中国病原生物学杂志
Journal of Parasitic Biology 중국병원생물학잡지
- 主管单位: 中国寄生虫病防治杂志
- 主办单位: 中华人民共和国卫生部
- 影响因子: 1.21
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-5457/R
- 国内刊号: 王利磊
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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pEGFP-C2-hTim-3真核表达载体的构建和hTim-3质粒稳定转染16HBE细胞株的建立
目的 筛选表达Tim-3的人呼吸道相关细胞株,为进一步阐明Tim-3可能与人呼吸道疾病相关奠定基础;构建pEGFP-C2-hTim-3真核表达载体,以期用于hTim-3的功能研究.将测序正确的重组质粒pEGFP-C2-hTim-3转染入人支气管上皮细胞株16HBE中,筛选出阳性细胞克隆,为后续实验提供理论基础. 方法 用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基于37℃5%CO2饱和湿度培养箱中体外培养人呼吸道相关细胞株16HBE、A549和GLC-82,调整细胞到佳状态,对数生长期时收集细胞,抽提总RNA,逆转录为cDNA.参照人GenBank中Tim-3基因的全长序列,使用Primer5.0设计并合成其引物,采用PCR检测以上3种细胞Tim-3的mRNA.将健康人外周血Tim-3基因全长cDNA片段克隆入真核表达载体pEGFP-C2,经菌落PCR、双酶切及测序鉴定,构建包含目的基因Tim-3的重组质粒pEGFP-C2-hTim-3.利用脂质体介导pEGFP-C2-hTim-3质粒和pEGFP-C2质粒分别转染16HBE细胞,荧光显微镜下观察16HBE细胞的瞬时转染效率,并采用含G418的培养基筛选以获得整合pEGFP-C2-hTim-3和pEGFP-C2的阳性细胞克隆,用荧光显微镜观察pEGFP-C2-hTim-3和pEGFP-C2在16HBE细胞上的定位表达. 结果 1)PCR显示人呼吸道相关细胞株16HBE、A549和GLC-82均表达Tim-3 mRNA;2)构建了具有筛选特征和能够稳定表达的pEGFP-C2-hTim-3质粒载体,测序结果与预期设计完全一致;3)瞬时转染后经荧光显微镜检查可见表达pEGFP-C2-hTim-3绿色荧光蛋白的16HBE细胞不足8%,表达pEGFP-C2绿色荧光蛋白的16HBE细胞不足15%o.采用G418筛选后获得表达野生型hTim-3和外源性pEGFP-C2-hTim-3的16HBE细胞及转染pEGFP-C2空质粒的16HBE细胞,经荧光显微镜观察前者定位在胞膜上,后者定位于胞质中. 结论 人呼吸道相关细胞株16HBE、A549和GLC-82均表达Tim-3 mRNA,Tim-3可能与人类呼吸道疾病的发生和发展相关.成功构建了真核表达载体pEGFP-C2-hTim-3并获得了高表达pEG-FP-C2-hTim-3的16HBE阳性克隆细胞,可供后续研究使用.
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弓形虫ROP11核酸疫苗免疫保护作用的研究
目的 观察ROP11核酸疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用. 方法 40只BALB/c小鼠随机分为实验组、空质粒对照组、PBS对照组和空白对照组,每组10只,均通过股四头肌注射免疫小鼠.其中实验组每鼠注射pcDNA3.1(+) ROP11重组质粒100 μg(1 μg/μl),空质粒对照组注射pcDNA3.1(+)质粒100 μg(1μg/μ1),PBS对照组注射无菌PBS缓冲液100μl,空白对照组不注射.共免疫3次,每次间隔2周,末次接种量均加倍.分别于每次注射前和末次注射后第2周检测小鼠血清特异性IgG和细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10.末次注射后2周各组小鼠腹腔攻击感染RH株弓形虫速殖子1×10 3个/只,观察其存活时间,评价免疫效果. 结果 ROP11核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,实验组小鼠血清特异IgG随着免疫次数的增加而显著增高(P<0.05).血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10均不同程度升高(P<0.05).重组质粒免疫组、空质粒免疫组、PBS和空白对照组小鼠经RH株弓形虫攻击感染后的平均存活时间为236.3、97.8、96.3和96.2h,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 ROP11核酸疫苗对BALB/c小鼠弓形虫感染有一定的免疫保护性,为进一步研究ROP11核酸疫苗的生物学功能提供了实验基础.
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阿苯达唑治疗中小学生棘球蚴病的观察
目的 观察阿苯达唑乳剂给药方案治疗儿童棘球蚴病的依从性、副反应及疗效,为进一步完善棘球蚴病治疗方案提供依据. 方法 在校儿童进行B超结合血清学检查,对病灶大径≥1 cm的棘球蚴病病例给予阿苯达唑乳剂治疗.每人每天口服阿苯达唑乳剂12.5 mg/kg,连服3个月为1个疗程,观察期1年多完成4个疗程.随访服药和副反应发生情况.开始治疗的1年后B超复查考核疗效,采用x2检验、多元logistic回归等方法综合评价疗效及其影响因素.结果 共治疗儿童棘球蚴病临床诊断患者160例,治疗期间总不良反应发生率为15.0%.160例中,连服2~4个疗程者占66.2%(106/160):连续服药不足2个疗程者占33.8%(54/160).完成2~4个疗程的细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病的治愈率、有效率分别为0、27.9%和0、58.7%.细粒棘球蚴病不同疗程组间疗效存在显著性差异(x2=6.09,P<0.05);多房棘球蚴病不同疗程组间疗效无显著性差异(x2 =0.07,P>0.05).多元logistic回归分析显示,治疗疗程和病灶大小是影响治疗效果的主要因素. 结论 阿苯达唑乳剂治疗儿童棘球蚴病疗效较低,提示阿苯达唑乳剂治疗儿童棘球蚴病的合理剂量、疗程有待进一步研究改进.在治疗方案实施中密切观察与处理不良反应、定期随访、进行健康教育以提高对棘球蚴病长疗程治疗的依从性很有必要.
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云南省部分地区鸽粪中新型隐球菌的分离与鉴定
目的 对云南省部分地区鸽粪中新型隐球菌进行分离鉴定,并对各个地区鸽粪中新型隐球菌带菌率进行调查.方法 采集云南省4个城市鸽粪标本共473份,用黑米琼脂培养基对其进行分离,肉眼观察菌落形态、颜色,光学显微镜下观察菌体形态,对疑似菌落进行纯培养后用特异性引物CN4和CN5扩增URA5基因,阳性者鉴定为新型隐球菌,并用SPSS16.0对其结果进行统计分析. 结果 云南省4个地区473份鸽粪标本中共分离出152株新型隐球菌,平均阳性率为32.13%.其中大理地区阳性率为26.08%,昭通阳性率为30.05%,曲靖阳性率为81.81%,临沧阳性率为37.03%.4个地区阳性率差异有统计学意义(x2=41.87,P<0.01). 结论 云南地区鸽粪中新型隐球菌带菌率较高,且不同地区带菌率不同.
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T-bet和GATA-3基因在肝泡型包虫病患者肝脏组织中的表达及作用
目的 探讨T-bet和GATA-3基因在肝泡型包虫病患者肝脏组织中的表达及作用. 方法 选取14例在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的肝泡型包虫病患者病灶组织(L组)、病灶旁组织(P组)及正常肝组织(N组),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各肝脏组织中T-bet和GATA 3 mRNA的表达,采用两两比较的t检验和Pearson相关性检验分析结果. 结果 T-bet mRNA在L组、P组和N组的表达量分别为3.98、0.89和0.27,其中L组与P组比较差异无统计学意义(t=0.307,P>0.05),L组与N组比较差异有统计学意义(t=3.695,P<0.01),P组与N组比较差异有统计学意义(t=3.492,P>0.05).GATA-3 mRNA在L组、P组和N组的表达量分别为119.23、6.30和0.53,其中L组与N组比较差异有统计学意义(t=5.190,P<0.01),P组与N组比较差异有统计学意义(t=4.649,P<0.01),L组与P组差异无统计学意义(t=1.711,P>0.05).肝脏不同组织中,T-bet和GATA-3 mRNA的表达量呈正相关(相关系数为0.730~0.932). 结论 Th1细胞转录因子T-bet基因和Th2细胞转录因子GATA-3基因在肝脏病灶组织中的表达升高,这些变化或与泡型包虫病发病过程中寄生虫肉芽肿的形成有关.
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双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用
目的 建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法. 方法 利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品.以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5%脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490 nm处的吸光度(A)值.通过棋盘滴定法确定抗体适包被浓度、佳封闭剂、待检粪液佳稀释度及酶标抗体佳稀释度.应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测. 结果 建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01 mg/ml,封闭剂为1% BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好.应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9%. 结论 建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法.
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31株结核分枝杆菌异烟肼耐药相关基因检测及序列分析
目的 了解贵阳地区分离的结核分枝杆菌katG基因、inhA启动子和oxyR-aphc间隔区基因突变特征. 方法 对31株结核分枝杆菌临床分离株(异烟肼耐药株17株,异炯肼敏感株14株)的katG基因、inhA启动子和oxyR-aphc间隔区进行DNA片段的PCR扩增,并进行测序分析. 结果 17株异炯肼耐药菌株中有16株检出katG基因突变,其中70.5%(12/17)为315位密码子变异,且变异类型均为AGC→ACC,敏感株未发现315位点突变.11株敏感菌和4株耐药菌在463位密码子发生变异,变异类型均为CGG→TGG,变异率分别为78.6%(11/14)和23.5%(4/17),差异无统计学意义.有12株耐药株的变异类型为katG基因双重位点突变,其中10株为katG315(AGC→ ACC)和463(CGG→ TGG)位变异,463 (CGG→TGG)和299 (GGC→ AGC)变异及463 (CGG→TGG)和419 (GAC→CAC)位变异各1株.2株异炯肼耐药菌检出 oxyR-aphC启动区G32A突变,其中1株为联合katG463和299位突变. 结论 贵阳株结核杆菌菌株异烟肼耐药基因突变具有多态性,主要的变异类型为katG315位点突变.
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天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建
目的 构建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表达载体,获得稳定转染LILRB5的单核细胞系. 方法 将LILRB5构建入真核表达载体pEGFP-flag,瞬时转染293T细胞系,通过免疫荧光和流式细胞术检测LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T细胞中的表达.构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达. 结果 测序显示真核表达载体pEGFP-LILRB5-flag的序列与预期相符,瞬时转染pEGFP-LILRB5-flag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测显示LILRB5-flag在细胞膜表面有表达;构建亚克隆慢病毒载体pHR-LILRB5,经测序验证后,转染293T细胞,产生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1细胞,流式细胞术检测LILRB5在THP-1细胞稳定表达. 结论 构建LILRB5的慢病毒载体,通过LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的稳转THP-1细胞系.
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抗骨桥蛋白抗体对沙鼠肝多房棘球蚴组织周围血管生成的影响
目的 观察抗骨桥蛋白(osteopontin,OPN)抗体对长爪沙鼠肝多房棘球蚴(俗称泡球蚴)组织周围血管生成的影响. 方法 90只长爪沙鼠随机分为3组,即模型对照组(A组),兔血清对照组(B组)和抗OPN抗体干预组(C组),所有沙鼠均采用开腹肝穿刺法接种泡球蚴原头节悬混液0.1 ml(约含原头节400个).B组于接种当天注射兔血清0.15 ml/鼠,1次/2 d,连续7次,之后改为每周1次,直至处死;C组采用相同的方法注射抗OPN抗体(效价1∶32);A组不作任何处理.分别与感染后第20、60、100、140、180 d每组各处死6只沙鼠,留取肝泡球蚴组织,制作组织切片采用苏木素—伊红(H-E)法和免疫组化Envision法观察各组沙鼠肝泡球蚴组织MVD-CD34的表达情况. 结果 感染泡球蚴沙鼠肝脏中均可见团块状泡球蚴组织,部分播散至腹腔.感染20 d时A、B、C组MVD分别为(9.83±3.87)/HP,(9.67±2.94)/HP和(7.50±1.87)/HP,感染60 d时分别为(33.67±3.67)/HP,(32.83±6.11)/HP和(24.33±5.61)/HP,感染100 d时分别为(44.67±4.92)/HP,(42.20±6.26)/HP和(28.00±8.76)/HP,感染140 d时分别为(34.17±3.19)/HP,(31.67±4.97)/HP和(20.50±4.72)/HP;感染180 d时分别为(32.33±7.42)/HP,(29.67±3.88)/HP和(13.50±3.21)/HP.其中感染60 d及以后各时间点C组与A组和B组相比,微血管数差异有统计学意义(P<0.05). 结论 抗OPN抗体可抑制沙鼠肝泡球蚴组织周围血管生成.
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罕见输入性卵形疟原虫wallikeri亚种的PCR鉴定和测序分析
目的 应用PCR技术对与间日疟原虫形态相识的卵形疟原虫亚种wallikeri进行鉴定. 方法 采集1例镜检可疑间日疟输入性疟疾患者滤纸血,采用PCR扩增18核糖体小亚单位RNA(18 Small Subunit ribosomal RNA,18SSurRNA)片段,并进行测序分析. 结果 采用5对引物(rFAL1、rFAL2,rVIV1、rVIV2,rMAL1、rMAL2,rOVA1、rOVA2,rOVA1v、rOVA2v)进行PCR扩增,其中rOVA1v、rOVA2v引物扩增阳性,PCR产物大小为760 bp;测序分析该基因片段(GenBank accession number KJ786425)与GenBank数据库中Plasomdium ovale wallikeri克隆RSH10 18SrRNA基因部分序列(KF219561.1)及卵形疟ssrRNA基因(AJ001527.1)的序列一致性都为100%. 结论 卵形疟与间日疟原虫形态相似,可采用PCR技术确认.本例患者感染的疟原虫经PCR鉴定和测序分析确定为卵形疟原虫变形P.ovale wallikeri变形亚种.
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液体培养基分离和保存利什曼原虫的效果观察
目的 观察利什曼原虫液体培养基(LLM)分离和保存利什曼原虫的效果. 方法 用LLM培养基对黑热病材料进行利什曼原虫分离培养,同时接种的灰仓鼠,进行利什曼原虫分离率比较. 结果 用LLM培养被检材料出结果时间为4d,对荒漠型和平原型黑热病利什曼原虫分离率分别为35.7%(10/28)和50.0%(15/30),分别比接种灰仓鼠的分离率高10%和30%.培养基-20℃冷冻保存有效期为2年. 结论 应用LLM培养基能显著提高利什曼原虫的分离率.该培养基与传统3N培养基比较,保存时间延长,培养出结果时间缩短,可用于黑热病实验诊断和黑热病抗药性研究.
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生物信息学数据库在医学研究中的应用
后基因组时代的到来,使生物信息学的应用范围更加广泛,生物信息学数据库种类不断增多,数量不断增加,功能日趋完善;在一次数据库的基础上大量的生物信息学二次数据库得到了开发和应用,推动了病毒分析、基因识别与预测以及疾病诊断等相关领域的发展.
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肺孢子菌肺炎药物治疗策略及新药靶点研究进展
肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)是免疫功能低下患者严重的机会性感染疾病.目前临床治疗肺孢子菌肺炎常用的一线、二线药物因副作用及特定人群耐受力差等原因而应用受限,亟需开发新药并寻找新的治疗方法以改善PCP患者的预后.本文综述了近些年PCP的药物治疗策略及新的药物靶点研究进展,包括抗真菌药物、免疫调节剂的潜在应用等,以期为PCP的临床治疗提供新的参考.
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诺如病毒感染宿主免疫应答的研究进展
诺如病毒是引起非细菌性急性感染性胃肠炎的主要病原体,常常引起严重的公共卫生与食品安全问题.诺如病毒疫苗的研发被越来越多的国家提上日程,疫苗的研制和应用依赖于对宿主和病毒相互关系的深入了解,依赖于宿主对病毒的免疫应答机制的了解.本文综述了诺如病毒国内外流行现状、诺如病毒感染与HBGAs受体关系和诺如病毒感染人或动物后机体的免疫应答研究现状.
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2011年北京地区婴幼儿病毒性腹泻病原学研究
目的 了解北京地区婴幼儿病毒性腹泻的病原学特点. 方法 采集2011年1月-12月5岁以下腹泻患儿的粪便标本并填写个案调查表,用ELISA试剂盒检测A组轮状病毒,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测人杯状病毒和星状病毒,采用PCR检测腺病毒. 结果 604例粪便标本中,A组轮状病毒检出率15.89%,人杯状病毒检出率18.71%,星状病毒检出率2.98%,腺病毒检出率4.80%,病毒混合感染27例.11月份轮状病毒检出率高,10月份人杯状病毒检出率高. 结论 A组轮状病毒和人杯状病毒为北京地区秋冬季婴幼儿腹泻的主要病原.
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南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况分析
目的 了解南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况. 方法 按照《全国病媒生物监测方案(试行)》要求,采用诱蚊灯法在南京市开展蚊虫监测. 结果 2013年南京市共捕蚊3 268只,蚊密度为0.57只/(h·灯),捕获的蚊虫隶属2亚科4属5种,优势蚊种为淡色库蚊和三带喙库蚊,分别约占58.05%和17.59%,季节消长呈7月和10月双高峰曲线. 结论 南京市蚊虫具有种群多样性,淡色库蚊和三带喙库蚊为优势蚊种,每年7月和10月为密度高峰季节,可供当地蚊虫防制措施的指定提供参考.同时要关注蚊虫孳生地情况及气象因素对蚊虫密度的影响.
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肠炎沙门菌食物中毒中PFGE的应用
目的 对2014年武汉市某区一起食物中毒事件的病原体进行分离鉴定及同源性分析. 方法 参照GB4789-2012和WS/T 13-1996的方法进行病原菌的分离培养,对检出菌进行表型鉴定;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法对检出菌及实验室收集的其他肠炎沙门氏菌进行分子分型和流行病学特征分析;采用WHO推荐的改良K-B法对检出菌进行抗生素敏感试验 结果 流行病学调查及实验室病原学检测证实,本起事件是一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒,共分离到18株肠炎沙门氏菌.分离白该事件可疑食物及患者肛拭子的肠炎沙门氏菌相似系数为100%,与同一时期散发临床患者分离的肠炎沙门氏菌相似系数约为90%,与2012年健康体检分离株及2013年、2014年临床患者分离株小相似系数>90%.此次食物中毒株对所检测药物敏感性较好. 结论 此次食物中毒病原菌为本地区流行的肠炎沙门氏菌优势株.PFGE可用于细菌性食物中毒的溯源分析.
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布鲁菌病218例临床特征分析
目的 总结布鲁菌病的流行病学特点和临床特点,为布鲁菌病防治积累临床经验. 方法 对经ELISA确诊并在本院住院治疗的218例布鲁菌病患者的临床资料(包括流行病学资料、临床表现及实验室检查结果等)进行回顾性分析. 结果 218例布鲁菌病患者的发病时间集中在3~8月.76.1%的患者系从事养殖业的农民,以青壮年男性为主,主要经直接接触感染.发热、乏力、多汗、关节疼痛和脾大系常见临床表现,热型多不规则,关节疼痛症状多不典型.可并发骨关节损害、肝脏及心肌损害、睾丸炎、血液指标异常、心内膜炎、脑膜炎等,首诊误诊率为62.3%. 结论 布鲁菌病临床表现复杂多样,并发症多,易误诊,医师应加强对本病的认识以提高诊疗水平.
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基于PGMY09/11引物的PCR法检测高危型HPV的效果观察
目的 评估基于PGMY09/11引物的PCR法检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)效果. 方法 采用HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR技术检测感染HPV16的50份样品和感染HPV18的50份样品,样品模板DNA分别按照1∶1、1∶2、1∶4、1∶8和1∶16倍比稀释,比较2种方法检测的敏感性和一致性.同时采用HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR技术检测感染单纯疱疹病毒(HSV)和沙眼衣原体(CT)的20份样品及单一感染HPV16和HPV18的10份样品,评估基于PGMY09/11引物的PCR检测HPV的特异性. 结果 HC Ⅱ试剂盒和基于PG-MY09/11引物的PCR对1∶1、1∶2稀释的HPV16和HPV18的检出率均为100%;HC Ⅱ对1∶4稀释的HPV16和HPV18的检出率为36%和46%,但不能检出1∶8和1∶16稀释的HPV16和HPV18样品;基于PGMY09/11引物的PCR对1∶4、1∶8和1∶16稀释的HPV16检出率分别为100%、90%和32%,对1∶4、1∶8和1∶16稀释的HPV18样品检出率分别为100%、86%和40%.HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR对HPV16检测的整体一致性为84.1%(Kappa值为0.674),对HPV18检测的整体一致性为81.7%(Kappa值为0.598).基于PGMY09/11为引物的PCR方法不能检测HSV和CT合并感染. 结论 基于PGMY09/11为引物的PCR方法检测出高危型HPV具有较高的敏感性和特异性,与市售HC Ⅱ试剂盒检测结果具有较高一致性,可用于HPV感染诊断.
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p63不同异构体表达模式对细胞周期特异性毒物诱导的肝癌细胞生长的影响
目的 研究肝癌细胞中p63不同异构体表达模式对该细胞阿霉素敏感性的影响. 方法 用0(溶剂对照)、0.08、0.16、0.32、0.64和1.28 μmol/L阿霉素处理对数生长期的p53基因缺失Hep3B细胞,采用MTT比色法检测Hep3B细胞的存活率变化,采用流式细胞术分析Hep3B细胞凋亡率变化,通过彗星实验评价Hep3B细胞DNA损伤水平,采用Western blott方法检测Hep3B细胞中TAp63、DNp63和Cytochrome c的蛋白水平.结果阿霉素处理后的Hep3B细胞存活率依次为89%、71%、54%、38%和22%;凋亡率依次为16%、28%、42%、56%和78%;Hep3B细胞DNA损伤程度依次为2.9、5.1、7.2、9.4和12.1;上调了TAp63和Cytochrome c蛋白表达水平,而DNp63蛋白表达水平则无显著变化,使得TAp63/ DNp63比值随之显著升高. 结论 TAp63/ DNp63比值的增加可显著提高Hep3B细胞对于化疗药物阿霉素的敏感性,p63异构体的不同表达模式将有可能作为肝癌基因治疗的新靶点.
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BACTEC MGIT 960用于结核分枝杆菌直接药敏试验的研究
目的 探讨BACTEC MGIT 960系统在结核分枝杆菌直接药敏试验的临床应用价值. 方法 对200株临床涂阳痰标本应用BACTEC MGIT 960系统进行一线抗结核药(链霉素、异炯肼、利福平、乙胺丁醇)结核分枝杆菌直接药敏试验,并与同步进行的BACTEC MGIT 960间接药敏试验及传统改良罗氏(L-J)比例法药敏试验进行比较,从结果报告时间和符合率等方面进行评价.统计学分析分别采用配对资料的t检验和Kappa检验. 结果 BACTEC MGIT960直接药敏试验报告时间为(9.7±3.1)d,与BACTEC MGIT 960间接药敏试验报告时间(17.5±6.6)d比较差异有统计学意义(t=14.7,P<0.01),与L-J法报告时间(50.4±8.6)d比较差异有统计学意义(t=73.4,P<0.01);4种一线抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏BACTEC MGIT 960直接法与BACTEC MGIT 960间接法药敏结果总符合率为97.3%,BACTEC MGIT 960直接法与L-J法药敏结果总符合率为96.2%. 结论 BACTEC MGIT 960直接药敏试验快速、准确,可用于结核分枝杆菌的药物敏感性检测,利于耐药结核病的早期诊断和治疗.
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手术切口感染铜绿假单胞菌的MBLs基因检测和耐药性分析
目的 研究住院患者手术切口感染铜绿假单胞菌的耐药性,并对碳青霉烯类耐药株进行分型和金属—内酰胺酶基因检测. 方法 分离自患者手术切口感染的铜绿假单胞菌186株,以铜绿假单胞菌ATCC27853,大肠埃希菌ATCC25922作为质控菌株,采用常见的8种抗生素进行药敏试验;利用ERIC-PCR对碳青霉烯类耐药株铜绿假单胞菌进行分型;利用IMP-PCR和VIM-PCR检测金属β-内酰胺酶基因. 结果 186株铜绿假单胞菌对8种抗生素的耐药率分别为:庆大霉素和哌拉西林36.02%,阿米卡星和左氧氟沙星34.95%,美罗培南32.80%,环丙沙星32.26%,头孢吡肟27.42%,头孢他啶25.27%,其中62株耐碳青霉烯类铜绿假单细胞菌对美罗培南耐药率98.4%,且全部为多重耐药(MDR),占总数的33.3%.11株为泛耐药株(PDR),占总数的6%.4株VIM2型铜绿假单胞菌和1株IMP-25亚型金属β-内酰胺酶基因检测阳性. 讨论 随着近年来抗生素的频繁使用铜绿假单胞菌不断产生新的耐药株,并检出1株IMP-25亚型,这对研究铜绿假单胞菌的耐药性和流行病学特点具有重要意义.
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医院ICU分离株肺炎克雷伯菌基因进化分析和耐药性研究
目的 研究医院ICU分离株肺炎克雷伯菌耐药和基因关键位点突变情况,为肺炎克雷伯菌感染治疗提供依据. 方法 对分离株肺炎克雷伯菌采用琼脂扩散法做15种常见抗生素的药敏试验,方法及标准参照2013版美国临床实验室标准化委员会药敏试验标准(CLSI);按照CLSI对超广谱β酰胺酶进行检测和验证,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增Ⅰ类整合酶基因;对QRDR(喹诺酮耐药决定区)耐药株基因gyrA和parC进行检测并与疫苗株比对. 结果 药敏试验显示,ICU分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南,美罗培南,阿米卡星的耐药率分别为1.4%、2.7%和4.0%.对复方新诺明和庆大霉素耐药率分别为68.0%和62.7%,对其他抗生素耐药率在10%~60%之间.采用琼脂扩散法检出23株产ESBLs,占30.7%;采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶6株阳性,占8.0%;PCR检测Ⅰ类整合子21株阳性,占28.0%.耐药株QRDR基因检测和序列分析显示,gyrA基因编码产物第83位由丝氨酸(Ser)变异为苯丙氨酸(Phe)S83F,第87位天冬氨酸(Asp)变异为谷氨酸(Asn)D87N,parC基因编码产物第80位由丝氨酸(Ser)变异为异亮氨酸(Ile)S80I. 结论 本组分离菌中带有Ⅰ类整合子和产碳青霉烯酶检出率较低,分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南和阿米卡星耐药率低于10%,上述药物可作为一线药物用于肺炎克雷伯菌的感染治疗.对QRDR基因检测发现gyrA和parC基因突变引起细菌对环丙沙星和左氧氟沙星耐药,因此氟喹诺酮类药物应慎用.
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PBL在地方医学院校免疫学检验实验教学中的探索
为探索PBL教学法在地方医学院校医学检验专业实验教学中的应用效果,在本院2010级医学检验本科实验教学中开展PBL教学,主要通过设置病例、小组讨论、查找资料、总结汇报对免疫学检验的基础知识进行详细学习,并且对PBL教学在地方医学院校免疫学检验实验教学中存在的问题和不足进行了分析,结果显示PBL教学法明显提高了学生学习的独立自主性,增强了其对问题的探索精神及解决问题的综合能力.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |