的理想方法.
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柴胡口服液HPLC指纹图谱及柴胡皂苷b2的含量测定
目的:建立柴胡口服液HPLC指纹图谱,并测定柴胡皂苷b2的含量,为科学评价和有效控制其质量提供可靠的方法.方法:用HPLC方法测定了10批柴胡口服液,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,建立柴胡口服液的标准指纹图谱,并计算了每批制剂的相似度及柴胡皂苷b2的含量.结果:10批柴胡口服液的HPLC指纹图谱主要有11个共有峰,其中1个共有峰得到确认,相似度均>0.985.柴胡皂苷b2在0.0397~0.793 3μg呈良好的线性关系(r=0.999 1),平均加样回收率98.27%,RSD 1.79%.结论:柴胡口服液制剂可通过与标准指纹图谱比较评价质量,方法稳定易行、重复性好,可用于柴胡口服液的质量评价.
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芪苈强心胶囊UPLC指纹图谱研究
目的:采用超高效液相色谱(UPLC)法建立芪苈强心胶囊的指纹图谱.方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相乙腈-0.15%磷酸水,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温40℃,检测波长203nm.结果:建立了芪苈强心胶囊的UPLC指纹图谱,共标定了36个共有峰,指认了其中8个共有峰,10批芪苈强心胶囊指纹图谱的相似度均在0.979 ~1.000.结论:该法具有良好的精密度、稳定性和重复性,为提高芪苈强心胶囊质量控制提供了新方法.
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川白芷不同品种(系)挥发油成分GC-MS分析
目的:运用GC-MS技术比较川白芷不同品种(系)挥发油的组分和含量.方法:采用乙醇超声法,对8个川白芷品种(系)进行处理,以水蒸气蒸馏方法提取挥发油;运用GC-MS技术对各品种(系)挥发油组分进行分析,采用面积归一法计算其相对百分含量.结果:8个供试品种(系)挥发油中共鉴定出78个化合物,主要含醇类和碳烯类化合物;8个品种(系)挥发油中分别鉴定出40,33,36,38,38,42,33,36种组分,共有组分为12种.除B-6品系外,共有组分均占挥发油总量的50%以上.试验结果还表明,仅B-7品系挥发油中含较高含量吡嗪类化合物.结论:川白芷不同品种(系)挥发油组分和含量总体一致,但也存在一定差异,这为川白芷资源进一步合理开发利用提供了科学依据.
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QuEChERS法联合在线GPC-GC-MS测定独活中27种农药残留
目的:采用QuEChERS样品前处理方法与在线凝胶色谱-气相色谱-质谱联用仪(GPC-GC-MS)联用,建立独活中27种农药多残留的快速检测方法.方法:以1%醋酸的乙腈为提取溶剂,超声提取,分散固相萃取净化,采用在线GPC-GC-MS分析,以选择离子检测(SIM)模式检测.结果:27种农药成分的峰面积与其浓度均有良好的线性关系,相关系数均在0.994 3 ~0.999 9.方法的检出限和定量限分别在0.037 5 ~3.040 0 μg·L和0.125 0 ~ 10.100 0uLg·L-1;在加标0.1 mg·L-1情况下,回收率均在61.7% ~114%,RSD 1.03% ~ 13.9%.结论:该方法简单、快速、选择性好、灵敏度高,符合农药多残留检测的要求,可用于独活中27种农药多残留的测定.
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辐射灭菌对西洋参巴布剂质量的影响
目的:考察不同剂量的60Co-γ射线辐照灭菌对西洋参巴布剂黏附性及主要有效成分含量的影响.方法:建立HPLC测定西洋参巴布剂中3种人参皂苷的含量,比较不同剂量辐照前后西洋参巴布剂的黏附性能及有效成分含量的变化.结果:西洋参巴布剂在不同剂量的60Co-γ辐照前后其黏附性无明显变化,辐照前后西洋参巴布剂人参皂苷Rg1,Re,Rb1含量分别约为8,90,90,22,189 μg·cm-2.结论:不同剂量60Co-γ辐照前后西洋参巴布剂的黏附性及3种人参皂苷含量无明显变化.
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西洋参鲜品与干品蛋白质、维生素C、维生素E、挥发油成分及超氧化物歧化酶活性的比较
目的:对西洋参鲜品和干品蛋白质、维生素C、维生素E、挥发油成分及超氧化物歧化酶活性进行比较,为西洋参的合理应用提供参考.方法:蛋白质分析采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法;维生素C、维生素E含量测定采用分光光度法;挥发油成分分析采用GC-MS的方法;超氧化物歧化酶(SOD)活性测定采用邻苯三酚自氧化法;并对测定结果进行t检验.结果:西洋参鲜品与西洋参干品的蛋白质电泳谱带有所不同,但鲜品蛋白质含量高于干品;维生素C、维生素E含量、SOD活性西洋参鲜品极显著高于干品(P<0.01),挥发油含量、成分种类西洋参鲜品多于干品,且成分有所不同.结论:西洋参鲜品与干品的蛋白质、维生素C、维生素E、挥发油成分有所不同,SOD活性有所差异,这可能是二者药性及作用不同的原因之一.
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HPLC测定凤眼草中槲皮素与山柰素的含量
目的:建立以高效液相色谱法测定凤眼草中槲皮素与山柰素含量的方法.方法:Inertsil ODS-3色谱柱(4.6mrn×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50),检测波长360 nm,流速1.0 mL· min-1.结果:槲皮素在11.1~333μg(r=1)线性关系良好,平均回收率为97.82%,RSD 1.1%;山柰素在2.3~69 μg (r=1)线性关系良好,平均回收率为96.81%,RSD 1.7%.结论:方法简便、快速、重复性好,可用于凤眼草的质量控制.
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中药三联疗法对急性脑梗死疗效及对脑血流量的影响
目的:研究中药三联疗法对急性脑梗死治疗效果及对脑血流量的影响.方法:286例急性脑梗死患者随机均分为观察组与对照组,各143例,观察组予以中药三联疗法治疗,包括自拟中风方煎服,1剂/d;直肠滴注中风方500 mL,1剂/d;银杏叶注射液10 mL,静脉滴注,1次/d.对照组以静脉滴注银杏叶注射液10 mL,1次/d;胞磷胆碱0.5g,静滴,1次/d.两组疗程均为14 d.比较两组的治疗效果及脑血流量变化.结果:观察组总有效率88.8%(127/143),对照组74.1%(106/143),观察组高于对照组(P<0.05).观察组患者治疗前后脑血流量为(583.1±114.2),(663.5±99.3) mL· min-1,对照组患者治疗前后为(594.1±105.9),(615.47±96.5) mL·min-1,治疗后观察组明显高于对照组(P<0.05).结论:中药三联疗法治疗急性脑梗死,能够改善脑供血,促进神经功能恢复,值得临床进一步推广实践.
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氟比洛芬酯与舒芬太尼联合用于肠道肿瘤术后的代谢调理作用分析
目的:对比分析氟比洛芬酯联合舒芬太尼与单独使用舒芬太尼,在对肠道手术后病人所产生的镇痛作用的效果以及代谢调理作用.方法:将2011年2月-2012年7月接受过肠道肿瘤根治手术的80位病人作为实验调查的样本,随机分成舒芬太尼镇痛组(A组,n =40)和氟比涪芬酯联合舒芬太尼镇痛组(B组,n=40).A,B组的病人在接受手术后的3d内不得进食,只能通过肘静脉注射进行营养补充.在此时间内定时记录A,B组的病人在禁食阶段中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α、体温数值、皮质醇、氮平衡状况、镇痛的整体效果、白细胞介素-6(IL-6)以及肾上腺索的变化情况.结果:术后两组镇痛评分差异无统计学意义,在第3天A,B组的患者相比,第1天的镇痛效果均出现了明显的好转.术后体温、负氮平衡、TNF-α及IL-6变化B组均较A组明显(P<0.05),但是肾上腺素的数值与皮质醇数值并没有出现明显变化.结论:相比单一的使用舒芬太尼进行术后镇痛,舒芬太尼和氟比洛芬酯混合镇痛的效果并没有明显的优势,但是舒芬太尼和氟比洛芬酯混合能够起到良好的术后调理效果.
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中西医结合治疗对冠心病患者血浆BNP水平变化的影响
目的:探讨中西医结合治疗对冠心病患者血浆B型脑钠肽(BNP)水平变化的影响.方法:选取2010年1月到2012年1月华中科技大学同济医学院附属武汉市普爱医院收治的冠心病患者120例,随机分为对照组60例,给予常规西药治疗.研究组60例,在对照组治疗基础上加用中药治疗,疗程为2周,比较两组疗效以及采用酶联免疫吸附法,治疗前后两组血浆BNP指标变化.结果:治疗2周后,与对照组疗效(68.3%)比较,研究组疗效(86.7%)明显增加,差异显著,有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者血浆BNP水平比较,研究组明显改善,差异显著,有统计学意义(P<0.01).结论:中西医治疗冠心病疗效明显,优于单纯西药治疗,可以明显改善血浆BNP水平,值得临床推广.
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丹参川芎嗪注射液联合中药灌肠对慢性肾脏病的疗效及作用机制研究
目的:观察丹参川芎嗪注射液联合中药灌肠对慢性肾脏病(CKD)的疗效及对内皮素(ET),6-酮前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)及血栓素B2(TXB2)的影响.方法:70例CKD 3期、4期患者随机分为观察组和对照组各35例.对照组给予常规西医对症处理及大黄液灌肠治疗,每次注入200 mL,保留灌肠1~2h,以灌入距离肛门大约20 cm处为标准.1次/d.观察组加用丹参川芎嗪注射液15 mL,以生理盐水100 mL稀释,静脉滴注.连续10 d;休息2d再行下1个疗程.共2个疗程.于治疗前后检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),ET,6-Keto-PGF1a及TXB2水平.结果:观察组总有效率71.43%,优于对照组的45.71% (P <0.05);治疗后观察组BUN和SCr水平均低于对照组(P<0.05,P<0.01);治疗后两组ET和TXB2水平下降,6-keto-PGF1a水平上升,观察组ET和TXB2均低于对照组,而6-keto-PGF1a水平高于对照组(P<0.05).结论:丹参川芎嗪注射液能降低CKD 3期、4期患者血BUN和SCr水平,提高临床疗效,并能改善患者高凝状态,保护血管内皮功能.
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血必净注射液治疗老年坠积性肺炎
目的:探讨血必净注射液治疗老年坠积性肺炎的临床疗效.方法:64例患者随机分为观察组和对照组各32例.对照组注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(2∶1) 1.5 g,5%葡萄糖注射液100 mL稀释后静脉滴注,bid;盐酸氨溴索注射液30 mg,生理盐水100 mL稀释后静脉滴注,bid.观察组加用血必净注射液50 mL加生理盐水100 mL,静脉滴注,bid.疗程14 d.观察咳嗽咯痰、体温、血象及X射线检测肺部情况.结果:观察组治疗4,7,14 d症状、体征积分均低于同期对照组(P<0.05,P<0.01);观察组体温复常时间、咳嗽咯痰消失时间,肺片恢复正常时间及血象复常时间均短于对照组(P<0.05);观察组临床疗效优于对照组(P<0.05).结论:加用血必净注射液能明显改善老年坠积性肺炎患者的临床症状和体征,提高临床疗效,促进了疾病的康复.
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复方丹参滴丸对早期糖尿病视网膜病变患者血管内皮功能的影响
目的:探讨早期糖尿病视网膜病变患者血管内皮功能变化及复方丹参滴丸的干预治疗作用.方法:选择早期糖尿病视网膜病变患者65例,分为常规治疗组、丹参滴丸治疗组,常规治疗组予胰岛素治疗,丹参滴丸治疗组在使用胰岛素的基础上服用复方丹参滴丸,10丸/次,3次/d,共服用8周;对照组31例,检测早期糖尿病视网膜病变患者治疗前后及对照组空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血内皮素-1(ET-1)水平,利用超声检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(FMD);同时观察早期糖尿病视网膜病变患者治疗前后荧光血管造影变化.结果:早期糖尿病视网膜病变患者组FBG,TC,TG,HbA1c,hs-CRP,ICAM-1及ET-1均高于对照组(P<0.05);早期糖尿病视网膜病变患者组FMD较对照组降低(P<0.05);丹参滴丸治疗组治疗后视网膜血管造影较治疗前明显改善,外周血hs-CRP,ICAM-1,ET-1[(8.76±1.26) mg·L-1,(407.82±87.45) μg·L-1,(96.68 ±10.69) ng·L-1]较常规治疗组[(18.78±2.42)mg·L-1,(597.79 ±60.74) μg·L-1,(184.5 ±10.78) ng·L-1]下降更明显,FMD升高更明显[(11.88±3.57)%vs(9.17±0.54)%],且差异有统计学意义(P<0.05).结论:复方丹参滴丸能有效的降低早期糖尿病视网膜病变患者炎症反应,并改善血管内皮功能.
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补肾温阳化瘀法治疗子宫内膜异位症30例
目的:通过检测补肾温阳化瘀法对子宫内膜异位症患者血清糖链抗原-125(CA125)的影响,观察补肾温阳化瘀中药对子宫内膜异位症的治疗作用,并通过检测子宫内膜异位症患者治疗前后血清细胞间黏附分子-1(sICAM-1),血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)的变化,观察细胞黏附分子在子宫内膜异位症发病中的作用.方法:采用补肾温阳化瘀法治疗内异症患者30例,分别于治疗前后于卵泡期相同时间分别抽取空腹肘静脉血,测定治疗前后血清中CA125,sICAM-1,sVCAM-1的含量变化.结果:补肾温阳化瘀法治疗本病总有效率73.33%,补肾温阳化瘀法能降低内异症患者血清中CA125的水平(P<0.01),内异症患者血清sICAM-1,sVCAM-1含量明显升高(P <0.05,P<0.01),经过中药治疗后降低(均P<0.01),有统计学意义.结论:ICAM-1,VCAM-1在子宫内膜异位症发病中起着一定的作用,补肾温阳化瘀法通过降低sICAM-1,sVCAM-1含量从而在对子宫内膜异位症起到治疗作用.
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辨证治疗糖尿病性便秘
目的:观察中医辨治治疗糖尿病便秘的疗效及对血糖、糖化血红蛋白的影响.方法:将120例糖尿病便秘患者随机分为治疗组与对照组各60例.治疗组在常规治疗基础上给予中药汤剂自拟方,对照组服用莫沙比利及维生素B12片,疗程均14 d,观察治疗前后两组大便情况及血糖(FPG)、2h餐后血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)的变化.结果:便秘改善总有效率治疗组为91.67%,对照组65%,两组有显著性差异(P<0.01);各项便秘症状指标比较,两组差异有统计学意义(P<0.01).治疗后两组患者FPG,2 hPG,HbAlc均有不同程度的下降,但治疗组明显优于对照组,自身前后对照和组间对照均有显著性差异(P<0.05).结论:辨证治疗糖尿病便秘疗效肯定,并有助于改善血糖.
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翘荷汤加味治疗急性咽炎62例
目的:观察翘荷汤治疗急性咽炎的临床疗效.方法:将124例急性咽炎患者随机分为治疗组与对照组,各组62例.治疗组给予翘荷汤加味(每日1剂),对照组给予头孢氨苄胶囊(0.5 g/次,3次/d),均口服,连续7d.结果:治疗组痊愈38例,总有效率为96.77%,对照组痊愈32例,总有效率为82.26%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05).不良反应发生率治疗组为3.23%,对照组为11.29%,两组比较差异显著(P<0.05).结论:翘荷汤加味对急性咽炎的临床疗效优于头孢氨苄胶囊,且不良反应少,可供临床推广应用.
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益肺胶囊联合痰咳净散对COPD稳定期的临床疗效
目的:探讨益肺胶囊联合痰咳净散对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的临床疗效.方法:98例COPD稳定期患者随机分为观察组和对照组各49例.两组均常规采用非药物治疗,并按需给予化痰、解痉平喘等药物治疗.观察组加服益肺胶囊,4粒/次,3次/d,连续服用12周,在痰多、咳嗽较重时以痰咳净散含服,0.2 g/次,3~6次/d.观察肺功能和BODE指数,采用圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评价生活质量.结果:观察组第1秒用力呼气容积(FEV1)和FEV1/用力肺活量(FVC)均较治疗前上升明显(P<0.01),且均高于对照组(P<0.05);观察组呼吸症状、活动能力及疾病影响3个维度评分和SGRQ总评分均低于对照组(P<0.05);观察组FEV1,呼吸困难量表(mMRC)及6 min步行距离(6MWD)3个维度评分和BODE指数均低于对照组(P<0.05).结论:益肺胶囊联合痰咳净散能改善COPD稳定期患者肺功能,改善临床症状及BODE指数,提高患者生活质量.
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中西医结合治疗非静脉曲张性上消化道出血
目的:探讨中西医结合治疗非静脉曲张上消化道出血患者止血的临床疗效.方法:选择2010年1月到2011年12月期间我院住院的136例非静脉曲张上消化道出血患者,将患者按随机抽样法随机分为两组,67例患者采用常规治疗基础上加用洛赛克针剂治疗作为对照组.69例患者作为研究组,在对照组治疗的基础上加用复方中药治疗,比较两组的止血时间、显效时间、治疗效果、输血量以及不良反应发生率,持续治疗1周.结果:对照组总有效率为77.6%,研究组总有效率为94.2%,与对照组比,差异显著,有统计学意义(P<0.05);与对照组止血时间(14.85 ±2.56)h、显效时间(9.49 ±2.64)h、输血量(2.86±1.53)U比较,研究组患者各指标明显改善,有统计学意义(P<0.05);对照组患者不良反应发生率为7.5%,观察组不良反应发生率为5.8%,两组互相比较,差异不显著,没有统计学意义.结论:中西医结合治疗非静脉曲张上消化道出血效果好于单纯西医治疗,疗效显著,不良反应发生率低,值得临床推广.
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云南白药促进宫颈上皮内瘤变宫颈冷刀锥切术后的康复
目的:探讨云南白药促进宫颈上皮内瘤变宫颈冷刀锥切术后康复的疗效.方法:96例宫颈上皮内瘤样病变(CINⅢ级)宫颈冷刀锥切术(CKC)术后,随机分为观察组和对照组各48例.对照组CKC术后创面电灼后纱条填塞并常规抗感染治疗4d;观察组创面电灼后用云南白药粉覆盖创面后纱条填塞,常规抗感染治疗4d,云南白药胶囊口服,2粒/次,tid,疗程5d.观察术后1,2,5,8周阴道排液时间及排液量,阴道出血时间及出血量,宫颈痂膜脱落情况及其宫颈创面伤口愈合情况.结果:观察组术后阴道流血时间及平均阴道流血量均少于对照组(P<0.0l);观察组术后阴道排液时间及平均阴道排液量均少于对照组(P<0.01);观察组术后5周及8周分别有23例和45例创面愈合,均优于同期对照组的12例和34例(P<0.05);术后5周观察组阴道清洁度明显优于对照组(P<0.01);两组术后疗效差异不明显.结论:CINⅢ级患者在CKC术后采用电凝止血并以云南白药粉覆盖创面,并配合云南白药胶囊内服,减轻了术后并发症,促进了疾病的康复.
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脑脉泰胶囊加复方脑蛋白水解物片治疗老年恢复期脑梗死
目的:探讨脑脉泰胶囊加复方脑蛋白水解物片治疗老年恢复期脑梗死的临床疗效.方法:72例老年恢复期脑梗死患者随机分为观察组和对照组各36例.两组均口服阿司匹林肠溶片抗血小板聚集,予以控制血糖、血压,调节血脂等基础治疗.对照组加用复方脑蛋白水解物片,口服,4片/次,3次/d;观察组在对照组基础上加服脑脉泰胶囊,口服,2粒/次,3次/d.两组疗程均为8周.采用简易智能状态检查修正表(MMSE)和日常生活能力量表(ADL)分别对两组的智能状态、日常生活能力进行评价.结果:治疗后观察组MMSE评分高于对照组(P<0.01),ADL评分低于对照组(P<0.05);观察组恢复期中风病疗效总有效率为83.33%优于对照组的61.11% (P<0.05);观察组中医证候疗效总有效率为91.67%优于对照组的66.67% (P <0.05).结论:脑脉泰胶囊能明显改善脑梗死恢复期患者的认知功能和日常生活能力,对脑梗死恢复期患者神经功能有明显改善作用,并改善了临床症状,提高了疾病疗效.
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从脾辨治慢性荨麻疹临床研究
目的:观察从脾辨治慢性荨麻疹(CU)临床疗效.方法:采用前瞻性自身对照法进行研究,对符合诊断要求的72例患者从脾辨证分型,并给予相应治疗方药.其中脾虚湿蕴证CU治以益气健脾、除湿止痒;脾肺气虚证CU治以补益脾肺、疏风止痒;心脾气血两虚证CU治以益气健脾、补血养心、祛风止痒.分别以参苓白术散、玉屏风散、归脾汤为主加减组方而治之.观察各证型治疗前后临床表现、停药后复发情况以及副作用.结果:经治疗后,各型均获满意疗效,其中脾虚湿盛证总有效率为92.31%,脾肺气虚证总有效率91.67%,心脾气血两虚证总有效率为90.91%,三型比较,疗效无统计学差异.2个月的跟踪随访,结果复发共5例,其中脾虚湿蕴证2例,脾肺气虚证1例,心脾气血两虚证2例,三型无显著差异.从血、尿常规、肝、肾功等方面观察均未发现异常或不良反应.结论:从脾辨证分型论治慢性荨麻疹,疗效显著,且复发率低,毒副作用小,安全性高,值得临床进一步探究、推广.
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中西医结合治疗中晚期结肠癌61例
目的:观察中药扶正消积汤联合化疗药物治疗中晚期结肠癌的临床疗效.方法:将病理确诊的中晚期结肠癌患者91例随机分为两组,对照组30例,采用FOLFOX方案化疗治疗组61例,化疗方案同对照组,同时配合中药扶正消积汤,早晚各服150 mL.两组均采用相同止吐等对症处理方案.结果:近期疗效:治疗组全部缓解(CR)9例(14.8%),部分缓解(PR)22例(36.1%),有效率50.8%;对照组CR 4例(13.3%),PR 10例(33.3%),有效率46.7%.两组比较统计学无显著性差异.对治疗后外周血象、体力(KPS)、免疫功能变化观察比较,治疗组能减轻化疗对外周血象、免疫功能的影响,提高KPS评分,差异有显著性意义(P <0.05,P<0.01).结论:扶正消积汤配合化疗可以减轻化疗副作用、改善生活质量、提高治疗效果.
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肝苏颗粒对慢性乙型肝炎患者IL-21的影响
目的:探讨肝苏颗粒对慢性乙型肝炎(CHB)患者白介素21(IL-21)的影响.方法:86例CHB患者随机分为观察组和对照组各43例.对照组采用派罗欣,180 μg/次,1次/周,sc.观察组在此基础上加用肝苏颗粒,9 g/次,3次/d,口服.疗程24周.检测血清IL-21水平、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)定量及肝功能.结果:治疗后两组HBV-DNA水平均较治疗前明显降低,观察组低于对照组(P<0.05);两组IL-21均较治疗前明显升高,观察组上升水平高于对照组(P<0.01);观察组治疗后门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),谷酰转肽酶(GGT)及总胆红素(TBil)低于对照组(P <0.05,P<0.01),白蛋白(ALb)高于对照组(P<0.05).结论:肝苏颗粒能升高CHB患者IL-21水平,具有抗乙肝病毒和保护肝功能的作用.
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基于用药合理与安全分析中药注射剂治疗脑卒中的临床研究
目的:评价中药注射剂治疗缺血性脑卒中急性期临床研究的用药合理性与安全性.方法:在中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊文献数据库(CNKI)、维普中文生物医学期刊数据库(CMD)搜索2012年1月至2012年11月中文生物医学期刊发表的关于中药注射剂治疗缺血性脑卒中急性期的临床研究,按照纳入和排除标准筛选文献,从用药品种、用药方式、辨证用药、合并用药和安全性5个方面进行资料提取和数据分析.结果:共纳入83篇文献.共用18种中药注射剂;用法均为每日1次静脉注射,但每1种药物的日剂量、首剂病程、用药疗程各有不同;没有1个临床试验辨证使用中药注射剂;合并治疗包括抗血小板聚集药物、抗凝药物、降纤药、神经保护剂、脱水剂5类专科药物、溶栓、康复、高压氧3种治疗和中药注射剂、中药汤剂;55个试验进行了安全性评价,其中40个试验没有发现不良反应.结论:中药注射剂进行急性缺血性脑卒中的临床研究存在不合理用药的现象.强调中医辨证和严格把握其适应证,并注意药物安全性的监测与不良反应分析.
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艾迪注射液对肺癌放疗患者细胞因子表达的影响
目的:探讨艾迪注射液对肺癌放疗患者血清细胞因子的影响.方法:将40例肺癌患者,随机分为治疗组(20例)和对照组(20例),两组均予三维适行放疗(3DCRT),治疗组在此基础上加用艾迪注射液.比较放疗前后两组患者血清中白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因-β(TGF-β)水平的变化及放射性肺炎(RP)发生率的差异.结果:治疗组在放疗结束后细胞因子IL-6,TNF-α和TGF-β的水平明显低于对照组,二者比较差异有显著性(P<0.05);两组RP的发生率相近.结论:艾迪注射液能降低肺癌放疗患者血清细胞因子IL-6,TNF-α和TGF-β的水平,延缓放射性肺炎的进展,有效预防放射性肺炎的发生.
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补肾祛寒治尫汤加减联合外洗治疗类风湿性关节炎
目的:观察补肾祛寒治尫汤内服、外洗对类风湿性关节炎(RA)患者的有效性和安全性.方法:将100名患者分为试验组和对照组各50例,试验组采用补肾祛寒治尫汤加减口服+外洗.对照组采用塞来昔布胶囊,0.2 g·d-1,口服;甲氨喋呤片(MTX) 10 mg,1次/周,口服;来氟米特片(LEF)20 mg·d-1,口服;白芍总苷胶囊0.6g,2次/d,口服;并加用中药汤剂口服.两组疗程均为24周,观察治疗前后两组临床症状的改善情况,检测血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)的变化以及不良反应.结果:治疗24周后两组ACR20的改善率比较无统计学差异;两组治疗后中医证候、晨僵时间、休息痛、关节肿痛指数、关节压痛指数、双手平均握力、20米步行时间、健康评价问卷(HAQ),ESR,CRP,RF等均较治疗前显著改善,但组间无统计学差异;两组共同的不良反应主要为消化系统反应,对照组患者容易出现血液系统的损害.结论:与中西医结合疗法比较,补肾祛寒治尫汤加减联合外洗在改善临床症状、体征和控制炎症方面与之疗效相当,且不良反应较轻,值得推广应用.
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青蒿有效部位的提取工艺优化及驱蚊效果评价
目的:优选青蒿有效部位的提取工艺并评价其驱蚊效果.方法:采用单因素试验筛选青蒿驱蚊有效部位的提取方法;以挥发油得率为指标,通过正交试验考察时间、温度及压力对提取工艺的影响,确定佳提取工艺.以有效保护率为指标,评价青蒿提取物的驱蚊效果.结果:采用超临界CO2萃取工艺,其佳萃取工艺为温度60℃,压力30 MPa,时间2h,挥发油得率约0.35%.制备的青蒿驱蚊提取物(质量浓度>0.05 g·mL-1)在2h内有效保护率达99%.结论:优选的提取工艺稳定合理,具有较好的驱蚊作用.
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土木香根中土木香内酯和异土木香内酯的微波辅助提取工艺优化
目的:优选微波法提取土木香根中土木香内酯和异土木香内酯的工艺条件.方法:以土木香内酯和异土木香内酯含量为指标,通过单因素试验和正交试验考察乙醇体积分数、料液比、微波辐射时间和提取温度等因素对提取工艺的影响,采用HPLC测定指标成分含量.结果:土木香内酯和异土木香内酯的佳微波提取工艺为乙醇体积分数90%,料液比1∶15,微波时间180s,提取温度45℃.结论:优选的微波提取工艺具有稳定可行、节约时间、能耗低等优点.
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延胡索乙素柔性脂质体的制备与透皮吸收
目的:制备延胡索乙素柔性脂质体,研究其透皮吸收效果.方法:采用薄膜分散法制备延胡索乙素柔性脂质体,改良的Franz扩散池法研究其透皮吸收.结果:制备的延胡索乙素柔性脂质体包封率82.7%,粒径(112.3±59.2)nm,基本呈正态分布.该制剂12 h内累积渗透量2 121 μg,明显高于对照组酊剂的1 153μg;在皮肤内滞留率53.9%,明显高于酊剂的11.2%.结论:制得的延胡索乙素柔性脂质体透皮效果较酊剂好.
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穿心莲内酯自微乳化制剂的处方优化及质量评价
目的:优选穿心莲内酯自微乳化制剂的处方工艺,并对其质量进行评价.方法:通过溶解度试验、处方配伍对比试验及绘制三元相图优选处方辅料种类和用量范围,以形成乳液的形态、粒径、自乳化时间、制剂稳定性及zeta电位为指标,采用星点设计-效应面优化法优化自微乳化处方,并评价其质量.结果:穿心莲内酯自微乳化佳处方为m聚山梨酯-80∶m油酸乙酯∶m甘油=50∶26∶26,乳滴粒径39.5 nm,Zeta电位-15.18 mV,自乳化时间40.53 s.结论:所制备的穿心莲内酯自微乳化制剂澄清透明,物理稳定性良好.
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HPLC测定布洛芬口服溶液中苯甲酸钠、安赛蜜含量
目的:建立HPLC测定布洛芬口服溶液中苯甲酸钠和安赛蜜含量的方法.方法:采用HPLC测定,色谱条件为J'sphere ODS-H80色谱柱(4.6 mm×250 mm,4.0 μm),流动相0.02 mol·L-1乙酸铵-甲醇(85∶ 15),流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长230 nm,进样量10 μL.结果:苯甲酸钠和安赛蜜可有效分离,安赛蜜、苯甲酸钠线性范围依次为15.75 ~110.25,7.8~47.8 μg;平均回收率依次为100.51%(RSD 0.79%),100.42%(RSD 1.56%).结论:该方法灵敏、简便、重复性好,可为布洛芬口服溶液中苯甲酸钠和安赛蜜的含量测定提供参考.
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响应曲面分析法优化油茶籽中总黄酮提取工艺
目的:优化油茶籽中总黄酮的乙醇提取工艺.方法:以提取温度、提取时间、乙醇体积分数、料液比为自变量,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,以总黄酮提取率为响应值作响应面和等高线,采用响应面法优化油茶籽中总黄酮的提取工艺.结果:佳提取工艺条件为温度66℃,70%乙醇提取1.3h,料液比1∶22;油茶籽总黄酮提取率1.87%,与理论值(1.89%)接近.结论:该优选工艺稳定可靠,为油茶资源的合理利用提供参考.
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麸炒白术的炮制工艺优化
目的:优选麸炒白术的炮制工艺.方法:以白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ和苍术酮含量为指标,HPLC测定指标成分含量,采用L9(34)正交试验考察炒制温度、炒制时间、投麸量对麸炒白术炮制工艺的影响,确定佳炮制工艺.结果:麸炒佳工艺为炒制温度170℃,炒制时间2 min,投麸量10%.结论:优选的炮制工艺切实可行.
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丹七方不同剂型的体外溶出度比较
目的:以丹七方不同剂型为模型,探讨中药多组分体外溶出度研究的新思路与方法.方法:采用小杯法,以水为溶出介质,浆速50 r·min-1,利用HPLC测定滴丸和普通片剂中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1的体外摩尔溶出率,利用各成分在三七总皂苷的比例作为自定义权重系数,计算三七总皂苷的体外摩尔溶出率.结果:在30 min时,滴丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1的体外摩尔溶出率分别为96.87%,97.15%,96.10%,接近释放完全;片剂分别只有16.10%,15.48%,16.03%;片剂在120 min的体外摩尔溶出率才达到90%.Weibull方程拟合表明滴丸中3种成分和三七总皂苷的Td和T50均<片剂.结论:通过三七总皂苷各成分摩尔浓度自定义权重系数的整合体外溶出结果符合中药同类成分的体外分析,得到的参数基本可以表征中药同类物质的整体释放规律.
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聚酰胺树脂分离纯化忍冬藤叶中绿原酸的工艺优选
目的:优选忍冬藤叶中绿原酸的分离纯化工艺条件.方法:以绿原酸含量为指标,通过单因素试验考察聚酰胺树脂的静态和动态吸附、解吸性能,并考察上样量、水洗用量、洗脱剂种类和用量;以绿原酸纯度和保留率为指标,采用L9(34)正交试验考察洗脱流速、洗脱剂浓度和用量对忍冬藤叶中绿原酸的分离纯化工艺的影响.结果:优选的分离纯化工艺为绿原酸上样量10 mg·g-1树脂,用2 BV水洗除杂,加3 BV 65%乙醇洗脱,洗脱流速0.4 BV·h-1,收集洗脱液.结论:优选的工艺合理、稳定可行,可为工业化分离纯化绿原酸提供参考.
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参桃软肝胶囊质量标准
目的:建立参桃软肝胶囊的质量控制标准.方法:采用TLC对该制剂中生晒参、当归、丹参、大黄进行定性鉴别,采用HPLC测定人参皂苷Rb1的含量,色谱条件为以乙腈-水为流动相进行线性梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长203nm.结果:TCL专属性强,均能检出目标物质,且斑点清晰,阴性对照无干扰.人参皂苷Rb1线性范围0.406 ~4.059 7μg(r=0.999 7),平均加样回收率100.96%,RSD 1.16%.结论:方法简便准确、重复性好,可有效控制参桃软肝胶囊的质量.
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HPLC同时测定全蝎不同工艺提取物中5种核苷类化合物含量
目的:比较水煎煮、醇提取以及湿法超微粉碎3种提取工艺对全蝎中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷类成分含量的影响.方法:全蝎经不同工艺提取,采用HPLC外标法测定提取物中5种核苷化合物含量.Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.07%冰乙酸-甲醇梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长254 nm,柱温35℃.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物均在一定质量浓度范围内线性关系良好,r均>0.999 5,样品中5种核苷化合物的加样回收率98.9% ~ 103.9%,RSD均<3%.结论:该HPLC简便快速、灵敏度高、重复性好,可应用于同时测定尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物含量并比较不同全蝎提取物之间的差异.
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气血双补口服液的提取工艺优选
目的:优选气血双补口服液的提取工艺.方法:采用醇水双提法,以黄芪甲苷提取量为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、提取时间、提取次数及乙醇用量对醇提取工艺的影响;以芍药苷和淫羊藿苷提取率为指标,选取提取时间、提取次数及加水量为考察因素,通过正交试验优选水提取工艺条件.结果:气血双补口服液的佳提取工艺条件为取黄芪和当归加8倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5h;取黄芪和当归药材残渣及剩余药味,加9倍量水回流提取3次,每次2h.结论:优选的提取工艺科学合理、稳定可行.
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苦柏妇炎栓水提醇沉工艺优选
目的:优选苦柏妇炎栓的提取、醇沉工艺.方法:采用水提醇沉法,以苦参碱、盐酸小檗碱、蛇床子素质量为指标,通过正交试验考察料液比、提取次数及提取时间对苦柏妇炎栓水提取工艺的影响;以苦参碱、盐酸小檗碱、蛇床子素质量的综合评分为指标,通过正交试验考察浓缩液相对密度、醇沉浓度及放置时间对醇沉工艺的影响.结果:优选的提取工艺为加12倍量水提取3次,每次2h;优选的醇沉工艺为提取液浓缩至相对密度1.18(25℃),醇沉浓度60%,放置12 h.结论:优选的工艺稳定可行,为苦柏妇炎栓的临床应用提供实验依据.
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东北铁线莲中抗肿瘤活性成分的提取工艺优选
目的:建立东北铁线莲中抗肿瘤活性成分W2[3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷]的提取工艺.方法:以W2提取量为指标,采用HPLC测定W2含量,通过正交试验和单因素试验考察提取溶媒、提取时间、料液比、提取次数对提取工艺的影响,确定W2佳提取工艺.结果:佳提取工艺为30%乙醇提取2.5h,料液比1∶12,提取2次.结论:优选的提取工艺合理、稳定、可行,为东北铁线莲后续研究提供实验依据.
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多指标加权评分法优选润肤止痒脂质体凝胶提取工艺
目的:优选润肤止痒脂质体凝胶的提取工艺条件.方法:以苦参碱、羟基红花黄色素A含量及浸膏得率为综合评价指标,在单因素试验基础上,采用正交试验法考察浸泡时间、提取时间、加水倍数对提取工艺的影响.结果:佳提取工艺为加12,10倍量水浸泡0.5h,分别提取2.0,1.5h.结论:优选的工艺稳定可行,为润肤止痒脂质体凝胶的进一步开发提供实验依据.
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具有雌激素样作用的补肾阳药对脂代谢的影响
中医认为绝经后卵巢功能失调、雌激素减少的根本原因是肾虚.肾虚分为肾阴虚证、肾阳虚证和肾阴阳俱虚证.针对雌激素减少出现的脂代谢紊乱及相关疾病属肾阳虚证者,常应用补肾阳药物进行治疗,一方面可以温补肾阳,改善卵巢功能,发挥雌激素样作用,另一方面可以温肾助阳、增强气化作用,达到化浊降脂的功效.查阅整理文献发现,许多具有雌激素样作用的补肾阳药同时也具有调脂作用,如淫羊藿、鹿茸、杜仲、补骨脂、菟丝子、蛇床子、肉苁蓉、沙苑子;有些补肾阳药具有调脂作用,如冬虫夏草、肉桂、金樱子;而有些补肾阳药则具有雌激素样作用,如紫河车、续断、蛤蚧.总结补肾阳中药的雌激素样作用和调脂作用,可以为深入探讨补肾阳中药的雌激素样作用和调脂作用的相关性提供依据.
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中医药在抗胃溃疡研究应用中的现状与进展
通过调研近年来国内外胃溃疡的相关研究资料,整理胃溃疡的中医辨证分型论治、胃溃疡动物模型、中医药治疗胃溃疡的实验及临床研究.中医药对胃溃疡在辨证论治下具有高治愈率、副作用小、价格较低等优势和特点.但在研究中仍存在一些不足,如仍以实验动物模型为主,缺少符合中医药特点的评价模型,且临床研究深度不够,大多只是简单推测某几个指标,缺少对指标间关系的摸索等.在全面介绍了近年来抗胃溃疡中医药的研究进展的基础之上,对中医药抗胃溃疡研究的发展前景也作了分析,以期为广大医药工作者提供有益参考.
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白术抗肿瘤作用的研究及应用进展
通过对国内外相关文献的查询,对白术单药及其配方在抗肿瘤、改善肿瘤患者胃肠功能中作用机制的研究及临床应用进行介绍.中药白术不仅具有燥湿利水,止汗安胎,健脾补气的功效,还可对多种肿瘤产生抗肿瘤作用,在肿瘤患者胃肠功能的调节方面也具有一定功效.白术作为传统中药在肿瘤中的应用引起了研究者的广泛兴趣,大量研究表明,白术在抗肿瘤治疗中取得了良好效果,明显改善了肿瘤患者的生活质量.白术为天然的植物药物,药源丰富,疗效肯定,具有重要的临床应用价值.
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基于数据库的平性药组方配伍规律研究
目的:通过分析1 307首古今方剂的药性组方规律,探讨了平性药组方配伍用药规律.方法:从国家规划教材《方剂学》及《中国药典》(以下简称《药典》)中筛选1 307首方剂,并以《药典》等为药性的判定依据,将获得的数据录入自创的“中药方剂药性数据分析系统”,分析探讨平性药组方配伍规律,并以平性药分别作为君、臣、佐、使的应用频次上限10%确定为该组方角色常用药物,频次上限25%定为该组方角色主干药物.结果:不同药性在1 307首方剂中作为君臣佐使的频次统计:寒性、平性、热性药物,作君药者分别占42%,15%,43%,作臣药者分别占40%,17%,43%,作佐药者分别占37%,20%,43%;作使药者分别占17%,66%,17%;筛选出平性药作为君、臣、佐、使的常用药物及主干药物.结论:平性药在组方配伍方面有两大特点,一是少为君臣,重在和合;二是多为佐使,调和辅助;本研究方法所筛选出的君臣佐使常用平性药和主干平性药,将为临床组方用药及研究提供有益的参考.
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治疗老年痴呆病中药应用频次及临床分析
目的:更好的发挥中医药在治疗老年痴呆病中的作用,并为医务工作者在本病临床中提供参考.方法:采用信息定量统计法,以老年痴呆病为检索词检索,以现代应用频次较高的500种常用中药药名为检索词2次检索,按功效对药物进行分类统计排序,根据统计结果予以研究.结果:以检索中频次多少,在治疗老年痴呆病中中药现代应用频次高的依次为丹参、当归、人参、远志、黄芪、石菖蒲、何首乌、郁金等50味中药.按中药学功效分类,应用频次前六类的分别是补虚药、活血化瘀药、清热药、平肝熄风药、化痰止咳平喘药、安神药.结论:较客观地反映了目前治疗老年痴呆病的中药应用情况,为今后应用中药治疗该病提供参考.
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愈肠宁治疗溃疡性结肠炎的组方设计研究分析
目的:溃疡性结肠炎(UC)是一个多病灶点的复杂疾病.愈肠宁方中含黄芪、苦参.黄芪益气健脾,苦参清热燥湿,两药协同使标本兼治,提高药效.方法:通过对治疗UC的文献调研分析,选用恰当的评价方法,对文献进行筛选,并对用药规律进行统计.结果:得到符合标准得文献234篇,统计分析可知,在UC临床治疗中黄芪的用药频率是33.0%,口服占用药途径的72.7%;苦参用药频率为19.7%,灌肠占用药途径的73.9%.从统计的结果得出临床治疗UC的药物和给药方式与愈肠宁方设计思路一致.结论:该设计思路与近20年的UC临床用药实践一致,因此推测该设计研制的制剂安全、有效.
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大黄酸肠溶缓释微丸在家兔体内的药代动力学研究
目的:考察自制大黄酸肠溶缓释微丸在家兔体内的药动学过程,将其与大黄酸海藻酸钠溶液在兔体内大黄酸的药动学行为作比较,以明确该缓释制剂在体内的药动学特征,并对其相对生物利用度进行初步研究.方法:采用双周期交叉设计,按大黄酸量10只家兔单剂量口服35 mg·kg-1.自制大黄酸肠溶缓释微丸和大黄酸的海藻酸钠溶液,分别于服药前、服药后0.5,1,2,3,4,6,8,9,10,12,14,24,28,32,36 h采血,以高效液相色谱法测定大黄酸不同时间点的血浆浓度,并进行统计学处理.结果:两种制剂在家兔体内的药-时曲线中自制的大黄酸肠溶缓释微丸:tmax(9.73 ±0.68)h,Cmax (3.00±0.81)g·L-1,AUC0~∞(59.21±4.35) mg·L·h-1,MRT(21.12±1.12)h;参比制剂:tmax(4.17 ±0.12)h,C max(2.71 ±0.74)g·L-1,AUC0~∞(39.72-±3.11) mg·L·h-1,MRT(9.33 ±2.08)与参比制剂相比,自制大黄酸肠溶缓释微丸的达峰时间更晚,峰浓度更大,两制剂间有显著性差异(P<0.05).结论:自制大黄酸肠溶缓释微丸生物利用度优于参比制剂.
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吴茱萸水提组分对大鼠长期毒性研究
目的:观察连续35 d给大鼠吴茱萸水提组分样品导致大鼠长期毒性损伤程度及恢复情况.方法:分别给大鼠灌胃高、中、低剂量的吴茱萸水提组分样品连续35 d,按生药量计算,分别为8.0,4.0,2.0 g·kg-1,除观察一般状况外,检测血常规、血清肝功能、肾功能、脂质代谢、糖代谢相关指标,处死大鼠,称取心、肝、脾、肺、肾脏质量,计算脏、体比值,进行肝脏病理组织学检查.剩余大鼠停止给药,恢复20 d,观察大鼠恢复情况,并进行上述相同指标的检测.结果:不同剂量的吴茱萸水提组分样品在连续给药35 d后可导致大鼠体重下降,饮食、饮水不佳,导致血中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)水平明显增高,白蛋白(ALB)明显降低,白蛋白/球蛋白(A/G)降低,肝脏质量和肝体比值增大,病理学检查可见不同程度的肝组织损伤;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,与空白组比较有明显差异(P<0.01).对总胆红素(TBI)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血糖(Glu)、胆固醇(CHO)等指标和血常规影响不明显;肝毒性损伤程度与用药剂量呈一定的剂量依赖相关性.恢复期大鼠上述各指标只见高剂量组ALT指标与空白组比较有显著性差异(P<0.05),其余指标未见显著性差异.结论:长时间给予一定剂量的吴茱萸水提组分可造成对大鼠明显的蓄积毒性,其毒性损伤部位以肝损伤为主,经过25 d恢复期观察,其脏器损伤基本可恢复.
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基于β-AS基因的甘草道地性形成机制研究
目的:对甘草道地性形成机制进行探索.方法:在GenBank中检索β-香树酯醇合成酶(β-AS)基因,进行序列比对并找出序列保守区,用primer premier 5.0软件设计引物,对3个不同产地甘草材料的β-AS基因进行扩增、测序,用MegAlign软件进行序列分析并构建系统树.在表达差异实验中,对来自3个产地的9份甘草材料进行总RNA提取,逆转录得到cDNA,以甘草18S基因为内参,PCR扩增后进行相对表达量分析.结果:在序列多态性实验中,9个样品的β-AS序列经比对分析共发现108处变异位点,内含子变异位点数高于外显子变异位点数两倍.在表达差异实验中内蒙组、甘肃组和宁夏组的甘草β-AS基因平均相对表达量有显著性差异.结论:不同产地甘草β-AS基因多态性的差异以及表达量的差异,可能是导致甘草道地性形成的原因之一.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |