真核表达载体GV394-Nurr1的构建及鉴定

目的：构建含人源性Nurr1基因真核表达载体GV394?Nurr1，检测其瞬时表达对细胞内活性氧类物质（ ROS）水平的影响。方法 PCR扩增人Nurr1基因，克隆至 T载体，测序正确后与真核载体 GV394一起，经BamHI和XhoI双酶切，T4 DNA连接酶连接，构建GV394?Nurr1；采用脂质体将GV394?Nurr1瞬时转染神经母细胞瘤SH?SY5Y细胞，RT?PCR检测Nurr1基因mRNA水平，通过DCFH?DA染色检测Nurr1对细胞内ROS水平的影响。结果 PCR及测序证实人Nurr1基因正确克隆至真核表达载体GV394； RT?PCR显示Nurr1基因mRNA水平在瞬时转染的细胞中明显增高；DCFH?DA染色显示瞬时转染Nurr1的神经母细胞瘤细胞的细胞内的ROS水平峰值较对照组明显左移。结论成功构建人源性Nurr1真核载体，可在SH?SY5Y细胞中表达并减少细胞内ROS水平，为进一步在体外研究Nurr1的功能及其与多巴胺能神经元的保护作用的关系提供了基础。

丙泊酚干预对大鼠视神经损伤的影响及机制研究

目的：探讨大鼠视神经损伤后丙泊酚干预对损伤视神经及视网膜神经节的影响及机制。方法 SD大鼠67只，随机取20只为正常组，不予任何处理。余行视神经钳夹法造模，造模成功42只纳入实验。随机分为：模型对照组和丙泊酚组，各21只／组。造模后4 d，以TUNEL法检测大鼠视网膜和视神经细胞凋亡，造模后7 d， RT?PCR、Western?blot检测视网膜和视神经节细胞组织 Caspase?3、BCL?2基因和蛋白表达。造模后14 d，行闪光视觉诱发电位检测，处死大鼠取眼球，观察各组大鼠视网膜和视神经的病理形态，行视网膜神经节细胞计数。结果造模后4 d，丙泊酚组视网膜神经节细胞凋亡数量明显低于模型对照组（P ＜0．05），造模后7 d与模型对照组相比，丙泊酚组 Caspase?3的表达显著降低（P ＜0．05）；BCL?2的表达显著升高（P ＜0．05）。造模后14 d，荧光金阳性RGC数：模型对照组少，丙泊酚组较多，正常组多，且各组之间差异有统计学意义（ P ＜0．05）。丙泊酚组大鼠闪光视觉诱发电位伏期较模型对照组大鼠短（P ＜0．05）、波幅明显高于模型对照组（P ＜0．05）。结论丙泊酚干预通过减少大鼠视神经钳夹后RGCs的凋亡，降低视网膜Caspase?3的表达，升高BCL?2的表达，对视神经损伤起到保护作用。

发光二极管光源照射日本大耳白兔皮肤的安全性评价

目的：通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织，对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发，LED光源照射，强度为50 mw／cm2，对照组动物以普通日光灯光源照射，两组均每天照射5 h，连续3个月。观察动物皮肤有无红肿，测量动物进食、体重、体温等改变情况；照射完毕采集外周血测量常规、生化指标；Elisa分析免疫细胞及细胞因子改变情况；脏器组织病理检测，及分析皮肤弹力纤维变化情况；皮肤免疫组织化学分析C?myc、P53、细胞周期蛋白D1（CCND1）等癌基因及抑癌基因的表达变化。结果照射组兔皮肤未见红肿表现，体重在6周后稍高于对照组，体温3周、6周有差别，进食未见异常；血常规有白细胞增多，生化检测尿素、肌酐水平有增高，但在正常范围内；ELISA分析血免疫细胞CD3T细胞、细胞因子IL?6、TNF?α、IFN?γ水平在两组无明显差别，照射组动物CD19B细胞，IL?4水平升高；照射组动物脏器组织病理未见明显异常结构改变，皮肤弹性纤维分布无异常；皮肤组织内细胞周期蛋白（CCND1），C?Myc蛋白， P53蛋白表达与对照组相比没有差异。结论 LED光源照射日本大耳白兔3个月后，未引起体内明显的组织病理学改变，也未引起皮肤肿瘤相关因子的改变。

矢车菊素-3-葡萄糖苷对APPswe/PS1ΔE9阿尔茨海默病模型小鼠糖脂代谢的影响

目的：探讨矢车菊素?3?葡萄糖苷（Cy3G）对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠糖脂代谢的影响。方法将7月龄APPswe／PS1ΔE9（PAP）的AD模型小鼠随机分为AD模型组（PAP）、Cy3G治疗组（PAPCy，5mg／kg／d）及同窝阴性对照组（nPAP）；另外选择相同月龄的正常野生型C57BL／6J小鼠分别作为空白对照组（WT）和Cy3G干预组（WTCy，5mg／kg／d）；每组12只，雌雄各半。 Cy3G灌胃8周后，用MicroPET／CT检测脑葡萄糖代谢率；血生化方法检测小鼠肝肾功能及脂代谢相关指标；取全脑称重并计算脏器系数，HE染色进行组织病理学检查；透射电镜观察海马中老年斑沉积情况；Western?blot 分析 Jun 氨基末端激酶（ JNK ）和蛋白激酶 B （ AKT ）的表达情况。结果MicroPET／CT结果显示，与WT组相比，PAP组小鼠脑18 F?FDG的摄取率显著降低（ P ＜0．05），尤其在额叶和海马区降低尤为明显；与PAP组相比，PAPCy组小鼠额叶和海马区的18 F?FDG的摄取率显著升高（ P ＜0．05）。血生化结果显示，与WT组相比，PAP组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）水平显著升高（P ＜0．05），脂代谢指标相对正常；与PAP组相比，PAPCy组血清LDH水平显著降低（P ＜0．05）。脑组织HE染色未发现异常，但是在脑系数比较中，与WT组相比，PAP组小鼠脑系数显著降低（P ＜0．05）；与PAP组相比，PAPCy组小鼠大脑的脑系数显著升高（P ＜0．05）。透射电镜下观察发现，WT组、WTCy组及nPAP组海马中未见有老年斑沉积，PAP组小鼠海马可观察到有老年斑沉积，而PAPCy组小鼠海马中老年斑沉积有所减少。 Western blot结果显示，与WT组相比，PAP组JNK蛋白水平显著降低（P ＜0．05）、AKT蛋白水平显著升高（P ＜0．05）；与PAP组相比，PAPCy组JNK蛋白水平显著升高（P＜0．05），而AKT蛋白水平显著降低（P ＜0．05）。结论 Cy3G可以有效改善AD模型小鼠脑葡萄糖代谢障碍，但对脂代谢调节并不显著，同时还能抑制大脑海马中老年斑的沉积。提示， Cy3G可能是通过JNK／AKT通路调节胰岛素抵抗和炎症反应。

miR－126对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨miR?126对急性心肌梗死（ AMI）大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型，随机分为AMI组、miR?126 mimics negative control （ NC）组及miR?126组，其中NC组及miR?126组分别采用心肌组织局部注射慢病毒转染miR?126 mimics NC及miR?126 mimics，另外假手术组采用冠状动脉左前降支穿线不结扎。记录大鼠心脏功能，TCC法及原位末端凋亡法（ TUNEL）检测心肌凋亡指数及梗死面积，比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase 3）及Caspase 8活性，Western?blot法检测Bax及Bcl?2表达，同时RT?PCR法检测Fas及Fas?L mRNA表达。结果与假手术组比较，AMI组及NC组左室射血分数（ LVEF）及左室长轴缩短分数（ FS）升高，左室舒张末期内径（ LVDd）及左室收缩末期内径（ LVDs）降低，心肌凋亡指数提高，心肌梗死面积增大，Caspase 3及Caspase 8活性上升，Bax蛋白表达量上调，Bcl?2蛋白表达量下调，Fas及Fas?L mRNA水平上升，差异具有统计学意义（P ＜0．01）。与AMI组及NC组比较，miR?126组能扭转此变化，差异具有统计学意义（P＜0．01）。结论 miR?126能显著抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡，与调节细胞凋亡相关蛋白表达有关。

地佐辛后处理对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响

目的：探讨地佐辛后处理对大鼠肠缺血再灌注所致急性肺损伤的影响以及可能的机制。方法选取健康成年雄性SD大鼠32只，采用随机数字表法分为4组：CON组为假手术组；II／R组制备肠缺血再灌注模型；Dez组于缺血1 h经股静脉注射地佐辛3 mg 0．6 mL，再灌注1 h；5?HD组于缺血前30 min腹腔注射5?羟基葵酸钠10 mg／kg，随后制备肠缺血再灌注模型，后续处理同Dez组。再灌注1 h即刻，取部分肠组织，观察肠粘膜形态并进行肠粘膜损伤评分；取左肺组织，观察肺组织形态并进行肺损伤评分；取右肺组织测定丙二醛MDA的含量、超氧化物岐化酶SOD活性及髓过氧化物酶MPO的活性，取动脉血检测血清中TNF?a和IL?6的水平。结果地佐辛后处理能减轻肠缺血再灌注引起的远隔脏器肺的损伤，降低肠粘膜损伤评分、肺损伤评分，使肺组织丙二醛MDA的含量降低，超氧化物岐化酶SOD活性上升，髓过氧化物酶MPO的活性下降，血清TNF?a和IL?6的浓度明显下降。使用线粒体ATP敏感钾通道抑制剂5?羟基葵酸钠处理后可以减弱地佐辛对肺损伤的保护效应。结论地佐辛后处理可改善大鼠肠缺血再灌注对远隔脏器肺的损害，激活线粒体ATP敏感钾通道可能是保护机制之一。

MicroRNA-137与AngⅡ在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

目的：探讨微小核糖核酸195（MicroRNA?137，miRNA?137）、TGF?β1／Smads信号转导通路及血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）在自发性高血压大鼠（ SHR）心脏重构中的作用。方法取雄性SHR大鼠16只，随机分为SHR干预组（卡托普利10 mg／kg·d）和SHR 对照组（蒸馏水）各8只，另取Wistar大鼠8只为正常对照组，分别给予SHR大鼠卡托普利10 mg／kg·d和蒸馏水灌服，共持续8周。造模前后测大鼠尾动脉血压，8周后股动脉放血处死大鼠， HE 染色观察大鼠心脏形态学改变，实时荧光定量多聚酶链式反应（ qRT?PCR）法检测大鼠心脏中 miRNA?137的表达，Western?blot 检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta1，TGF?β1）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、Smad蛋白3（small mother against decapen?taplegic protein three，Smad3）、I 型胶原（Col?Ⅰ）和Ⅲ型胶原（Col?Ⅲ）蛋白表达水平。结果 SHR大鼠心脏miRNA?137、AngⅡ、TGF?β1、Smad3、Col?Ⅰ及 Col?Ⅲ的表达量均高于 Wistar 大鼠（ P ＜0．01或 P＜0．05），SHR 干预组大鼠心肌细胞较 SHR 对照组明显变小，细胞排列较其紧密有序，miRNA?137、AngⅡ、TGF?β1、Smad3、Col?Ⅰ及Col?Ⅲ表达量均明显降低（ P ＜0．01或 P ＜0．05）。结论 miRNA?137可能通过上调AngⅡ及TGF?β1／Smads信号转导通路促进SHR心脏重构；卡托普利干预可抑制 miRNA?137表达。

一种用于观察小鼠后足趾类实验固定装置的研制

设计研制应用于观察小鼠后足趾类实验固定器，如发汗、止汗等实验研究，为其提供安全、方便、便于操作的实验工具。

50余种miRNA在神经胶质瘤中的表达水平及作用靶点

miRNAs是一类内源性的非编码小分子RNA，它能降解靶mRNAs或阻遏其翻译过程。在神经胶质瘤中，有些miRNAs表达水平是上调的，而有些则是下调的；有些miRNAs在肿瘤发生发展过程中起促进作用，而有些则发挥着类似抑癌基因的功能。因此，研究神经胶质瘤中miRNAs的表达概况，既可以为临床上胶质瘤的早期诊断提供辅助依据，还可以提供新的治疗策略。本文将就miRNAs在胶质瘤中表达水平及作用靶点的研究作一综述。

外周P2X3受体在不同炎性痛模型中的作用比较

P2 X3亚单位是嘌呤受体P2 X家族成员之一，高度选择性的表达于伤害感受器上，参与炎性痛病理过程。目前炎性痛的动物模型主要包括福尔马林炎性痛模型、弗氏佐剂炎性痛模型、角叉菜胶炎性痛模型、蜜蜂毒炎性痛模型等。不同的炎性痛模型具有不同的病理特征，福尔马林模型的主要特点是双时相的自发痛，由于炎症持续时间的不同，角叉菜胶模型一般用于亚急性的炎症模型，而弗氏佐剂模型和蜜蜂毒模型，以及松节油模型则用于慢性炎性痛模型研究，P2X3受体在其中的表达和功能可能有所不同，本文就外周P2X3受体在不同炎性痛模型中的作用做一综述。

认知功能相关的动物行为学实验研究进展

认知功能的行为学评估在相关疾病模型的生理机制研究、药物干预评估等实验研究中应用广泛。在众多的行为学实验中，评估学习记忆功能的实验为常见。本文就近年来动物模型中常用的认知行为学分析方法进行总结，对评价内容、各个行为学实验的优势及局限性做简要介绍，为认知功能障碍相关疾病模型的行为学分析提供参考。

大鼠行进行为的评价及其应用研究现状

行进行为（ locomotion ）是大鼠基本且重要的运动方式，可反映诸多实验模型动物的运动行为（ motion）表现与特征，制订大鼠行进行为评价方法与标准对于运动功能障碍程度评级和康复治疗效果评分具有重要的临床意义。本文通过文献查阅的方法，对近年来大鼠行进行为的评价方法及典型应用的研究现状进行综合分析与评述，以期为相关研究者提供必要的参考。

The Collaborative Cross( CC) is a powerful genetic resource with a wide range of applications in medical research. It is a multiparental genetic reference population, composed of 200 recombinant inbred mouse strains. It was designed to be a resource for rapid mapping of genes that mediate complex traits. The CC has been produced following an intense breeding program that had taken over ten years to complete. It is now becoming available to the research community. While advances in human genetic technologies over the last decade have been substantial, the CC provides the ability to make discoveries not possible with other methods or resources. It can be applied to any subject that can be measured or modelled in the mouse. Here, we discuss a range of applications for which the CC can be used, with examples taken from the early characterization of this powerful resource.

复杂性状遗传CC小鼠信息资源及研究应用

复杂性状遗传CC小鼠（ CC小鼠）由不同遗传背景的小鼠品系杂交后，近交培育而成，用于研究人类复杂性状疾病和疾病的遗传差异。 CC小鼠能体现不同小鼠亚种的遗传差异，其单核苷酸多态性是传统近交系小鼠的四倍。 CC小鼠在生命科学与医学研究领域的应用越来越广泛。本文通过信息检索等方式对CC小鼠相关信息资源进行梳理，阐述了CC小鼠的起源、数据库、应用工具，以及研究领域等，以推动CC小鼠资源在中国得到广泛应用。

实验动物学教学改革：课程学习与从业证书培训相结合

将研究生的课程教学与从业人员岗位证书规范化培训紧密结合是改革研究生医学实验动物学教学的一个行之有效的举措。一方面，通过转变实验动物学教学模式，使学生能够将实验动物学普遍知识与其各自专业相结合，提高他们在动物实验中的动手能力以及研究课题独立的寻找、设计和实施能力，在实践中培养其创新性思维。另一方面，在教学中同时学习国家的关于实验动物的法律法规和相关的伦理知识，使学生通过课程的学习获得实验动物从业人员岗位资格证书，打开动物实验的第一道门槛，终达到实验结果精确可靠，方法规范、标准，又符合伦理学原则。