中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位: 中华人民共和国卫生部
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-5457/R
- 国内刊号: 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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克雷伯菌属噬菌体LH-01的生物学特性及其对败血症小鼠疗效的初步研究
目的 自地下生活污水中分离肺炎克雷伯菌的噬菌体,明确其生物学特性,观察其对小鼠多重耐药肺炎克雷伯菌所致败血症的疗效. 方法 电镜观察LH/01形态,调查其噬菌谱、生长曲线等生物学特性.建立小鼠败血症感染模型,观察LH-01的疗效. 结果 LH-01在其宿主菌的菌苔上形成毒性噬菌体所具有的完全透明的噬菌斑,电镜观察LH-01具典型的有尾噬菌体目短尾病毒科病毒的形态特征.一步生长曲线显示LH-01的潜伏期约为10 min,裂解量约为100 PFU/细胞.稳定性试验显示LH-01在pH 5~10及50 ℃和60℃环境均具良好稳定性.LH-01治疗克雷伯菌感染败血症小鼠的存活率为90%,对照组存活率为0,差异有统计学意义(P<0.001),且无毒副作用. 结论 LH-01具有高效的裂菌活性和高稳定性,治疗克雷伯菌感染小鼠败血症有效且安全,有望成为生物抗菌剂,其有效成分有待进一步研究.
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旋毛虫在小鼠中繁殖力指数的比较和分析
目的 比较、分析旋毛虫8个种和4个基因型在小鼠中的繁殖力指数的差异,为旋毛虫虫种鉴定提供重要的实验数据. 方法 以BALB/c小鼠为动物模型,分别感染12个旋毛虫国际标准虫株,感染40 d后剖杀,采用镜检和消化法收集肌幼虫,镜下观察幼虫形态并计算各虫株的繁殖能力指数(RCI)和每克肌肉幼虫数(LPG);采用统计学方法比较和分析旋毛虫不同种及基因型在小鼠中RCI值的差异. 结果 镜下观察8个种及4个基因型虫体形态存在明显差异,有包囊的旋毛虫虫株很容易观察到包囊,而无包囊的旋毛虫虫株则观察不到明显的包囊;在膈肌中大多数呈卷曲式,少数呈伸展条状;消化后各种肌幼虫的形态也有所不同,包括卷曲程度、活动状况、虫体大小等;用消化液原液计数所得出的RCI值与文献报道值存有偏差;首次获得T8和T9的RCI值,分别是43.8±7.98和125.6±11.22. 结论 已知旋毛虫12个国际标准虫株在小鼠中的RCI数值不同,可供旋毛虫虫种鉴定参考.
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体外诱导阿莫西林耐药株幽门螺杆菌PBP1突变位点检测
目的 分析幽门螺杆菌(Hp)阿莫西林耐药的相关分子机制. 方法 将Hp接种在含阿莫西林Karmali平板连续传代,诱导阿莫西林敏感菌株Hp 26695产生耐药性,获得耐药株.PCR扩增5种青霉素结合蛋白(PBPs,PBP1~PBP5),2种Hop孔蛋白(HopB和HopC)和1个外排泵蛋白(HefA)的编码基因,分析耐药菌株与敏感株Hp 26695之间的基因差异. 结果 获得4株阿莫西林耐药菌株,其中小抑菌浓度(MIC)为0.5和2 mg/L各1株,MIC为4mg/L 2株;对PCR扩增的基因片段进行测序和比对分析在4个耐药株的PBP1中共检出3个突变位点,2个替代突变(T438M,T593K)和1个插入突变(594G+),突变导致的氨基酸变化均位于所有耐药株PBP1的C端转肽酶结构域中.T593K和594G+是新发现的突变位点.594G+突变株的MIC为2.0 mg/L.T438M和T593K突变增加了594G+突变株的耐药强度,594G+合并T438M或T593K突变株的MIC提高到4.0 mg/L. 结论 在体外诱导的阿莫西林耐药株Hp PBP1中检测到3个突变位点,其中2个为新发现突变,Hp对阿莫西林耐药可能与PBP1的上述突变有关,但需要进一步试验验证.
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猪囊尾蚴膜联蛋白基因的原核表达和免疫学分析
目的 对猪囊尾蚴AF239799-1膜联蛋白基因进行高效原核表达,对表达产物进行免疫学分析. 方法 通过DNA自动合成仪,用固相亚磷酸酰胺法合成一段5'端有Nde Ⅰ内切酶位点,3'端有Xho Ⅰ内切酶位点的猪囊尾蚴AF239799-1基因序列,并将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,经测序、PCR及双酶切鉴定后,将其转入到宿主菌E.coli BL21 (DE3)中,用IPTG诱导表达,表达产物采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化,纯化的重组蛋白用Western blot进行免疫学分析. 结果 该基因全长为1 250 bp,编码区为2~1 042 bp,编码346个氨基酸,理论分子质量、等电点分别为40.39 ku和6.80.经DNA测序、PCR及双酶切鉴定,pET28a(+)-AF239799-1重组质粒构建成功.重组质粒在E.coli BL21 (DE3)主要以包涵体形式表达,Westernblot显示重组蛋白可被猪带绦虫病猪血清识别. 结论 猪囊尾蚴AF239799-1基因可在原核表达系统中高效表达,表达产物具有免疫反应性.
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河北地区皮肤病住院患者金黄色葡萄球菌耐药基因检测
目的 调查河北地区皮肤病住院患者感染金黄色葡萄球菌耐药基因、毒力基因分布情况,为医院感染控制以及流行病学研究提供参考. 方法 收集分离自皮肤病患者的金黄色葡萄球菌60株,通过PCR法检测耐药基因;扩增产物纯化后测序,进行同源性比对. 结果 耐药基因检测显示,60株金黄色葡萄球菌中43株携带各种不同类型的耐药基因,占菌株数的71.7%.其中mecA、ermA、qacA基因只在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中检出,而以ermC、aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ基因的检出率较高;携带ermB基因的全部为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,而未检测到ant(4'4")基因.毒力基因检测显示,pvl基因携带率为6.7%,且全部为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌;sea基因的检出率为33.3%,sec1基因携带率为15.0%,sed基因携带率为11.7%,seb基因携带率为5.0%,未检出tst基因.基因大小分别为:ermA基因420 bp,ermB基因360 bp,ermC基因570 bp,mecA基因160 bp,qacA基因630 bp,aph(3')-Ⅲ基因260bp,aac(6')/aph(2")基因220 bp,sea基因340 bp,seb基因285 bp,sec1基因325 bp,sed基因450 bp,pvl基因430 bp.PCR产物测序后登陆GenBank数据库比对,mecA、aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、seb、sed基因的同源性均为100%,qa-cA、ermA、ermB、ermC、pvl、sea、sec1基因的同源性均为99%. 结论 皮肤病患者感染的金黄色葡萄球菌耐药基因和毒力基因携带率较高,可供耐药机制与毒力研究及其感染治疗参考.
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肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞IL-9、PU.1及IRF-4 mRNA表达水平的研究
目的 探讨辅助性T细胞9(Th9)相关细胞因子IL-9及转录因子PU.1和IRF-4 mRNA在肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞中的表达及其作用. 方法 2012年10月-2014年3月新疆医科大学第一附属医院收治的肝脏泡型包虫病患者(AE组)14例,健康志愿者(HC组)14例,应用实时荧光定量PCR法检测两组受试者外周血单个核细胞中IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA的相对表达量,数据分析采用非参数秩和检验两独立样本比较法(MW法),用Spearman线性相关性检验分析细胞因子和转录因子之间的相关关系. 结果 肝泡型包虫病组和健康对照组受试者外周血单个核细胞IL-9 mRNA相对表达量分别为2.44911(IQR:0.69268-5.70628)和0.00316(IQR:0.0198-0.00815),差异有统计学意义(P=0.000);PU.1 mRNA相对表达量分别为313.105(IQR:94.80556-548.13140)和0.77147(IQR:0.28829-1.59077),差异有统计学意义(P=0.009);IRF-4 mRNA相对表达量分别为0.04126(IQR:0.01957-0.08204)和21.58347(IQR:8.95431-52.31027),差异有统计学意义(P=0.000),单个核细胞中IL-9 mRNA水平与PU.1 mRNA呈正相关(r=0.8228,P-0.000),与IRF-4 mRNA也呈正相关(r=0.9332,P=0.000). 结论 Th9细胞功能性细胞因子IL-9以及转录因子PU.1和IRF-4参与泡型包虫病发生发展过程,其表达水平上调有利于虫体继续寄生于宿主体内,同时可能与形成泡型包虫慢性肉芽肿有关.
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细粒棘球绦虫AgB5抗原表位的生物信息学预测
目的 应用计算机在线预测软件分析细粒棘球绦虫AgB5抗原蛋白的二级结构,预测其可能形成的B细胞表位和T细胞表位,为研制安全、高效的新型包虫病基因疫苗奠定基础,也为包虫病的免疫学治疗提供新的理论依据.方法 采用计算机在线预测软件SOPMA对细粒棘球绦虫AgB5抗原蛋白的二级结构进行预测和分析;采用LEPS和ABC Pred网络软件结合其表面特性、亲水性、柔韧性、可及性、可塑性等对其B细胞表位进行预测和分析;采用IEBD和SYFPEITHI在线软件对细粒棘球绦虫AgB5抗原蛋白的MHC-Ⅰ类HLA-A 0201限制性T细胞表位进行预测和分析.结果 采用计算机在线预测软件预测细粒棘球绦虫AgB5抗原蛋白的二级结构中α螺旋结构占76.47%,β-折叠占5.88%,无规则卷曲占17.65%.结合其表面特性、亲水性、柔韧性、可及性以及可塑性等分析得出分值较高的3个B细胞表位区域,分别为:6~14、28~33和48~52氨基酸序列,较易形成B细胞表位;通过MHC-Ⅰ类HLA-A 0201限制性T细胞表位分析得出分值较高的4个T细胞表位区域,分别为:9~13、24~29、38~45和51~59氨基酸序列,较易形成T细胞表位. 结论 通过生物信息网络技术方法分析确定细粒棘球绦虫AgB5抗原蛋白分别存在3个B细胞抗原表位和4个T细胞抗原表位,可为细粒棘球绦虫AgB抗原性研究和高效表位疫苗研发提供参考,为临床包虫病的免疫诊断、药物治疗提供新的靶标.
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结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Pup-蛋白酶体系统Pup基因、Mpa基因、Dop基因和PafA基因缺失突变株的构建
目的 利用SOE-PCR技术和T载体技术,快速构建结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Pup-蛋白酶体系统Pup基因、Mpa基因、Dop基因和PafA基因缺失突变株,为进一步研究结核分枝杆菌Pup-蛋白酶体系统的功能奠定基础. 方法 基于同源重组原理,利用SOE-PCR技术和T载体技术分别将各待缺失基因的上下游同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建各基因缺失突变盒;将各基因缺失突变盒与T-Vector pMD 19 (Simple)相连接,构建各基因缺失突变自杀载体;利用电穿孔技术将各载体转入H37Rv菌株,通过筛选阳性克隆、菌落PCR鉴定、DNA测序及遗传稳定性检测,获得各目的基因的缺失突变株. 结果 成功构建了带有1 601 bp的特异性置换片段Pup-N-K和1 591 bp的特异性置换片段K-Pup-C的Pup基因缺失突变株H37Rv△Pup,带有1 604 bp的特异性置换片段Mpa-N-K和1 602bp的特异性置换片段K-Mpa-C的Mpa基因缺失突变株H37Rv△Mpa,带有1 515 bp的特异性置换片段Dop-N-K和1509 bp的特异性置换片段K-Dop-C的Dop基因缺失突变株H37Rv△Dop及带有1 590 bp的特异性置换片段PafA-N-K和1 584 bp的特异性置换片段K-PafA-C的PafA基因缺失突变株H37Rv△PafA,且各突变株均具有良好的遗传稳定性. 结论 利用SOE-PCR技术和T载体技术可以快速构建结核分枝杆菌基因缺失突变株,依据此方法成功构建了H37Rv菌株Pup-蛋白酶体系统Pup基因、Mpa基因、Dop基因和PafA基因缺失突变株,为进一步研究结核分枝杆菌Pup-蛋白酶体系统的功能奠定了基础.
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犬贾第鞭毛虫PDI-4基因的表达及定位
目的 克隆、表达二硫键异构酶4基因,并研究其在犬贾第鞭毛虫滋养体中的定位. 方法 根据GenBank登陆的贾第鞭毛虫二硫键异构酶4基因(gPDI-4)(登录号XM_001710176)序列,通过分析序列,设计合成一对gPDI-4引物.以犬贾第鞭毛虫滋养体总RNA为模板,采用反转录PCR的方法扩增PDI-4基因并克隆至pMD-18 T载体,构建pMD-gPDI-4载体,再把目的基因亚克隆至pET-28a载体,构建表达载体pET-gPDI-4,转化人大肠埃希菌表达菌DE3中,经IPTG诱导后用SDS-PAGE分析表达情况.同时用组氨酸(His)结合树脂柱纯化PDI-4蛋白.用纯化的PDI-4蛋白免疫小鼠,之后收集血清作为一抗,通过免疫荧光法检测PDI-4在贾第鞭毛虫滋养体中的定位. 结果 反转录PCR(RT-PCR)扩增出大小为1 065 bp的PDI-4基因,构建的pET-gPDI-4能高效表达gPDI-4蛋白,SDS-PAGE显示表达蛋白分子质量为36 ku.免疫荧光试验显示贾第鞭毛虫PDI-4蛋白除定位于细胞表面、内质网和腹部吸盘外,主要存在于腹部鞭毛. 结论 成功克隆、表达了犬贾第鞭毛虫PDI-4基因,并确定其主要在腹鞭毛表达.
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日本血吸虫蛋白磷酸酶PP2C-1的原核表达及活性分析
目的 构建日本血吸虫PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析. 方法 从日本血吸虫基因组数据库中找到一个可能编码PP2C-1蛋白磷酸酶的基因Sj-PP2C-1,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区与pET28a表达载体连接后转化大肠埃希菌并用IPTG诱导表达,对表达产物的磷酸酶活性进行分析. 结果 成功构建了Sj-PP2C-1蛋白磷酸酶表达载体,其编码区能够在大肠埃希菌中表达分子质量单位为40 ku的目的蛋白;采用V2460系统进行检测,Sj-PP2C-1具有PP2C磷酸酶活性. 结论 Sj-PP2C-1基因原核表达产物具有蛋白磷酸酶活性,为研究PP2C类蛋白磷酸酶的功能打下了基础.
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肺炎链球菌重组蛋白LytA体外抗菌效应探讨
目的 构建肺炎链球菌(ATCC49619)自溶素lytA基因的原核表达载体,并在大肠埃希菌表达系统中表达,获取LytA重组蛋白(rLytA),初步探讨其体外抗菌效应. 方法 根据GenBank中的肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列(FN549899.1)设计合成特异性引物,采用PCR技术从肺炎链球菌ATCC49619标准株基因组中扩增lytA基因序列,分别构建克隆载体PGM-T/lytA和表达载体pET32a(+)/lytA,将pET32a(+)/lytA转化至感受态细胞E coli BL21(DE3),经IPTG诱导后用透析袋等电点洗脱技术纯化目的蛋白rLytA;采用微量肉汤稀释法测定rLytA和青霉素G对肺炎链球菌及其青霉素G耐药株的低抑菌浓度(MIC),动态测定肺炎链球菌及其耐药株对rLytA和青霉素G的药物敏感性,评价rLytA的体外抗菌活性. 结果 成功构建了原核表达载体pET32a(+)/lytA,获得的rLytA对肺炎链球菌标准株和青霉素G耐药株的MIC分别为8μg/ml和16 μg/ml;以rLytA对标准株及耐药株MIC的3倍浓度,分别作用于标准株及耐药株,与未加药物的对照组相比,rLytA作用于标准株3h后细菌数显著减少(P<0.05),且效果持续至7 h(P<0.05);对青霉素G耐药株作用3h时显示具有抑菌效果(P<0.01),且抑菌作用持续至7 h(P<0.01). 结论 一定浓度的rLytA对肺炎链球菌标准株和耐药株均显示出抑菌作用,且持续时间长,具有作为抗菌药物的可能性.
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中东呼吸综合征冠状病毒半巢式PCR检测方法的建立
目的 建立特异、灵敏的半巢式PCR方法以期用于检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV). 方法 根据MERS-CoV N蛋白基因设计并合成特异性内侧、外侧引物.通过条件优化,建立MERS-CoV半巢式PCR检测体系,扩增产物测序后与目的序列进行同源比对.以10倍系列稀释重组质粒为标准品,与普通PCR反应进行比较,检测半巢式PCR方法的灵敏度.以其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因为对照,检测半巢式PCR方法的特异性. 结果 使用建立的半巢式PCR方法扩增的特异片段与GenBank中发表的MERS-CoV基因序列同源性为100%;半巢式PCR检测方法的灵敏度为1.17×101拷贝,比普通一轮PCR扩增的灵敏度(1.17×10 5拷贝)提高了104倍;用该方法检测MERS-CoV基因为阳性,其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性. 结论 建立的MERS-CoV半巢式PCR方法具有良好的准确性、灵敏性和特异性,为MERS-CoV感染的诊断提供了一种新的、可靠的检测手段.
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人外周血单个核细胞与肝细胞Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达
目的 检测人外周血单个核细胞(PBMC)与肝细胞Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达情况,探讨HBV感染PBMC的可能途径,研究乙型肝炎病毒(HBV)感染PBMC机制. 方法 用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,用TRIzol提取人外周血单个核细胞与肝细胞总RNA,经逆转录合成cDNA.设计合成一对针对NTCP-mRNA的特异性引物,对人外周血单个核细胞及肝细胞的cDNA进行PCR扩增,扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,以检测NTCP基因在两种细胞的表达情况. 结果 RT-PCR电泳显示,用NTCP基因特异性引物对肝细胞cDNA扩增,扩增产物大小在200~300 bp之间,与NTCP基因理论值(246 bp)相符,即肝细胞NTCP基因表达阳性;人外周血单个核细胞的cDNA扩增后进行电泳鉴定,未出现特异性条带,即NTCP基因表达阴性. 结论 人外周血单个核细胞不表达NTCP基因,提示其表面的HBV受体可能并非NTCP,或HBV循非受体途径进入PBMC,关于HBV感染PBMC的具体机制尚需进一步研究.
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过继转移日本血吸虫感染鼠CD8α-DC抑制OVA诱导的过敏性哮喘研究
目的 探讨日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum,SJ)感染鼠树突状细胞(Dendritic cell, DC)亚型对过敏性哮喘的抑制作用及其机制. 方法 采用MACS方法从SJ感染鼠脾脏中提取CD8α+ DC (SJCD8α+ DC)和CD8αDC(SJCD8dDC),分别过继转移给BALB/c小鼠,并用OVA诱发哮喘(SJCD8α+组和SJCD8α-组),以正常组(Normal组)和单纯诱发哮喘组(Asthma组)作为对照.取各组小鼠肺组织作石蜡切片,HE染色后观察肺组织病理变化.采用qRT-PCR检测SJCD8α+ DC和SJCD8α DC中IL-12和IL-10 mRNA水平,以正常鼠CD8α+ DC(NCD8α+ DC)和正常鼠CD8α-DC(NCD8α-DC)作为对照.用ELISA方法检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和脾细胞培养上清中IL-10水平. 结果 肺组织病理学检查显示DC过继转移组过敏性哮喘被抑制,其中SJCD8α-组的抑制效果强于SJCD8α+组.SJCD8α-DC IL-10 mRNA表达水平高于SJCD8α+ DC(P<0.05).并且,SJCD8α-组的BALF和脾细胞培养上清中IL-10蛋白表达水平明显高于SJCD8α+组(P<0.01,P<0.01).SJCD8α-DC和SJCD8α+ DC的IL-10 mRNA水平分别为1.73±0.24和1.03±0.03 (GAPDH%).SJCD8α组和SJCD8α+组的BALFIL-10蛋白水平分别为411.21±6.38 pg/ml和202.88±25.30 pg/ml,两组的脾细胞培养上清中IL-10蛋白水平分别为841.53±7.75 pg/ml和254.16±21.46 pg/ml. 结论 过继转移SJCD8α-DC可能通过高表达IL-10抑制OVA诱导的过敏性哮喘.
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11例新型隐球菌性脑膜炎临床资料分析
对11例新型隐球菌性脑膜炎患者的临床资料进行了回顾性分析.11例新型隐球菌脑膜炎患者均否认有鸽及鸽粪接触史,但从事种植及养殖业且免疫功能正常的患者占54.5%(8/11);1次墨汁染色涂片检查新型隐球菌阳性率为63.6%(7/11),2次检查阳性率合计为90.9%(10/11),3次检查阳性率合计为1oo%(11/11).随着免疫功能正常的新型隐球菌性脑膜炎患者逐渐增多,详细询问患者的一般资料包括职业、病史及接触史对新型隐球菌性脑膜炎的早期诊断具有一定帮助作用,对疑似患者应多次进行脑脊液墨汁染色检查以提高新型隐球菌的检出率.
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太原市孕妇弓形虫感染现况调查
在山西省煤炭中心医院妇产科采集产前检查孕妇血清标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清弓形虫IgG抗体.共调查466名孕妇,血清弓形虫IgG抗体阳性率为5.58%(26/466);不同年龄和职业孕妇弓形虫抗体阳性差异无统计学意义(x2年龄=0.097,x2商业=6.309,P>0.05);随文化程度的增高,弓形虫抗体阳性率逐渐降低(x2=10.964,P<0.01);有动物接触史的孕妇弓形虫IgG抗体阳性率25.93%,无接触史的孕妇弓形虫IgG抗体阳性率为4.33%,差异有统计学意义(x2 =22.522,P<0.01);有不良孕产史的孕妇弓形虫IgG抗体阳性率为28.57%,无不良孕产史孕妇阳性率为4.11%,差异有统计学意义(Fisher's Exact Test,P<0.01).太原市孕妇弓形虫感染率较高,喂养宠物是弓形虫感染的重要因素.同时,弓形虫感染也是导致不良孕产结局的重要原因.应采取健康教育、早期检查及治疗等综合性预防控制弓形虫感染措施,提高生育质量.
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面部蠕形螨病治疗研究进展
人体蠕形螨是寄生于人体毛囊和皮脂腺的一种永久性寄生螨,主要寄生在人体面部,引起面部蠕形螨病,必须采用相应的除螨措施才能有效治疗面部蠕形螨.本文对目前面部蠕形螨治疗采用的化学药物、天然药物和其他综合疗法以及除螨护肤品的研究进展予以综述,以期为面部蠕形螨病的治疗提供参考.
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结核新疫苗研究进展
结核病是由结核分枝杆菌(MTB)引起的一种人畜共患传染病.近年来随着结核分枝杆菌多重耐药性菌株(MDR)的增多和艾滋病的流行,结核病死灰复燃,如何有效控制和预防结核病的发生显得尤为重要.卡介苗(BCG)仍是目前人类普遍使用的抗结核疫苗,但其免疫预防效果不甚理想,因此研究新型结核疫苗迫在眉睫,本文就近年来抗结核新疫苗研究的新进展作一综述.
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蜱传疾病实验检测方法研究进展
蜱是多种人畜共患传染病的重要传播媒介.由于近些年蜱传疾病有增加的趋势,一系列新的蜱媒传染病相继出现,蜱及蜱传疾病再次成为关注的焦点.本文综述了莱姆病(Lyme disease,LD)、森林脑炎(Tick-borne encephalitis,TBE)、人类粒细胞无形体病(Human Granulocytic Anaplasmosis,HGA)、Q热(Q fever)和斑点热(spotted fever)的检测方法,包括聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),巢式PCR(nested PCR)和荧光定量PCR(RT-PCR).
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生物信息学技术在病原生物学中的应用
随着信息技术的飞速发展,生物信息学技术已经广泛运用于病原生物学研究的各个领域,本文概述了生物信息学在病原生物的鉴定、致病机制、疾病诊断、药物研究和疫苗研发方面的应用.
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呼吸道感染患者肺炎克雷伯菌gyrA基因和parC基因突变情况及其耐药机制分析
目的 通过药敏试验探究肺炎克雷伯菌的耐药情况,分析其gyrA基因和parC基因突变与其耐药性的相关性,进而为呼吸道感染肺炎克雷伯菌的临床治疗提供指导. 方法 从呼吸道感染患者体内分离肺炎克雷伯菌并进行鉴定,然后测定其对各种抗生素的耐药情况,并通过基因测序研究gyrA基因和parC基因的突变情况与其耐药性关系.结果 药敏试验结果显示,肺炎克雷伯菌对诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、加雷沙星、加替沙星和莫西沙星的耐药率分别为45.65%、39.13%、30.43、27.17%、i3.30%、14.13%和10.87%.通过PCR方法成功地对gyrA和parC基因进行了扩增,并从电泳图得出gyrA基因分子量大小为449 bp、parC基因分子量大小为319 bp.通过基因测序比对发现,gyrA基因的83位、87位和parC基因的80位、91位都有不同类型的突变,这些突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关. 结论 gyrA基因和parC基因突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关,但是若要彻底解决其耐药性问题,应从源头卜控制抗生素的合理选用,从而更好地指导呼吸道感染的临床治疗.
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2011-2013年河北地区医院烧伤患者铜绿假单胞菌耐药株oprD基因突变分析
目的 分析铜绿假单胞菌oprD基因突变情况及其与耐药性的关系,以指导烧伤患者感染的临床治疗. 方法 采用体外药敏试验分析铜绿假单胞菌的耐药情况,然后进行oprD基因的PCR扩增,采用双脱氧链末端终止法对其进行测序分析. 结果 药敏试验中头孢噻肟、氨苄西林、头孢唑林对铜绿假单胞菌的抑菌圈直径均为6 mm,即该菌对上述抗生素均具有耐药性.头孢哌酮、哌拉西林、头孢吡肟、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星对铜绿假单胞菌的抑菌环直径范围分另为6~22 mm、6~20 mm、6~20 mm,6~28 mm,6~22mm和6~32mm,即该菌对这6种抗生素产生了不同程度的耐药.美罗培南大抑菌直径为28 mm,环丙沙星为32 mm,可优先用于治疗烧伤患者铜绿假单胞菌感染.通过PCR扩增oprD基因,其大小为1 340 bp;采用双脱氧链终止法对铜绿假单胞菌菌株oprD基因测序,在279位发生C→G的碱基替换,302位发生T→C的碱基替换,334位发生A→G的碱基替换,350位发生T→C的碱基替换,380位发生A→G的突变. 结论 oprD基因缺失或其基因片段上的碱基替换引起的基因突变与铜绿假单胞菌的耐药性密切相关,可供烧伤患者感染的临床治疗及抗生素使用提供指导.
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矢量化在人体寄生虫学CAI课件中的应用
人体寄生虫学属形态学范畴,是病原生物学重要组成部分,也是临床医学和预防医学的基础课程.目前,在大多数院校,教学时数已逐渐减少,且学生普遍对该课程不重视.矢量化应用于人体寄生虫学CAI课件中,不仅能引起学生对该课程的兴趣与重视,而且能很好的解决课时减少的问题.作者结合人体寄生虫学的专业特点,尝试使用矢量化方法,研制出一套能动起来的、有趣的、可修改、可控速的人体寄生虫学多媒体课件.经教学实践,该课件的教学效果得到了广大学生和教师的认可,通过介绍矢量化在课件中的应用,旨在总结经验、交流体会,以期能广泛的应用于教学,进一步促进教学水平的提高.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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