中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位: 中华人民共和国卫生部
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-5457/R
- 国内刊号: 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛辅助蛋白AP1、BP主要抗原域串联表达及其免疫活性鉴定
目的 构建无乳链球菌菌毛岛屿辅助蛋白AP1、菌毛骨架蛋白BP主要抗原域串联表达重组载体,对表达产物进行抗原性分析及鉴定. 方法 利用DNAstar Protean功能筛选AP1和BP主要抗原结构域,引入15位柔性多肽,通过重叠延伸PCR技术串联融合AP1、BP主要抗原决定簇基因区,PCR扩增串联体基因片段,克隆至pET-30a(+)载体后转化BL21(DE3)细胞,表达的目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定. 结果 PCR扩增出321 bp的AP1和660 bp的BP主要抗原域,经重叠延伸PCR获得966 bp的AP1、BP串联体基因片段,DNA测序表明无碱基缺失、突变和移码.构建的重组表达载体经IPTG诱导能可溶性表达分子质量约45 ku的目的蛋白,纯化后重组蛋白的纯度≥95%,Western blot分析表明,重组融合蛋白能被兔源抗无乳链球菌阳性血清识别. 结论 重叠延伸PCR获得AP1、BP主要抗原域串联体,构建的pET-30a(+)/AP1+ BP重组表达载体能以包涵体形式表达目的蛋白,表达产物具有良好的反应原性,为研究基于AP1、BP蛋白的致病机制及其免疫活性奠定了实验基础.
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血清不耐热物质对噬菌体PL39杀灭铜绿假单胞菌的影响
目的 观察人血清和鼠血清中不耐热物质对噬菌体PL39杀灭不同克隆铜绿假单胞菌的影响. 方法 采用双层平板法筛选PL39敏感宿主菌;根据ERIC-PCR图谱分析敏感宿主菌的遗传差异性.分别添加新鲜及热灭活人血清和鼠血清,观察其对PL39杀灭不同敏感宿的影响. 结果 筛选到9株PL39敏感宿主菌,其中2株菌ERIC指纹图谱无明显不同,其他菌株的指纹图谱明显不同.9株菌均能完全抵抗人血清和鼠血清的溶菌作用;噬菌体PL39在两种血清中均能保持恒定的成斑活性,但在人血清中对9株宿主菌的杀灭作用均被抑制;在小鼠血清中,PL39对L39菌有一定杀灭作用,对其他宿主菌无杀灭作用;两种血清热灭活(56℃,30 min)后对PL39杀灭不同宿主菌作用无显著影响,与营养肉汤中的PL39杀菌作用相比差异无统计学意义(P>0.05). 结论 人血清和鼠血清中的不耐热物质均可影响噬菌体PL39对其宿主菌的杀灭作用.
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高毒性人呼吸道合胞病毒鼠适应株的筛选
目的 以BALB/c小鼠作为动物模型筛选高毒性人呼吸道合胞病毒鼠适应株. 方法 以连续传代法经小鼠下呼吸道接种临床株人呼吸道合胞病毒hRSV-A-GZ08-0,确认8月龄BALB/c雄鼠作为人呼吸道合胞病毒动物模型较3周龄BALB/c小鼠和8月龄BALB/c雌鼠更佳后,以8月龄BALB/c雄鼠为动物模型,将hRSV-A-GZ08 0连续传代50代,分离获得1株鼠适应株hRSV-A GZ08 P50-4,该株病毒与临床株hRSV-A GZ08-0分别接种8月龄BALB/c雄鼠后第3d以TCID50方法测定鼠肺灌洗液中的病毒滴度,并作鼠肺病理切片比较两株病毒感染的不同. 结果 8月龄BALB/c雄鼠作为人呼吸道合胞病毒动物模型较3周龄BALB/c小鼠和8月龄BALB/c雌鼠更佳.与临床株hRSV-A-GZ08-0比较,hRSV-A-GZ08-P50-4为高毒性hRSV鼠适应株. 结论 8月龄BALB/c小鼠,特别是8月龄BALB/c雄鼠,可作为动物模型筛选高滴度hRSV鼠适应株.筛选到的高毒性hRSV鼠适应株hRSV-A-GZ08-P50-4致病力较强.
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蜡样芽孢杆菌非溶血性肠毒素基因的原核表达及多克隆抗体制备
目的 分别对非溶血性肠毒素基因(Nhe)的3个亚基进行原核表达,并对蜡样芽孢杆菌分泌的非溶血性肠毒素蛋白进行免疫学鉴定. 方法 根据NCBI数据库非溶血性肠毒素NheA、NheB、NheC基因序列设计引物,以蜡样芽孢杆菌的基因组为模板,PCR扩增NheA、NheB、NheC基因.分别将3个基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化到大肠埃希菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,进行SDS-PAGE分析以及Western blot分析,并免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体. 结果 经PCR和酶切鉴定,成功构建重组表达载体.重组表达载体分别转化至BL21 (DE3),经IPTG诱导表达相应的目的蛋白,分子质量单位分别为NheA 40 ku,NheB 44 ku,NheC 40 ku.经电离飞行时间质谱鉴定,重组蛋白NheA、NheB和NheC表达正确.3种目的蛋白经SDS-PAGE电泳后分别割胶回收,免疫新西兰大白兔,获得重组多克隆抗体. 结论 成功构建了NheA、NheB、NheC基因重组表达载体,表达的重组蛋白免疫新西兰兔获得相应的克隆抗体,为进一步研究非溶血型肠毒素的结构和功能奠定了基础.
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刚地弓形虫垂直传播小鼠模型的建立
目的 探讨建立刚地弓形虫稳定垂直传播小鼠模型的方法. 方法 将42只孕8 d BALB/c小鼠随机分为(AF组),正常对照A组(孕鼠经腹腔注射无菌PBS 0.2 ml/只)和感染组(B~F)(每只小鼠经腹腔接种不同剂量的弓形虫速殖子10、20、40、80个/0.2 ml).观察并记录孕鼠的体重改变、行为反应、流产率与活胎率;孕18d时剖腹,取出胎鼠进行形态学观察. 结果 感染组小鼠出现倦怠、竖毛、弓背等异常反应,且随速殖子感染数量的增加异常反应程度逐渐严重;F组孕鼠死亡2只.感染组较对照组体重增加不明显,F组体重减轻;孕18d时D~F组体重与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).感染组出现流产、死胎等,F组存活孕鼠腹中无胎鼠.D~F组流产率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);B~F组活胎率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).E~F组胎鼠体重、体长、尾长与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 成功建立刚地弓形虫垂直传播小鼠模型,BALB/c小鼠孕8d腹腔注射接种RH株弓形虫速殖子40个/(0.2 ml·只)为适宜感染剂量.
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MERS-CoV棘突蛋白主要特性及B/T细胞抗原表位预测分析
目的 应用生物信息学方法分析中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)棘突蛋白(Spike,S)的主要特性,预测可能的B/T细胞抗原表位. 结果 MERS-CoV的S蛋白氨基酸序列基本保守,具有多个糖基化、酰胺化及磷酸化翻译后修饰位点.综合各种单参数预测MERS-CoV S蛋白可能存在4个B细胞抗原表位、7个CTL细胞表位和5个Th细胞表位. 方法 以MERS-CoV S蛋白的氨基酸序列一级结构为基础分析其保守性,采用ProtParam预测S蛋白的理化特性,SOPMA预测其二级结构,Motif Scan预测翻译后修饰位点,DNAStar分析其序列的亲水性指数、柔韧性指数、可及性参数以及抗原指数,推测B细胞抗原表位的可能位置,采用SYFPEITHI的T细胞表位预测工具预测CTL和Th细胞表位. 结论 生物信息学方法预测MERS-CoV S蛋白氨基酸保守序列,该蛋白可能含有B/T细胞抗原表位,为MERS-CoV疫苗研制及其他相关研究奠定了基础.
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重组结核分枝杆菌TB10.4的表达及免疫反应性分析
目的 构建结核分枝杆菌TB10.4的原核重组表达体系并表达TB10.4,分析其反应原性. 方法 GenBank 报道的结核分枝杆菌标准株H37Rv TB10.4基因序列设计并合成引物,从H37Rv基因组DNA为模板PCR扩增TB10.4基因片段,克隆至pMD-18T载体后转化大肠埃希菌JM109,筛选和鉴定阳性克隆,并进行测序分析.将TB 10.4基因插入原核表达载体pET 28a后转化大肠埃希菌E.coli DH5a,PCR和双酶切鉴定阳性的重组子转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达TB 10.4蛋白.冰浴超声裂解重组菌,His-bindTM柱层析纯化TB10.4蛋白,Western blot分析其反应原性,ELISA评价其诊断结核病的价值. 结果 PCR扩增和克隆获得TB10.4基因片段,大小约300 bp,与GenBank中报道的序列一致.将TB10.4基因片段插入原核表达载体,构建TB10.4蛋白重组表达体系,金属螯合层析获得分子质量单位约为10.4 ku的TB10.4.Western blot证实TB10.4蛋白可被结核患者血清特异识别.以重组TB10.4为抗原采用ELISA诊断结核病的灵敏度为88.5%,特异度为97.3%,阳性预测值93.8%,阴性预测值94.8%,诊断效率94.5%. 结论 成功构建了TB10.4蛋白的重组表达体系,表达的TB10.4蛋白具有反应原性,可用于结核病的免疫诊断.
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TLR4-NOD2协同信号传递增强树突状细胞抗结核分枝杆菌感染的作用研究
目的 研究TRL4-NOD2(T4N2)信号传递增强树突状细胞(dendritic cell,DC)抗结核分枝杆菌(MTB)感染机制,为结核病(tuberculosis,TB)的免疫防治提供参考. 方法 分别用TLR4配体LPS、NOD2配体MDP和T4N2双配体刺激DC后,ELISA法定量检测1h、6h、12 h、24 h和48 h上清液中IL6和IL-12.DC经MTB感染再用LPS、MDP以及T4N2双配体刺激,24 h后分别收集细胞培养并计数细胞内生长的菌落数,判断细菌生长的抑制率. 结果 ELISA显示T4N2双信号刺激DC后,细胞因子IL-6在1h、6h、12 h、24 h和48 h浓度分别为(86.4±0.34) pg/ml、(92.2±0.69)pg/ml、(93.6±0.69)pg/ml、(96.0±1.73) pg/ml和(107.8±4.53) pg/ml;IL-12在1h、6h、12h、24 h和48 h浓度分别为(94.6±4.07) pg/ml、(100.9±4.45) pg/ml、(97.9±2.96) pg/ml、(112.4±9.28) pg/ml和(132.8±1.49)pg/ml.不同时间段T4 N2双信号刺激较LPS、MDP刺激显著增多(P<0.05);T4N2双信号活化的DC对MTB生长抑制率显著增强. 结论 T4N2信号传递能协同增强DC的活化,活化的DC可抑制MTB的生长.
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幽门螺杆菌hp0788基因对GES-1细胞功能影响的初步研究
目的 构建幽门螺杆菌ATCC26695 hp0788基因敲除突变菌株(ATCC26695△0788km),观察hp0788基因对GES1细胞功能的影响. 方法 以基因敲除质粒载体pSJHK构建基因敲除质粒,在hp0788基因的上下游分别扩增800~1100 bp的基因片段作为同源臂,经限制性内切酶酶切后与质粒载体连接构建基因敲除质粒pSJHK-0788,通过电击转化构建hp0788基因敲除突变菌株,以FITC标记法检测其对GES-1细胞黏附能力的影响;以感染复数(MOI)为200∶1构建幽门螺杆菌与GES-1细胞共培养体系,比较ATCC26695和ATCC26695△0788km对GES-1细胞凋亡及活性的影响. 结果 构建了hp0788基因双交换敲除质粒,电击转化获得hp0788基因敲除突变菌株.FITC标记ATCC26695和幽门螺杆菌ATCC26695△0788km与GES-1细胞混匀后采用流式细胞术检测FITC的荧光强度,ATCC26695组的黏附率记为100%,ATCC26695△0788km组黏附率为90.40%,差异均有统计学意义(t=2.80,P<0.05);ATCC26695与ATCC26695△0788km分别与GES-1细胞共培养8h和16h,流式细胞术检测细胞凋亡率分别为(15.73±7.84)%、(25.26士5.81)%和(12.46±12.30)%、(21.13±10.09)%,细胞增殖一毒性检测试剂盒检测细胞活力分别为53%、40%和66%、50%,差异均有统计学意义(t值分别为3.30,2.80,-2.93,-2.76,P<0.05). 结论 hp0788基因敲除幽门螺杆菌ATCC26695对GES-1细胞的黏附率下降,并使GES-1凋亡率下降,而细胞活力增高.表明hp0788基因是影响幽门螺杆菌ATCC26695感染GES-1细胞后引起细胞凋亡和活性变化的重要基因.
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结核分枝杆菌CarD蛋白结构与功能的生物信息学分析
目的 应用生物学信息分析软件预测结核分枝杆菌CarD蛋白的结构和功能. 方法 运用NCBI中Blast工具,将结核分枝杆菌H37Rv carD基因序列与GenBank中相似序列进行核苷酸比对;利用MEGA 6.06软件,采用邻位相连法构建N-J进化树;运用ClustalX 2.1软件,将结核分枝杆菌H37Rv CarD及与其同源性较高的分枝杆菌CarD氨基酸序列进行多重比对分析;登录ExPASy网站,运用ProtParam T具分析CarD蛋白的理化性质,运用ProtScale进行蛋白质疏水性分析,运用SignalP 4.1 Server预测蛋白质信号肽,运用TMHMM Server v.2.0以及TMPred预测蛋白质跨膜螺旋区,运用SOPMA预测蛋白质二级结构,运用SWISS-MODEL进行蛋白质三级结构同源建模;运用NetPhos 3.1 Server预测蛋白质磷酸化位点;运用NCBI中CDD 工具预测CarD蛋白保守结构域. 结果 分枝杆菌carD基因序列相似度为100%,进化关系较近.H37Rv与田鼠分枝杆菌起源于同一物种,同源性较高.CarD分子在进化过程中高度保守,为稳定、亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,蛋白序列中存在4个丝氨酸磷酸化位点,二级结构中以α-螺旋为主,三级结构同源建模成功.CarD蛋白是一种结合RNA聚合酶的转录调控因子,属于CarD/CdnL/TRCF家族. 结论 CarD蛋白为RNA聚合酶结合蛋白,调控转录和控制结核分枝杆菌的生长.该蛋白序列保守稳定,是治疗结核病潜在的新靶标.
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口腔菌群结构动态变化与胃癌发生发展相关性分析
目的 探讨胃癌患者口腔菌群结构动态变化与胃癌的相关性. 方法 采用微生物鉴定芯片技术高通量分析和比较胃癌患者和健康对照受试者唾液中菌群结构动态变化与胃癌发生发展相关性;运用SPSS软件对基因芯片中424种微生物探针信号进行分析;采用dChip软件分析口腔菌群差异,采用MEGA软件制作系统进化树进行多样性分析.结果 与对照组比较,胃癌组患者的唾液中有26种菌群显著减少,差异有统计学意义.其中包括拟杆菌门(Bacteroidetes)5种、变形菌门(Proteobacteria)8种、放线菌门(Actinobacteria)1种、厚壁菌门(Firmicutes)9种、梭杆菌门(Fusobacteria)3种. 结论 胃癌患者口腔菌群发生变化,有显著变化的细菌种类有望做为胃癌检测的生物标志物.
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青海省平安县人体土源性线虫感染监测分析
选取青海省平安县平安镇为监测点,采用改良加藤厚涂片法检查监测点内≥3周岁常住居民土源性线虫感染情况,其中3~12周岁儿童加做透明胶纸肛试法查蛲虫卵.采集10个居民户的菜园、厕所周边、庭院、厨房土样查蛔虫卵.结果表明,监测点内人群蛔虫感染率为5.93%(62/1046),未查出鞭虫、蛲虫感染者.收集10户共40份土壤,其中10份检出人蛔虫卵,阳性率为25.00%.菜园、厕所周边、厨房和庭院土壤人蛔虫卵阳性率分别为5.00%、10.00%、2.50%和7.50%.表明平安县人群感染土源性线虫虫种以蛔虫为主,且主要为轻度感染,儿童是主要感染人群,土壤蛔虫卵污染是造成人体感染的风险因素.
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弓形虫表膜抗原SAG1的研究及应用进展
刚地弓形虫是一种原生动物,被其感染后引起一系列的病理变化和症状.刚地弓形虫表膜抗原SAG1是一类重要的膜蛋白,研究发现其表膜抗原SAG1在制备单克隆抗体、疫苗和临床快速诊断等方面都有着重要的作用.本文主要就弓形虫表膜抗原SAG1的分子生物学信息、SAG1在机体内的免疫应答和应用研究进行综述.
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TgHSP70诱导TLR4信号通路的研究进展
弓形虫热休克蛋白70(Toxoplasmagondii heat shock protein 70)是结构同源性高的一类蛋白,正常情况下体内表达较低,但在弓形虫急性致命感染期呈高度表达.TgHSP70作为TLR4的主要配体,在弓形虫感染以及机体免疫应答和炎症反应中起重要作用,可以通过启动TLR4介导的信号通路,诱导宿主产生一系列免疫应答.因此,本文综述了TgHSP70诱导的TLR4相关信号通路的研究进展,进一步明确TgHSP70在弓形虫病发展过程中的作用及其机制,为弓形虫病的有效防治提供理论参考.
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载体介导的幽门螺杆菌尿素酶疫苗的研制现状
幽门螺杆菌感染可引起胃炎、胃和十二指肠溃疡、胃粘膜相关淋巴瘤以及胃癌等疾病,采用疫苗防治该菌是当前研究的热点领域之一.尿素酶是一种有效的疫苗候选分子,本文综述了鼠伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、根癌农杆菌、脊髓灰质炎病毒、杆状病毒和腺病毒等载体介导的幽门螺杆菌尿素酶疫苗的研制现状.
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2010-2016年唐山市H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析
目的 了解2010-2016年唐山市分离的H3N2亚型流感病毒株血凝素HA基因特征和变异规律. 方法 随机选取2010一2016年唐山市分离的20株H3N2亚流感毒株提取RNA,采用RT-PCR扩增目的片段,测序,采用MEGA 6.0软件构建HA基因核苷酸系统进化树,采用BioEdit v7.2.5软件比较分析其核苷酸序列特征及氨基酸变异情况. 结果 0株病毒HA1区核苷酸和氨基酸同源性分别为92.4%和89.1%.系统进化和序列分析显示,2010-2011流行年度分离的5株病毒分别属于HA基因1和5分支,其中1分支毒株在抗原决定簇发生E50K,I260M,R261Q氨基酸替换,5分支毒株发生D53N、Y94H、I230V和E280A替换;2011-2016流行年度分离的15株H3N2亚型病毒属于3C分支,与疫苗株A/Perth/16/2009比较抗原表位发生S45N、T48I、A198S、N278K和N312S位点突变,并逐年进化为3C.1(2010-2011)、3@2012/13 (2012-2013)、3C.3(2013-2014)、3C.3a (2014-2015)和3C.2a (2015-2016)分支.与相应疫苗株相比,3C.3a和3C.2a分支毒株抗原表位A、B及受体结合部位均发生了氨基酸位点突变,其中3C.2a毒株拥有Q311H(C区)和N171K(D区)位点突变. 结论 2010-2016年唐山市分离株A/H3N2亚型流感病毒发生抗原漂移,未来应关注3C.2a分支流行株的变化.
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1978-2014年青海省果洛州鼠疫流行病学分析
目的 分析1978-2014年果洛藏族自治州鼠疫流行态势,为制定预防控制对策提供科学依据. 方法 采用描述性流行病学方法对1978-2014年青海省果洛州的鼠疫监测报告、鼠疫自然疫源地调查资料和人间鼠疫病例数据库的数据进行分析. 结果 1978-2014年青海省果洛州共分离鼠疫菌14株.动物鼠疫的流行季节为7~10月,流行地区主要在玛多县、玛沁县;果洛州人间鼠疫共发生8起,发病22例,死亡12例,病死率为54.6%,病例中以肺型居多,占59.1%(13/22).人间鼠疫疫情发生在旱獭鼠疫流行高峰期和藏系绵羊鼠疫滞后期. 结论 果洛州鼠疫流行形势严峻,应采取综合性防治对策,做好疫情预报预测,严防人间鼠疫流行.
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牡蛎污染耐药性细菌调查及整合子检测
目的 对水产品牡蛎污染耐药性细菌进行调查,并检测其携带整合子类型,为细菌耐药机制研究提供依据.方法 利用抗性培养基平板筛选牡蛎标本中的耐药性细菌,用K-B法进行药敏试验,PCR法扩增Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型整合酶基因. 结果 34份牡蛎标本分离出76株耐药株,其中超过90%的分离菌对四环素、氨苄西林耐药,诺氟沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、环丙沙星、头孢唑啉和氯霉素耐药>50%,有2株对耐亚胺培南细菌.整合酶基因检测结果显示80.26%耐药细菌携带Ⅰ型整合子,其中6株同时携带Ⅱ型整合子,未检测到Ⅲ型整合子.所有携带整合子的耐药细菌是多重耐药,不携带整合子耐药细菌中多重耐药占60%. 结论 牡蛎污染细菌的耐药性严重,且多重耐药与携带整合子有关,携带整合子细菌更易产生多重耐药,提示整合子可作为食品分离菌的耐药性检测靶标.
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男性泌尿生殖道支原体感染特征及耐药性分析
目的 了解男性泌尿生殖道支原体感染特征及耐药性,为临床治疗提供指导. 方法 收集重庆三峡中心医院、湖北医药学院附属人民医院2014~2015年男科就诊的男性患者临床资料,收集精液、尿液、尿道分泌物、前列腺液标本,对标本进行支原体培养检测及耐药性分析. 结果 2014-2015年共检测男性患者1 712例,支原体感染570例,感染率33.29%;其中2014年734例,感染211例,感染率28.75%;2015年978例,感染359例,感染率36.71%.≤20岁、21岁~、31岁~、≥41岁人群支原体感染率分别为19.39%、26.92%、50.58%和22.70%.31岁~组感染率与≤20岁、21岁~和≥41岁组比较,差异均有统计学意义(x2=73.6888,63.5098,71.3700,P均<0.05).无性伴侣者、有1个、≥2个性伴侣者感染率分别为12.11%(39/322)、28.87%(136/471)和42.98%(395/919);≥2个性伴侣组与无性伴侣组、1个性伴侣组比较,差异均有统计学意义(x2=99.9182,26.2493,P均<0.05).共分离出364株支原体,其中UU191株,MH 75株,UU+MH 98株.2014年分离139株,其中UU 73株,MH 29株,UU+MH 37株;2015年分离225株,其中UU118株,MH 46株,UU+MH 61株.2014年分离的73株和2015年118株UU对TET、ASP、ERY、ROX、DOX、CRA、OFL、MIN、JOX和AZI的耐药率分别为83.56%、36.99%、97.26%、38.36%、8.22%、12.33%、46.58%、16.44%、19.18%、26.03%和79.66%、34.75%、92.37%、40.68%、6.78%、37.29%、55.08%、14.41%、12.71%、38.98%. 结论 男性泌尿生殖道支原体感染者主要集中于21~40岁的性活跃者,性伴侣较多者感染率也较高.2014-2015年男性泌尿生殖道支原体以UU为主,临床治疗中可优先选用交沙霉素、美满霉素及强力霉素等.
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女性尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染情况及预后研究
目的 分析女性尖锐湿疣(CA)患者人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况及基因分型,探讨HPV基因型与CA预后的关系. 方法 临床确诊女性CA初发患者(CA组)230例,采用导流杂交基因芯片技术(HybriMax)进行HPVDNA及基因分型检测.HPV-DNA阳性患者根据HPV基因型分为高危型、低危型和混合型3组,另选健康女性作为对照,分析HPV-DNA阳性CA患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群变化并与健康人进行比较;观察不同HPV基因型CA患者治疗后1、3、6个月的复发情况. 结果 CA患者HPV-DNA阳性率为95.22%(219/230).HPV DNA阳性标本中共检出21种HPV基因型,其中HPV16(7.83%)和HPV6 (29.57%o)分别在高危型和低危型HPV中阳性率高.治疗前不同HPV基因型CA患者的CD3+、CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值均显著低于健康对照组(P<0.05),CD8+T淋巴细胞百分比显著高于健康对照组(P<0.05);治疗后不同HPV基因型CA患者的CD3+、CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值均较治疗前显著升高(P<0.05),CD8+T淋巴细胞百分比显著降低(P<0.05);治疗前后各HPV基因型组间T淋巴细胞亚群百分率差异无统计学意义(P>0.05).高危型患者治疗后3个月和6个月复发率分别为12.17%和15.65%,与低危型组的4.78%、6.52%和混合型组的5.56%、8.26%比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 女性CA患者HPV感染以HPV6、HPV11及HPV16 3种基因型为主,高危型和低危型HPV可单-感染也可混合感染.CA患者细胞免疫功能失调与HPV基因分型无关,但高危型HPV感染患者治疗后复发率更高.
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鲍曼不动杆菌外排泵基因与菌株多药耐药关系的研究
目的 分析鲍曼不动杆菌耐药情况及外排泵基因分布情况,为临床感染治疗及耐药性控制提供指导. 方法 收集本院各科室送检的患者样本,对菌株进行分离培养,经全自动细菌鉴定仪鉴定出鲍曼不动杆菌110株,采用K-B法对菌株耐药性进行分析,用PCR扩增法对菌株外排泵基因分布情况进行检测. 结果 110株鲍曼不动杆菌中分离白ICU 41株,呼吸内科25株,神经外科15株,心脏外科12株,肿瘤科9株以及其他科室8株,分别占37.27%、22.73%、13.64%、10.91%、8.18%和7.27%.各科室鲍曼不动杆菌的分离率分别为40.20%、25.77%、23.81%、21.05%、16.36%、和7.77%.自痰液标本75株,导管标本12株,血液标本8株,尿液标本6株,引流液标本4株,其他标本5株,分别占68.18%、10.91%、7.27%、5.45%、3.64%和4.55%;不同标本的分离率分别为38.66%、15.58%、15.09%、13.04%、9.52%和7.69%.鲍曼不动杆菌对环丙沙星、诺氟沙星、卡那霉素、利福平、四环素、红霉素、亚胺培南和美罗培南等常用抗菌药物的耐药率分别为50.91%、49.09%、63.64%、37.27%、77.27%、81.82%、20.91%和26.36%.adeA基因+adeB基因、adeB基因+adeC基因、adeA基因+adeB基因+adeC基因、mdfA基因+adeA基因+adeB基因+adeC基因、qacE△1基因+adeA基因+adeB基因+adeC基因、mdfA基因+qacE△1基因+adeA基因+adeB基因+adeC基因的检测率分别为1.82%、3.64%、44.55%、25.45%、10.91%和8.18%. 结论 鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,可能与菌株携带外排泵基因有关.
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医院就诊儿童肺炎支原体感染流行病学特征及耐药情况分析
目的 分析医院儿童肺炎支原体感染的流行病学及其耐药性,为临床抗感染防治提供指导. 方法 收集3134例儿童患者静脉血标本,从中分离血清,用呼吸道感染病原体IgM检测试剂盒检验肺炎支原体感染情况,用支原体IST检测药敏试剂盒进行药敏试验. 结果 2014-2016年3 134例医院就诊患儿中946例感染肺炎支原体,阳性率30.19%,其中2014年阳性率23.06%(229/933),2015年33.18%(358/1079),2016年33.80%(359/1062). 2014-2016年的春、夏、秋、冬四季肺炎支原体阳性率分别为26.99%(220/815)、32.91%(257/781)、34.97%(270/772)和25.98%(199/766). 2014年各季肺炎支原体阳性率分别为16.85%、28.00%、27.70%和19.32%,2015年分别为33.08%、35.51%、34.56%和29.43%,2016年分别为31.16%、36.59%、40.77%和27.55%.男性患儿肺炎支原体阳性率为26.00%(513/1973),女性患儿为37.30%(433/1161),女性肺炎支原体阳性率高于男性(x2=44.2433,P<0.05).≤1岁患儿肺炎支原体阳性率为12.11%(192/1585),1~岁为41.33%(348/842),3~岁为52.25%(209/400),5~岁为60.12%(98/163),7~16岁为68.75%(99/144).上呼吸道感染、支气管炎、毛细支气管炎、支气管肺炎、大叶性支气管肺炎、间质性肺炎、哮喘急性发作患儿肺炎支原体阳性率分别为29.39%(82/279)、24.00%(6/25)、19.41%(92/474)、27.32%(513/1878)、76.32%(58/76)、59.18%(29/49)和47.03%(166/353). 2014年分离的肺炎支原体对阿奇霉素、罗红霉素、克拉霉素、螺旋霉素、吉他霉素、克林霉素的耐药率分别为19.21%、17.03%、12.66%、11.35%、1.31%和0.87%,2015年分别为21.51%、17.88%、15.64%、17.88%、1.40%和0.84%,2016年分别为21.73%、17.55%、15.04%、18.38%、1.39%和1.11%. 结论 肺炎支原体在医院就诊患儿中的感染率逐年增高,且随着患儿年龄增长感染率增加明显;大叶性支气管肺炎儿童肺炎支原体感染率高.肺炎支原体对大环内酯类抗生索耐药程度呈升高趋势,尤其是阿奇霉素,临床诊疗中应密切关注耐药性的发生和发展.
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重症颅脑损伤患者呼吸道分泌物病原学监测及其耐药性分析
目的 了解重症颅脑损伤患者呼吸道分泌物病原类型及其耐药情况,为临床抗感染防治提供有效指导. 方法 收集本院2016年1-12月就诊的411例重症颅脑损伤患者的临床资料,分析患者呼吸道分泌物病原学感染情况,用K-B法对各主要病原菌的耐药性进行检测,用PCR扩增法检测金黄色葡萄球菌耐药基因. 结果 从患者呼吸道分泌物中分离出128株病原菌,其中革兰阴性菌68株,革兰阳性菌46株,真菌14株.革兰阴性菌中鲍曼不动杆菌20株,肺炎克雷伯菌14株,铜绿假单胞菌1 2株,大肠埃希菌10株,其他革兰阴性菌12株.革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌17株,表皮葡萄球菌12株,肺炎链球菌9株,其他革兰阳性菌14株.鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢噻肟、亚胺培南、美罗培南、氧氟沙星的耐药率分别为30.00%、20.00%、65.00%、50.00%、0%、10.00%、25.00%,肺炎克雷伯菌耐药率分别为14.29%、14.29%、71.43%、71.43%、0%、0%、50.00%,铜绿假单胞菌耐药率分别为50.00%、41.67%、58.33%、58.33%、16.67%、16.67%、41.67%.金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、环丙沙星、万古霉素、利福平、庆大霉素、氨苄西林的耐药率分别为76.47%、64.71%、52.94%、0%、17.65%、47.06%、58.82%,表皮葡萄球菌耐药率分别为75.00%、16.67%、50.00%、0%、25.00%、50.00%、16.67%,肺炎链球菌耐药率分别为66.67%、22.22%、33.33%、0%、0%、44.44%、0%.17株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为76.47%(13/17),qacA基因检出率为52.94%(9/17),ermB基因检出率为47.06%(8/17),aac(6')/aph(2″)基因检出率为29.41%(5/17).结论 重症颅脑损伤患者呼吸道感染病原菌主要为革兰阴性菌,以鲍曼不动杆菌多;革兰阳性菌感染治疗可优选万古霉素和利福平,革兰阴性菌可优选亚胺培南和美罗培南;金黄色葡萄球菌耐药程度较高,耐药基因携带率也较高.
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基于BasicMed平台的医学免疫学大班制翻转课堂教学模式的探讨
以团队为中心的大班制翻转课堂注重培养学生的自主学习能力、沟通交流能力和团队协作精神.基础医学教学资源共享(BasicMed)平台是教师个性化教学和学生自主学习的有效网络环境和工具.在医学免疫学教学中,构建了依托于BasicMed平台的翻转课堂教学模式,经过不断探索和实践,实现了“学生为主体,教师为引导”的教学模式改革,提高了医学免疫学的教学效果.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |