中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位: 国家中医药管理局
- 主办单位: 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子: 1.62
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1005-9903
- 国内刊号: 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理形态及TNF-α,IL-6表达的影响
目的:观察麝香乌龙丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织病理形态及滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响.方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(A)10只,造模组30只.造模组大鼠于右后足跖皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)0.1 mL造成AA模型.将造模成功的造模组随机分为模型组(B)、麝香乌龙丸低、高剂量组(C,D,n=10),ig给予1.0,2.0 g·kg-1的麝香乌龙丸,每日1次;A,B组每日ig生理盐水2 mL/只.30 d后,取跖趾关节,HE染色观察滑膜组织病理形态,免疫组化法检测滑膜组织中TNF-α,IL-6的表达.结果:麝香乌龙丸低、高剂量组滑膜组织破坏程度较模型组明显减轻;TNF-α,IL-6在麝香乌龙丸低、高剂量组中表达均较模型组显著降低(P<0.01或P<0.05),麝香乌龙丸低、高剂量组比较无统计学意义.结论:麝香乌龙丸能改善AA大鼠滑膜组织病理损害,下调TNF-α,IL-6的表达.
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痛泻要方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠水通道蛋白8表达影响的机制研究
目的:探讨痛泻要方治疗腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠的作用机制.方法:健康雄性Wistar大鼠40只随机分为正常组、模型组、中药组、药抗组,采用应激与束缚的方法18d复制肠易激综合征模型,造模成功后中药组和药抗组大鼠给予中药23.6 g·kg-1,ig 1次/d,连续7d,药抗组第4天开始给予血管活性肠肽(VIP)受体拮抗剂35 μg· kg-1,iv 1次/d,连续4d.检测大鼠粪便含水量,采用RT-PCR法和SABC免疫组化法检测结肠组织水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)的表达.结果:①大鼠粪便含水量:与正常组比较,模型组粪便含水量升高(P<0.01);与模型组比较,中药组粪便含水量降低(P<0.01);药抗组粪便含水量与模型组差异无统计学意义.②结肠组织AQP8:与正常组比较,模型组AQP8表达下调(P<0.01);与模型组比较,中药组AQP8表达上调(P<0.01);药抗组AQP8表达与模型组差异没有统计学意义.结论:痛泻要方治疗D-IBS的药理学机制可能通过VIP途径调节AQP8的表达实现.
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养心康片对慢性心功能不全模型兔心功能,TNF-α,IL-6的影响
目的:观察养心康片对慢性心功能不全模型兔心功能、肿瘤坏死因子-α( TN F-α)和白细胞介素-6( IL-6)的影响.方法:应用结扎兔冠状动脉的方法建立兔慢性心力衰竭动物模型,随机分为模型组、卡托普利组、养心康片低、中、高剂量组,并设立空白对照组,每组5只.造模后第5天开始给药.卡托普利组给予卡托普利1.2 mg·kg-1;养心康片低、中、高剂量组分别给予养心康片(0.17,0.51,1.53 g·kg-1),ig每天1次.空白对照组和模型组给予等体积的蒸馏水,共4周.观察养心康片对心衰模型兔心功能,TNF-α,IL-6的影响.结果:空白对照组的左室舒张末容积(LVEDV)低(2.20 ±1.14)mL,与模型组比较,其间差别有统计学意义(P<0.01).模型组的LVEDV高(4.12+1.19)mL,与卡托普利组、养心康片中、高剂量组比较,其间差别有统计学意义(P<0.05).空白对照组LVEF值高(83.60 +2.79)%,与模型组比较,其差别有统计学意义(P<0.01).模型组的左室射血分数(LVEF)值低(64.80±12.07)%,与养心康中、高剂量组比较,其间的差别有统计学意义(P<0.01).空白对照组的TN F-α,IL-6的水平低,与模型组比较差别有统计学意义(P<0.01).模型组的TNF-α,IL-6的水平高,与养心康片各剂量组比较其差别有统计学意义(p<0.05).结论:养心康片可以改善心衰模型兔心功能,降低心衰模型兔血清的TN F-α,IL-6水平.
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补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后神经干细胞迁移的影响
目的:观察补阳还五汤对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后神经干细胞(neural stem cells,NSCs)迁移的影响.方法:采用MCAO模型,缺血90 min后再灌.将造模成功的大鼠分层并随机分组分为模型和补阳还五汤组,24 h后ig补阳还五汤12g.kg-1,1次/d,连续3周.另16只不阻塞动脉大鼠设为手术组.分别在给药后1,2,3周进行行为学评分;并在第4天和18天ip 5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)50 mg· kg -1,各连续3d.2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死面积;免疫组化检测BrdU阳性细胞;酶联免疫法(ELISA)检测基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组1周和3周神经行为学评分显著升高(P <0.05或P< 0.01),脑梗死面积、缺血侧室管膜下区(subventricular zone,SVZ)及纹状体区BrdU阳性细胞数均显著增加(P< 0.05或P< 0.01).与模型组相比,补阳还五汤能显著改善大鼠MCAO神经功能缺失症状,药后1,2,3周神经功能评分为(1.33±0.60),(o.89±0.58),(0.50±0.31)分,明显低于模型组的(1.72±0.46),(1.56±0.51),(1.89±0.50)分(P<0.01);降低脑梗死面积,药后1,3周分别为(16.1±5.2)%,(10.3±0.40)%,明显低于模型组的(35.2±6.3)%,(29.8±6.9)%,(P<0.01),提高SVZ和纹状体区BrdU阳性细胞数,药后1周分别为(71.17±5.19),(83.8±3.83)个,明显高于模型组的(52.17±6.52),(60.20±6.72)个,药后3周分别为(43.33±6.06),(54.60±5.77)个,明显高于模型组的(35.83±4.88),(22.00±3.87)个(P<0.01);给药3周时显著提高SDF-1表达,3周时为(36.3±2.71) pg·mg-1,明显高于模型组的(28.65±3.47)pg·mg-1(P< 0.05).结论:补阳还五汤能促进MCAO大鼠缺血侧NSCs迁移,其可能机制是通过上调SDF-1蛋白的表达水平实现的.
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舒胃汤对功能性消化不良大鼠P物质与胃窦Cajal间质细胞的影响
目的:观察舒胃汤对肝郁脾虚型功能性消化不良( functional dyspepsia,FD)大鼠胃排空、P物质(substance P,sP)和胃窦Cajal间质细胞的影响,探讨舒胃汤治疗FD的机制.方法:60只SPF级SD大鼠分为6组,分别为舒胃汤低剂量组(舒低组)、舒胃汤高剂量组(舒高组)、中成药组(木香顺气丸组)、莫沙必利组、空白对照组、模型对照组,每组10只;舒低组、舒高组分别给予舒胃汤7.67 g·kg-1,30.68 g·kg -1,木香顺气丸组予木香顺气丸1.65 g·kg-1、莫沙必利组予莫沙必利1.37 mg·kg-1,采用夹尾刺激方法制造功能性消化不良造模7d,造模后第3d各组给予相应药液ig,对照组和模型组每日予以蒸馏水( 10 mL·kg-1 )ig,均为每日1次,持续14 d.检测大鼠胃排空、用放射免疫法检测血浆SP水平、透射电镜下观察Cajal间质细胞的结构变化.结果:大鼠模型组胃排空(48.12±10.17)%与空白组(89.00±7.59)%比较延迟(P<0.05),血浆SP模型组(5.32±2.12)ng·L-1与空白组(19.56±5.01 )ng·L-1比较,显著降低(P<0.05).大鼠胃排空中成药组(58.35±8.71)%、莫沙必利组(78.17±10.74)%、舒低组(60.39±3.48)%、舒高组(76.80±6.96)%与模型组(48.12±10.17)%比较改善(均P<0.05);血浆SP含量中成药组(12.89±2.10)ng·L-1、莫沙必利组(17.86±3.56)ng·L-1、舒低组(8.03±2.51)ng·L-1、舒高组(13.79±2.58)ng·L-1与模型组(5.32±2.12)ng·L-1比较明显增加(均P <0.05),胃窦部Cajal间质细胞结构改善.结论:功能性消化不良大鼠胃肠运动抑制,舒胃汤能够提高SP水平,改善胃窦ICC细胞结构功能,促进胃排空,恢复胃肠道运动功能.
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小半夏加茯苓汤及其拆方对家兔离体胃肠运动的影响
目的:研究小半夏加茯苓汤(Xiaobanxia Fuling decoction,XBFD)及其拆方水提物对家兔离体胃肠运动的影响.方法:用生物信号分析系统记录小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对家兔正常离体胃、肠平滑肌和工具药乙酰胆碱、阿托品所致离体胃、肠平滑肌收缩的影响,采集胃、肠平滑肌收缩的曲线和数据,比较用药前后胃、肠平滑肌收缩的振幅、频率和张力变化.结果:小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对正常离体胃底和胃窦平滑肌自主活动具有不同程度的兴奋作用,对家兔正常离体十二指肠平滑肌的正常舒缩活动有抑制作用,加药前后比较显著差异(P<0.01);能拮抗氯化乙酰胆碱引起的胃肠平滑肌强直痉挛(P<0.01);对阿托品引起的十二指肠平滑肌舒缩活动减弱具有协同作用(P<0.05),而对阿托品作用后的胃底和胃窦平滑肌有兴奋作用(P<0.01),原方及拆方的作用强度表现为:小半夏加茯苓汤>小半夏汤>生姜>半夏.结论:小半夏加茯苓汤及其拆方提取物对家兔离体胃肠运动具有双向调节作用,复方药效优于拆方.其作用途径不仅与M胆碱受体有关,还可能与其他调节因素有关.
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郁心效的抗抑郁作用及其机制研究
目的:确认郁心效的抗抑郁作用,并初步探讨其抗抑郁作用的机制.方法:小鼠随机分5组:模型组、阳性药物对照组、郁心效低、中、高剂量( 320,640,1 280 mg· kg -1)组,均ig7 d,于末次给药后建立5-羟色氨酸(5-HTP)诱导小鼠甩头和育亨宾小鼠致死增强模型,观察郁心效对5-HTP( 10 mg·kg-1,iv)诱导小鼠甩头行为和对小鼠皮下注射(sc)育亨宾(35 mg·kg-1)致死增强的影响;大鼠随机分6组:正常组、模型组、盐酸舍曲林(10 mg·kg-1)组、郁心效低、中、高剂量(220,440,880mg·kg-1)组,建立慢性不可预知性温和应激模型(CUMS),造模同时ig给药8周,观察郁心效对大鼠糖水偏嗜度、旷场行为和海马中5-羟色胺(5-HT),多巴胺(DA),去甲肾上腺素(NE)含量的影响.结果:郁心效可显著增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数,对育亨宾诱导的小鼠致死量没有显著影响;可显著提高CUMS大鼠的糖水偏嗜度、旷场行为总评分和海马中5-HT,DA的含量.结论:郁心效具有明确的抗抑郁作用,其作用机制可能与5-HT系统有关.
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鼻渊舒口服液对兔慢性鼻-鼻窦炎模型鼻窦黏膜上皮NF-κB p65蛋白表达的影响
目的:观察兔慢性鼻-鼻窦炎( chronic rhinosinusitis,CRS)模型鼻窦黏膜上皮核因子-κB(NF-κB) p65蛋白表达的变化及鼻渊舒口服液对其的影响,探索鼻渊舒治疗CRS的可能机制.方法:取新西兰大白兔100只,适应性喂养1周后,随机分为正常组、模型组、假手术组、鼻渊舒组、西药治疗组,每组20只,建立CRS模型;鼻渊舒组、西药治疗组分别给予鼻渊舒口服液ig 4.05 g·kg -1,克拉霉素ig 25 mg· kg -1,共14 d,处死后取鼻窦黏膜组织HE染色光镜观察鼻窦黏膜病理变化,Western blotting法检测鼻窦黏膜上皮细胞胞质及细胞核NF-κB p65蛋白表达.结果:模型组鼻窦黏膜呈慢性炎症表现,黏膜炎细胞浸润,上皮细胞、腺体和杯状细胞明显增生;胞质及细胞核NF-κB p65蛋白表达较正常组显著增高(P<0.01).经鼻渊舒治疗后鼻窦黏膜上皮修复较好,炎细胞浸润、腺体和杯状细胞增生不明显;胞浆NF-κB p65蛋白表达虽显著低于模型组(P<0.01),但显著高于正常、假手术及西药组(P<0.01);胞核NF-κB p65蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),与正常、假手术及西药组比较无显著性差异.结论:NF-κB参与了CRS的发生,鼻渊舒口服液主要通过抑制NF-κB p65向细胞核易位而起治疗作用.
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赤芍、白芍凉血作用比较研究(Ⅱ)——抑制脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的谱效分析
目的:以LC-MS图谱上的峰面积和川赤芍、赤芍、白芍对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞活性的影响为基础进行谱效分析,以此确定川赤芍、赤芍、白芍抑制NR8383细胞凋亡的“药效成分组”,并比较差异.方法:采用偏小二乘回归法( PLSR),对川赤芍、赤芍、白芍LC-MS图谱数据和NR8383细胞凋亡药效数据之间的内在联系进行谱效分析.结果:LC-MS图谱上的X8,X10,X3,X7,X13这5个成分组成的“药效成分组”对川赤芍、赤芍、白芍抑制NR8383细胞凋亡药效的贡献较大.结论:“药效成分组”的研究能够较为全面的反映中药的功效,是评价中药质量的关键.
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交泰丸不同配比抗抑郁作用的实验研究
目的:研究不同配比交泰丸的抗抑郁作用.方法:雄性昆明小鼠按体重随机分为空白对照组、阳性药对照组(盐酸氟西汀7.5 mg·kg-1)及5种不同配比交泰丸高、低剂量组(黄连-肉桂=10∶1,1∶10,10∶0,0∶10,1∶1),共计12组.各组小鼠ig给药lh后采用小鼠悬尾实验(TST)、小鼠强迫游泳实验(FST)研究不同配比的交泰丸的抗抑郁作用.结果:在TST和FST中,与空白对照组比较,各给药组小鼠的不动时间均显著减少,其中以交泰丸中黄连与肉桂配比为10∶1和1∶10时对小鼠不动时间的影响为明显,即在TST中,交泰丸黄连与肉桂配比为10∶1高、低剂量组时小鼠的不动时间分别为(69.8±18.1)s和(79.2±14.6)s,交泰丸黄连与肉桂配比为1∶10高、低剂量组时小鼠的不动时间分别为(69.5±21.7)s和(64.1±26.0)s;在FST中,交泰丸黄连与肉桂配比为10∶1高、低剂量组时小鼠的不动时间分别为(83.6±29.0)s和(72.9±37.7)s,交泰丸黄连与肉桂配比为1∶10高、低剂量组时小鼠的不动时间分别为(92.2±37.8)s和(71.9±35.9)s.交泰丸中黄连与肉桂配比为10∶1和1∶10组与空白组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01),并且TST和FST的结果具有一致性(P<0.01).结论:不同配比的交泰丸均具有抗抑郁的作用,但它们在抗抑郁作用强度上存在差异.
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山绿茶中ilexgenin A抗大鼠移植性肝癌的作用
目的:用大鼠Walker-256移植性肝癌模型研究ilexgenin A抗肿瘤作用以及对肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的影响,以探讨ilexgenin A抗肝癌作用机制.方法:32只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组:ilexgenin A 高、低剂量(100,500 mg·kg-1 ·d-1)组,5-Fu(5 mg·kg-1,隔日1次)组,模型组.于造模成功后第8天ilexgenin A治疗组及5-Fu组ip给药,模型组分别ig生理盐水10 mL·kg-1给药,连续用药14 d后停药24 h,取血处死大鼠,取出瘤块称重,常规瘤体组织形态学观察,分离血清检测肝功能指标天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),用免疫组化法检测瘤块中VEGF和MVD的表达情况;另设正常组饲养大鼠8只,不进行造模及给药,供实验结束时作空白对照用.结果:ilexgenin A给药组瘤重明显低于模型组(P<0.01);ilexgenin A给药组及5-Fu血管条数目密集程度较模型组比较明显减少,ilexgenin A对血清AST,ALT活性升高有明显的拮抗作用,AST的含量与模型组比较差异显著(P<0.01);实验造模各组VEGF及MVD的表达水平均明显高于正常组(P<0.01);两者的表达均以模型组高.结论:ilexgenin A可显著抑制大鼠体内癌细胞生长,对移植性肝癌所造成的肝功能损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与下调VEGF和MVD的表达水平有关.
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地黄多糖对大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞诱导分化作用的研究
目的:探讨地黄多糖体外对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)分化为神经样细胞的诱导作用.方法:以大鼠BMSCs为研究对象,采用流式细胞仪检测BMSCs表面标志,MTT法检测细胞生长曲线,当第3代细胞爬片达到80%以上汇合时,分为对照组、化学方法诱导组(5 mmol·L -1,β-mercap toethanol)、脑源性神经生长因子(10 μg·L-1,BDNF)组和地黄多糖组(200 mg·L-1)进行诱导,6h后应用免疫细胞化学染色法检测各实验组神经元巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,RT-PCR检测nestin,NSE,βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和GFAP mRNA的表达情况.结果:经分离鉴定培养5代以内大鼠BMSCs增殖旺盛、具有较好的细胞活力;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,对照组不表达神经细胞标志物,各诱导组诱导后有特异性神经细胞标志物表达.其中地黄多糖组Nestin,NSE阳性细胞率分别为( 56.74±1.36)%,(73.37±1.27)%,高于化学诱导组(28.21±2.43)%,(2.31±2.72)%和神经生长因子组(31.3±1.61)%,(28.87±1.65)%,(P<0.05);GFAP阳性细胞率(20.17±1.27)%低于化学诱导组和神经生长因子组,差异具有统计学意义(P<0.05);化学诱导组Nestin,NSE和GFAP阳性细胞率与生长因子组比较,差异无统计学意义.结论:地黄多糖具有诱导BMSCs向神经样细胞分化的作用,主要向神经元样细胞方向诱导.
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三化汤对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9表达的影响
目的:观察三化汤对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9),MMP-9 mRNA表达的影响.方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、三化汤低、高剂量组(7.2,14.4 g·kg-1) ig、尼莫地平组(8.1 mg·kg-1)ig.大鼠常规饲养3d后ig给药,每日1次,连续给药7d后采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型.采用免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织MMP-9的表达,采用逆转录聚式酶链反应法(RT-PCR)检测脑组织MMP-9 mRNA的表达.结果:模型组脑组织MMP-9,MMP-9mRNA表达显著升高(P<0.01);三化汤高剂量组脑组织MMP-9,MMP-9 mRNA表达显著降低(P<0.01),尼莫地平组脑组织MMP-9,MMP-9 mRNA表达也明显降低(JP<0.05),三化汤低剂量组脑组织MMP-9,MMP-9 mRNA表达降低不明显;三化汤高剂量组降低脑组织MMP-9,MMP-9 mRNA表达较尼莫地平组明显.结论:三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用.
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川芎嗪衍生物liguzinediol对戊巴比妥钠致急性心力衰竭大鼠血流动力学的影响
目的:观察liguzinediol(2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪)对戊巴比妥钠致急性心力衰竭大鼠血流动力学的影响.方法:40只雄性SD大鼠右侧股静脉恒速注射戊巴比妥钠制备急性心衰模型,造模后随机分为5组:模型组(给予NS),阳性对照组(地高辛,22.5 μg· kg -1),liguzinediol(5,10,20 mg·kg-1)3个剂量组,每组8只,稳定后经恒速注射泵右侧股静脉单次给药,多道生理记录仪记录全过程中大鼠血流动力学指标的变化.结果:静脉给药后,liguzinediol 3个剂量组均使大鼠左心室收缩压(LVSP)、左心室内压力大上升速度(+dp/dtmax)、左心室内压力大下降速度(- dp/dtmax)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)在1min内开始显著增加,并且对心率影响不大,心肌收缩力增强.结论:liguzinediol对急性心衰大鼠心脏具有正性肌力作用.
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淫羊藿苷对大鼠颈总动脉内膜损伤后骨桥蛋白表达的影响
目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉内膜损伤后新生内膜内骨桥蛋白表达的影响.方法:取大鼠42只,随机分为正常对照组6只,模型组和淫羊藿苷高、低剂量组( 120,60 mg· kg -1)各12只.后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6d开始给予淫羊藿苷灌胃至实验结束;模型对照组以等体积生理盐水灌胃.术后14d和28 d分批处死动物.取各组实验动物颈动脉损伤段,常规石蜡切片,免疫组织化学S-ABC法检测骨桥蛋白(OPN)的表达;RT-PCR检测OPN mRNA的表达.结果:在球囊损伤后14,28 d时,淫羊藿苷高、低剂量组OPN mRNA的表达14 d时为(0.58±0.01),(0.42±0.02),28 d时为(0.28±0.02),(0.33±0.03),明显低于模型组14 d(0.71 ±0.02),28 d(0.62±0.01);高、低剂量组之间无明显差异.淫羊藿苷高、低剂量OPN蛋白表达量14 d时为(20.21±3.67),(32.53±12.16),28 d时为(26.14±4.64),(24.16±11.35),明显低于模型组14 d(71.24±13.25),28 d(46.13±12.31),均P<0.01.结论:淫羊藿苷在动脉损伤后可调控OPN的表达,抑制平滑肌细胞的迁移,从而减轻球囊损伤后新生内膜的增生.
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当归芍药散煎剂对垂体后叶素所致小鼠心肌缺血的影响
目的:观察当归芍药散(DSS)对垂体后叶素(Pit)所致小鼠心肌缺血的影响.方法:昆明种小鼠100只,分为空白对照组、模型组、DSS低剂量组(生药30 g·kg-1 ·d-1)、DSS高剂量组(生药60 g·kg-1·d-1)和阳性对照组(复方丹参滴丸0.174 g·kg-1 ·d-1),ig连续5d,末次药后lh,ip Pit(30 U·kg-1)进行造模.记录ip Pit前10 min和注射后5,15,25 min时点Ⅱ导联心电图;检测血清一氧化氮(NO)水平、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性(免疫组化法)以及心肌组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果:DSS高、低剂量组与模型组相比,心率均明显改善,具有显著差异(P<0.05或P <0.01);DSS高、低剂量血清NO水平分别为(79.35±25.18),( 26.46±18.24)μmol·L-1,明显高于模型组(13.66±3.83)μmol·L -1(均P<0.01).DSS高、低剂量eNOS活性为(0.259±0.037),(0.241±0.029),均强于模型组(0.176±0.036),P<o.o1).DSS高、低剂量心肌SOD活性分别为(269.55士20.65),(263.58±21.04) U·mg-1,明显高于模型组( 222.75±23.44)U· mg-1(P<0.01);DSS高、低剂量心肌MDA含量分别为(3.58±1.01),(4.22±0.75)nmol·mg-1,明显低于模型组(5.25±1.42)nmol·mg-1(P <0.05或P<0.01).结论:当归芍药散能有效防治由Pit所引起的心肌缺血及缺血损伤,具有保护心肌细胞的作用.
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柔毛淫羊藿对去卵巢小鼠骨密度、破骨细胞和IL-1β的影响
目的:探讨单味中药柔毛淫羊藿( EPM)对去卵巢小鼠骨密度、破骨细胞和白介素-1β(IL-1β)的影响.方法:切除雌性小鼠双侧卵巢制备骨质疏松动物模型,随机分为模型组、己烯雌酚( DES,2 mg·kg-1)组及EPM水煎浸膏高、中、低剂量( 200,100,50 mg·kg-1)组,另设正常对照组.术后45 d开始给予相应药物,1次/d,60d后检测小鼠骨组织骨密度、破骨细胞数和骨组织中IL-1β.结果:模型组动物呈现明显的骨质疏松表现;给药组动物骨密度增加;EPM高、中、低剂量骨组织破骨细胞数分别为(1.9±1.0),(0.9±0.6),(0.8±0.4)个,明显低于模型组(3.4±1.6)个,(P <0.05或P<0.01);EPM高、中、低剂量骨组织IL-1β阳性细胞数分别为(11.6±2.1),(12.4±2.2),(16.4±2.7)个,明显低于模型组(20.6±3.2)个(P<0.01).结论:EPM能增加去卵巢骨质疏松症小鼠的骨密度、降低破骨细胞数和IL-1β的表达.
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补肾、健脾、活血中药对地塞米松诱导骨质疏松大鼠骨组织TRPV5表达的影响
目的:观察地塞米松诱导的骨质疏松大鼠骨组织新型上皮钙通道( TRPV5)基因和蛋白表达的变化,探讨糖皮质激素性骨质疏松症( GIO)的发病机制,并比较补肾、健脾、活血中药的疗效及其调控作用.方法:Wistar大鼠132只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、补肾组(1.139 g·kg-1)、健脾组(0.945 g·kg-1)、活血组(0.504 g·kg-1)和骨疏康组(2.1 g·kg-1).地塞米松im造模(2.5 mg·kg-1),每周2次,造模及给药连续9周.测定离体股骨骨密度(BMD),生化法测定血清骨代谢指标,实时定量PCR与Western -blot法测定骨组织TRPV5 mRNA和蛋白表达.结果:模空组大鼠BMD明显降低(P<0.01),血清骨吸收标记物TRAP含量明显升高(P<0.01),骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达均上升(P<0.01);补肾中药能明显增加模型大鼠股骨BMD(P <0.01),降低大鼠血清TRAP含量(P<0.01),下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05).结论:补肾中药通过下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达而抑制破骨细胞骨吸收,从而起到抗骨质疏松的作用,其疗效优于健脾与活血中药.
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氧化苦参碱对结肠癌LoVo细胞c-myc,PSMD9,CDK4mRNA表达的影响
目的:探讨氧化苦参碱( oxymatrine,OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制.方法:采用流式细胞仪检测LoVo细胞凋亡率以及细胞周期分布;采用荧光定量PCR法检测0.25,0.5 g·L-1 OM对LoVo细胞增殖相关基因c -myc,蛋白酶调解因子9(PSMD9),CDK4的基因表达的影响.结果:0.5 g·L-1以下浓度的OM作用结肠癌LoVo细胞48 h,对细胞凋亡无明显影响.0.25 g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制人结肠癌LoVo细胞c-myc基因表达(P<0.05).0.5g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制LoVo细胞c-myc,CDK4的基因表达(P <0.01,P<0.01,).药物作用时间为96 h时,0.5g·L-1 OM可明显抑制c-myc,PSM D9,CDK4基因表达(P<0.05,或P<0.01).结论:较低剂量OM显著抑制人结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制,可能与下调LoVo细胞c-myc,PSM D9,CDK4表达有关.
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补阳还五汤含药血清对Toll样受体4信号转导通路及氧化低密度脂蛋白受体-1表达的影响
目的:从补阳还五汤含药血清对脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)信号转导通路及血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的影响,研究补阳还五汤防治动脉粥样硬化( atherosclerosis,AS)的机制.方法:含药血清的制备:选择新西兰大耳白兔20只,随机分为正常组、补阳还五汤高、中、低浓度组,每组5只.中药组分别以13.2,6.6,3.3 g·kg-1补阳还五汤ig,正常组以同等量的生理盐水ig,连续ig7 d.在末次ig给药2h后,心脏采血,离心后分离血清,获得3种不同浓度药物血清;体外培养人脐静脉内皮细胞,用脂多糖(LPS)(1 mg·L-1)刺激后,分别加入含10%高、中、低浓度补阳还五汤药物血清干预,24 h后收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4,MyD88,TRAF-6,TRAM,TRIF,NF-κB及LOX-1的基因表达,用Western blotting法测定TLR4,MyD88,TRAF-6,LOX-1的蛋白表达.结果:用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起TLR4,MyD88,TRAF-6,TRAM,TRIF,NF-κB及LOX-1的高表达(与空白对照组比较P<0.01),用补阳还五汤含药血清干预后显著抑制TLR4,MyD88,TRAF-6,NF-κB及LOX-1的高表达(与模型组比较P<0.05),而对TRAM和TRIF与模型组比较无明显抑制作用.结论:补阳还五汤可抑制TLR4和MYD88依赖性信号转导通路及LOX-1的表达,这可能是其治疗各种免疫炎症性疾病及防治动脉粥样硬化作用的机制之一.
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榼藤子生品和炮制品总皂苷体内抗肿瘤作用
目的:考察榼藤子生品和炮制品总皂苷体内抗肿瘤作用.方法:荷瘤小鼠随机分为8组,接种后第2天给药,连续10 d,模型对照组ig以等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射顺铂3 mg· kg -1,低、中、高剂量榼藤子生品、炮制品总皂苷组分别ig 0.25,0.5,1 g·kg-1剂量.观察榼藤子总皂苷的肿瘤抑制作用;计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数、肝脏指数;测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平.结果:榼藤子生品高、中、低剂量组的抑瘤率分别为58.86%,49.52%,43.45%,榼藤子炮制品高、中、低剂量组的抑瘤率分别为59.41%,48.81%,44.59%,榼藤子生品及炮制品总皂苷还能提升荷瘤小鼠血清SOD的活力,降低MDA水平.结论:榼藤子生品和炮制品总皂苷具有抗小鼠肿瘤作用,并可增强抗氧化能力.
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肝郁脾虚型大鼠肠易激综合征模型的建立及评价
目的:采用大黄结合夹尾应激法、番泻叶结合束缚应激法建立肝郁脾虚型大鼠肠易激综合征模型以及对模型进行评价.方法:将大鼠随机分为3组:空白对照组(K),大黄结合夹尾组(D+J),番泻叶结合束缚组(F+S),连续造模7d,造模前禁食12 h,K组每只大鼠灌胃生理盐水2 mL,D+J组ig 20 g·kg-1(1 g·mL-1)大黄煎煮液,F+S组ig番泻叶煎煮液5.76g·kg-1(0.36 g·mL-1).观察其一般行为活动、体重变化及排便情况等,造模结束后,评价其一定时间的粪点数及给药后开始排便的时间.结果:D+J,F+S组均有不成形的稀便而空白对照组无稀便;K,D+J,F+S组体重增长率分别为30.24%,11.59%,11.32%;给药后开始排稀便所经历的时间分别为222.91,182.61,162.36 min;造模结束后10d5 h的粪点数分别为4.5,7.68,8.71;24 h粪点数分别为37.14,43.49,45.54.与空白对照组比,模型组体重增长率、开始排便时间以及5,24 h内粪点数均有显著性差异(P<0.05),尤其以F+S组为明显结论:大黄结合夹尾、番泻叶结合束缚均能成功造成腹泻型肠易激综合征模型.
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黄芩素对4种肝损伤物质造成肝细胞毒性的拮抗作用
目的:观察黄芩素对4种肝毒性物质诱导的人正常肝细胞株L-02细胞损伤的拮抗作用.方法:培养的L-02细胞分别给予10 mmol· L-1对乙酰氨基酚(AP),50 μmol·L -1山岗橐吾碱( clivorine,CLI),2μmol·L-1川楝素( toosendanin,TSN)和100 mmol· L-1乙醇( EtOH)诱导肝细胞毒性.黄芩素1,10,25,50,100 μmol· L-1分别与细胞预孵15 min后,加入肝毒性物质,48 h后MTT法检测细胞存活率.结果:与对照组相比,4种肝毒性物质均能显著降低肝细胞存活率(P <0.001).经不同浓度黄芩素处理后,各浓度黄芩素均能显著提高AP,TSN,EtOH肝细胞损伤模型组的细胞存活率(P <0.01,P<0.001);10,25,50,100μmol·L-1黄芩素能显著提高CLI肝细胞损伤模型组的细胞存活率(P <0.05,P<0.001).结论:黄芩素具有拮抗对乙酰氨基酚、山岗橐吾碱、川楝素和乙醇这些肝毒性物质诱导的肝细胞毒性的作用,且具有一定的浓度依赖性.
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蛇床子-补骨脂在乳腺癌骨转移裸鼠模型中吸收入血特征的研究
目的:以蛇床子素和补骨脂素为靶标成分,从药物吸收入血角度探讨蛇床子-补骨脂配伍后疗效增加的机制.方法:采用左心室注射MDA-MB-231 BO细胞法建立裸鼠乳腺癌骨转移模型,给予不同配比的蛇床子-补骨脂药物煎液,采用HPLC-MS法测定裸鼠血浆中蛇床子素和补骨脂素,观察蛇床子-补骨脂配伍后蛇床子素和补骨脂素吸收入血的特征.结果:蛇床子组血浆中可发现蛇床子素离子峰;补骨脂组血浆中可发现补骨脂素分子及其离子峰信号;蛇床子-补骨脂(1∶3)组血浆中可发现蛇床子素分子及离子峰信号,未发现补骨脂素分子及离子峰信号,蛇床子-补骨脂(2∶2)组可发现蛇床子素和补骨脂素的分子及离子峰信号,蛇床子-补骨脂(3∶1)组可发现蛇床子素分子及离子峰信号,未发现补骨脂素分子及离子峰信号.结论:蛇床子素和补骨脂素均可被吸收入血;蛇床子与补骨脂1∶1配伍可促进补骨脂中补骨脂素的吸收入血.
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高效液相色谱测定不同生境黄芩中的黄芩苷
目的:测定不同生境条件下,黄芩根、茎和叶中黄芩苷的含量.方法:采用HPLC,Kromasil ODS柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇-水(53∶47)为流动相,检测波长280 nm,线性范围0.124~0.93 μg,r =0.999 9,平均回收率98.17%,RSD1.3%(n=6).结果:不同生境下黄芩根的黄芩苷平均含量分别为6.79%,6.01%,5.49%,3.50%,4.38%、茎的黄芩苷平均含量分别为0.10%,0.08%,0.09%,0.06%,0.03%;叶的黄芩苷平均含量分别为0.27%,0.26%,0.15%,0.14%,0.09%.结论:本方法简便快速,稳定可靠,重现性好.相同产地不同生境中的黄芩及黄芩不同器官的黄芩苷含量间存在显著差异.
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免疫复方的化学成分研究(Ⅱ)
目的:对免疫复方的化学成分进行系统研究.方法:免疫复方水煎液用正丁醇萃取后剩余的水层,经大孔吸附树脂洗脱,对30%乙醇洗脱部分采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和中低压制备等手段进行分离,依据理化性质和波谱法鉴定化学结构.结果:从免疫复方的大孔吸附树脂30%乙醇洗脱部分分得11个化合物,分别鉴定为4-羟基-2-(E)-壬烯酸(1),腺嘌呤(2),芹菜素(3),木犀草素(4)腺苷,(5),鸡屎藤次苷甲酯(6),黄芪甲苷(7),没食子酰芍药苷(8),丹参素(9),丹酚酸C(10),芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷(11).结论:以上化合物均为首次从免疫复方中分得,其中化合物1及其同类化合物均未见从复方单味药中分离的报道.
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金铁锁体外抗氧化活性研究
目的:研究金铁锁体外抗氧化活性.方法:采用清除采用清除二苯代苦味酰基( DPPH)自由基、清除[2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,对金铁锁体外抗氧化活性进行评价,并阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)比较.结果:金铁锁3个提取物体外抗氧化活性均弱于阳性对照PG,BHA,BHA.在3个提取物中,金铁锁乙酸乙酯提取物清除ABTS自由基(IC50=40.54mg·L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC=(696.9±2.42) μmol·g-1]较强;正丁醇清除ABTS自由基(IC50=83.38 mg· L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC =(166.1±1.06) μmol· g-1]次之,石油醚提取物弱.结论:金铁锁乙酸乙酯部位体外抗氧化活性较强.
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不同干燥方法对川芎不同部位阿魏酸含量的影响
目的:研究不同干燥方法对川芎不同部位阿魏酸含量的影响.方法:采用高效液相色谱法测定不同干燥方法的川芎不同部位中阿魏酸的含量.结果:阿魏酸在进样量0.005 74 ~0.918 4μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),定量限为0.114 8 mg·L-1,平均回收率为100.7%,RSD 1.07% (n =9).川芎不同部位阿魏酸的含量从高到低为根茎>茎>叶.不同干燥方法对川芎不同部位阿魏酸含量影响不同.结论:川芎不同部位的阿魏酸含量不同;川芎根茎不宜选用自然晒干的干燥方式,全株宜选用晒后烘干的干燥方式.
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微波协助提取在中药饮片含量测定中的应用(4)——微波法与药典法测定骨碎补中柚皮苷含量比较
目的:建立微波协助提取法提取骨碎补中有效成分柚皮苷含量测定方法,比较微波协助提取法与药典法提取柚皮苷优势.方法:采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-醋酸-水(35∶4∶65),检测波长283nm,柱温30℃,流速1 mL· min-1.结果:微波提取时间5 min,提取温度120℃,提取溶剂50%甲醇.柚皮苷在0.04 ~0.6 μg呈良好线性关系,r=0.999 9.平均回收率99.51% (n =6).结论:微波提取法较药典法提取柚皮苷更简便快速、结果准确,为一种符合环保绿色理念的含量测定方法,可用于检测骨碎补饮片中有效成分柚皮苷含量.
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不同干燥方法对猕猴桃总黄酮含量的影响
目的:建立猕猴桃总黄酮的含量测定方法并寻找适合猕猴桃干燥保存的方法.方法:以芦丁为对照品,采用分光光度法,比较烘干法,减压干燥法,微波干燥法对猕猴桃中总黄酮的影响.结果:不同干燥方法对猕猴桃中总黄酮的含量影响较大,其中采用烘干法干燥后猕猴桃中总含量为10.62 mg·g-1;减压干燥法为15.64 mg·g-1;微波干燥法为13.32 mg·g-1.结论:采用减压干燥法适合用于猕猴桃干燥保存.
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小蓟的化学成分研究
目的:研究菊科蓟属植物刺儿菜Cirsium setosum地上部分(小蓟)的化学成分.方法:通过各种柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果:分离并鉴定了9个化合物,分别为伪蒲公英甾醇(1),伪蒲公英甾醇醋酸酯(2),谷甾醇(3),反式对香豆酸二十六醇酯(4),芹菜素(5),异山萘甲黄素(6),胡萝卜苷(7),芦丁(8),蒙花苷(9).结论:化合物2,4,6为首次从小蓟中分离得到.
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HPLC比较醇提重楼及其颗粒中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量
目的:建立一种测定重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量测定方法,用于比较重楼乙醇提物与重楼配方颗粒中皂苷的含量.方法:采用C18色谱柱,以乙腈-水(42:58)为流动相,检测波长210 nm,流速1 mL· min -1,柱温室温.结果:在0.043 5~0.870 0g·L-1,重楼皂苷Ⅰ的峰面积与浓度有良好的线性,r =0.999 1;在0.038 ~0.760 0 g·L-1,重楼皂苷Ⅱ的峰面积与浓度有良好的线性,r=0.999 7,重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的平均回收率为99.90%,100.2%,RSD分别为1.7%,1.7%.醇提物与配方颗粒中皂苷Ⅰ,Ⅱ的总含量分别为34.7%,3.1%.结论:该法操作简单,出峰时间短,两峰分离度好,测得的醇提物中皂苷Ⅰ,Ⅱ含量明显高于重楼配方颗粒.
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3种方法制备的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量测定
目的:对四逆汤传统法、药典收录的水提醇沉法、各单味药分提合并法制备的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量进行比较.方法:采用HPLC测定3种不同的方法提取液中甘草苷、甘草酸的含量,C18色谱柱,流动相乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长237 nm,流速1.0 mL·min -1,进样量10 μL.结果:甘草苷在传统汤剂中含量为2.57 mg·g-1,经方合剂中的含量为2.21 mg·g-1,单味配方合并液中含量为3.58 mg·g-1;甘草酸在传统汤剂中含量为1.96 mg·g-1,经方合剂中的含量为1.84 mg·g-1,单味配方合并液中含量为3.04 mg·g-1.结论:四逆汤单提合并法中甘草苷、甘草酸含量高,且各制法的四逆汤中甘草苷、甘草酸含量均有显著性差异,为四逆汤提取方法研究提供依据.
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茜草提取物中大叶茜草素测定的方法研究
目的:建立茜草提取物中大叶茜草素的HPLC含量测定方法.方法:采用Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸(25∶50∶25),流速为1 mL·min-1,柱温25℃,检测波长250 nm.结果:在该条件下,大叶茜草素在3.566~ 456.4 mg·L-1线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为98.97%( RSD 2.29%).结论:该方法准确、可靠,操作简便,可用于茜草提取物的质量控制方法.
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朱砂中HgS含量、形态和晶形研究
目的:对朱砂中HgS含量、形态和晶形进行研究,并与伪品朱砂进行比较.方法:采用性状、显微、理化鉴别的方法,确立朱砂鉴别特征;采用X-射线衍射和电镜分析法,对朱砂的粒径大小、形貌和晶型进行表征;采用容量分析测定朱砂中HgS含量.结果:可通过性状、显微、理化特征等的差异鉴别朱砂及其伪品;朱砂有两种变体(α-HgS和β-HgS),不同产地的朱砂样品具有相对稳定的X-射线单晶衍射特征.结论:朱砂中HgS含量、形态和晶形是影响朱砂药材质量的重要因素.
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尖叶假龙胆中norswertianolin的含量测定
目的:利用反相高效液相色谱法对尖叶假龙胆中norswertianolin成分进行含量测定.方法:采用Shim-pack VPODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)(80∶ 20),流速1.0 mL· min -1,柱温25℃,紫外检测波长254 nm.结果:尖叶假龙胆中norswertianolin在9.6~192 mg·L-1线性关系良好(r=0.999 5);仪器精密度RSD0.67%(n=6);方法重复性RSD 1.88% (n =6);样品在12 h内稳定;平均回收率为99.8%( RSD 1.31%).结论:本法快速、准确、重复性好,可用于蒙药尖叶假龙胆中norswertianolin成分的含量测定.
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FTIR定量测定扶芳藤中卫矛醇的方法研究
目的:建立快速测定扶芳藤中卫矛醇含量的方法.方法:以高效液相色谱法测定结果为对照,应用FTIR技术,采用偏小二乘法、主成分回归法和多元线性回归法3种回归分析方法对不同产地扶芳藤药材中的卫矛醇进行定量测定.结果:三种方法的测定结果与高效液相测定的结果没有显著差异(P<0.05),各定量方法的实测值与预测值均没有系统误差;多元线性回归法测定8个产地扶芳藤原药材和甲醇提取物卫矛醇的结果和HPLC结果为接近,其平均标准误差分别为0.16,0.296.RSD分别为4.475%,6.643%,小于其他两种方法,说明多元线性回归法的结果为理想.结论:所建立的定量校正模型具有较强的测定能力,采用自编计算程序和现有统计软件,还可将模型实现实时在线检测,大大提高了测定速度而更加具应用价值.
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3,5-二硝基水杨酸法联合苯酚-浓硫酸法测定不同产地黄精中多糖含量
目的:建立一种操作简便,可排除黄精药材本身所含单糖干扰的多糖含量测定方法,建立合理客观地评价黄精药材的质量.方法:联合3,5-二硝基水杨酸法和苯酚-浓硫酸法,通过紫外分光光度法分别测定黄精原药材中还原糖和总糖的含量,取两者之差即为药材中多糖的含量,并从重复性、精密度、稳定性以及加样回收率等方面进行了方法学考察.结果:本方法具有良好的适用性,不同产地的黄精药材多糖含量测定结果表明云南产黄精药材中多糖含量较高.结论:本实验样品处理简单、方法的重复性、精密度、稳定性及加样回收率均符合要求,可用于评价黄精生药材的质量.
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基于近红外光谱的白芍药材快速分析
目的:采用近红外(NIR)光谱技术建立一种快速测定白芍药材芍药苷的方法.方法:运用HPLC测定样品中芍药苷的含量,运用偏小二乘(PLS)法建立含量如NIR光谱之间的多元校正模型,对未知样品进行含量预测.结果:校正集的内部交差验证均方差RMSECV为0.019 7,校正模型中真实值与预测值之间的相关系数(R2)为0.969 6,外部验证均方差(RMSEP)为0.046 1.结论:近红外漫反射光谱法快速、简便、无损,可用于白芍药材中芍药苷含量的快速检测,对其他药材中指标性成分的测定也有一定的参考价值.
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可变波长同时测定泸州龙眼没食子酸和鞣花酸的含量
目的:建立同时测定泸州龙眼肉、核、皮中没食子酸和鞣花酸含量的HPLC方法.方法:依利特Sino Chrom ODSBP (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,改变波长测定(0~ 11.5 min,215 nm,测定没食子酸;11.5~25 min,255 nm,测定鞣花酸),柱温30℃,流速1 mL· min-1,进样量10 μL.结果:没食子酸在0.229 ~2.29 μg,鞣花酸在0.412 5 ~4.125 μg峰面积与进样量有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率(n=9)分别为98.27%( RSD 0.63%),98.31% (RSD 0.88%).结论:该方法灵敏、准确、重复性好,可用于泸州龙眼中没食子酸和鞣花酸的含量测定.
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伤湿止痛热熔压敏贴膏质量标准研究
目的:建立伤湿止痛热熔压敏贴膏的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法对伤湿止痛热熔压敏贴膏中颠茄流浸膏进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对贴膏中马钱子碱和士的宁进行含量测定.结果:在薄层色谱中能检出颠茄流浸膏中硫酸阿托品的特征斑点;高效液相色谱法测定贴膏中马钱子碱和士的宁的含量,士的宁在0.53 ~53.0 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 5),其平均回收率为95.57%,RSD 2.91%(n=6);马钱子碱在0.50~50.0 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 5),其平均回收率为97.95%,RSD 1.43% (n=6).结论:方法简便、专属性强、重复性好,可用于控制伤湿止痛热熔压敏贴膏的质量.
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4种发酵法炮制中药材的微生物初步研究
目的:通过对发酵法炮制的4种中药材(生神曲、生建曲、生半夏曲、生淡豆豉)进行相关的微生物培养、鉴定及分析,进而确定其内在质量,为临床安全用药提供参考.方法:采用血平板、沙氏、中国蓝及常规空气4种培养皿分别对上述中药材进行细菌培养及形态学检测.结果:4种中药材在常规空气培养皿中均培养出较多杂菌,在中国蓝培养皿中均培养出一定量G-杆菌.在血平板中培养出不同程度的G+杆菌、G-杆菌、G+球菌、真菌孢子等,在沙氏培养基中只有生神曲及生建曲培养出真菌并形态学鉴定为酵母菌.结论:生神曲和生建曲培养出较多的真菌酵母菌为发酵法产生的有益菌,而生半夏曲和生淡豆豉却未发现有真菌存在,因此应提醒关注发酵炮制的过程,进一步确保药材质量.
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治疗类风湿关节炎中药方剂作用原理的网络药理学研究策略
方剂是中医临床用药的主要形式,是中医整体观和辨证论治思想的集中体现.长期以来,方剂作用原理的研究既是学术界的热点也是难点.近年来,基于组学技术及计算机模拟计算方法的网络药理学被广泛应用于中药药理、方剂配伍的科学内涵、中药药性与疗效等领域的研究中并产生了许多有价值的研究成果.本文概述了类风湿关节炎寒、热证候相关的疾病网络的构建方法,证候关联中药组方规律的文本挖掘方法以及方证对应的生物靶点网络的构建方法.初步探讨了基于证候动物模型的组学信息构建“病-证”动物表型网络及基于寒性、热性方剂对应的化合物信息构建药物靶标网络的网络药理学思路.提出应用网络药理学的技术方法研究类风湿关节炎寒、热证相关疾病网络特点及寒性、热性方剂作用原理的新策略.
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生化固本汤防治含顺铂方案化疗所致恶心呕吐反应的临床观察
目的:观察生化固本汤加减防治含顺铂方案化疗所致恶心呕吐反应的临床疗效.方法:86例患者以生化同本汤为治疗组,同时设托烷司琼为对照组,对化疗后恶心呕吐反应的防治效果进行随机交叉对照临床研究.结果:对恶心的控制有效率生化固本汤组为82.6%,托烷司琼组为74.4%,对呕吐的控制有效率生化固本汤组为87.2%,托烷司琼组为88.4%,经分析两组对化疗所致恶心呕吐的防治效果均无统计学意义,但托烷司琼组发生不良反应26例(30.2%),生化固本汤组发生1例(1.2%),两组比较具有统计学意义(P<0.05).结论:生化固本汤能有效防治含顺铂方案化疗后的恶心呕吐反应,且毒副反应小,值得临床推广.
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参附舒心汤对老年心衰患者血清中脑利钠肽的影响
目的:探讨参附舒心汤治疗老年冠心病舒张性心力衰竭的疗效,关注其对血清中脑利钠肽(BNP)的影响,探讨其临床意义.方法:收集我院诊治的65例冠心病舒张性心力衰竭的老年患者,依入院顺序分为治疗组和对照组,对照组(32例)应用常规治疗(贝那普利10 mg,每日1次,酒石酸美托洛尔6.25 ~12.5 mg,每日2次,1周后加倍);治疗组(33例)在常规治疗基础上加用参附舒心汤(人参9 g,制附片12 g(先煎0.5h),黄芪30 g,红花9 g,川芎12g,三七6 g,瓜蒌壳12g,郁金15g,桂枝6 g,葶苈子12 g,泽泻12 g,制甘草15 g),观察两组的疗效及对患者血清中BNP的影响.结果:治疗组的疗效明显优于对照组.治疗组与对照组治疗后血清中BNP的表达明显低于治疗前,但治疗组治疗前、后BNP的减少值明显高于对照组.结论:冠心病舒张性心力衰竭的老年患者在常规治疗基础上加用参附舒心汤治疗,临床效果明显,且能有效调节血清中的BNP水平,进而有效调节机体内环境,临床治疗中可以积极应用.
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中西医结合治疗多器官功能障碍综合征的疗效观察
目的:探讨中西医结合治疗多器官功能障碍综合征的临床疗效.方法:2009年9月至2011年9月期间,我院诊治的60例多器官功能障碍综合征患者,随机将其分为对照组(单纯西医药物治疗)和观察组(对照组基础上,给予复方大黄灌肠液进行灌肠治疗),对两组的显效率和总有效率,进行观察和比较.结果:30例对照组患者中,有14例显效,9例有效,7例无效;30例观察组中,有21例显效,6例有效,3例无效.与对照组相比(46.7%和76.7%),观察组的显效率和总有效率都明显提高(70.0%和90.0%),P<0.05,差异具有统计学意义.与对照组相比(23.3%),观察组的低钾血症的发生率明显降低(10.0%),P <0.05,差异具有统计学意义.结论:中西医结合治疗多器官功能障碍综合征疗效显著,治疗时间短,而且不良反应少.
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口服中药联合穴位埋线治疗中风患者下肢痉挛
目的:观察口服中药联合穴位埋线治疗中风后下肢痉挛的临床疗效.方法:将62例患者随机分为两组,治疗组口服补阳还五汤联合穴位埋线法,对照组口服西药妙纳,两组同时都配合常规康复治疗,疗程均为40 d.治疗前后分别进行表面肌电数据的采集.结果:治疗组、对照组表面肌电和肌肉痉挛分级(改良Ashworth分级量表)的数据有明显下降,且治疗组优于对照组;治疗组总有效率93.5%,明显高于对照组(67.7%).结论:口服补阳还五汤联合穴位埋线治疗中风后下肢痉挛状态疗效优于口服妙纳,且无明显副作用.
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喘可治注射液治疗呼吸系统急症
目的:评价喘可治注射液治疗呼吸系统急症的临床疗效.方法:将呼吸系统急症患者86例随机分为治疗组和对照组,治疗组44例,对照组42例;对照组给予常规吸氧、抗炎及对症支持治疗,治疗组在常规治疗基础上,加喘可治注射液4 mL/次,2次/d,im,7d为1个疗程.观察两组治疗前后临床主要症状、体征的改善情况,以及辅助检查结果的变化.结果:治疗组总有效率88.64%;对照组总有效率66.67%,差异显著(P<0.05).结论:喘可治注射液治疗呼吸系统急症疗效显著.
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并有糖调节受损的代谢综合征中医辨证分型风险因素临床研究
目的:观察并有糖调节受损(IGR)的代谢综合征(MS)中医痰热互结证和气阴两虚证型相关危险因素.方法:通过“十一五”国家科技支撑计划中医药项目调查的北京、山东、辽宁等地符合西医及中医证型诊断的并有IGR的MS 353例患者,收集年龄、性别、体重指数(body mass index,BMI)、腰围(waist cincumference,WC)、收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、总胆同醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDI)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2h血糖(2 hours plasma glucose,postprandial blood glucose;2 hPG,PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)等主要指标进行分析.结果:①痰热互结证型患者BMI,WC高于气阴两虚组(P<0.05);②痰热互结证的PBG高于气阴两虚组(P<0.05);③血压与并有IGR的MS中医辨证分型无相关性;④痰热互结证的LDL高于气阴两虚组(P<0.05).结论:BMI,WC,PBG,LDL是并有IGR的MS痰热互结证的危险因素,临床治疗中要重视化痰清热法.
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乳岩方治疗乳腺癌术后抑郁
目的:观察乳岩方对于乳腺癌术后抑郁患者的改善情况.方法:使用Zung抑郁自评量表(SDS)对乳腺癌术后患者进行评分,选出评分≥41分者,使用信封法随机分为两组,治疗组给予乳岩方治疗3个月,对照组给予不含乳岩方中的中药服用3个月,3个月后重新评分,对症状和生活质量的改善做评价.结果:SDS总分治疗组由(45.40 ±1.51)分降至(33.9士1.54)分,对照组由(46.60±1.12)分降至(42.75±1.37)分,治疗组改善优于对照组(P<0.05);治疗组在抑郁、易哭、睡眠障碍、便秘、心悸、易倦、不安、绝望、易激惹等方面治疗前后比较有显著差异(P<0.05),而对照组只在心悸、易倦、绝望症状改变上有显著差异(P<0.05).结论:乳岩方对于乳腺癌术后抑郁状况有改善作用,且无明显毒副反应.
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细辛、威灵仙联合应用止痛疗效观察
目的:观察细辛、威灵仙联合配伍治疗几种疼痛的疗效.方法:3种疼痛病证共229例:胃热阴虚型牙痛77例,基本方为玉女煎;风寒凝聚型三叉神经痛76例,基本方为川芎茶调散;风寒湿痹型风湿痛76例,基本药为黄芪、当归、独活、羌活、苍术、薏苡仁、防己.每种疼痛病证都按就诊顺序分别分成4组,每组19例左右:对照组用基本方稍加减;细辛组即基本方加细辛;威灵仙组即基本方加威灵仙;细辛-威灵仙组即基本方加细辛、威灵仙.疗程为两周,分别观察其止痛情况.结果:每组有效率>84.2%,细辛-威灵仙组有效率>94.44% (P =0.000).结论:细辛-威灵仙组疗效佳,说明细辛-威灵仙联合配伍加入应证方药,治疗顽痛疗效明显,为临床用药提供经验.
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巴豆中巴豆苷的提取纯化及制备
目的:建立一种从巴豆中提取纯化及制备巴豆苷的方法.方法:以巴豆苷得率为指标,采用正交试验设计优化巴豆苷的提取工艺参数;考察大孔树吸附脂纯化工艺条件;应用制备型液相色谱分离高纯度巴豆苷.结果:佳巴豆苷提取工艺参数为8倍量20%乙醇提取3次,每次40 min;大孔树脂吸附初步纯化后,制备液相分离出巴豆苷单体,质量分数达98%,可作为对照品.结论:该方法简便易行,可用于分离制备高纯度巴豆苷样品.
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β-细辛醚巴布剂制备工艺优选
目的:优选β-细辛醚巴布剂制备工艺.方法:以光泽性、持黏力、基质残留、皮肤追随性和反复揭贴性为考察指标,采用正交试验设计法,优选巴布剂基质配比和β-细辛醚巴布剂成型工艺.结果:优选基质佳处方为卡波姆-压敏胶-聚乙烯醇-羧甲基纤维素钠-明胶-柠檬酸-柠檬酸钠-甘油-丙二醇0.3∶1∶0.05∶0.35∶0.1∶0.12∶0.18∶3.5∶3.5.β-细辛醚巴布剂成型工艺为搅拌转速500r·min-1,炼和温度45℃,炼和时间15 min,β-细辛醚含量为8.7%.结论:优选的β-细辛醚巴布剂持黏力、赋型性、光泽均良好,载药量大,无皮肤残留;该制剂对中风的治疗具有一定的优势和广泛的应用前景.
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五倍子提取物喷雾膜剂体外释放评价
目的:建立五倍子提取物喷雾膜剂的体外释放度测定方法,并考察其体外释药特性.方法:以没食子酸为考察指标,采用改良Franz扩散池装置,以半透膜为体外渗透屏障,HPLC测定接收液中没食子酸的含量,计算体外释放度.结果:促渗剂对五倍子提取物喷雾膜剂的释药效果影响不明显,方程拟合以一级动力学方程拟合效果好.结论:五倍子提取物喷雾膜剂体外释放良好,具有一级动力学特征,不使用促渗剂即可达到较好的释放效果.
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正交设计优选四神结肠片提取工艺
目的:采用正交试验设计优选四神结肠靶向片的提取工艺.方法:以乙醇体积分数、溶媒用量、提取次数及提取时间为考察因素,以补骨脂素、异补骨脂素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的提取率及出膏率为考察指标,采用L9(34)正交试验优选四神结肠靶向片的HPLC含量测定及提取工艺.结果:佳提取工艺为加8倍量60%乙醇回流提取3次,每次提取1.5h.结论:优选提取工艺合理,提取效率高,适用于工业生产.
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硫磺熏蒸怀牛膝工艺筛选
目的:研究硫磺熏蒸对怀牛膝中蜕皮甾酮的影响.方法:采用高效液相色谱法测定硫磺熏蒸后蜕皮甾酮的含量,XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(15∶85),检测波长250 nm,柱温25℃,流速0.8 mL·min-1.结果:硫磺用量100 g·m-3,熏蒸1次,熏蒸2h,此时蜕皮甾酮的量高;蜕皮甾酮在0.408 ~2.448 μg线性关系良好,回归方程为Y=34.167X +61(r =0.999 6).结论:硫磺熏蒸对怀牛膝中蜕皮甾酮含量有一定影响,随硫磺用量增加、熏蒸时间延长、熏蒸次数增加而呈减少趋势.
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汉黄芩素白蛋白微球的制备及其体外释放
目的:制备汉黄芩素白蛋白微球,并考察其体外释放及稳定性.方法:以白蛋白为载体,采用乳化交联法制备汉黄芩素白蛋白微球.在单因素考察基础上,利用正交设计优化汉黄芩素白蛋白微球制备[艺,并对微球的粒径和体外释放特性进行研究.结果:制得的微球形态圆整,平均粒径(0.95±0.14) μm,平均载药量(53.58 ±3.26)%,平均包封率(62.54±3.17)%,体外释放符合Higuchi方程,Q=10.402 8 t1/2 -1.205 6(r=0.998 2).结论:本实验获得了较理想的汉黄芩素白蛋白微球,其体外释放特性符合缓释制剂特征.
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正交试验优选葛根醋制工艺
目的:优选葛根佳醋制工艺.方法:以HPLC测定葛根素、大豆苷、大豆苷元含量为指标,考察辅料用量、闷润时间、文火炒制时间3个因素,采用正交试验对葛根的佳醋制工艺进行优选.结果:葛根的佳醋制工艺为取葛根一定量,加入20%醋闷润0.5h,文火炒制30 min.结论:优选出的葛根醋制工艺稳定可行,重现性好.
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心神宁片中栀子苷含量影响因素的考察
目的:考察心神宁片中关于栀子苷含量的影响因素.方法:选择心神宁片生产工艺中多个控制点,通过HPLC测定栀子苷的含量,计算栀子苷的转移率.结果:影响栀子苷含量的主要因素是浓缩工序和制粒工序,要求控制两道工序的温度在75℃以下,3批中试样品中栀子苷平均含量1.87 mg/片,平均转移率67.0%.结论:按照此工艺栀子苷的有效成分能提取完全且有效转移,并能更好控制产品质量.
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氮酮对骨平巴布膏中葛根素体外透皮吸收的影响
目的:研究氮酮对骨平巴布膏中葛根素体外透皮吸收的影响.方法:采用体外扩散池法研究单用氮酮及氮酮与其他透皮吸收促进剂复合应用时对葛根素透皮吸收的影响.结果:不同质量分数氮酮均可促进葛根素透皮吸收,氮酮与处方中的冰片和挥发油复合应用时透皮效果更好.结论:骨平巴布膏中加入5%的氮酮能够显著增加葛根素的吸收速率和吸收量.
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黄藤素结肠定位片的制备及其体外释放评价
目的:制备pH依赖、时滞双重机制控制的黄藤素结肠定位片释药系统,并考察其体外释放度.方法:以羟丙甲基纤维素和聚乙二醇6 000作为隔离层,以丙烯酸树脂Ⅳ号和聚乙烯吡咯烷酮作为时滞层,以pH依赖型丙烯酸树脂Ⅱ和丙烯酸树脂Ⅲ的混合溶液作为外层肠溶层.考察包衣片在体外模拟人体胃肠道环境中的释药情况.结果:制备的黄藤素结肠定位片在pH 1.0人工胃液中2h不释药;在pH 6.8人工小肠液中3.5h释药量<1%;在人工结肠液中6h基本释药完全.结论:所制备的黄藤素结肠定位片具有良好的结肠定位效果.
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复方红景天颗粒提取工艺优选
目的:优选复方红景天颗粒的提取工艺.方法:采用比较试验法和正交试验法,对复方红景天颗粒主要成分的水提取[艺进行优选,以HPLC测定红景天苷提取量及浸膏得率为考察指标,对提取次数、浸泡时间、加水量、提取时间等因素进行优选.结果:佳提取工艺为浸泡0.5h后,提取2次,第1次加10倍量水提取2h,第2次8倍量水提取1h.结论:复方红景天颗粒的水提取工艺合理、简单易行.
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西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F11工艺
目的:优选从西洋参茎叶总皂苷中分离纯化拟人参皂苷F11的佳工艺.方法:以拟人参皂苷F11(PF11)提取率为指标,建立HPLC-ELSD检测PF11的方法,并优选AB-8大孔吸附树脂纯化西洋参茎叶总皂苷中PF11的工艺.结果:佳工艺为西洋参茎叶总皂苷过10倍量AB-8大孔吸附树脂柱,流速5 mL·min-1,依次用7.5 BV 30%~33%乙醇,8 BV 35%~40%乙醇进行洗脱,收集35%~40%乙醇洗脱液,回收乙醇,蒸千,得PF11粗品纯度>50.0%.结论:大孔吸附树脂分离拟人参皂苷F11方法简单、快速、可行.
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微小核糖核酸在中药研究中的应用
对微小核糖核酸( miRNA)研究文献进行分析和综评.以miRNA为主题词检索MEDLINE和CNKI数据库,选取其中代表性文献21篇,分析、评述miRNA研究的新进展及其在中医药研究中的应用.结果显示miRNA在诊断和疗效评价上既是一类新的生物标记物,在治疗和药物干预上也是一类新的作用靶标,在中药作用的物质基础上又是一类新的活性成分.利用微小核糖核酸技术多个视角探讨研究中医药具有广阔的前景.
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慢性阻塞性肺病动物模型在药理研究中的应用
对慢性阻塞性肺病(COPD)动物模型研究的国内外报道进行文献整理,对COPD模型的建立以及COPD治疗药物开发提供新的思路.通过中科院上海药物研究所图书数据库平台查阅近几年国内外有关慢性阻塞性肺病和动物模型为关键字的研究报道30余篇,进行分析综合.总结了几种动物作为COPD动物模型的优势和缺陷,并归纳建立COPD模型的相关方法和评价造模成功的判断相关指标,为COPD模型的建立提供参考.COPD疾病的发病过程复杂至今没能有国际统一的标准建模方法,报道多是几种方法联合进行造模;希望能为COPD的研究者选择模型提供一点参考,为新的治疗COPD的药物的开发铺路,期望在不远的将来能够建立标准化统一的COPD治疗与研究方法.
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大孔树脂技术在中药提取纯化中的应用及展望
对近10年大孔树脂技术在中药方面的应用文献进行整理和归类分析,其中包括中药单、复方中有效成分的分离精制、中药有害杂质的脱除、树脂中有机残留的控制、孔树脂再生等;并对大孔吸附树脂技术的应用领域扩展进行探讨.大孔吸附树脂分离技术主要应用于皂苷、黄酮、生物碱等成分的富集上,近年来用于重金属杂质和农药残留物脱除.根据中药化合物的结构类型开发研制高选择性的树脂,提高中药有效成分分离效率,快捷、省时、低成本将成为新的发展趋势.选用2009~2011年的参考文献31篇,占总参考文献62%,以期为大孔树脂技术的研究及生产提供参考.
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中药四性研究现状与思考
总结和反思中药四性研究的现状,提出基于生物光子辐射检测的中药四性研究新思路.中医理论认为中药的药性是药物与疗效相关的性质和性能,是中药调整机体偏性状态的能力.深入剖析传统中药药性概念和反思目前药性研究的基础上,基于机体电磁辐射能表征中医之气的观点,笔者认为四性就是调节机体电磁辐射量子叠加态的度量.目前中药四性研究存在着不足,从生物光子辐射角度来探讨中药四性将会是有意义的探索.通过检测不同药性中药调节机体电磁辐射叠加态的能力,为揭示药性的本质研究提供了一个新的思路.
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雷公藤多苷片的抗炎作用及体内药效动力学研究
目的:采用药理效应法探讨雷公藤多苷片的药效动力学参数.方法:将8组雄性Wistar大鼠,皮内注射0.1 mL完全弗氏佐剂(CFA)第14天后,制得佐剂性关节炎模型.然后,分别以白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化率为效应指标测定雷公藤多苷片的药效动力学参数.结果:雷公藤多苷片大鼠ig给药后,以IL-1和TNF-α变化率为指标,时间体存量均符合二室开放模型,主要药代动力学参数分别为t1/2α0.230和0.196 h,t1/2β0.283和0.246 h,V1/F 2.174,1.798 L·kg -1,AUC0-∞1.236,1.578 mg· L-1·h-1.结论:雷公藤多苷片在大鼠体内药动学行为符合线性二室模型,在体内的分布和消除均较快.
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地格达4味汤中獐牙菜苦苷在急性肝损伤模型大鼠体内药代动力学研究
目的:建立急性肝损伤模型大鼠血清中獐牙菜苦苷的HPLC血药浓度测定方法,并对其药代动力学进行研究.方法:SD大鼠腹腔注射D-半乳糖胺(D-GIaN) (400 mg·kg-1),制备急性肝损伤模型,按高、中、低(0.39,0.77,1.54 g·kg-1)剂量灌胃给予地格达-4味汤,收集不同时间点含药血清,HPLC测定血药浓度,采用Winnonlin 5.1药动学软件拟合房室模型,计算其药动学参数.结果:獐牙菜苦苷在0.000 6 ~0.019 2 mg ·L-1(r =0.998 9)线性关系良好,平均回收率均在80%以上,方法学考察其他项均符合实验要求.地格达-4味汤高、中、低剂量组吸收半衰期基本一致,药时曲线下面积(AUC)与给药剂量之间呈现良好的线性关系,属于线性动力学过程.结论:獐牙菜苦苷在急性肝损伤模型大鼠体内的药时曲线符合二室模型特征;所建立的方法准确,灵敏度高,专属性好,可作为獐牙菜苦苷体内血清药物浓度分析方法.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |