中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位: 中华人民共和国卫生部
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-5457/R
- 国内刊号: 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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真姬菇菌糠多糖抗HBV和细胞增殖能力的研究
目的 体外观察真姬菇菌糠多糖抗HBV及抗肿瘤能力,并探讨其作用机制. 方法 体外培养HepAD38和HepG2.2.15细胞,加入不同浓度真姬菇菌糠多糖作用72 h后收集上清液,采用CCK8试验检测真姬菇菌糠多糖对He-pAD38和HepG2.2.15细胞的CC50和IC50,采用时间分辨荧光法检测细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg含量;采用CCK8试验检测真姬菇菌糠多糖抗HepAD38、HepG2.2.15、HepG2和Huh7细胞的增殖能力;采用Western blot检测50 μ上g/ml真姬菇菌糠多糖处理HepG2和Huh7细胞凋亡相关蛋白表达情况. 结果 真姬菇菌糠多糖对HepAD38细胞的CC50为198.2 μg/ml,HBsAg的SI值为4.81,HBeAg的SI值为3.87;真姬菇菌糠多糖对HepG2.2.15细胞的CC50为211.5 μg/ml,HBsAg的SI值为5.84,HBeAg的SI值为3.93. 50 μg/ml真姬菇菌糠多糖与拉米夫啶联用对HBVDNA的抑制作用(0.027)强于单用拉米夫啶组(0.72)(P<0.05).50 μg/ml真姬菇菌糠多糖可抑制HepAD38、HepG2.2.15、Huh7和HepG2细胞的增殖,真姬菇菌糠多糖可下调HepG2细胞中的Stat3、p-Stat3和Survivin 3种抗凋亡相关蛋白的表达. 结论 真姬菇菌糠多糖可抑制HBsAg和HBeAg的分泌,增强拉米夫啶的抗HBV DNA功效;并可通过Stat3/Survivin信号途径抑制细胞的增殖.
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6株红树林根际土壤放线菌的分离鉴定及活性测定
目的 分离和鉴定具有抗菌活性的红树林根际土壤放线菌,以期发现具有药用价值的放线菌资源. 方法 采用4种分离培养基以稀释涂布法分离放线菌,对分离自红树林根际土壤放线菌进行形态特征观察、生理、生化和和抗菌活性测定;采用PCR技术测定16S rRNA基因序列,进行比对分析和系统发育分析. 结果 从红树林根际土壤样品中分离出6株典型放线菌,其中BIHK5、BLHK125、BIHK198、BLHK245、BLHK271具有广谱抗菌活性,抑菌圈直径为9~26 mm;根据其形态特征、生理生化和基于16S rRNA系统发育分析,初步鉴定BLHK125、BLHK271为小单孢菌属(同源性分别为99.83%和98.53%),BLHK217为糖单孢菌属(同源性为98.88%),BLHK5、BLHK198、BLHK245为链霉菌属(同源性为99.10%~100.00%). 结论 广西北部湾北仑河口红树林根际土壤放线菌资源丰富,从红树林根际土壤样品中分离的5株放线菌的发酵液浓缩物具有较好的抗菌活性,具有研究价值.
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布鲁氏菌OMP25的表达、纯化、鉴定及多克隆抗体的制备
目的 表达和纯化布鲁氏菌OMP25重组蛋白并制备OMP25多克隆抗体,为建立布鲁氏菌病的诊断方法奠定基础. 方法 采用PCR方法扩增M16羊布鲁氏菌标准菌株的OMP25外膜蛋白基因,连接载体质粒pET-30a(+)并导入受体细胞DH5α中,构建重组PET-30a(+)-OMP25质粒,转化至Rosetta(DE3)菌株,收集表达的蛋白,用Ni2+NTA柱纯化试剂盒进行纯化.用纯化的重组蛋白免疫家兔,制备OMP25多克隆抗体,Western blot检测抗体特异性.结果 成功构建重组质粒PET-30a(+)-OMP25,导入受体细胞Rosetta (DE3),获得重组蛋白,纯化后免疫家兔,制备的OMP25多克隆抗体与OMP25重组蛋白发生特异性反应. 结论 成功构建重组质粒PET-30a(+)-OMP25,表达的重组蛋白具有免疫原性,并制备了高纯度、高效价的多克隆抗体,为布病免疫诊断方法的建立奠定了基础.
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宫颈癌组织中IDO表达与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性研究
目的 探讨宫颈癌组织中IDO表达与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性,为临床治疗提供指导. 方法 收集204例宫颈癌组织标本,PCR法检测宫颈癌患者高危型HPV感染情况,采用免疫组化法检测IDO蛋白表达情况,并分析宫颈癌组织IDO的表达与高危型HPV感染的相关性. 结果 PCR检测宫颈癌患者感染高危型HPV16、HPV18目的片段大小分别为152和471 bp;181例鳞癌患者中176例为高危型HPV感染,166例IDO阳性,相应的感染率和阳性率为97.24%和89.73%;21例腺癌患者中19例为高危型HPV感染,17例ID(O阳性,相应的感染率和阳性率为90.48%和80.95%;2例腺鳞癌患者均为高危型HPV感染且IDO均阳性.204例宫颈癌患者高危型HPV感染率为96.57%(197/204),IDO阳性率为90.69%(185/204).其中183例高危型HPV感染宫颈癌患者IDO阳性,占89.71%;7例高危型HPV阴性宫颈癌患者中IDO阳性2例,占0.98%.通过统计学分析宫颈癌患者IDO表达与高危型HPV感染具有相关性(OR值>1). 结论 宫颈癌患者高危型HPV的感染率与IDO表达率均较高,且两者具有相关性.
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铜绿假单胞菌PA0861突变菌株表达谱检测分析
目的 分析铜绿假单胞菌野生型菌株PAO1及PA0861突变菌株基因表达谱,探讨铜绿假单胞菌中GGDEF-EAL基因PA0861的生物学功能. 方法 以野生型铜绿假单胞菌PAO1及PA0861基因转座子插入失活的突变体菌株为材料,利用结晶紫染色方法进行细菌生物膜的表型分析;利用Microarray技术分析其基因表达谱的变化;采用半定量RT-PCR验证Microarray结果. 结果 PA0861突变株生物膜的合成量在4、8、12h均高于PAO1 (P<0.05),在12h时增加了近1倍;利用Microarray技术筛选出差异表达基因517个,其中319个上调,198个下调.生物分子功能注释和Pathway分类显示这些差异表达基因除涉及代谢过程中基本的物质变化和能量转换外,突变体PA0861中涉及铁载体生物合成基因的表达增高.半定量RT-PCR验结果一致. 结论 铜绿假单胞菌突株PA0861基因表达谱发生改变,其中铁载体生物合成基因高表达,提示c-di-GMP可能通过对铁载体的调控影响细菌生物膜的形成.
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免疫蛋白质组学方法对内脏利什曼病人血清识别主要抗原的鉴定
目的 鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白. 方法 培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-DWestern blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定. 结果 等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现约700个蛋白点,内脏利什曼病人血清识别的主要无鞭毛体抗原蛋白为p微管蛋白、磷酸多糖β-1,3半乳糖基转移酶、PA7为磷酸多糖β-1,3阿拉伯糖基转移酶及延伸因子1等,识别的主要前鞭毛体抗原蛋白为热休克蛋白 70及延伸因子1等. 结论 人内脏利什曼病患者血清能识别多种杜氏利什曼原虫蛋白,有利于筛选抗内脏利什曼病疫苗抗原和新的血清学诊断抗原.
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肺炎链球菌Tpx蛋白的原核表达、纯化及活性分析
目的 原核表达、纯化肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)Tpx蛋白并测定其活性. 方法 利用生物信息学方法分析Tpx蛋白的生物学特性.设计特异性引物,PCR扩增Tpx基因并对进行双酶切,酶切片段连接到表达质粒pET28a.将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),利用IPTG诱导重组Tpx蛋白表达,使用Ni2+亲和层析进行纯化,采用氧化铁二甲酚橙法(FOX)测定其活性. 结果 生物信息学分析Tpx蛋白无信号肽,无跨膜结构域.α-螺旋、延伸主链、β-转角和无规卷曲的含量分别为30%、27.6%、11.6和30.7%.晶体结构在蛋白结构数据库(PDB)中的登陆号为1psq.1.A.PCR扩增Tpx基因片段大小为492 bp,连接到pET28a后获得重组质粒pET28a-Tpx.重组质粒转化DE3后经IPTG诱导表达分子质量单位约为22 ku的重组蛋白,经亲和层析得到高纯度的重组Tpx蛋白,该蛋白能分解H2O2和叔丁基过氧化氢(t-BHP). 结论 成功构建pET28a-Tpx质粒,表达的重组Tpx蛋白具有氧化酶活性,为研究肺炎链球菌的抗氧化机制奠定了实验基础.
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结核分枝杆菌panD蛋白功能预测及生物信息学分析
目的 研究结核分枝杆菌panD(Rv3601c)基因及其编码蛋白的结构和功能,为耐药结核的治疗提供参考依据.方法 运用ClustalX 2.1、MEGA 6.06软件以及ExPASy、NCBI等在线工具分析结核分枝杆菌panD基因信息,同时分析其进化特征、编码蛋白质的理化性质、信号肽、磷酸化位点、结构特点并预测其功能;利用BepiPred 1.0 Server和NetMHCIIpan 3.1 Server预测panD蛋白的B细胞和T细胞抗原表位. 结果 结核分枝杆菌panD基因全长420 bp,不同菌株panD基因序列相似度100%,具有高度同源性,进化关系较近,编码139个氨基酸.panD蛋白不稳定系数为8.72,亲水性平均系数为0.147,为稳定、疏水性蛋白、无跨膜区与信号肽,存在9个磷酸化位点.二级结构中以无规则卷曲为主,结构较疏松.三级结构同源建模成功.该蛋白具有多个潜在的B细胞抗原表位和T细胞抗原表位. 结论 panD蛋白作为脱羧酶,在结核分枝杆菌合成β-丙氨酸过程中具有重要作用.panD蛋白序列保守稳定,具有多个优势抗原表位,是治疗耐药结核的潜在新靶标.
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PIK-75对体外细粒棘球蚴原头节的作用研究
目的 探讨不同浓度PIK-75体外对细粒棘球蚴原头节生长作用及形态学的影响. 方法 将体外培养的细粒棘球蚴原头节分为空白对照组及PIK-75处理组(0.4、0.8、1.2、1.6及2.0 μmol/L),处理后的原头蚴用经0.1%伊红染色,置于倒置显微镜下观察原头节的形态及活力,试验独立重复3次并绘制活力曲线图.用Caspase-3试剂盒检测作用24、48 h后各浓度组原头节体内caspase-3酶活性;使用ELISA试剂盒测定不同浓度PIK-75作用后原头节体内抗氧化酶HO-1及NQO-1的活性变化. 结果 PIK处理组原头节的形态结构发生变化,活力减弱,以2.0tmol/L时组原头节变化更明显,且在第6d时原头节均发生死亡.随着药物浓度的增高,PIK-75对细粒棘球蚴原头节生长的抑制作用越强.0.8 μmol/I PIK-75处理组作用24 h后原头节活性开始下降,在第3d约为67.4%,作用7d后活力为32.1%,空白对照组原头节形态及活力无明显变化.不同浓度PIK-75作用细粒棘球蚴原头节24、48 h后caspase-3酶活性显著高于空白对照组(P<0.05).0.8 μmol/L PIK-75作用原头节2d、5d后,HO-1活性分别为(704.265±5.082) pg/ml和(656.05±0.095) pg/ml,NQO-1活性分别为(2.236±0.018) ng/ml和(1.446土0.026 ng/ml),与空白对照组比较显著降低(P<0.05),且作用5d后的原头节酶活性显著低于作用2d组(P<0.05). 结论 PIK-75能抑制体外细粒棘球蚴原头节的生长,降低抗氧化酶的活性,具体机制有待进一步研究.
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泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性机制研究
目的 探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制. 方法 采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值的差异;比较加入改变细胞壁通透性试剂后,单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼MIC差值问的差异. 结果 (1)与单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC值过表达PafA基因株增加1.03 μg/ml,过表达Dop、Mpa基因株分别降低1.03 μg/ml、0.68 μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.898,P>0.05);过表达Pup基因株异烟肼的MIC值增加8μg/ml,差异有统计学意义(t=2.185,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株异烟肼的MIC值分别降低4.82、4.98、4.99、4.9 μg/ml,差异均有统计学意义(F=35.809,P<0.05).(2)与加入改变细胞壁通透性试剂后单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC差值过表达Pup基因l株增加7.78 μg/ml,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株分别降低4.58、4.73、4.75、4.68 μg/ml,差异均有统计学意义(F=33.598,P<0.05);过表达Dop、Mpa基因株分别降低1μg/ml和0.7μg/ml,过表达PafA基因株增加0.97 μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.935,P>0.05). 结论 结核分枝杆菌泛素样蛋白蛋白酶体系统可能通过调控单耐异烟肼结核分枝杆菌细胞壁的通透性影响其耐药性.
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粉尘螨变应原Der f 2在毕氏酵母中表达及圆二色谱分析
目的 克隆粉尘螨变应原Der f 2编码基因,并构建毕氏酵母表达体系,对表达产物进行圆二色分析. 方法 提取粉尘螨总RNA,根据GenBank中的序列设计并合成简并引物,PT PCR扩增Der f 2全长基因,与pGAPZα-A载体连接后转化至E.coli Top10F,取阳性克隆并测序;将pGAPZα-A-Der f 2用Bln Ⅰ进行线性化,电转化至GS115感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE验证表达产物,用His Trap HP亲和柱纯化重组蛋白Der f2,进行圆二色谱扫描分析. 结果 PCR扩增获得Der f 2编码基因,成功构建表达质粒pGAPZα-A-Der f 2,SDS-PAGE验证表明该质粒在GS115感受态细胞中正常表达,表达产物分子质量单位为14.9 ku,重组蛋白Der f 2纯化后进行圆二色谱数据分析,其二级结构α-螺旋占41.2%,转角占10.3%,β-折叠占26.8%,不规则卷曲占21.7%. 结论 尘螨变应原Der f2在毕氏酵母中成功表达,为该变应原的进一步研究及规模生产和应用奠定了基础.
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美洲钩虫广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂NaKuI3的鉴定及特性研究
目的 原核表达美洲钩虫(Necator americanus)丝氨酸蛋白酶抑制剂NaKuI3,检测其对丝氨酸蛋白酶的抑制活性. 方法 根据美洲钩虫序列(GenBank No.XM_013451492)设计引物,以美洲钩虫成虫cDNA为模板,通过SMART-RACE方法相继分离NaKuI3的3'和5'cDNA末端序列;构建重组表达质粒pET32a sumo/NaKuI3,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并用Ni-NTA亲和纯化和SUMO酶酶切获得rNaKuI3,用发色底物法检测rNaKuI3对丝氨酸蛋白酶的抑制活性. 结果 成功从美洲钩虫中获得了新的Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂-NaKuI3全长cDNA,推测其完整阅读框(ORF)为225 bp,编码74个氨基酸残基组成的多肽,具有19个氨基酸残基组成的信号肽.rNaKuI3对猪胰蛋白酶、人纤溶酶、人中性粒细胞弹性蛋白酶和人蛋白酶3均有较强抑制作用,抑制常数(ki)分别为(16.40±2.08) nmol、(24.39±4.25) nmol、(38.39±3.92)nmol和(89.90±13.91)nmol,对人组织蛋白酶G也具有一定抑制活性,但对牛a-胰糜蛋白酶、猪胰弹性蛋白酶抑制作用较弱. 结论 融合蛋白美洲钩虫NaKuI3获得成功.该多肽对多种丝氨酸蛋白酶有抑制作用,是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制剂,为进一步研究NaKuI3的生理学功能奠定了基础.
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PCR方法检测梅毒螺旋体的临床实验室诊断应用
梅毒是由梅毒螺旋体(Tp)引起的一种慢性、接触性及低死亡率的传染病,目前依然在世界范围内流行.由于检测的成本、假阳性及临床报告时限等原因,使现有方法无法满足临床需要.近年来,PCR技术在临床实验室检测中得以迅速发展和应用,本文就PCR法检测Tp常用特异性鉴别基因、临床标本选择、模板DNA的制备及在临床梅毒诊断中常用的PCR检测技术等进行综述.
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铜绿假单胞菌外膜蛋白Ⅰ(OprⅠ)疫苗的研制现状
铜绿假单胞菌是一种革兰阴性的条件致病菌,是院内感染常见的病原体之一.铜绿假单胞菌具有天然或者获得性的多重耐药性,采用疫苗防治其感染是当前的研究热点.铜绿假单胞菌的外膜蛋白Ⅰ是一种脂蛋白,不但具有良好的免疫原性,而且在不同血清型之间具有交叉保护作用.本文拟就外膜蛋白Ⅰ的特性、重组抗原疫苗、DNA疫苗和重组沙门氏菌疫苗等方面的研究现状进行综述.
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2013-2014年南宁市A(H3N2)亚型流感病毒病原学特征分析
目的 分析南宁市2013-2014年A(H3N2)亚型流感病毒的病原学特征及流行趋势. 方法 通过RT-PCR扩增毒株A(H3N2)病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)并进行同源比对,采用Mega5.1(N-J法)构建系统进化树,统计氨基酸位点的差异,同源建模后分析蛋白结构的变化. 结果 构建系统进化树,20株毒株HA基因与NA基因均分为4个类群,呈多侧支流行;部分毒株的HA蛋白A抗原决定簇144位点及B抗原决定簇156和158位点发生突变,二硫键和糖基化位点高度保守,未发生变化;NA蛋白抗原基本稳定,只有A/Nanning/43/2014(H3N2)毒株抗原决定簇312位点发生突变,二硫键、酶活性位点、糖基化位点及耐药性位点均未发生变化;HA和NA蛋白晶体结构分析显示氨基酸突变位点主要发生在β折叠部位和无规则卷曲处. 结论 南宁市A(H3N2)亚型流感病毒株变异活跃,在HA基因和NA基因进化树上疫苗株明显滞后于南宁市流行株,抗原决定簇位点出现氨基酸的替换,但关于疫苗的预防效果尚需进一步验证.
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2009-2016年临海市手足口病病原学监测结果分析
目的 了解临海市近年手足口病疫情和病毒株流行情况,为该病的预防和控制提供科学指导. 方法 应用荧光定量RT-PCR对临海市2009 2016年采集的手足口病患者和健康密切接触者咽拭子标本进行病原学检测,采用Excel2003和SPSS19.0软件进行数据录入和分析. 结果 共采集咽拭子标本537份,荧光定量RT-PCR检测手足口病病毒299份阳性,总阳性率为55.68%,其中肠道病毒EV71型阳性79份,阳性率14.71%,占所有阳性标本的26.42%;科萨奇Cox A16型56份阳性,阳性率10.43%,占所有阳性标本的18.73%;其他肠道病毒阳性164份,阳性率30.54%,占阳性标本的54.85%. 结论 临海市引起手足口病的病毒以EV71和CoxA16型为常见,重症手足口病病原以EV71为主.因此,掌握手足口病的流行规律和病原学特征,对进行更有效的防控有重要意义.
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海南省46例类鼻疽的流行病学特征与临床分析
目的 分析海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌感染的临床特点及耐药性,为类鼻疽的预防和治疗提供科学依据.方法 收集2000年1月-2012年12月海南省人民医院经培养鉴定的46株类鼻疽伯克霍尔德菌标本的相关资料,分析类鼻疽患者的分布特征、临床表现、病死率、耐药性及治疗效果. 结果 类鼻疽伯克霍尔德菌感染者多分布于省内沿海地区,内陆无或少见,病死率较高(占28.26%);中年发病较多,男、女性患者比例为43∶3;患者通常伴有某些基础性疾病,其中糖尿病患者为32例,占69.57%;临床表现多样,症状以败血症多见(占76.09%);细菌对亚胺培南、美罗培南和哌拉西林/他唑巴坦较敏感,敏感率分别为100.00%、94.59%和91.89%,以亚胺培南为主的综合治疗效果良好.结论 类鼻疽伯克霍尔德菌感染易被误诊和漏诊,医生应该提高类鼻疽疾病识别水平,早期进行细菌培养和药敏试验,并及时选用敏感的抗生素治疗,以提高治愈率.
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鲍曼不动杆菌的耐药监测及rapd基因分型意义研究
目的 分析鲍曼不动杆菌的耐药监测以及rapd基因分型的意义,为合理用药及防控鲍曼不动杆菌院内感染提供参考依据. 方法 选择2014年5月-2016年4月间本院分离自住院患者不同标本的鲍曼不动杆菌620株(均为不重复菌株),采用全自动微生物分析仪(WalkAway-96SI)与纸片扩散法进行菌种鉴定及药敏试验,应用rapd技术对其中58株多重耐药鲍曼不动杆菌进行基因分型. 结果 620株鲍曼不动杆菌耐药情况较重,其中对头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星耐药率分别为20.16%(125/620)和45.81%(284/620),对多粘菌素B均敏感;对其余13种抗菌药物耐药率均>56%.在620株菌株中多重耐药检出率为76.45%(474/620).ICU与非ICU患者感染鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率(22.22%~87.44和16.50%~57.28%)比较差异统计学有意义(P<0.01);rapd技术分出8种类型基因:A-H,其中A型22株,B型12株,C型6株,D型8株,E型4株,F型3株,G型2株,H型l株. 结论 鲍曼不动杆菌的耐药情况较严重,呈逐年上升趋势,且存在多重耐药.rapd基因分型有助于细菌的同源性分析,可为防控院内感染提供依据.
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金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药基因研究
目的 研究金黄色葡萄球菌的临床分布情况及耐药基因检出情况,为菌株感染的防治提供指导. 方法 收集835例2015年医院不同科室的住院患者送检标本,将患者送检标本进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,采用细菌鉴定仪进行菌株鉴定,采用纸片扩散法分析金黄色葡萄球菌的药敏情况,并采用PCR检测耐药基因. 结果 从835例住院患者的临床标本中共分离金黄色葡萄球菌174株,其来源分别为脓液47株,分离率25.54%(47/184);痰液33株分离率21.43%(33/154);血液28株,分离率20.90%(28/134);分泌物21株,分离率18.58%(21/113);尿液19株,分离率19.19%(19/99);引流液12株,分离率16.67%(12/72);以及其他标本来源14株,分离率17.72%(14/79),各标本间金黄色葡萄球菌分离率差异无统计学意义(x2 =4.231,P=0.645).174株金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平和庆大霉素的耐药率分别为14.94%、39.08%、37.93%、59.20%、0.00%、31.03%、0.00%、47.70%、17.82%和45.98%.174株金黄色葡萄球菌mecA、qacA、ermA、ermB、er-mC、aac(6')/aph(2')等耐药基因的阳性检出率分别为21.26%、10.92%、16.09%、35.06%、29.89%和43.10%. 结论 金黄色葡萄球菌广泛分布于医院感染患者脓液标本中,且在抗感染治疗中可以优先考虑使用万古霉素和替考拉宁,但是仍应合理选用;为控制菌株耐药性发生及发展,应及时检测耐药基因携带情况.
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医院儿童肺炎支原体的耐药性变迁分析
目的 分析2015年医院儿童肺炎支原体的耐药性变迁情况,为临床抗感染治疗提供指导. 方法 以1541例2014年1月至2015年12月儿科呼吸道感染患者作为研究对象,收集患者咽拭子标本,液体培养基分离培养肺炎支原体,采用药敏试剂盒检测其耐药情况,检测23S rRNAⅤ区基因位点突变情况,统计学分析采用SPSS软件. 结果 1541例呼吸道感染患者检出肺炎支原体阳性532例,阳性率34.52%,2014年阳性率为29.60%,2015年为39.19%.2014年0岁~组、1岁~组、3岁~组及6~14岁组呼吸道感染患儿肺炎支原体阳性率分别为48.39%、18.89%、24.12%和22.11%,差异有统计学意义(x2=23.9807,P<0.05);2015年各年龄组阳性率分别为59.02%、51.19%、40.10%和24.01%,差异有统计学意义(x2=47.5100,P<0.05). 2014-2015年上呼吸道感染患儿阳性率为49.69%,下呼吸道感染患儿阳性率为27.42%,差异具有统计学意义(x2=73.3757,P<0.05).2014-2015年检出的532株肺炎支原体对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素、螺旋霉素、吉他霉素、克林霉素的耐药率分别为18.23% 、20.11%、14.29%、17.11%、14.47%、1.13%和0.94%.2014年分离的222株肺炎支原体中耐药株数106株,2015年分离的310株肺炎支原体中耐药株数141株.2014年耐药组肺炎支原体23rRNA Ⅴ区基因位点突变率为44.34%,非耐药组突变率为8.62%,差异具有统计学意义(x2=37.0301,P<0.05);2015年耐药组突变率为48.23%,非耐药组突变率为8.89%,差异具有统计学意义(x2=60.7127,P<0.05). 结论 肺炎支原体在<3岁呼吸道感染的儿童患者中分离率较高;肺炎支原体耐药性逐年增加,临床治疗中应合理用药;23rRNAⅤ区基因位点突变与肺炎支原体对大环内酯类抗生素产生耐药性关系密切.
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神经外科患者术后颅脑感染的病原学特点及高危因素分析
目的 分析神经外科患者术后颅脑感染的病原学特点,并对病原菌的临床耐药情况及感染相关因素进行分析,为神经外科患者术后颅脑感染的防控提供科学指导. 方法 收集神经外科术后颅脑感染患者临床资料,从送检脑脊液标本中分离病原菌,采用全自动微生物鉴定仪进行菌株鉴定,采用K-B法分析病原菌的耐药性. 结果 266例神经外科患者中,术后颅内感染80例,感染率30.08%.从80例感染患者脑脊液标本中共分离84株病原菌,其中革兰阳性菌53株,革兰阴性菌29株,真菌2株.革兰阳性菌中,凝固酶阴性葡萄球菌27株,金黄色葡萄球菌12株,粪肠球菌12株,其他4株;革兰阴性菌中,鲍曼不动杆菌16株,肺炎克雷伯菌6株,大肠埃希菌3株,铜绿假单胞菌2株,其他2株.凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对环丙沙星、头孢他啶、头孢曲松、氯霉素和万古霉素的耐药率分别为33.33%、44.44%、40.74%、55.56%、0和33.33%、66.67%、58.33%、66.67%、0;粪肠球菌对环丙沙星、头孢他啶、头孢曲松、氯霉素、莫西沙星、加替沙星的耐药率分别为30.00%、50.00%、40.00%、60.00%、10.00%和10.00%.鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对环丙沙星、头孢他啶、美罗培南、头孢曲松、氯霉素的耐药率分别为37.50%、50.00%、18.75%、43.75%、50.00%和33.33%、50.00%、0、50.00%、33.33%.年龄<60岁患者颅脑感染率为17.80%,≥60岁者为39.86%;有脑室外引流者感染率为47.78%,无脑室外引流者为21.20%;有脑脊液外漏者感染率为45.63%,无脑脊液外漏者为20.25%;术前使用抗生素者感染率为53.27%,术前未使用抗生素者为14.47%;感染率差异均有统计学意义(x2=15.2040,20.2696,19.3411,45.7982,P均<0.05). 结论 在神经外科患者术后颅脑感染的病原学特点分析中,病原菌类型以革兰阳性菌居多,其中又以凝固酶阴性葡萄球菌分离率高,临床应高度重视此类病原菌的传播扩散.鉴于临床分离株的耐药程度,临床应合理选用抗菌药物,高效防治神经外科患者术后颅脑感染发生.神经外科患者年龄、脑室外引流、脑脊液外漏以及术前使用抗生素情况是发生颅脑感染的相关因素,临床应给予这些因素重视,并且对病原菌耐药性分析对治疗患者意义重大.
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黄芩苷对流感病毒PR8感染小鼠内质网应激反应的干预作用
目的 观察黄芩苷(Baicalin)对流感病毒PR8感染小鼠急性肺损伤内质网应激相关蛋白PERK、CHOP、pJNK及Caspase-12表达的影响,探讨其对PR8小鼠感染急性肺损伤的保护作用及机制. 方法 实验分为健康对照组,PR8组,黄芩苷治疗组,黄芩苷预防给药组,利巴韦林治疗对照组.用流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/4(H1N1)建立小鼠流感病毒性肺炎模型后按相应治疗方案进行给药治疗,观察小鼠肺组织病理变化,应用Western blot法检测PERK、CHOP、p-J NK及Caspase-12蛋白水平. 结果 黄芩苷治疗和预防给药肺指数(0.98±0.13、1.25±0.14)较比PR8组(1.42±0.11)明显降低(F-43.850,P<0.01;F=5.750,P<0.05),肺组织病变减轻;黄芩苷治疗和预防给药组各指标相对表达量分别为PERK(1.53±0.09、1.96±0.21)、CHOP(2.10±0.26、2.75±0.12)、pJNK (2.57±0.33、3.42±0.34)及Caspase-12(1.75±0.21、2.44±0.38),与PR8组(2.86±0.23、4.75±0.38、5.02±0.49、3.64±0.36)相比,表达量显著下降(F=135.340,P<0.01;F=74.100,P<0.01). 结论 黄芩苷治疗和预防给药均能缓解甲型流感病毒PR8诱导的小鼠肺炎性病理损伤,通过下调内质网应激反应和抑制组织细胞的凋亡,发挥抗流感病毒感染的作用.
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Xpert MTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌的方法学研究
目的 探讨Xpert MTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的佳实验条件并进行方法学评价. 方法 应用Xpert MTB/RIF检测MBT标准株H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌及20种常见非结核分枝杆菌(NTM)、18种非分枝杆菌病原体和临床分离株,分析Xpert MTB/RIF的敏感性、特异性和重复性,比较不同前处理方法对实验结果的影响,针对仪器出现的报警、错误及无效结果进行相应的处置和总结. 结果 MTB标准菌株H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌Xpert MTB/RIF检测阳性,敏感度为1×102 CFU/ml(在痰标本中的检测极限为106 CFU/ml);20种常见NTM和18种非分枝杆菌病原体检测阴性;标本中含有1%浓度的红细胞、白细胞、血清未对103/ml的H37Rv产生干扰作用;重复试验表明本法批间、批内变异系数均小于15%.100株MTB(其中50株Hain线性探针试验确认存在rpoB基因突变)和20株NTM临床分离株加入阴性临床痰标本制备成为含菌浓度为2×102条/ml的模拟痰标本经Xpert MTB/RIF检测均相符.在SR处理液加入半胱氨酸的改良直接法前处理痰液Xpert MTB/RIF检测出现“错误+无效”的比例显著低于沉淀处理法和直接法前处理的痰标本(x2值分别为4.19和6.74,P<0.01). 结论 Xpert MTB/RIF灵敏、特异、快速、简便,可用于MTB和利福平耐药MTB的快速检测,但仍存在错误和无效检测而影响实验结果,应采取有效措施予以避免.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |