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中国病原生物学

中国病原生物学杂志

Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지

北大核心期刊
  • 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
  • 主办单位: 中华人民共和国卫生部
  • 影响因子: 1.21
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-5457/R
  • 国内刊号: 王利磊
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: cjpd@vip.163.com
  • 曾用名: 中国寄生虫病防治杂志
  • 创刊时间: 1988
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华预防医学会;山东省寄生虫病防治研究所
  • 出版地区: 山东
  • 主编: 中国病原生物学杂志编辑委员会
  • 类 别: 感染性疾病及传染病
期刊荣誉:
  • 多肽富集方法比较及应用于日本血吸虫感染早期诊断的研究

    作者:黄玉政;熊春蓉;张英;许永良;姚韵怡;陶永辉;徐明;陶建平

    目的 筛选较好的血清多肽富集方法与优诊断模型,为开发替代性血清蛋白富集试剂盒奠定基础. 方法 建立日本血吸虫急性感染小鼠模型,利用分别包被有C3、C8、弱阳离子、螯合铜离子的磁珠富集纯化血清多肽,在m/z0.8~1.6 ku区段应用基质辅助激光解吸电离时间飞行质谱(MALDI-TOF-MS)考察多肽峰数量与质量,结合ClinProTool建立诊断模型,盲测考察不同模型的检测效果. 结果 在m/z 0.8~16 ku范围的多肽指纹图谱中,弱阳离子富集肽数量多,组内均值为208个,螯合铜离子的多肽峰信噪比佳达460.02,均显著高于C3与C8组(P<0.05);在实验条件下盲测,螯合铜离子富集的多肽峰应用于ClinProTool建立的诊断模型检测日本血吸虫感染的敏感性与准确率高. 结论 ClinProTool诊断准确性与多肽峰信噪比正相关;具有疏水作用的弱阳离子与螯合铜离子更易富集血清多肽,且血清肽谱峰质量较好,可为开发相应试剂提供参考.

  • 弓形虫抑制神经干细胞向神经元分化的研究

    作者:甘小凤;张贤;程正阳;沈继龙;罗庆礼;余莉

    目的 探讨弓形虫排泄分泌抗原(ESA)对神经干细胞分化的影响. 方法 分别用含5%马血清、10%胎牛血清DMEM完全培养液,无血清DMEM培养液及含2%N2的DMEM/F12培养液培养诱导神经于细胞系C17.2分化,分别于诱导分化后1、3、5d收集细胞,提取RNA,采用RT-PCR检测神经元标志蛋白βⅢ-tubulin基因的转录;用含ESA的2% N2 DMEM/F12培养液培养C17.2细胞5d,收集细胞,提取总蛋白,采用Western blot检测βⅢ-tubulin蛋白水平.结果 用含2%N2的DMEM/F12培养液培养5d,C17.2细胞βⅢ-tubulin基因转录水平为3.93±0.13,另两组分别为(0.08±0.34)%和0,差异有统计学意义(P<0.05);2%N2诱导分化后5d,弓形虫ESA能显著降低βⅢ-tubulin蛋白水平(P<0.05). 结论 弓形虫ESA能抑制C17.2神经干细胞向神经元分化.

  • 大肠埃希菌多耐药与生物被膜相关性分析

    作者:余玥;刘鑫;王晓燕;杨颖丞;唐小平;黄永茂;陈枫

    目的 探讨细菌耐药程度与细菌生物被膜(BBF)之间的相关性. 方法 收集临床分离的大肠埃希菌药物敏感株29株,单耐药菌株21株,多耐药菌株60株,采用银染法,以“+”作为BBF量化指标,激光共聚焦显微镜层扫BBF厚度,每个视野扫描8~32层,求平均值.同时采用扫描电镜观察BBF生长情况. 结果 银染结果药物敏感组“-”有5株、“+”15株、“2+”8株、“3+”1株;单耐药菌株组“-”有3株、“+”6株、“2+”10株、“3+”1株、“4+”1株;多耐药菌株组“-”有1株、“+”7株、“2+”15株、“3+”16株、“4+”21株;多耐药组BBF高于药物敏感组和单耐药组(x2=15.545,P<0.05)差异有统计学意义.激光共聚焦显微镜层扫多耐药组BBF厚度为(47.97±9.53)μm,药物敏感组和单耐药组分别为(25.91士5.84)μm和(31.84±4.91)μm,多耐药组与药物敏感组和单耐药组比较差异有统计学意义(F=48.70,P<0.05).扫描电镜观察BBF生长,药物敏感组细菌多为杆状生长.多耐药菌株组细菌之间黏液样物质明显增多,细菌相互包裹成块状,47株有大块状.单耐药菌株组中有2株大块状. 结论 多耐药大肠埃希菌BBF量或厚度高于单耐药及药物敏感大肠埃希菌,表明BBF与大肠埃希菌多耐药有关.

  • 缺失TC7L-TK2L基因减毒天坛株痘苗病毒构建及筛选

    作者:李一权;阚式绂;胡宁宁;姜爽;陈智飞;周晔;李霄;孙丽丽;金宁一

    目的 通过敲除天坛株痘苗病毒(Vaccinia virus Tiantan strain,VTT)的复制非必需基因TC7L-TK2L,并结合双标记筛选及外源筛选标记敲除技术构建TC7L-TK2L基因缺失的VTT弱毒株rVTT-TC7L--TK2L-. 方法 人工合成含有痘病毒早晚期复合强启动子pE/L和外源筛选标记增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)的重组臂,构建穿梭质粒pTC7L-TK2L-EGFP,再与VTT共转染BHK-21细胞,通过连续筛选10次,获得含有筛选标记的重组痘苗病毒rVTT-TC7L-TK2L--EGFP+;利用Cre/loxp系统敲除EGFP,连续筛选10次,获得无筛选标记的重组痘苗病毒rVTT-TC7L--TK2L-,用PCR方法对rVTT-TC7L--TK2L-进行鉴定和遗传稳定性检测,用电镜观察病毒形态变化,并通过绘制生长曲线观察病毒在细胞内的复制情况. 结果 PCR结果表明,成功构建了重组痘苗病毒rVTT-TC7L-TK2L-,且具有良好的遗传稳定性;电镜观察痘苗病毒缺失TC7L-TK2L基因未影响病毒形态;生长曲线显示敲除TC7L-TK2L基因后病毒毒力显著下降,但不影响病毒的正常复制. 结论 成功构建了痘苗病毒减毒株rVTT-TC7L--TK2L-,该重组痘苗具有良好的遗传稳定性且毒力减弱.

  • 柯萨奇B5型病毒安徽分离株的鉴定及VP1区基因特征分析

    作者:史永林;张永根;胡万富

    目的 了解手足口病相关病原CVB5病毒安徽分离株VP1基因遗传进化特征. 方法 用RD和Hep-2两种细胞对采集的手足口病临床病例咽拭子标本进行病毒分离,出现CPE后培养物上清,采用微量中和试验鉴定毒株血清型;抽提病毒RNA,用RT-PCR扩增VP1基因,对扩增产物进行基因序列测定,采用ClustalX2.0和Mega5.0生物软件对测序结果与国内外参考毒株进行基因亲缘性进化分析. 结果 2株毒株微量中和试验鉴定为CVB5,基因测序显示VP1区核苷酸长度均为891 bp,其核苷酸和氨基酸序列同源性均为100%;基因进化分析显示,安徽分离株与山东、河南和浙江分离毒株亲缘性较近,处于同一进化分支Clade Ⅰ,核苷酸同源性为92.56%~98.94%,氨基酸同源性为92.93%~100%;与国外参考株及CVB5的原型株(Faulkner/)比对,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为78.89%~83.84%和96.81%~98.59%. 结论 分离到的2株病毒均为肠道病毒CVB5,其VP1区基因和氨基酸序列变异较小,与国内流行参考株同源性高.

  • 阴道毛滴虫全虫抗原的制备及其免疫原性鉴定

    作者:许少莉;杨森;王黎;薛长贵

    目的 制备阴道毛滴虫全虫抗原并用其免疫家兔,观察其免疫原性. 方法 将阴道毛滴虫临床分离株接种于TYM培养基进行连续培养,达到纯培养后制成全虫抗原,经背部皮下多点注射免疫家兔,间隔2周加强免疫(共2次),末次免疫后7d采血,分离血清,采用ELISA检测抗体效价,达标后采集、分离并纯化免疫血清,采用Western blot 和间接免疫荧光法检测其免疫原性. 结果 阴道毛滴虫在连续培养3代后即达到纯培养,SDS-PAGE显示提取的全虫抗原蛋白带分布在10~150 ku之间,其中30~70 ku之间的蛋白带为密集.ELISA检测显示阴道毛滴虫全虫抗原注射家兔后引起较强的免疫反应,产生的抗体滴度>1∶1×106;Western blot检测共有15种全虫抗原蛋白组分可被免疫兔血清识别,免疫荧光染色显示阴道毛滴虫虫体可与全虫抗原免疫兔血清发生免疫反应,呈现红色荧光. 结论 阴道毛滴虫全虫抗原具有良好的免疫原性,用该抗原免疫家兔可获得较高滴度的抗血清.

  • H9N2亚型AIV HA蛋白第226位点氨基酸多样性分析及3株病毒受体结合能力检测

    作者:王爱荣;桑晓宇;高晓龙;李元果;张坤;于志君;王铁成;杨松涛;夏咸柱

    目的 了解目前我国家禽业中流行的H9N2亚型AIV的HA蛋白第226位氨基酸残基的多样性,并用固相糖链ELISA方法检测实验室保存的3株H9N2亚型AIV病毒的受体结合能力. 方法 从NCBI数据库中下载我国分离的H9N2流感病毒的HA氨基酸序列,对其第226位(参照H3亚型HA位点)氨基酸残基的种类进行统计分析,并利用固相糖链ELISA方法对3株H9N2亚型AIV的受体结合能力进行检测. 结果 与H9N2流感病毒受体结合能力相关的HA226位点已呈现出多样性,分别为HAL226、HAQ226、HAM226和HAF226,其占有比率分别为81.85%、17.57%、4.81%和0.11%;进一步统计分析表明,我国近几年分离的H9N2流感病毒以HAL226为主.受体结合能力检测显示,CK/JN/3(HAL226)只具有结合人样受体的能力,CK/JL/06 (HAQ226)只具有结合禽样受体的能力,而CK/JN/2(HAF226)则具有双受体结合特性,其中与人样受体结合能力稍高. 结论 当前我国家禽中流行的H9N2亚型AIV中以具有HAL226位点特征的毒株占优势,而这一位点特征与病毒结合人样受体有关.因此,H9N2亚型AIV具有突破种间屏障并引发新的流感大流行的潜在威胁.

  • 宫颈癌患者人巨细胞病毒临床分离株基因序列遗传变异分析

    作者:陈华;郭桂兰

    目的 通过对宫颈癌患者人巨细胞病毒(HCMV)临床分离株基因序列遗传变异分析,了解其与宫颈癌之间的相关性,从而为宫颈癌发病机制研究提供理论依据. 方法 从宫颈癌患者的细胞标本中分离HCMV,对其基因进行全长序列PCR扩增,并进行同源性比较. 结果 PCR扩增HCMV基因全长序列分别为568、347、1 472、466和732 bp;测序分析5个基因的突变均由碱基替换所引起,并且UL83基因第18、231位氨基酸的突变位点都是具有诱导CTL抗原决定簇反应能力的表位区,而UL32,UL44,UL137和UL145基因序列具有高度保守性,初步推测UL83基因CTL表位突变情况可能与宫颈癌患者HCMV感染有关联;同源性比较显示,HCMV基因与HCMV AD169株、Merlin株、Towne株同源性为97%~100%. 结论 UL83基因的突变可能是导致HCMV感染的主要原因,且其第18、231位氨基酸的突变位点都是具有诱导CTL抗原决定簇反应能力的表位区,因此认为UL83基因CTL表位突变可能与宫颈癌患者HCMV感染有关联.

  • 群组PCR策略高通量筛选疟疾患者的可行性研究

    作者:李雨春;王善青;胡锡敏;王光泽;陈军虎;黄芳;陈云钰;蒙锋;蔡鹏

    目的 探讨群组PCR策略高通量筛选不同密度疟原虫的敏感性和特异性,以期用于消除疟疾后的疟疾病例监测. 方法 采用2种敏感的PCR方法分别对8个不同密度梯度疟原虫下单个标本组,5个标本群组,25个标本群组,50个标本群组,100个群组进行敏感性和特异性检测,并对8个梯度密度疟原虫进行显微镜检查和免疫学诊断. 结果 群组PCR检测疟原虫的敏感性随着原虫密度梯度的下降和群组大小的增加呈现下降趋势.5个样品群组和25个样品群组均可对低密度疟原虫进行检测,采用核糖体基因检测法(18S SSu RNA基因)比细胞色素B基因(CYTB)的敏感度高,低可检测到0.8 p/μl疟原虫DNA;5个样品群组检测的敏感性高于25个样品群组. 结论 在敏感性和特异性一定的情况下,群组PCR可对低密度疟原虫感染者进行高通量筛选,较逐一筛选节省大量费用,适合于在消除疟疾阶段对疟疾病例进行监测.

  • 去氢骆驼蓬碱抗细粒棘球蚴原头节作用研究

    作者:李红玲;赵军;马运芳;高惠静;吕国栋;阮洁;王建华

    目的 研究去氢骆驼蓬碱在体外及小鼠体内抗细粒棘球蚴原头节的作用. 方法 通过体外药物干预试验检测去氢骆驼蓬碱(Harmine)体外杀原头蚴效果,并以去氢骆驼蓬碱对原头蚴的半数致死浓度(LC50)与传统抗包虫药物阿苯达唑(Albendazole,ABZ)相比较,评价去氢骆驼蓬碱体外抗细粒棘球蚴原头节活性;通过昆明白小鼠腹腔注射细粒棘球蚴原头节制备包虫病动物模型,观察10.0、5.0、2.5 mg/kg体重去氢骆驼蓬碱连续给药14 d对包虫病小鼠的囊湿重、抑囊率及囊泡和肝脏组织结构的影响. 结果 去氢骆驼蓬碱在体外可抑制原头蚴生长,LC50为(44.11±1.32)μg/ml;去氢骆驼蓬碱2.5、5.0、10.0 mg/kg体重均可抑制包虫病小鼠体内囊泡的生长,抑囊率分别为64.59%、68.38%和72.43%,且能破坏囊泡的生发层结构和抑制肝脏的炎症. 结论 去氢骆驼蓬碱对体内外细粒棘球原头蚴均有较强的抑制作用.

  • 龙岩市手足口病病原体柯萨奇B5病毒基因特征分析

    作者:廖琳虹;何云;陈前进;曹春远;吴水新;张彦锋;何春荣

    目的 了解龙岩市手足口病病原体柯萨奇B5病毒(Coxsackie virus B5,CVB5) VP1区基因特征及变异情况.方法 对2011年采自确诊手足口病患者的Real-time RT-PCR法检测肠道病毒通用引物阳性而肠道病毒71型(enterovirus 71,EV 71)和柯萨奇病毒A16型(Coxsackie virus A 16,CVA16)阴性未分型样品,经RD细胞分离肠道病毒.从培养上清中提取RNA核酸,经RT-PCR法初步鉴定病毒型别.应用187/222引物对扩增病毒株的VP1区,回收产物经克隆、筛选后测序.采用ClustalX、Mega5.0进行核苷酸及氨基酸序列同源性分析和进化树构建. 结果 104份未分型样品中分离到3株CVB5.3株CVB5分离株VP1区长度为330~357个核苷酸,编码110~119个氨基酸.3株间的核苷酸同源性为97%~99%,氨基酸同源性为84%~99%.比较推导的氨基酸序列,FJLY2011126h株VP1与另外2株龙岩分离株相比有18个位点差异,核苷酸序列287~288位发生插入突变,第290、291、338、339位发生颠换,与2010年长春株JN695051的同源性高(核苷酸同源性95%~98%,氨基酸同源性84%~99%). 结论 2011年福建省龙岩市手足口病患者中存在CVB5感染,病毒与2005年法国株和国内山东、长春、昆明、浙江病毒株属同一型别.

  • 应用pET32a(+)载体表达尘螨变应原Der f 3及其产物IgE反应性鉴定

    作者:崔玉宝;周鹰;王楠;俞黎黎;卞勇华;杨李;张承伯

    目的 获得粉尘螨变应原第3组分Der f 3原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE反应性. 方法 酶切质粒pET28a(+)-Der f 3获得目的基因Der f 3,将其与pET32a载体连接成质粒pET32 a (+)-Der f3,转化BL21细菌,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni+离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot和质谱鉴定纯化产物.以纯化产物为包被抗原,采用间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体反应情况. 结果 成功构建了原核表达质粒pET32 a(+)-Der f 3.将该质粒转化E.coli BL21诱导表达,亲和层析纯化后经SDS-PAGE鉴定获得目的蛋白,Western blot验证该蛋白的能够与载体的组氨酸标签结合,质谱鉴定其结构与天然Der f 3一致.以此产物为包被抗原采用间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清,阳性率为29.73% (11/37). 结论 成功构建了原核表达质粒pET32 a (+)-Der f 3,亲和纯化获得的目的蛋白具有良好的反应原性.

  • 细胞外死亡因子与细菌感染的研究进展

    作者:张霞;伊正君;付玉荣

    在研究细菌mazEF介导的压力应激诱导细菌细胞程序性死亡的过程中发现一个新的群体感应信号分子,在细胞级联死亡反应中发挥了至关重要的作用.这种信号分子称之为细胞外死亡因子(EDF).本文介绍了EDF的基本特征,探讨了在环境压力激活mazEF系统介导的细菌细胞程序性死亡的生物学作用,以及EDF在不同的细菌系统中研究的现状和新理论,对EDF的应用前景提出了进一步展望.

  • 弓形虫蛋白激酶功能的研究进展

    作者:刘功振;李瑾;崔勇;黄炳成

    弓形虫蛋白激酶在虫体入侵过程、信号转导、调节宿主细胞功能等方面发挥重要作用.弓形虫钙依赖蛋白激酶能调控虫体的入侵和释放,而棒状体蛋白激酶和假激酶对弓形虫毒力和信号通路方面起到至关重要的作用.本文对弓形虫蛋白激酶功能的研究进展进行综述.

  • 基孔肯雅病毒常见血清学检测技术研究进展

    作者:杨晓羽;周红宁;郭晓芳

    基孔肯雅热是由基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)经伊蚊叮咬传播的一种自然疫源性疾病,人群普遍对CHIKV易感,临床上多以突起发热、皮疹、关节疼痛和轻度出血为主要特征,主要分布在非洲、南亚、东南亚热带和亚热带地区.由于目前无疫苗预防和特效药治疗,及时开展疑似CHIK病例实验室诊断检测,防止其暴发与流行具有重要的意义.现今实验室检测CHIKV感染技术主要包括血清学试验、病毒分离技术和分子生物学检测技术,其中前者具有操作简便、快速特点,较容易现场推广应用.常见的血清学检测方法主要包括中和试验(Neutralization test,NT)、血凝抑制试验(Hemagglutimation inhibition test,HI)、酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫层析试验(Immunochromatography assay,ICA)、间接免疫荧光试验(Indirect immunofluorescence assay,IFA)等.本文对上述常见的基孔肯稚血清学检测方法进行了综述.

  • 寄生虫病疫苗研究新进展

    作者:兰希;赵慧;丁剑冰;马秀敏

    寄生虫病严重危害人畜健康,给畜牧业造成巨大经济损失.目前用于寄生虫病控制的有效手段仍然是疫苗接种.本文对寄生虫病传统疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗到现在研究多的表位疫苗等新型疫苗进行简要综述,旨在为寄生虫病的防控提供参考.

  • 住院患者肝炎病毒感染的血清流行病学调查

    作者:孙平;李宗祥

    目的 了解住院患者肝炎病毒感染的血清流行病学状况. 方法 采用酶联免疫法对医院住院患者肝炎病毒血清标志物HBsAg和抗-HCV进行检测. 结果 住院患者HBsAg总体阳性率为9.84%,抗-HCV总体阳性率为0.75%;儿科HBsAg阳性率低,为4.93%,血液内科抗-HCV阳性率高,为1.94%,阳性率与其他科室差异有统计学意义(P<0.05);HBsAg和抗-HCV阳性率在性别差异无统计学意义(P>0.05);51~岁年龄段HBsAg阳性率高,0~岁年龄段HBsAg低,两组差异有统计学意义(P<0.05);从事服务业的住院患者HBsAg、抗-HCV阳性率高,与其他职业阳性率差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 医院住院患者HBsAg阳性率较高,提示应做好医院内乙肝等传染性疾病的传播控制以及营养支持工作,对感染病人予以营养和及时有效的治疗.

  • 2009-2013年南昌市重症手足口病疫情分析

    作者:胡茂红;陈盛恩;吴景文;孙延双;傅伟杰

    目的 分析南昌市2009-2013年重症手足口病发病情况,了解手足口病重症病例的基本特征. 方法 由“疾病监测信息报告管理系统”导出重症手足口病的数据,采取描述性与分析性流行病学相结合的方法进行统计描述.结果 2009-2013年南昌市共报告重症手足口病病例302例,男女性别比为2.21∶1,<3岁幼儿265例,占重症病例总数的87.75%.发病高峰为每年的16~27周;病例在家庭居住地的分布上差异有统计学意义(x2=21.66,P=0.001).手足口病病毒阳性患者中,EV71型占75.11%.病毒型别在不同年份间的分布差异有统计学意义(x2=23.21,P=0.026),2013年较前四年肠道病毒未分型有升高趋势.死亡病例占所有重症手足口病病例的6.29%,主要来自农村(84.21%),以手足口病病毒EV71型为主(84.21%). 结论 应持续监测手足口病病毒在人群中的变异情况,并进一步提高医疗机构重症手足口病识别与诊疗能力,大限度提高重症手足口病患儿救治成功率.

  • 一起登革热暴发疫情流行病学特征分析与现场处置

    作者:杨捷;张保森;唐发良;杨杏;杨恒林;吴超;杨明东;周红宁;尹文帮

    目的 对2013年德宏州发生的一起登革热暴发疫情及其处置情况进行分析,为制定有效的登革热防控措施提供依据. 方法 对2013年德宏州一起登革热疫情的所有登革热病例进行流行病学个案调查,对疑似病例血清标本检测登革病毒NS1抗原,用RT-PCR进行登革热病毒型别鉴定,采用布雷图指数法对蚊媒进行监测. 结果 全州8~12月份共报告登革热病例247例,其中缅甸输入100例,外省输入2例,本地感染145例.本地感染病例均主要集中在瑞丽市(占94.33%),男女性别比为1.15∶1,发病年龄小9月、大81岁,以20~55岁为主;职业以农民、商业服业者居多(占46.15%).发热门诊共接诊发热病人43 949人,疑似登革热病人976人血清标本检测,抗原阳性247份,阳性率25.31%.PCR检测82份抗原阳性标本登革病毒核酸均阳性.基因分型显示38份为登革病毒1型(占46.34%),44份为登革病毒2型(占53.66%).调查白纹伊蚊全州均有分布,埃及伊蚊主要分布在瑞丽市. 结论 该起疫情首发病例为输入性病例,以多点爆发,家庭聚集和散发并存为主要特点,病原为登革病毒1型为主,传播媒介为白纹伊蚊和埃及伊蚊.提示应加强输入病例的监测和蚊媒控制.抽取82份抗原阳性标本进行PCR登革病毒核酸检测,结果均阳性.基因分型:

  • 铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药机制的研究

    作者:白羽;刘金辉;李清祥;应颖

    目的 研究铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制. 方法 对环丙沙星耐药的铜绿假单胞菌变异株采用诺氟沙星、亚胺培南,头孢唑啉、氟氯西林、左氧氟沙星、环丙沙星等抗生素进行药敏实验;采用PCR扩增20株变异株的DNA拓扑异构酶Ⅱ和Ⅳ的gyrA、gyrB、parC、parE基因片段并测序,研究基因突变与耐药之间的关系. 结果 20株铜绿假单胞菌环丙沙星耐药变异株对诺氟沙星100%耐药,对氟氯西林57%耐药,对亚胺培南55%耐药,对左氧氟沙星48%耐药,对头孢唑啉36%耐药.20株变异株中,17株发生基因突变,包括gyrA基因QRDR区域发生突变15株,其中12株突变发生于编码83位氨基酸密码子,突变形式为Thr→Ile(ACC→ ATC);5株突变发生于编码87位氨基酸密码子,突变形式为Asp→Asn或Gly(GAC→ AAC或GGC);3株在83位和87位氨基酸密码子发生双点突变.gyrB基因QRDR区域发生突变3株;其中2株突变发生于编码470位氨基酸密码子,突变形式为Glu→Asp (GAG→GAT);1株突变发生于编码361位氨基酸密码子,突变形式为Phe→Try (TTC→ACG).parC基因QRDR区域发生突变13株,其中11株突变发生于编码80位氨基酸密码子,突变形式为Ser→ Leu (TCG→TTG);4株突变发生于编码84位氨基酸密码子,突变形式为Glu→ Lys (GAG→ AAG);2株在80位和84位氨基酸密码子发生双点突变.parE基因QRDR区域发生突变4株,其中1株突变发生于编码420位氨基酸密码子,突变形式为Asp→ Ash(GAC→ AAC);3株突变发生于编码425位氨基酸密码子,突变形式为Ala→ Val (GCG→ ACG). 结论 铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药机制主要DNA拓扑异构酶Ⅱ和Ⅳ的QRDR区域发生突变,需要引起高度重视,并进行针对性预防和治疗.

  • 感染呼吸道合胞病毒后婴幼儿下呼吸道受体细胞转录水平检测及临床研究

    作者:王娜;郝玲;任常军;额尔敦高娃;张晶;董燕;李铁志

    目的 了解婴幼儿下呼吸道细胞实验感染呼吸道合胞病毒后不同时间点受体细胞转录水平,为此类疾病的防治提供指导. 方法 取婴幼儿下呼吸道细胞进行培养并分为病毒感染组和正常对照组.提取细胞总RNA,进行定性和定量分析,进行RT-PCR检测. 结果 不同时间点RT-PCR检测正常细胞TLRs(TLR3,TLR4,TLR7和TLR9)的mRNA有一定程度的表达,呼吸道合胞病毒感染细胞TLRs的mRNA随病毒感染时间延长呈上调趋势. 结论 婴幼儿下呼吸道细胞感染呼吸道合胞病毒后TLR3,TLR4,TLR7和TLR9的基因mRNA转录水平上调,可供婴幼儿下呼吸道感染的防治提供参考.

  • 接受体外循环治疗患者分离株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因研究

    作者:胡玲;左宪宏;崔晓征;黄建成;陈茜松

    目的 探讨接受体外循环治疗患者分离株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况,并对其耐药基因及流行特点进行研究,为医院MRSA感染的防治和临床用药提供指导. 方法 选取分离自接受体外循环治疗患者的21 7株金黄色葡萄球菌进行药敏试验,采用K-B头孢西丁纸片法对MRSA筛选.对217株金黄色葡萄球菌的特异基因16s rRNA,femA和MRSA特有基因及万古霉素耐药基因VanA、VanB和VanC进行检测. 结果 217株金黄色葡萄球菌中有75株为MRSA,占34.6%,其中2013年分离株MRSA占比高,为42.6%,2011年为34.2%,2012年为27.6%.217株金黄色葡萄球菌中未发现万古霉素耐药株,莫西沙星耐药率为30.88%,亚胺培南耐药为37.33%.16srRNA和femA特异基因检测217株全部阳性,MRSA特有基因mecA检测75株阳性,未检测到万古霉素耐药基因.讨论 本组金黄色葡萄球菌MRSA检出率低于全国平均水平,这主要归功于医院内部进行了干预,如对医护人员进行于部等卫生管理,对医疗器械消毒等.本组MRSA中未检出万古霉素耐药株,因此万古霉素仍可作为治疗MRSA感染的一线药物.

中国病原生物学分期目录
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