泰泽病原体单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备多种抗泰泽病原体的单克隆抗体,用于该菌隐性感染的检测.方法用含泰泽病原体的大鼠肝匀浆免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术和间接免疫荧光方法筛选抗该菌的单克隆抗体;运用免疫电镜、Western blotting和免疫双向扩散试验确定单克隆抗体的抗原定位和相对分子质量及IgG亚类型.结果共筛选出5种单克隆抗体(M2、M3、M4、M5和M7).免疫电镜表明:抗体M2、M4、M5、和M7与泰泽病原体的细胞壁结合,而M3为抗菌毛的单克隆抗体;Western blotting结果表明:抗体M2、M3和M4与相对分子质量约为64×103的抗原有特异性结合,M5与M7与相对分子质量约为41×103的抗原特异性结合;M2、M5、M7为IgG1,M3为IgG2b,M4为IgG2a.对模拟自然感染大鼠考的松激发试验阳性为2/10,而单克隆抗体为诊断抗体的IFA则为8/10.除M7外,4种单抗不与清洁级以上大鼠回盲部细菌发生反应.结论筛选的杂交瘤细胞能稳定分泌抗体,其IFA效价达1:1 024;表明这些抗体具有高效价、较高特异性和敏感性.

大鼠白细胞及骨髓有核细胞减少模型的研究

目的建立白细胞及骨髓有核细胞减少的大鼠模型.方法20只正常SD大鼠,随机分成两组,试验组给大鼠腹腔反复注射环磷酰胺,对照组注射等体积的生理盐水.结果试验组大鼠体重明显降低,白细胞及骨髓有核细胞数明显减少,且停药15d时,白细胞总数仍维持在低值水平.结论此方法建立的大鼠模型,低白细胞水平维持的时间长,能够满足实验研究需要的观察时间,可用于化疗毒性的治疗药物筛选及其他治疗手段的研究.

No-1886对实验性糖尿病小型猪血糖、血脂异常和肝脏病变的保护作用观察

目的探讨合成化合物No-1886是否降低高糖高脂饲料诱发的糖尿病贵州小型猪的血浆葡萄糖、自由脂肪酸浓度和改善肝脏病变.方法3～4月龄贵州小型猪15只(♂8只、♀7只),随机选取5只饲以基础饲料为A组(正常对照组);5只饲以高糖高脂饲料为B组(糖尿病对照组);5只前3个月饲以高糖高脂饲料,后5个月饲以高糖高脂饲料加1.0%No-1886为C组(糖尿病治疗组),分别在0、2、3、4、5、6、8个月时从禁食过夜的猪眶静脉窦取血样测定葡萄糖、自由脂肪酸,第8个月末,处死动物,取肝脏1小块,10%甲醛液固定,常规石蜡包埋切片,分别作HE和肝糖原染色以及油红O染色,光学显微镜下观察并照相.结果糖尿病对照组和糖尿病治疗组加药前出现高血糖、高自由脂肪酸,并随着喂养时间的延长而逐渐升高.正常对照组血糖、自由脂肪酸未见明显升高,两组对比差异具有显著意义(P＜0.05),与糖尿病对照组比较,糖尿病治疗组血糖、自由脂肪酸明显降低.从肝脏病理切片观察所见,糖尿病对照组肝脏肝细胞索排列紊乱,中央静脉扩张,肝细胞脂肪变性明显,具大量脂肪空泡,并有局灶溶解性坏死,淋巴细胞浸润,肝糖原极少或消失,油红O染色显示细胞内有较多脂滴.而糖尿病治疗组未见明显脂肪空泡变性,组织结构基本正常,肝糖原丰富.油红O染色细胞内未见明显脂滴.结论No-1886不仅可改善脂质代谢紊乱,而且可降低血浆葡萄糖,减少肝糖原分解和减轻肝脏病变.可开发为治疗糖尿病糖代谢紊乱和脂质紊乱的药物.

SHR、SHRsp、WKy三品系大鼠血液生化检查参数

目的检查了解SHR、SHRs、WKy三品系大鼠血液生化的参数.方法每个品系分别取年轻大鼠(12周龄)、年老大鼠(22～28周龄)各14只,心脏取血,用自动生化分析仪检验血生化及电解质等指标.结果年老SHR、SHRs、WKy大鼠血肌酐平均水平较年轻大鼠分别高8.5%、9.2%和14.2%(P=0.07;P=0.07;P=0.04),但血钙、血磷较低.同龄SHR、SHRsp血磷平均水平均较同龄WKy低25.0%(P=0.12～P＜0.001).同龄SHR、SHRsp的肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶同工酶(LDH-1)较WKy升高1～2倍(P=0.15～P＜0.001).结论SHR、SHRsp及Wky三种品系大鼠的血液生化参数多为相似,但也有一些差别.

SD大鼠第三脑室室周区的生长抑素样接触液神经元

目的观察大鼠第三脑室室周区是否存在生长抑素样触液神经元.方法采用免疫细胞化学方法显示第三脑室室周区的生长抑素阳性神经元.结果第三脑室室周的室管膜下和室管膜内含有胞体或突起与第三脑室直接接触的生长抑素阳性神经元.结论大鼠第三脑室室周区存在生长抑素样触液神经元.

实验性房室不节对雄性小鼠生殖机能影响的初步研究

目的通过比较不同造模方法对雄性小鼠生殖机能方面的影响,研究单纯的房室不节是否能影响雄性小鼠生殖机能.方法利用房室不节建立肾阳虚证雄性小鼠模型,同时以脾虚证、恐伤肾致肾虚证、氢化可的松致肾虚证为对照因素,研究造模小鼠的睾丸乳酸脱氢酶-同工酶(LDH-X)、母鼠怀孕活胎数、精子密度、精子活力、精子畸形数.结果房室不节组的睾丸乳酸脱氢酶-同工酶(LDH-X)、母鼠怀孕活胎数、精子密度、精子活力、精子畸形数与正常组、脾虚组比较有统计学意义(0.01＜P＜0.05).对雄性小鼠生殖机能的影响比较明显.结论单纯的房室不节能影响雄性小鼠的生殖机能.

通痹片对大鼠佐剂性关节炎防治作用及其机理研究

目的观察通痹片对大鼠佐剂性关节炎(AA)动物模型的治疗作用及其免疫机制.方法制做大鼠佐剂关节炎动物模型,经通痹片治疗后,观察关节指数,检测大鼠关节液和血液中IL-1、TNFα、IL-6、IL-8的含量、腹腔巨噬细胞分泌细胞因子(IL-1、TNFα、IL-6、IL-8)的能力、脾淋巴细胞分泌IL-6、IL-8的能力.结果治疗组关节指数明显低于AA对照组(P＜0.01),能明显改善AA大鼠的关节炎症状;给药组大鼠血清中IL-1、TNFα、IL-6和IL-8水平较AA对照组明显降低;腹腔巨噬细胞分泌细胞因子(IL-1、TNFα、IL-6、IL-8)的能力,以及脾淋巴细胞分泌IL-6、IL-8的能力显著受到抑制;关节液内炎症细胞因子的水平明显下降.结论通痹片对佐剂性关节炎有良好的治疗作用,其抗炎作用的发挥与其免疫抑制反应有关.

玉米秸作为大鼠垫料对其生长发育及繁殖性能的影响

目的对比观察不同原料制成的垫料对SD大鼠繁殖性能及其仔鼠生长发育的影响,探讨以玉米秸为原料制作实验动物新型垫料的可行性.方法测定使用玉米秸、卫生纸、刨花三种垫料时SD大鼠的繁殖性能指标及仔鼠体重变化,并进行比较分析.结果出生仔数、初生窝重、初生重三个指标三组间比较差异无显著性(P＞0.05);离乳率三组间差异有显著性(P＜0.05),玉米秸组与卫生纸组差异有极显著性(P＜0.01),玉米秸组高,为99.79%;三组之间胎次间隔差异有显著性(P＜0.05),玉米秸组为31.41 d;仔鼠生长发育指标,三组之间比较,差异无显著性(P＞0.05).结论玉米秸作为垫料时,SD大鼠能保持较高的繁殖性能,可以作为大鼠垫料使用.

嗜肺巴氏杆菌外膜蛋白和脂多糖提取及其活性的初步研究

目的提取嗜肺巴氏杆菌外膜蛋白(OMP)和脂多糖(LPS),测定其稳定性和抗原性,探讨其作为诊断抗原的可能性.方法选取具有代表性的嗜肺巴氏杆菌15株及参考株共16株,提取OMP、LPS,通过SDS-PAGE、Western blot、ELISA等方法在稳定性、抗原性等方面与全菌抗原(WC)进行比较.结果16株嗜肺巴氏杆菌OMP的SDS-PAGE图谱基本一致,不同培养基成分、培养时间和不同体外传代次数的提取物均显示5条带,相对分子质量大约是(17、26、31、37、41)×103.其中5株嗜肺巴氏杆菌的LPS为光滑型和粗糙型LPS的混合物,主带相对分子质量在14.4×103左右.外膜蛋白和脂寡糖提取物保持了其抗原反应性和免疫原性.OMP和LPS具有种和型的特异性.OMP的5条条带抗原性存在差异,相对分子质量(26、37)×103的蛋白不具有抗原性,相对分子质量17×103的蛋白抗原为受试菌株的共同抗原,(31、41)×103抗原具有大鼠株和小鼠株的特异性.LPS表现出较强的型的特异性.结论本研究提取的OMP和LPS活性稳定,并保持了抗原性和免疫原性.

湖北封闭群日本大耳白兔部分生物学参数的观察

目的建立湖北封闭群日本大耳白兔生物学数据库,为毒理学实验提供相关的实验动物背景资料.方法采用物理称重法测定日本大耳白兔体重、脏器重量;自动血球计数仪、半自动生化分析仪测定红细胞数等10项血液有形成分和血红蛋白,以及碱性磷酸酶等10项生化参数.并与国内常用新西兰和北京的大耳白实验兔有关参数进行对比.结果提供了湖北封闭群日本大耳白兔的体重、脏器重量;RBC,HGB,MCV,MCH,MCHC,HCT,PLT,MPV,WBC,W-SCR W-LCR,和AST、ALT、ALP、BUN、TP、ALB、GLU、T-BIL、Grea、T-CHO等与安全性评价有关常用参数.结论不同品种间的动物生物学特性有差异,即使同一品种而地区不同的封闭群动物,由于环境、饲养方式、营养状态不同,某些生物学特性和血液、生化参数也有差别.因此,为毒理学实验者提供实验家兔时,除提供微生物等级合格证外,还应按实验需求提供有关的生物学参数.

猕猴SPF种群的建立及保持过程中B病毒抗体监测研究

目的建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式.方法采用BV EIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪.结果从自繁自育猴中随机挑选218只断奶食蟹猴,92只断奶猕猴,经过近两年反复筛选得到25只SPF食蟹猴,9只SPF猕猴,此结果经美国BioReliance公司检测得到确认.结论该模式能有效监测猕猴BV抗体变化,为本中心在国内建立猕猴SPF种群提供了有力的技术保障.

我国实验动物科学发展现状与建议

我国实验动物科学十几年来已有很多进步,但由于受多因素的制约,在动物种类、质量和实验环境设施等方面有不足之处.建议通过加强领导、培养人才、统一规划等方式来推动实验动物科学快速、稳定、健康的发展.

大鼠原位肝移植的围手术期处理

目的探讨大鼠原位肝移植实验的围手术期处理的特点.方法在Kamada用"二袖套法"吻合血管的基础上进行改良.供体改经腹主动脉进行肝脏冷灌注,肝上下腔静脉用缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合,胆总管采用单管内支架胆管端吻合法.结果共施行大鼠原位肝移植360次,手术成功率为91.3%.非干预组中同系移植大鼠1周存活率为86.5%,3个月存活率达80.7%.结论积极手术前准备,手术中熟悉步骤、主动配合、手术后耐心细致护理、密切观察、可以保证大鼠原位肝移植实验顺利进行、减少并发症的发生、提高动物的长期存活率.

恒河猴子宫内膜炎性出血模型的建立

目的建立恒河猴子宫内膜炎性出血模型.方法选择月经正常的雌性育龄恒河猴7只,随机分为实验组4只和对照组3只.实验组在月经第三天,用致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、厌氧消化链球菌混合感染恒河猴的子宫内膜,宫腔细菌接种后第5天进行宫颈分泌物的细菌培养鉴定,继而连续观察三个月经周期经量、经期等的变化,于第四个月经周期分泌晚期取子宫内膜进行组织病理学检测.对照组未进行宫腔细菌接种,其经量、经期的观察及内膜取材时间同实验组.结果①实验组宫颈分泌物细菌培养鉴定证实三种细菌为本实验宫腔接种的细菌.②实验组与对照组比较,月经量明显增多、经期明显延长.③光镜观察显示:实验组为慢性子宫内膜炎症改变,表现为内膜上皮坏死,间质炎性细胞增多明显,以中性粒细胞为主,间质出血严重,表浅微血管、静脉窦扩张明显,螺旋动脉扩张较明显,特别是在扩张的、大量炎性分泌物的腺体周围.其内皮细胞及平滑肌细胞变性严重、结构模糊、界限不清,平滑肌细胞排列紊乱.对照组为正常行经前期图像,螺旋动脉强烈收缩,内皮细胞无变性.结论通过月经情况的改变及内膜形态学观察评价该模型是成功的.

改良大鼠同种异位心脏移植术

目的改进制备大鼠同种异位心脏移植模型技术,提高成功率.方法大鼠同种异位心脏移植40例,10例采用Ono术式,30例采用改良术式,将供心右肺动脉吻合于受体下腔静脉,并改进围手术期处理.结果预实验组12例死亡,实验组20例均存活,死亡原因与手术方式及围手术期处理有关.结论成功制备大鼠心脏移植模型,良好手术技术和严格围手术期处理同等重要.

兔遗传性角膜混浊伴角膜缘干细胞缺陷两例报告

人类角膜营养不良是一类侵犯双眼的遗传性疾病,严重损害视功能.目前病因不明,治疗亦缺乏良策.近我们观察到2只先天性虹膜基质发育不全合并角膜混浊的大耳白兔,都存在有角膜缘干细胞缺陷,很受启发,特报告如下.

以化疗对猪行非清髓性预处理

在异种移植中适用于猪的非清髓性预处理尚无报道,本实验试图探索这样的方法.

蔷薇红景天提取液对糖尿病模型小鼠胰腺功能的修复作用

蔷薇红景天是一种生长在高海拔地区的植物,具抗辐射、耐缺氧等特性.有研究表明,蔷薇红景天提取液可改善四氧嘧啶型糖尿病动物的血糖水平,但其对糖尿病模型动物的胰腺是否具有修复作用,目前尚未见报道.

充血性心肌病动物模型的实验研究

1材料和方法大耳白兔20只,体重2.0～2.5 kg,雌雄各半,6月龄,由军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号:医动字第01-3008;重酒石酸去甲肾上腺素注射液(以下称去甲肾上腺素)为上海天丰药厂产品.

大鼠隐静脉注射方法探讨

大小鼠静脉注射多采用尾静脉.小鼠采用此法较易,大鼠较困难,成功率较低,反复多次注射就更加困难.常常因为给药困难使实验陷于困境.

Seldinger腔静脉置管技术在动物实验中的应用

在进行猪的肝肠联合移植手术过程中,因其手术时间长,操作复杂,失血、失液情况严重,血液动力学对机体的影响较大.

猕猴开颅手术的方法与体会

利用氯胺酮肌内注射麻醉,用动物立体定向头架固定猴头行开颅手术.结果表明,手术组猕猴没有手术并发症及手术死亡.用氯胺酮麻醉稳定,维持时间可满足制作创伤模型或移植实验要求,本方法开颅足以显露猴大脑,经猴顶部切口可暴露猴脑额叶后份、顶叶、枕叶及颞叶.

执行实验动物饲料质量新标准的体会

新的实验动物配合饲料通用标准(中华人民共和国国家标准GB14924--2001),由中国实验动物学会起草,2001年8月经中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局公布,自2002年5月1日开始在全国实施,代替原实验动物饲料质量标准(GB 14924-1994),这对实验动物饲料工作是一项大事.

国家啮齿类实验动物种子中心简介

中国实验动物学会第六届学术年会(第一轮通知)