中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位: 中华人民共和国卫生部
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-5457/R
- 国内刊号: 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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噬菌体LH-01治疗不同宿主菌所致小鼠致死性败血症影响因素研究
目的 观察肺炎克雷伯菌噬菌体LH-01治疗不同宿主菌所致小鼠败血症的效果,分析影响疗效因素,探索评价噬菌体疗效的方法. 方法 通过比较噬菌斑和成斑率,从9株LH-01宿主菌中选择对其敏感性较强的菌株.尾静脉注射绝对致死量的不同敏感菌致小鼠败血症,2h后通过尾静脉注射LH-01治疗并观察其疗效.比较LH-01在小鼠新鲜血清、补体热灭活血清,以及在标准补体溶血活性由低至高的溶液中对敏感菌的杀灭能力,明确引起LH-01对不同敏感菌感染组小鼠疗效差异的因素. 结果 9株宿主菌中KP6、KP13、KP16和KP22在营养肉汤中对LH-01为敏感.当小鼠全身感染致死量的这4种细菌后,LH-01的治疗可使KP6感染组小鼠生存率达90%(9/10),KP13组为30%(3/10),而KP16组和KP22组小鼠全部死亡.体外试验显示,除LH-01对KP6的作用不受补体影响外,LH-01对其余3株菌的杀灭作用均受补体影响,其中25 U/ml的补体活性即可完全抑制LH-01对KP16和KP22的杀灭作用,而完全抑制对KP13的杀灭作用所需的补体活性≥50 U/ml. 结论 补体是影响LH-01治疗小鼠肺炎克雷伯菌感染疗效的主要原因.血清中噬菌体对致病菌的杀菌力和补体干扰杀菌的程度有助于预测噬菌体疗效,指导细菌感染的噬菌体治疗.
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幽门螺杆菌多重耐药株hefA基因表达的检测与分析
目的 了解hefA外排基因表达与贵阳市幽门螺杆菌(Hp)多重耐药的关系. 方法 提取耐3种抗生素的多重耐药菌株(10株)、敏感菌株(6株)及质控菌株SS1的基因组DNA,PCR扩增hefA基因片段,PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测后测序,将测序基因片段序列输入NCBI中进行BLAST比对;利用TRIzol试剂提取上述细菌的RNA并逆转录成cDNA,以16 sRNA为内参基因,通过实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测hefA基因和内参基因的CT值,通过比较2-△△CT判断多重耐药菌株和敏感菌株hefA基因表达的差异,以两小样本t检验进行统计学分析. 结果 2%琼脂糖凝胶电泳显示,6株敏感菌和10株多耐药菌及SS1 hefA基因PCR产物均约140 bp,测序显示受试菌hefA基因序列与SS1菌株序列的一致性大于96%;RT-PCR检测hefA外排基因的表达,敏感菌株的2-△△CT为0.895±0.540,多重耐药菌株的2-△△CT为3.387±1.597,差异元统计学意义(t=9.399,P<0.05). 结论 hefA外排基因高表达是贵阳地区Hp多重耐药的机制之一.
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结核分枝杆菌FadD3结构与功能的生物信息学分析
目的 应用生物信息学分析软件预测结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶(FadD3)氨基酸序列的结构与功能.方法 应用生物信息学在线工具NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、Expasy(http://ca.expasy.org/)、SWISS-MODEL(http://swissmodel.expasy.org/)、客户端软件clustalx等进行多重序列比较、同源性分析、同源模建及蛋白功能活性位点分析;应用ProtParam软件(http://web.expasy.org/protparam)预测FadD3基因编码FadD3的蛋白理化性质;采用小值进化法(the Minimum Evolution method)构建分子进化树. 结果 FadD3 (Mt-FACS)与其他物种的脂酰辅酶A合成酶(FACS)含相同的保守序列及催化活性位点,第174-185氨基酸残基是AMP结合部位,也是FadD3的保守区域;第422-497氨基酸残基是FACS与底物(脂酸)结合的部位,亦是结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶的C末端.分子进化分析表明结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶(Mt-FACS)与睾丸酮丛毛单胞菌脂酰辅酶A合成酶(Ct-FACS)的进化关系较近,与黑腹果蝇脂酰辅酶A合成酶(Dm-FACS)的进化关系较远. 结论 生物信息学预测提示FadD3是结核分枝杆菌脂类代谢及耐药性研究的潜在靶蛋白.
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TLR2和TLR4在小鼠生殖道沙眼衣原体感染免疫应答中的应用研究
目的 探讨TLR2和TLR4在小鼠沙眼衣原体生殖道感染免疫应答中的作用. 方法 用沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)1×104 IFUs经生殖道感染野生型小鼠(WT,11只)、TLR2基因缺陷小鼠(TLR2 KO,14只)和TLR4基因缺陷小鼠(TLR4 KO,11只),复制生殖道沙眼衣原体感染模型.于感染后不同时间点取生殖道分泌物,采用免疫荧光法检测衣原体包涵体数量.在感染后第70 d处死小鼠,留取血清,采用免疫荧光法检测抗体类型和效价;无菌分离的脾细胞,用经紫外线灭活的衣原体EB刺激培养72 h,采用ELISA法测定上清液中细胞因子IFN-γ、IL-17、IL-4和IL-5水平.结果 TLR2 KO或TLR4 KO小鼠与WT小鼠在每一个检测时间点生殖道带菌量差异无统计学意义(P>0.05),3组小鼠带菌持续时间相同,截止到感染后第38 d,所有小鼠下生殖道感染的衣原体均被清除..3种基因型小鼠脾细胞均产生高水平的IFN-γ和IL-17,且3组间差异无统计学意义(P>0.05);但IL-4及IL-5水平均降低,且3组间差异元统计学意义(P>0.05).3种基因型小鼠血清IgG2a/IgG1比值均>1,且组间差异无统计学意义(P>0.05).3种基因型小鼠均发展为Th1偏倚的免疫应答. 结论 在沙眼衣原体生殖道感染中,TLR2或TLR4介导的信号通路对控制小鼠下生殖道衣原体感染不是必需的,沙眼衣原体诱导的适应性免疫应答既不依赖于TLR2,也不依赖于TLR4.
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H4N6亚型禽流感病毒分离与氨基酸序列测定
目的 对候鸟类流感病毒进行主要氨基酸位点变化分析和HA、NA遗传进化分析. 方法 在上海自然保护区采集候鸟粪便标本337份,采用PCR检测H4N6核酸;同时将粪便标本接种SPF鸡胚分离病毒;收集72h尿囊液做血凝试验,阳性标本进行全基因测序,并做主要氨基酸位点和遗传进化分析. 结果 共分离出2株流感病毒,经测序鉴定为H4N6亚型,HA裂解位点序列为NIPEKASR/G,且均未发生Q226L、G228S变异;NA序列存在117T、198N、314S等氨基酸变异.遗传进化分析显示2株H4N6亚型分离株HA和NA基因属于欧亚谱系的不同进化分支,亲缘关系较远. 结论 分离自上海自然保护区候鸟粪便的2株H4N6亚型流感病毒均属于低致病性禽流感病毒,奥司他韦类NA抑制剂存在一定耐药性,对其传播风险应予以关注.
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纳豆菌对光滑念珠菌的抗菌活性研究
目的 研究纳豆菌对光滑念珠菌的抑菌活性. 方法 于加血块法的15瓶纳豆滤液(含有纳豆菌)中各接种1株光滑念珠菌,进行混合连续培养,并转种念珠菌显色培养基,观察纳豆菌对光滑念珠菌的抑制作用,同时与传统肉汤法进行抑菌效果比较. 结果 光滑念珠菌在加血块的15瓶纳豆滤液中连续混合培养24、48、72、96和120 h后,分别转种念珠菌显色培养基,观察光滑念珠菌生长情况,其中培养72 h后有5株光滑念珠菌被纳豆菌所抑制;培养96h后15株光滑念珠菌中有14株被纳豆菌所抑制,而肉汤培养仅有2株光滑念珠菌被纳豆菌所抑制. 结论 纳豆菌对光滑念珠菌有抑制作用.与肉汤法比较加血块法纳豆菌的抑菌效果更好.
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亚洲带绦虫囊尾蚴的扫描电镜观察
目的 应用扫描电镜观察亚洲带绦虫囊尾蚴的超微结构. 方法 将亚洲带绦虫囊尾蚴进行清洗,戊二醛和四氧化锇固定,乙醇梯度脱水,乙酸异戊酯置换,CO2临界点干燥后喷金镀膜,用扫描电镜观察超微结构并记录. 结果 亚洲带绦虫囊尾蚴分为头节、颈部和囊体三部分.头节呈四棱台形,侧面观察呈方形,有1个顶突和4个吸盘.吸盘呈洞穴状,表面有皱褶,且布满粗短钝圆的微毛.颈部较短,直径约为头节的一半,中部较窄,因皮肌的收缩出现大量环形邹褶和纵型皱褶,颈部微毛较稀疏,有棘样尖端.囊体呈椭圆形,表面粗糙不平,呈丘陵状起伏.囊部微毛密集、细长,呈刷状或网状,末端可见圆形分泌颗粒. 结论 亚洲带绦虫囊尾蚴具顶突、吸盘、微毛等特有超微结构,这些超微结构与附着、运动和营养吸收等生理功能有密切联系,在生物学中具有重要意义.
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鼠类感染钩端螺旋体的PCR检测和基因序列分析
目的 对宁波地区鼠类携带的钩端螺旋体进行PCR检测并分析其基因序列特征. 方法 设计、合成钩端螺旋体的secY基因和23S rDNA基因引物,对宁波梅山口岸2014年5-12月捕获的鼠类样品进行PCR检测,并进行核苷酸序列测定与系统进化分析. 结果 共检测72只鼠类肾样品,其中5只黑线姬鼠PCR检测阳性,分离获得钩端螺旋体株DXLP 1501,其secY基因扩增片段大小为285 bp,23S rDNA基因扩增片段大小为484 bp.系统进化分析显示,DX-LP1501 23S rDNA基因与博氏螺旋体株L550位于同一分支,遗传距离为0.005;DXLP1501 sec Y基因与5株博氏钩端螺旋体和1株梅氏钩端螺旋体位于同一分支,遗传距离为0.011. 结论 宁波地区鼠类中存在博氏钩端螺旋体感染,流行株DXLP501与致病性国际流行株高度同源.
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黄粉虫养殖盒中孳生酪阳厉螨的生物学特性研究
目的 了解黄粉虫养殖环境中孳生的螨类,不同种螨类间的相互关系及酪阳厉螨的生物学特性. 方法 实验室人工养殖黄粉虫.从养殖盒中采集100份饲料样品,过筛后分成黄粉虫及筛内阻留物和细粒混合物两部分,并进行螨类分离、计数、鉴定和制片;从养殖盒饲料中挑取伯氏嗜木螨和酪阳厉螨成螨若干只,置于放有少量麦胚和黄豆粉的培养皿中饲养,显微镜下观察两种螨间的相互关系及酪阳厉螨的形态特征和食性. 结果 100份标本中检出8种螨,隶属于4科6属,总密度为490只/g饲料.显微镜下观察酪阳厉螨成螨在混合饲料饲养条件下可摄食麦胚、黄粉虫皮壳、死亡的黄粉虫成虫、黄粉虫的蛹和幼虫,同时还捕食伯氏嗜木螨的幼螨和成螨.酪阳厉螨雌螨较大,体长640~740 μm,椭圆形,黄褐色,胸板向后延伸至Ⅲ足基节中央,具刚毛3对,胸后板毛靠近胸后板和孔;生殖板似瓶颈状,具刚毛一对;肛板三角形,具刚毛3条;背板网纹状;气门板游离于腹面两侧后方,气门发达具气门沟,气门沟向上延伸至足Ⅰ基节前方;盾间膜位于肛板和生殖板的两边,有7对刚毛.雄螨较小体长460~570μm,腹面覆以全腹板;胸区具刚毛4对,气门沟板前端与背板愈合,气门沟延伸到足Ⅰ基节中央,螯肢趾无齿,钳齿毛细而长,足Ⅳ膝节具后侧毛2条. 结论 黄粉虫养殖盒中螨类污染严重,优势螨酪阳厉螨与伯氏嗜木螨之间存在一定的相互竞争关系,前者捕食后者.
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结核分枝杆菌早期分泌靶抗原和抗原85B融合蛋白的原核表达及其在血清学检测中的初步应用
目的 原核表达结核分枝杆菌抗原早期分泌抗原靶6 ku蛋白和抗原85B融合蛋白,建立融合抗原对结核病人快速诊断方法. 方法 从结核分枝杆菌H37Rv基因组中PCR扩增ag85B和Rv3875基因并构建表达载体pGEX4T-1上,转化BL21经IPTG诱导表达GST-85B-ESTA-6融合蛋白,对包涵体进行变性和透析复性后进行GST亲和层析纯化,纯化的可溶性目的蛋白用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行鉴定;以融合蛋白为抗原,采用ELISA检测结核病人血清抗体. 结果 成功构建了结核分枝杆菌ag85B和Rv3875融合基因原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21后经诱导产生了高水平的GST-85B-ESTA-6,该蛋白存在于菌体沉淀中,以包涵体形式居多.包涵体经变性、复性后用GST亲和层析纯化,纯化蛋白仍能与结核病患者血清反应,即可用于病人血清抗体检测. 结论 成功构建了pGEX4T-1-ag85B-Rv3875重组质粒,并诱导表达了含有GST-标签的ESAT-6-85B融合蛋白,为进一步研究结核菌的免疫机制奠定了基础.
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刚地弓形虫ROP18基因的克隆及生物信息学分析
目的 对刚地弓形虫RH株的棒状体蛋白18 (TgROP18)基因进行克隆,同时采用生物信息学分析TgROP18蛋白序列. 方法 提取刚地弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgROP18基因(GenBank登陆号为AM075204)的开放阅读框设计引物,采用逆转录PCR (RT-PCR)扩增ROP18基因,并对其产物进行测序;采用在线生物软件预测TgROP18蛋白的结构与功能. 结果 TgROP18基因RT-PCR扩增产物与预期一致,大小为1 665 bp;测序分析显示,ROP18基因序列与GenBank上已发表的序列完全一致.TgROP18蛋白含有554个氨基酸,分子式为C2753H4405N801O811S20,分子质量单位为62.34 ku,理论等电点为9.34;在TgROP18蛋白的二级结构中,α-螺旋、β-折、β-转角、无规则卷曲所占比例分别为41.52%、19.13%、7.76%和31.59%;TgROP18蛋白含有10个亲水性较高的区域(临界值为2.0),28个表面可及性较高的区域(临界值为1.9),10个保守结构区域,7个翻译后修饰位点,21个B细胞抗原表位,21个CTL抗原表位及26个Th抗原表位有. 结论 生物信息学分析表明,TgROP18蛋白具有良好的免疫原性,这将为弓形虫疫苗的研究提供基础资料.
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白细胞介素-38的研究进展
白细胞介素-1F10 (IL-1F10)是IL-1家族中的第10个成员,现称为白细胞介素-38(IL-38).有研究表明白细胞介素-36受体(IL-36R)是IL-38的特异性受体.IL-38基因序列与IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)、IL-36受体拮抗剂(IL-36Ra)基因序列高度同源.IL-38与IL-36 Ra、IL-1 Ra三者具有相似的生物学功能.本文主要对IL-38的分子结构,生物学特性、功能及其相关炎症性疾病作一综述.
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Sm16/Sj16在血吸虫感染宿主皮肤期中的作用
Sm16/Sj16早是从血吸虫的尾蚴分泌物中分离得到一种分泌蛋白,而尾蚴为血吸虫生活史中重要的感染期,Sm16/Sj16的分泌可减轻尾蚴感染宿主时引起的炎症反应.近年对血吸虫Sm16/Sj16分子的研究发现该分子参与下调血吸虫尾蚴感染宿主过程中炎症介质的表达水平,表现出了显著的抗炎作用,因而Sm16/Sj16分子可被制备为抗炎制剂应用于临床疾病的治疗.关于血吸虫Sm16/Sj16分子的文献报道众多,但血吸虫感染皮肤阶段涉及的具体的免疫调节机制至今尚未明确.本文针对血吸虫Sm16/Sj16分子的基因表达、体内外生物学功能的研究进展进行综述.
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狂犬病病毒核蛋白的结构、功能及其应用研究进展
狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后病死率几乎为100%.目前狂犬病尚无有效的治疗方法,及时、准确的诊断以及暴露后狂犬病疫苗的注射是其主要的预防措施.核蛋白是狂犬病病毒重要的功能蛋白,其在疫苗免疫效果的评价中也发挥着重要作用.狂犬病的诊断主要针对核蛋白.本文对核蛋白的基因结构、抗原性、致病性及其应用的研究进展进行了综合评述,从而加深对核蛋白的了解,为狂犬病的快速临床诊断和免疫效果评价提供参考依据,以更好的预防和控制狂犬病.
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云南省中缅边境孟连口岸登革热流行状况调查
目的 了解云南孟连口岸登革热流行状况,为边境登革热防治提供科学依据. 方法 采用酶联免疫法检测孟连口岸及其对应的缅甸居民健康人群血清登革热病毒IgG抗体,采用登革热病毒抗体检测试剂盒检测疑似登革热病人血清IgG和IgM抗体,采用定时、定点方法调查登革热媒介成蚊密度和幼虫指数. 结果 2011年共采集中国居民健康人群血清202份,其中登革热病毒IgG阳性3份,阳性率1.49%;缅甸口岸采集缅甸居民血清113份,登革热病毒IgG阳性13份,阳性率12.62%.2008-2014年在孟连口岸共监测跨境缅甸居民和本国居民疑似登革热病例518人,登革热病毒IgM阳性12例,阳性率为2.32%,均为中国居民到缅甸边境地区伐木或淘金人群;IgG阳性30例,阳性率为5.79%,其中18名为缅甸居民,12名中国居民.共监测孟连口岸本地未有出入缅甸史居民175人,登革热病毒IgM和IgG均为阴性;共捕获8种7 203只蚊虫,其中白纹伊蚊为当地口岸优势蚊种,占捕获蚊虫总数的69.17%,密度高峰期为7月;共监测5 837个容器,阳性容器232个,其中6~10月伊蚊幼虫平均布雷图指数(BD分别为20、29.5、24.5、14.5、9.31,容器指数(CI)分别为4.05、5.46、4.85、3.11、2.46,房屋指数(HI)分别为16.36、19.09、16.82、12.76、7.24,千人指数分别为42.64、63.35、52.63、30.02、19.49;未发现埃及伊蚊成蚊和幼虫. 结论 与孟连县接壤的缅甸边境地区登革热流行程度高,盂连口岸登革热媒介白纹伊蚊种群密度较高,存在登革热疫情隐患,应加强口岸登革热疑似病例和媒介的监测.
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2013年无锡地区诺如病毒腹泻病的监测研究
目的 监测2013年无锡地区诺如病毒腹泻的流行情况及流行株的基因型特征. 方法 2013年1-12月连续采集409份哨点医院急性腹泻病人的粪便标本,采用实时荧光定量RT-PCR检测诺如病毒GⅠ和GⅡ基因组,对部分GⅡ基因组阳性标本经RT-PCR扩增诺如病毒部分衣壳蛋白(VP1)和多聚酶蛋白(RdRp)序列,对核苷酸序列进行基因分型. 结果 2013年采集的急性腹泻病人粪便标本诺如病毒阳性率为9.78% (40/409),其中1月,4~5月份及10~11月份的病人粪便标本诺如病毒阳性率分别为13%、10.26%、17.65%、31.43%和15.15%,均高于月平均阳性率10%.诺如病毒腹泻在5岁以下儿童中发病率高,达到13.40%;其次是19~35岁组,发病率为12.50%.所测35株诺如病毒分为5种基因型,分别为:GⅡ.Pe/GⅡ.4型28株(80.00%)、GⅡ.P12/GⅡ.3型4株(11.43%),GⅡ.P16/GⅡ.13型2株(5.71%),GⅡ.P7/GⅡ.6和GⅡ.16各1株(2.86%). 结论 诺如病毒是无锡地区非细菌性腹泻常见病原体,诺如病毒腹泻全年流行.无锡地区诺如病毒流行株具有多种基因型,并存在不同基因型间重组株,以GⅡ.Pe/GⅡ.4型(Sydney_2 012)为绝对优势流行株.
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云南省景洪市四地溪蟹并殖吸虫感染情况调查
目的 了解云南省景洪市自然生态环境保护良好的地区并殖吸虫第二中间宿主溪蟹的种类及自然感染情况,探明并殖吸虫病的流行与自然疫源地的生态环境关系.同时丰富并殖吸虫或并殖吸虫病方面的流行病学资料,为今后制定并殖吸虫病的防治策略提供科学依据. 方法 从景洪市基诺山、曼赛囡、林宽新寨和补蚌的山涧溪流中采集溪蟹,经分类鉴定后采用组织捣碎过筛水洗沉淀法分离囊蚴,置生物体视镜下检查囊蚴或后尾蚴并分类计数.用常规方法统计不同调查点溪蟹的自然感染率和平均感染度.然后根据囊蚴的大小、囊壁的有无和层数、以及囊内蚴体的形态和排泄囊的特征,初步鉴定并殖吸虫的种属.将经过分类定种的囊蚴或者后尾蚴分别经口饲感染实验终宿主,获取成虫作为虫种的分类鉴定和验证结果. 结果 四地共采集到278只溪蟹,经鉴定均为景洪溪蟹.其中基诺山捕获溪蟹44只,自然感染率36.37%,平均感染度6.31;曼赛囡141只,自然感染率63.12%,平均感染度7.75;林宽新寨70只,自然感染率27.14%,平均感染度6.42;补蚌23只,自然感染率52.17%,平均感染度7.33.四个调查地点并殖吸虫虫种结构复杂,优势虫种为丰宫并殖吸虫. 结论 并殖吸虫在景洪市分布广泛,并殖吸虫病的流行与自然疫源地的生态环境关系密切.
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河北省人感染H7N9流感病例的流行病学调查与病原学分析
目的 调查河北省首例人感染H7N9流感的病毒来源并进行病原学分析,为防控人感染HTN9流感提供科学依据. 方法 采集与患者流行病学相关联的标本,提取RNA,应用Real-time RT-PCR方法检测病毒RNA;一步法RT-PCR扩增HTN9流感病毒基因HA和NA片段,测序并拼接基因组序列.下载GenBank公布的H7N9流感病毒的HA和NA序列,采用Mega 6.0软件对拼接序列进行序列比对并构建进化树,分析分离株H7N9与标本中检出的H7N9病毒序列同源性. 结果 河北省首例人感染H7N9流感病例于2013年7月20日确诊,患者发病前曾暴露与活禽市场.采集22份流行病相关标本,其中1份污水标本经检测甲型流感与H7亚型和N9亚型阳性,其余21份标本阴性.通过基因扩增测序,对其血凝素和神经氨酸酶基因进行比对和进化树构建,结果显示来源于病例和污水标本病毒的血凝素基因核苷酸和氨基酸同源性为100%,血凝素基因发生G186V和Q226L突变;神经氨酸酶基因核苷酸同源性为99.9%,氨基酸同源性为100%,未发生R292K突变.进化树显示二者亲缘关系近. 结论 河北省首例H7N9流感病例的感染可能与活禽市场环境暴露有关.该病例感染的病毒HA和NA基因与国内流行的H7N9流感病毒高度同源.
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手术室感染危险因素分析及护理干预措施
目的 探讨手术室感染的危险因素,实行相应的护理干预措施,以求降低手术室感染率. 方法 调查分析医院存在的手术室感染的危险因素并采取相应的干预措施,6个月后比较干预前后半年内手术切口感染率,并对手术切口感染的分布、病原菌检出情况及手术切口类型与感染的关系进行调查. 结果 2013年3月-2014年3月在手术患者2 123例,干预前对照组1 038例,干预后观察组1 085例,干预前感染率为14.93%(155/1038),干预后感染率为7.37%(86/1085),干预前后感染率差异有统计学意义(x2=25.877,P<0.01).<60岁患者术后切口感染率8.65%(119/1376),≥60岁患者术后切口感染率16.33%(122/747),差异有统计学意义(x2=28.405,P<0.01);术后切口感染率高的科室为普外科(16.23%),其次是肝胆外科(13.41%)和胸外科(10.28%);共送检标本883份,检出病原菌270株,检出率为30.58%;检出铜绿假单胞菌检出多(57株,占21.11%),其次是大肠埃希菌(55株,占20.37%)和金黄色葡萄球菌(41株,占15.19%).Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类切口感染率分别为2.05%、13.10%和28.62%,Ⅲ类切口感染率高;Ⅱ类切口感染占所有感染例数的60.17%(145/241). 结论 分析手术室感染原因并进行干预可有效降低术后切口感染率,干预效果显著.
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唐山地区医院儿科患者感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因检测及耐药性分析
目的 检测医院儿科患者感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)耐药基因,并分析其分布情况及与耐药性的关系,为抗MRCNS感染治疗及耐药性控制提供指导. 方法 收集儿科住院患者相关临床标本,分离MRC-NS,经鉴定后进行耐药性分析;制作DNA模板液并设计引物,采用PCR扩增耐药基因,分析其分布情况. 结果 共分离出116株耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌,药敏试验显示分离株MRCNS对青霉素、头孢唑林、头孢曲松、红霉素、四环素、庆大霉素、妥布霉素的耐药率分别为94.84%、89.66%、74.13%、86.21%、40.52%、69.82%和82.76%;PCR扩增mecA基因大小为393 bp,ermA基因为610 bp,ermB基因为142 bp,ermC基因为520 bp,tetM基因为501 bp,shy基因为786 bp,oxa基因为822 bp、aac(6')/aph(2")基因为220 bp、aph(3')-Ⅲ基因为292 bp,ant(6')-Ⅰ基因为597 bp,阳性率分别为97.41%、46.55%、37.93%、29.31%、79.31%、4.31%、4.31%、78.45%、42.24%和25.00%. 结论 医院儿科患者感染MRCNS携带耐药基因与耐药性关系密切,多数菌株对氨基糖苷类、四环素类、红霉素类以及β-内酰胺类抗菌药物都产生了不同程度的耐药性.
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结核分枝杆菌的病原学检测及耐药性分析
目的 探讨结核分枝杆菌的病原学检测及耐药情况. 方法 回顾性分析2009年1月-2013年12月在本院作痰涂片检查的20 054例患者临床资料,对2012-2013年确诊的160例结核患者作痰涂片抗酸染色检查、结核菌素(PPD)试验和结核抗体试验,并对阳性标本做异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)药敏试验.结果 2009-2013年作痰涂片检查标本结核分枝杆菌的阳性率分别为11.3%、10.1%、8.9%、8.3%、7.7%,呈逐步下降的趋势(x2 =37.396,P<0.05),合计阳性率为9.2%(1839/20054).其中阳性结果以(+)为主(占59.7%),男女比例约为1.7∶1(1 161/678),好发年龄为25~54岁(男女分别占60.9%和60.5%).与PPD试验(79.4%、47.8%)和结核抗体试验(76.9%、83.3%)相比,痰涂片抗酸染色的灵敏度(28.1%)较低(P<0.05),但特异度(100%)较高(P<0.05).99株分离菌中有86株为多耐药菌株,其中耐HR 30株(占34.9%),耐HRS 18株(占20.9%),耐HRE 10株(占11.6%),耐HRSE 28株(占32.6%),其好发年龄为25~54岁,占58.2%. 结论 痰涂片检查是特异性较强的肺结核诊断方法,联合血清学方法用于诊断肺结核有重要的临床意义.本组资料中痰涂片结核分枝杆菌阳性率逐年下降,但耐药率和多耐药率增高,应加强预防管理工作.
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肝癌术后医院感染嗜麦芽寡养单胞菌的耐药性检测及耐药基因分布
目的 分析肝癌术后患者医院感染嗜麦芽寡养单胞菌耐药性及耐药基因分布,为有效防治嗜麦芽寡养单胞菌医院感染发生提供参考. 方法 收集1 253例肝癌患者术后痰液、咽拭子等标本,分离嗜麦芽寡养单胞菌,经鉴定后采用K-B法进行耐药性分析.制备细菌的PCR模板液,并设计和合成引物,采用PCR扩增耐药基因,分析耐药基因分布情况. 结果 肝癌患者术后感染共分离出173株嗜麦芽寡养单胞菌,且主要来自于痰液、腹腔引流液及咽拭子标本.药敏结果显示,分离株嗜麦芽寡养单胞菌对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、头孢吡肟、头孢曲松、亚胺培南、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶的耐药率分别为95.36%、89.60%、85.55%、87.86%、88.44%、63.01%和74.57%.PCR扩增嗜麦芽寡养单胞菌,且aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ、L1、L2、sul1、sul2的7种耐药基因大小分别为237、178、320、780、900、581和657 bp,其中在庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星耐药株中检测到aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅱ和ant(2")-Ⅰ基因,在头孢毗肟、头孢曲松耐药株中检测到L1和L2基因,在磺胺甲恶唑/甲氧苄啶耐药株中均检测到sul1基因sul2基因,在亚胺培南嗜麦芽寡养单胞菌耐药株中检测到L1、L2、aac(6')-Ⅱ和sul1基因,可能是产生了多药耐药株. 结论 肝癌患者术后医院感染嗜麦芽寡养单胞菌对多种抗菌药物耐药,其耐药性的产生与携带相应耐药基因相关.
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骨科患者感染大肠埃希菌parC基因突变与耐药性研究
目的 分析骨科患者感染大肠埃希菌的耐药性及其parC基因突变情况,了解其耐药机制,为临床合理选用抗生素提供参考. 方法 分离骨科患者感染大肠埃希菌,采用琼脂平板稀释法进行耐药性测定;采用煮沸法提取细菌DNA,对parC基因进行PCR扩增及测序分析. 结果 采用K-B法测定60株大肠埃希菌临床分离株对环丙沙星、头孢噻肟、加替沙星、头孢他啶、四环素、阿米卡星的耐药率分别为76.67%、71.67%、65.00%、60.00%、15.00%和5.00%.PCR扩增大肠埃希菌parC基因,大小为524 bp;测序显示,耐药株大肠埃希菌parC基因的80位TCG突变为TTG,84位GAG突变为AAG. 结论 骨科患者感染大肠埃希菌对常用抗生素普遍耐药,parC基因的突变与大肠埃希菌的耐药性有关.四环素和阿米卡星可作为治疗骨科患者大肠埃希菌感染的首选药物.
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医学微生物学特色教育研究与实践
医学微生物学教学中,根据知识内容的特点,系统地进行“引用实例、联系实际、拓展视野、追踪进展、塑造精神、培养思想”的特色教育.这种教育模式理念上是课本知识与课外知识呼应、智商与情商并重、德育与智育兼修.方法上是在系统讲授基本知识、基本技能和基本方法的基础上,通过引用实例、联系实际、旁征博引、溯源中外等方法,使学生加深理解、强化掌握、开阔视野、增长见识,同时进行精神塑造和思想培养,培养学生的爱国、敬业、创新及奉献精神,从而达到既传道授业解惑、又育人育德育才的目标.
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论医学微生物学各部分内容特点及教学对策
本文针对医学微生物学绪论、总论及各论的内容特点,提出了相应的教学对策.绪论采用图片欣赏、设问以及讲故事教学法,重在激发学生学习兴趣,端正学生学习态度;总论重在讲清概念,通过归纳总结、绘制概念图,培养学生相关性思维;各论采用与生活、与临床、与学科前沿相结合的“三结合”教学法,促进学生知识迁移能力的培养;课后利用QQ交流平台进行辅导,巩固教学效果.教学实践表明,针对不同的教学内容,选择合适的教学方法有利于提高课堂教学效果.
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