医学研究杂志
Journal of Medical Research 의학구잡지
- 主管单位: 中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位: 中国医学科学院
- 影响因子: 0.70
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-548X
- 国内刊号: 11-5453/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
常规超声诊断困难的甲状腺结节的超声造影定性及定量研究
目的 探讨超声造影定性指标及定量参数对常规超声诊断困难的甲状腺结节的诊断价值.方法 在2011年11月~2015年12月就诊于北京协和医院的甲状腺结节患者中,前瞻性纳入常规超声诊断困难结节,65例患者共71个结节,所有患者均经手术治疗,术前均行常规超声和超声造影检查.以手术病理结果为金标准,分析超声造影灌注模式及时间强度曲线指标在良恶性鉴别中的意义.结果 恶性组10个(14.1%)结节,其中5个乳头状癌,5个滤泡癌;良性组61个(85.9%)结节,其中44个(72.1%)结节性甲状腺肿,14个(23.0%)腺瘤,3个(4.9%)桥本甲状腺炎.恶性组大径2.80±1.48cm,良性组大径2.89±1.35cm,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).超声造影灌注增强模式在良恶性组间差异有统计学意义(P<0.05),不均匀增强的模式更易发生于恶性病变,诊断敏感度、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为50.0%、95.1%、62.5%、92.1%.余超声造影定性指标(增强方向、增强程度)和超声造影定量参数(增强始增时间、达峰时间、峰值强度、峰值降半时间和相对达峰时间、相对达峰强度)在良恶性病变中差异均无统计学意义(P>0.05).结论 超声造影增强模式有助于鉴别常规超声诊断困难的甲状腺结节,其他指标均无法有效鉴别良恶性.
-
白藜芦醇对荷卵巢癌大鼠免疫功能的影响
目的 研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对荷卵巢癌大鼠免疫功能的影响.方法 通过右腋窝皮下注射接种卵巢癌NUTU-19细胞悬液的方法制备荷卵巢癌大鼠模型,取50只模型大鼠随机分为:模型对照组、白藜芦醇(200、100、50mg/kg)治疗组和顺铂2mg/kg治疗组(阳性对照);白藜芦醇各治疗组隔天灌胃给药1次,顺铂组隔天腹腔注射给药1次,共给药治疗5次.治疗完成后,观察比较各组大鼠一般状态及皮下肿瘤生长情况;处死动物后剥取肿瘤组织,称量瘤重量并计算抑瘤率;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法测定各组大鼠脾淋巴细胞转化率;通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;通过流式细胞仪检测各组大鼠血中T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)百分率,并计算CD4 +/CD8+比值;通过苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理性形态学变化.结果 与模型对照组比较,白藜芦醇治疗组大鼠皮毛松散、饮食差状况减轻,瘤体减小、活动度差、硬度差,以200mg/kg治疗组效果为显著;白藜芦醇(200、100mg/kg)治疗组肿瘤重量显著减轻且抑瘤率显著升高(P<0.05);脾淋巴细胞转化率显著升高(P<0.05);血清中IL-2和TNF-α含量均显著降低(P<0.05);白藜芦醇(200、100mg/kg)治疗组血液中CD4+百分率显著升高(P<0.05),白藜芦醇200mg/kg治疗组CD8+百分率显著升高,CD4+/CD8+比值显著升高(P<0.05);白藜芦醇治疗组肿瘤组织呈现片状坏死、瘤细胞皱缩等病理性形态学变化,以200mg/kg治疗组为明显.结论 白藜芦醇能够显著提高卵巢癌大鼠免疫功能,作用机制可能与其能够有效降低炎性因子(IL-2、TNF-α)水平,提高CD4+、CD8+百分率及CD4+/CD8+比值有关.
-
E-cadherin和Slug在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的 研究E-cadherin和Slug在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学DAB显色法检测74例OSCC组织切片和30例正常口腔黏膜组织切片中E-cadherin和Slug的表达,分析E-cadherin与Slug在OSCC和正常口腔黏膜组织中的表达及E-cadherin与Slug的异常表达与临床病理特征之间的关系.结果 在OSCC组织中E-cadherin和Slug的阳性表达率分别为52.63%(40/74)和48.65%(36/74).结合OSCC临床病理特征发现,E-cadherin的表达与肿瘤病理分级、淋巴结转移有统计学意义(P<0.05),Slug的表达与肿瘤病理分级、TNM分期、淋巴结转移有统计学意义(P<0.05),同时发现OSCC组织中E-cadherin的表达与Slug的表达呈负相关(r=-0.513,P<0.05).结论 E-cadherin和Slug的表达异常可能与OSCC的发生、发展、转移相关,其二者的联合检测可作为判断OSCC恶性程度和预后的参考指标.
-
人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1在三阴性乳腺癌中的表达研究
目的 检测人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease/redox effector factor 1,APE-1/REF-1)在乳腺癌中的表达,分析其与乳腺癌的临床病理特征的关系,及APE-1对三阴性乳腺癌患者预后的影响.方法 采用免疫组化Envision两步法检测323例乳腺癌中APE-1蛋白的表达,其中108例为三阴性乳腺癌.计数资料采用x2检验和Fisher精确检验.采用Kaplan-Meier法进行生存分析及Log-rank检验进行生存率的比较,并用COX比例风险回归模型进行多因素分析.结果 APE-1在乳腺癌组织较癌旁组织有更高的表达,且在非三阴性乳腺癌中与肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、临床分期、雌激素受体、人类表皮生长因子2型受体的表达显著相关(P<0.05).在三阴性乳腺癌中,APE-1表达与肿瘤大小(P=0.006)呈正相关,且APE-1低表达组有较好的生存率(P=0.007).腋窝淋巴结阳性的三阴性乳腺癌患者中,APE-1低表达组有较好的预后(P =0.042). 结论 APE-1是影响三阴性乳腺癌患者预后的独立因子,可能成为三阴性乳腺癌的潜在治疗靶点.
-
内质网相关降解通路小分子抑制剂与传统抗癌药物联合运用对肿瘤细胞的抑制作用
目的 探究内质网相关降解通路(endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD)小分子抑制剂EeyarestatinⅠ (Eer Ⅰ)与传统抗癌药物联合运用对肿瘤细胞的抑制作用.方法 不同剂量的Eer Ⅰ处理结肠癌SW480和胰腺癌PANC-1细胞,MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Eer Ⅰ单独或与抗癌药物顺铂(cisplatin,CDDP)和硼替佐米(bortezomib,BTZ)联用处理SW480和PANC-l细胞,Western blot法检测细胞中Poly ADP-ribose polymerase (PARP)及其剪切体和糖调节蛋白(GRP78/BiP)的蛋白表达.结果 Eer Ⅰ抑制SW480和PANC-1细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量-效应关系;联合用药的实验结果显示Eer Ⅰ提高了SW480和PANC-1细胞对CDDP和BTZ的敏感度(P<0.01);Western blot法检测结果表明,联合用药促进了PARP在SW480和PANC-1细胞中的剪切,同时BTZ处理可提高BiP蛋白的表达,提示激活内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应.结论 ERAD通路抑制剂EerⅠ可明显增强传统抗癌药物CDDP和BTZ的抗癌活性,这为抗癌新药研发及肿瘤耐药性逆转剂的研究提供了新的线索.
-
椎体成形术治疗后壁不完整的骨质疏松性椎体压缩性骨折
目的 研究经皮椎体后凸成形术(PKP)治疗后壁不完整的骨质疏松性椎体压缩性骨折(osteoporotic vertebral com-pression fracture,OVEF)的临床效果.方法 自2010年1月起采用椎体成形术治疗笔者医院后壁不完整但无神经损伤的骨质疏松性椎体压缩性骨折24例,观察术前和末次随访时患者的骨水泥渗漏情况、Oswesny功能障碍指数(ODI)和临床影像学的改变.结果8例后壁不完整的骨质疏松性椎体压缩性骨折均成功完成手术,术后随访时间范围为6~12个月,平均随访时间10.6个月,3例出现骨水泥渗漏,其中有2例经椎旁渗漏,1例椎弓根穿刺通道渗漏,术前和末次随访时患者的Oswesny功能障碍指数(oswestry disability index,ODI),椎体前缘高度、椎体中间高度、Cobb角和病椎楔形角的差异有统计学意义(P<0.05).结论 对于椎体后壁不完整的骨质疏松性椎体骨折,在掌握严格适应证和手术注意事项的情况下,经皮椎体成形术(PKP)治疗是可行的.
-
骨髓间充质干细胞抑制皮肤瘢痕形成的机制研究
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)抑制皮肤瘢痕形成的机制研究,为增生性瘢痕的防治提供实验基础.方法 C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、移植对照组、模型组以及MSCs移植组(n=6).对照组和移植对照组小鼠每日于背部经皮下注射1 ml PBS,3h后移植对照组经皮下注射1×106个MSCs,对照组给予相同剂量的PBS,模型组和MSCs移植组小鼠每日于背部经皮下注射1ml(1 mg/ml)博来霉素,3h后MSCs移植组经皮下注射1×106个MSCs,模型组给予相同剂量的PBS,共计3周.RT-PCR检测与瘢痕形成相关的基因表达,免疫组织化学法检测皮肤纤维化程度指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 BM-MSCs下调了TGF-β1、Ⅰ型胶原及HSP47的表达,并且促进了MMP-2、MMP-9及MMP-13的表达,也使得α-SMA的表达下调.结论 MSCs可以重塑细胞外基质以及抑制肌成纤维细胞生成,从而抑制皮肤瘢痕形成,为MSCs在皮肤创伤修复领域中的应用提供了新的实验基础.
-
男性糖尿病患者血清睾酮水平与动脉粥样硬化的相关性
目的 研究男性糖尿病患者的血清睾酮(testosterone,T)水平与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness,IMT)的关系,进而探讨男性糖尿病患者血清雄激素水平与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的相关性.方法 收集126名男性糖尿病患者,高频超声测量其颈动脉IMT,并根据IMT将患者分为正常组(n=64)和增厚组(n=62),记录患者年龄、并测定其血清睾酮(T)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)水平.结果 IMT增厚组患者年龄较正常组大(P<0.05),而睾酮水平则降低(P<0.05),其他指标组间差异无统计学意义(P>0.05).进一步的Logistic回归分析,发现年龄与颈动脉IMT呈正相关,而睾酮水平与颈动脉IMT呈负相关,其中睾酮水平与颈动脉IMT的相关性更大.结论 男性糖尿病患者血清睾酮水平的降低可促进动脉粥样硬化(AS)的发生,年龄以及睾酮水平与动脉粥样硬化(AS)的发生存在相关性.
-
常用血清肿瘤标志物对腹膜假黏液瘤诊断价值的初步探讨
目的 初步探讨常用血清肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖类抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)、糖类抗原724(carbohydrate antigen 724,CA724)和糖类抗原242(carbohydrateantigen 242,CA242)对初诊腹膜假黏液瘤的诊断价值.方法 研究对象包括28例经病理确诊的腹膜假黏液瘤患者,23例肠梗阻、肠炎等良性腹部疾病患者及29例健康体检者,应用化学发光法测定上述3组研究对象血清中CEA、CA125、CA199、CA724和CA242的含量,分析其在3组研究对象血清中的表达情况,采用ROC曲线分析各检测项目对腹膜假黏液瘤的敏感度和特异性.结果 腹膜假黏液瘤患者血清中5种肿瘤标志物的表达水平显著高于良性疾病组和健康对照组(P均<0.05),其中CEA、CA125、CA199、CA724和CA242对疾病的敏感度分别是89.3%、89.3%、78.6%、92.9%和89.3%,特异性分别为100.0%、98.1%、98.1%、92.3%和98.1%,曲线下面积分别为0.945、0.942、0.875、0.966和0.954.将5种肿瘤标志物联合检测,发现该组合对腹膜假黏液瘤诊断的敏感度为100.0%,特异性为80.8%,阳性预测值为73.7%,阴性预测值为100%.结论 5种肿瘤标志物联合检测对腹膜假黏液瘤诊断的敏感度高于单个肿瘤标志物,且联合检测对疾病的阴性预测值可达100%,该组合可辅助临床对非黏液瘤患者做出排除诊断.
-
胰高血糖素与2型糖尿病的相关性研究
目的 探讨2型糖尿病患者空腹及糖负荷后血浆胰高血糖素(Gg)、血糖、C肽的变化及三者之间的动态关系,并分析2型糖尿病患者血脂、体重指数(BMI)的变化及病程、年龄、BMI、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白、血脂与胰高血糖素的相关性.方法 对照组和糖尿病组清晨空腹测量身高、体重后行糖耐量实验(OCTT),分别于空腹、糖负荷后30、60、120、180min测定血浆Gg、血糖、C肽的水平,并对Gg与C肽、糖化血红蛋白、血脂等指标进行相关性分析.结果 两组C肽和Gg的分泌量随着血糖的升降而升降.糖尿病患者空腹及餐后血浆Gg水平均高于对照组(P<0.05).糖尿病组BMI、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平高于对照组,高密度脂蛋白(HDL)水平低于对照组(P<0.05).糖尿病组,Gg与病程、年龄、BMI、糖化血红蛋白、FBG、CHOL、TG、LDL呈正相关,与HDL呈负相关.结论 Gg的绝对或相对分泌增多,是2型糖尿病患者高血糖症的因素之一.血糖、C肽、胰高血糖素相互促进分泌为三者之间的关系.在糖尿病患者中随着病程、年龄、BMI、血脂水平的增长,胰岛β细胞功能受损和Gg水平升高并存,对于保护胰岛β细胞功能和调控胰高血糖素双管齐下才能使血糖达到理想水平.
-
骨桥蛋白对恶性胸膜间皮瘤诊断价值的Meta分析
目的 探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)检测对恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)的诊断价值.方法 在Medline、Embase及Cochrane图书馆数据库中,使用合适的关键词,检索截至2015年9月5日发表的有关评价OPN对恶性胸膜间皮瘤诊断价值的英文文献,由两名评价者使用QUADAS-2工具独立评价文献质量.采用随机效应模型进行统计分析得到OPN诊断MPM的总的敏感度、特异性及诊断比值比;应用SROC (summary receiver operating characteristic curves)评估OPN诊断MPM的总体性能.结果 共纳入7篇研究文献.汇总后的结果为:敏感度为0.59(95% CI:0.54 ~0.63),特异性为0.85(95% CI:0.83 ~0.87),诊断比值比为10.63(95% CI:7.73 ~ 14.60).SROC曲线下面积为0.839,Q值为0.771.结论 OPN可能是诊断MPM的一种有效标志物,鉴于已有的研究数量和病例数较少,尚需更多研究来验证OPN对MPM的诊断价值.
-
急性脑梗死患者颈动脉内膜中层厚度性别差异性研究
目的 探究急性脑梗死患者颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness,IMT)的性别差异,为脑梗死患者诊断和防治的性别差异提供参考.方法 选择急性脑梗死患者193例,依据性别将193例急性脑梗死患者分为两组:男性急性脑梗死组94例,女性急性脑梗死组99例.检测两组受试者血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,采用彩色多普勒超声测定两组受试者颈动脉IMT,比较两组间各指标的差异,分析颈动脉IMT性别差异性原因.结果 男性急性脑梗死患者组颈动脉IMT较女性急性脑梗死组厚,差异有统计学意义(P<0.05);男性急性脑梗死组血浆Hcy水平、LDL-C水平及吸烟率均高于女性急性脑梗死组,差异有统计学意义(P<0.05);女性急性脑梗死组HDL-C水平高于男性急性脑梗死组,差异有统计学意义(P=0.000);多变量Logistic回归显示血浆高Hcy、LDL-C水平,高吸烟率以及低血浆HDL-C与男性显著相关(P<0.05);多元线性回归分析进一步揭示男性、年龄、Hcy、吸烟与颈动脉IMT独立相关.结论 男性急性脑梗死患者组颈动脉IMT较女性急性脑梗死组厚,这可能与血浆Hcy水平、吸烟不良行为密切相关.
-
抑制素A在孕中期21-三体综合征筛查中的应用
目的 通过对比抑制素A单独或加入到传统三联21-三体综合征筛查前后检测结果的差异,评估抑制素A在孕中期21-三体综合征筛查中的作用,以建立一种简便、准确,且更加优化的孕期唐筛方案.方法 采集18例21-三体综合征孕妇(病例组)与90例胎儿正常孕妇(对照组)稳态浓度的血浆样品行病例对照研究,利用全自动微粒子化学发光法检测抑制素A、AFP、uE3和β-hCG含量,通过体重和孕周等校正后,用SsdwLab 5软件计算21-三体综合征风险值,并对检测结果进行统计分析.结果 抑制素A(MoM)在对照组和病例组孕妇中均符合对数正态分布;绘制各组抑制素A(MoM)频数分布图,结果相比对照组,病例组孕妇的血清抑制素A水平显著抬高(1.13±0.47 MoM vs 2.49 ±1.51 MoM,P<0.05),中位MoM分别为1.00 MoM和2.18 MoM,描记曲线整体右移.在1%、3%和5%的假阳性率时,抑制素A单变量的检出率分别为36%、50%和60%,与β-hCG单变量的检出率相当,而优于传统三联法中的另外两个血清标志物AFP和uE3,数据间比较差异有统计学意义(P<0.05).以抑制素A的检测数据为y,AFP、uE3和β-hCG含量为x进行Passing-Bablock线性回归,发现抑制素A与β-hCG间呈正相关,相关系数为0.34,相关性有统计学意义(P<0.05),而与AFP和uE3的相关性差异均无统计学意义(P>0.05).传统三联筛查的ROC曲线下面积(ROC-AUC)为0.93,联合抑制素A后的四联筛查ROC曲线下面积为0.95;在5%假阳性率时,三联法和四联法的诊断敏感度分别为71%和78%,两种方案筛查效能差异具有统计学意义(P<0.05).结论 抑制素A是孕中期21-三体综合征筛查的佳血清标志物之一,联合AFP、β-hCG和uE3后的四联法较传统三联筛查有更好的检测性能,建议推广入临床常规使用.
-
平阳霉素诱导人脐静脉血管内皮细胞HUVEC凋亡的作用机制
目的 检测不同浓度平阳霉素(pingyangmycin,PYM)作用24h对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞的生长抑制及凋亡的影响,探讨平阳霉素诱导HUVEC细胞凋亡佳浓度及有关作用机制.方法 用不同浓度的平阳霉素作用HUVEC细胞24h,以细胞增殖-毒性8检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测比较0.1、10、100、1000μg/ml平阳霉素作用24h后对HUVEC细胞的抑制作用,用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶细胞凋亡检测试剂盒(Annexin-V FITC/PI apoptosis kit)检测不同浓度PYM对HUVEC细胞凋亡作用的影响,蛋白印迹法(Western blot)检测不同浓度平阳霉素作用HUVEC细胞后内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达.结果 CCK-8结果显示随平阳霉素浓度的升高,对HUVEC细胞的抑制作用越明显(P<0.05);然平阳霉素药物浓度100μg/ml和1000μg/ml组相比,差异无显著性统计学意义(P>0.05).流式细胞检测显示0.1、1、10、100μg/ml平阳霉素作用24h后细胞凋亡率分别为5.37%±1.63%、12.70%±1.57%、24.70%±6.99%、23.60%±0.80%,坏死率分别为4.87%±2.09%、7.32%±3.88%、39.10%±6.18%、66.30%±0.40%,随药物浓度增加而增高,过高浓度细胞坏死占主导,和对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot法结果显示,平阳霉素各浓度作用24h后促进内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达.结论 平阳霉素在体外能明显抑制HUVEC细胞生长并促进其凋亡,当平阳霉素浓度达到100μg/ml时,细胞以坏死为主;平阳霉素可能通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径诱导HUVEC细胞凋亡.
-
脑胶质瘤组织中Tip60蛋白表达与预后关系
目的 揭示脑胶质瘤组织中Tip60蛋白表达与临床病理特征及长期预后的关系.方法 收集108例脑胶质瘤肿瘤标本,采用免疫组织化学方法检测神经胶质瘤组织Tip60蛋白表达,统计分析Tip60蛋白表达与患者性别、年龄、组织学分级、肿瘤部位、肿瘤类型、肿瘤直径和KPS评分等临床病理特征及5年总生存时间的关系.结果 脑胶质瘤组织中Tip60蛋白表达与肿瘤级别密切相关,高级别胶质瘤比低级别胶质瘤Tip60蛋白表达显著减少(P<0.001).Tip60蛋白低表达组患者平均5年总生存时间25.3个月(95% CI:20.9 ~29.8),Tip60蛋白高表达组患者平均5年总生存时间38.9个月(95% CI:32.9 ~45.0);经Log-rank检验,低表达组平均5年总生存时间显著短于高表达组(P =0.001).多因素COX回归分析显示,Tip60蛋白低表达是5年总生存时间缩短的独立危险因素(HR=1.762,95% CI:1.028~3.020,P=0.039).结论 Tip60蛋白与神经胶质瘤恶性程度密切相关,Tip60蛋白低表达是神经胶质瘤长期预后不良的独立危险因素.
-
保护性肺通气联合药物对围术期肺癌患者的影响
目的 探讨保护性通气联合药物对肺癌患者围术期的影响.方法 80例ASA分级Ⅰ~Ⅱ级拟行肺癌切除术的患者,随机分为4组(n=20):空白对照组(R组),保护性通气组(A组),保护性通气+依达拉奉处理组(B组),保护性通气+乌司他丁处理组(C组).所有患者行常规全身麻醉,双腔支气管插管辅助通气,R组设定潮气量为9ml/kg,单肺通气(one-lung yentilation,OLV)前10min给予100ml氯化钠注射液静脉滴注,A组在OLV前10min给予保护性通气策略:潮气量6ml/kg+ 5cmH2OPEEP,并等量氯化钠注射液静脉滴注,B组在OLV前10min行A组通气方式,给予0.5mg/kg依达拉奉注射液稀释于等量氯化钠注射液静脉滴注,C组在OLV前10min行A组通气方式,并给予5000U/kg乌司他丁稀释于等量氯化钠注射液静脉滴注.分别于麻醉诱导后(T0)、OLV 60min(T1)、术后120min(T2)抽取动脉血5ml,测定血清中肺表面活性蛋白D(SP-D)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素8(IL-8)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平.结果 在T1、T2时间点,与R组比较,A、B、C组的SP-D、TNF-α、IL-8水平降低(P<0.05),与A组比较,B、C组降低(P<0.05),B组和C组差异无统计学意义(P>0.05);T1、T2时间点,A、B、C组的MDA水平较R组降低,其中B、C组较A组降低(P<0.05),B组和C组差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C组的SOD水平较R组升高(P<0.05),其中B、C组较A组升高(P<0.05),B组和C组差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺保护性通气联合药物应用于肺癌患者能显著降低术中气道压力,改善氧合状况,有效抑制炎性反应和氧化应激反应,发挥肺保护作用,其中肺保护性通气联合依达拉奉药物干预与肺保护性通气联合乌司他丁药物差异无统计学意义.
-
优化整体原位杂交方法检测基因在幼鼠大脑中的表达
目的 优化整体原位杂交方法,用于检测基因在幼鼠大脑中的时空表达分布.方法 通过摸索佳蛋白酶K的消化时间,改良杂交缓冲液成分,并延长杂交时间和漂洗时间,对整体原位杂交方法进行优化,并用优化的方法检测了Cdh6、Bhlhb5和Lmo4 mRNA在出生后7天的小鼠大脑中的整体表达分布.结果 采用优化的整体原位杂交方法成功地检测了3种mRNA在幼鼠全脑的区域性表达特征,特异性杂交信号强,非特异性背景低.结论成功优化了幼鼠全脑原位杂交方法,为开展后续的研究打下基础.
-
人胶质瘤自杀基因细胞系的建立及其在胶质瘤治疗研究中的应用
目的 构建CD基因工程化人脑胶质瘤细胞并在此基础上进行胶质瘤治疗研究.方法 通过In-fusion基因克隆的方法,构建携带CD基因慢病毒载体;通过293T细胞体外包装获得慢病毒,并测定病毒效价;通过慢病毒体外感染细胞获得CD基因工程化人脑胶质瘤细胞;通过流式分选获得基因稳定表达细胞;通过CCK-8评价加入5-FC前药和(或)HSV-1后细胞存活率.结果 成功构建pLVX-CD-IRES-ZsGreen1慢病毒载体并体外包装获得相应慢病毒;慢病毒感染人脑胶质瘤U87细胞后获得携带CD基因的阳性细胞,并通过体外培养30天后流式分选获得稳定阳性细胞;加入前药5-FC和(或)HSV-1后对携带CD基因的U87细胞杀伤作用明显(P<0.01),其中5-FC联合HSV-1对胶质瘤细胞作用更加高效(P<0.01).结论 成功获得携带CD基因的人脑胶质瘤细胞;前药5-FC联合HSV-1对胶质瘤细胞具有更加高效的杀伤疗效.
-
沉默Kif5b赋予MDCK细胞干性
目的 观察沉默Kif5b对上皮细胞MDCK的影响并探讨Kif5b表达水平与细胞分化程度的相关性.方法 设计构建靶向Kif5b基因的短发卡RNA(shRNA)质粒载体,并转染犬肾上皮细胞株MDCK,检测其对Kif5b表达的抑制作用;采用Western blot法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(vimentin)在各组细胞中的表达差异;通过细胞诱导液培养检测细胞分化为脂肪细胞和成骨细胞的能力.结果 从形态上看,对照组MDCK细胞间紧密相连,呈鹅卵石状分布,而Kif5b沉默的细胞呈成纤维细胞状;与对照组相比,转染Kif5b-shRNA显著抑制Kif5b的表达,同时E-cadherin的表达下降,N-cadherin和vimentin的表达上升,细胞抵抗胰蛋白酶消化的能力降低;沉默Kif5b的MDCK细胞能被分化为脂肪细胞和成骨细胞;此外,Kif5b在MDCK中的表达量显著高于小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cell).结论 在MDCK细胞中沉默Kif5b诱导MDCK细胞经历上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition)过程,去分化为间充质干细胞样细胞,去分化的细胞能够被转分化为特化的脂肪细胞和成骨细胞.Kif5b的表达量与细胞的分化程度呈正相关.
-
番茄红素对高脂性脂肪肝大鼠的保护作用及其机制研究
目的 研究番茄红素(lycopene,LP)对高脂性脂肪肝大鼠的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 取120只实验用大鼠随机分为正常对照组、模型组、LP(10、20、40mg/kg)治疗组和辛伐他汀1.8mg/kg治疗组(阳性对照组).通过高脂饲料喂养8周制备高脂性脂肪肝大鼠模型;灌胃给药治疗,每天1次,疗程4周.治疗完成后,测定大鼠体质量、肝重量并计算肝脏指数;测定肝功能指标(ALT、AST、ALP、CHE);HE染色观察肝脏组织结构形态学变化;检测血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)含量,游离脂肪酸(FFA)含量,肝脏组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、T-AOC)活性和丙二醛(MDA)含量,血清中炎性因子(TNF-α、IL-6)水平.结果 与模型组比较,LP(20、40mg/kg)治疗组大鼠肝重量和血清中ALT、AST、ALP、TC、TG、FFA、TNF-α、IL-6含量均显著降低,肝脏组织中SOD活性显著升高且MDA含量显著降低;LP (40mg/kg)治疗组肝脏指数均显著降低,血清中CHE、LDL-C含量显著降低且HDL-C含量显著升高,肝组织中GSH-Px和T-AOC活性均显著升高,上述差异均有统计学意义(P <0.05);LP各治疗组大鼠肝脏组织病变呈不同程度改善,以LP 40mg/kg治疗组效果为显著.结论 LP对高脂性脂肪肝大鼠具有保护作用,其机制可能与LP能够有效降低血脂、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低炎性介质水平有关.
-
高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈人乳头瘤病毒阳性人群中的分流价值
目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV) E6/E7 mRNA检测在宫颈人乳头瘤病毒DNA阳性人群分流管理中的临床应用价值.方法 2014年1月~ 2015年7月因宫颈疾病在温州医科大学第三临床学院妇科门诊就诊的宫颈HPV-DNA阳性患者共970例,随机选取336例,均行HPV E6/E7 mRNA及宫颈细胞学(TCT)检测,并追踪其病理学结果.分析HPV E6/E7 mRNA拷贝数与病理分级及宫颈细胞学结果的关系,预测其对CINⅡ+的诊断价值.结果 鳞癌(squamous cell cancer,SCC)组拷贝数高,无上皮内病变或恶性病变(negative for intraepithelial ledion or malignancy,NILM)组拷贝数低,宫颈癌组HPV E6/E7 mRNA阳性率及拷贝数高,宫颈炎性改变组阳性率及拷贝数低.不同细胞学诊断级别间HPV E6/E7 mR-NA水平比较,细胞学异常组(包括atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS,low-grade squamous intraepithelial lesion LISL,high-grade squamous intraepithelial lesions HISL,SCC)的表达水平高于NILM组,差异有统计学意义(F=28.99,P<0.01),不同宫颈组织病变程度级别间HPV E6/E7 mRNA水平比较,CINⅡ+(histological dysplasia or cancer)的表达水平高于CINⅡ-,差异有统计学意义(F =40.154,P<0.01).Spearman等级相关提示宫颈细胞学诊断级别及宫颈病理级别同HPV E6/E7 mRNA拷贝数呈正相关,相关系数分别为(r=0.408,P<0.01;r=0.699,P<0.01).结论 随着宫颈病变程度的加重,HPV E6/E7 mRNA拷贝数逐渐增加,对宫颈HPV-DNA阳性患者的分流有一定的意义,对宫颈癌有一定的筛查价值.
-
贲门癌与非贲门癌根治术后患者的临床病理特点及预后分析
目的 探讨贲门癌与非贲门癌根治术后患者的临床病理特点及预后.方法 回顾性分析笔者医院2007年8月~2010年3月717例行胃癌根治术患者的临床资料及随访资料,按肿瘤部位分为贲门癌组和非贲门癌组,对两组患者的临床病理特点及预后进行分析.结果 与非贲门癌组相比,贲门癌组男性患者、≥60岁者、瘤体大直径≥4cm者、有神经侵犯者、有脉管内癌栓者、术前白蛋白< 40g/L者、Ⅲ期患者、有淋巴结转移者、浸润深度达T3~T4者所占比例更高,且差异均有统计学意义(P<0.05),而两组在术后病理分级差异无统计学意义(P>0.05).贲门癌根治术后患者的5年生存率为42.0%,明显低于非贲门癌根治术后患者的5年生存率63.2%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 贲门癌与非贲门癌在临床病理方面差异有统计学意义,且根治术后预后比非贲门癌差.
-
大鼠双侧卵巢切除术后不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的研究
目的 观察双侧卵巢切除(OVX) SD大鼠不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的关系.方法 分别于6月龄雌性SD大鼠假手术(Sham)组和双侧卵巢切除术(OVX)组术后2、4、8、12周随机取样,每组每个时间点处死4只,取血清测量雌二醇(E2)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平,取胫骨用显微CT(Micro-CT)和组织学HE染色观察胫骨骨小梁微结构变化.结果 术后2周,OVX组E2较Sham组开始下降,4周时差异有统计学意义(P<0.05),一直持续到12周,Sham组E2水平随时间变化不大;OVX组血清BALP在术后2周达峰值,然后迅速下降,12周时降至术前水平;OVX组血清TRAP活性在术后迅速升高,术后4周达峰值,然后下降,术后12周时仍高于Sham组及术前水平;Micro-CT分析胫骨干骺端相对骨体积(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、Conn.Dn、骨密度(BMD)在2周时与Sham组比较差异无统计学意义,第4周开始出现明显差异,12周差异更加明显,骨小梁厚度(Tb.Th)始终无明显差异;Micro-CT重建显示术后12周OVX组骨小梁较Sham组稀疏,缺失严重;HE染色显示术后12周OVX组大鼠胫骨干骺端骨骺板下骨小梁变细且排列稀疏,骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端,小梁壁厚度不一致.结论 OVX术骨质疏松模型建立过程中大鼠成骨及破骨细胞活跃度先增高后降低,破骨细胞相对而言上升周期更长且下降后能维持在更高水平,比成骨细胞更活跃,骨吸收大于骨生成导致骨质疏松,主要体现为骨小梁BV/TV、Tb.N、Conn.Dn、BMD下降,Tb.Sp升高,组织学表现为骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端.
-
男性全牙列牙周膜数字解剖学建模与测量
目的 探索逆向工程软件结合薄层CT测量活体总牙周膜面积及剩余牙周膜面积的方法.方法 采集第2代中国数字化人体(活体数字人)男性第23号头颅薄层CT图像,以DICOM格式导入Mimics软件进行三维重建,再通过Geomagic Stadio软件优化模型,将牙周膜建模后模型通过Geomagic Stadio软件自带测量功能测量牙周膜面积.结果 测量所得的牙周膜面积符合解剖学规律,上颌牙牙周膜大于下颌牙周膜;上颌牙周膜面积:第一磨牙>第二磨牙>尖牙>第一前磨牙>第二前磨牙>中切牙>侧切牙,下颌牙周膜面积:第一磨牙>第二磨牙>尖牙>第二前磨牙>第一前磨牙>中切牙>侧切牙.结论 利用逆向功能软件结合薄层CT能快速并准确地在活体上测出牙周膜面积、有利于进一步的诊断和治疗.
-
糖皮质激素联合抗真菌治疗变应性支气管肺曲霉菌病32例疗效分析
目的 总结分析糖皮质激素联合抗真菌治疗32例变应性支气管肺曲霉菌病(ABPA)患者的临床特点及疗效,以提高对ABPA的认识.方法 回顾分析2009年5月~2014年3月经江苏省人民医院确诊为ABPA的32例患者治疗前及治疗后2个月的临床表现、影像学特征、实验室检查结果及随访情况.结果 32例患者其中男性16例,女性16例,确诊年龄为23~83岁,患者中位年龄52岁.临床表现主要为咳嗽、咳痰、喘息、胸闷、咳痰栓、肺部哮鸣音等,影像学表现以斑片影、中央性支气管扩张、黏液栓为主.所有患者均经糖皮质激素联合抗真菌治疗2个月后症状、体征明显改善,肺部影像斑片影、黏液痰栓明显减少.治疗2个月后外周血嗜酸性粒细胞比例由15.04% ±9.66%5.06%±5.03%;血清总IgE由1591.52±735.24IU/ml下降至533.37±349.69IU/ml,烟曲霉特异性IgE由13.99±21.32IU/ml下降至8.72±17.53IU/ml,红细胞沉降率由24.75±22.12mm/h下降至14.63±12.90mm/h,血清CEA由5.80±4.39ng/ml下降至3.36±1.66ng/ml,差异有统计学意义(P均<0.05).相关性分析显示,治疗前、后外周血嗜酸性粒细胞比例均与血清总IgE水平呈正相关(分别为r=0.623,P=0.000;r=0.472,P=0.006);治疗前血清CEA水平与血清总IgE水平呈正相关(r=0.615,P=0.000).结论 咳嗽、咳痰、喘息为ABPA常见的临床症状,糖皮质激素联合抗真菌治疗可明显提高疗效;症状的好转、影像学表现的改善及血清总IgE、外周血嗜酸性粒细胞比例、烟曲霉特异性IgE抗体、血沉的下降可作为ABPA疗效评估的指标.
-
苯并芘通过NF-κB诱导RAW264.7细胞MMPs的表达
目的 探讨烟雾主要成分苯并芘(BaP)对RAW264.7单核-吞噬细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,为研究吸烟与腹主动脉瘤的关联提供相关依据.方法 应用免疫印迹法观察BaP对体外培养的RAW264.7单核-吞噬细胞基质金属蛋白酶-2/9/12(MMP-2/9/12)的影响,并验证其是否通过NF-κB信号通路.结果 BaP暴露使培养巨噬细胞NF-κB活化,同时伴随MMP-9、MMP-12表达升高,而PDTC,核转录因子NF-κB的抑制剂,可抑制NF-κB活化,同时伴随MMP-9、MMP-12表达下降.结论 BaP可通过NF-κB通路诱导RAW264.7单核-吞噬细胞MMP-9、MMP-12表达升高.
-
术前营养支持对肝胆肿瘤患者术后营养状况的影响
目的 探讨肝胆肿瘤患者术前营养支持对术后营养状况的影响.方法 收集2014年1~7月入院时术前NRS2002评分≥3分的原发性肝胆肿瘤患者50例,按是否采用术前营养支持,分成术前营养支持组和非术前营养支持组(对照组),比较两组间术后营养指标的差异.结果 术前营养支持组的术后BMI、血红蛋白、白细胞、淋巴细胞、总蛋白、白蛋白、肌酐、尿酸的改善情况与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);与术前相比,而其术后的BMI、血红蛋白、总蛋白、白蛋白、肌酐、淋巴细胞百分比下降程度也低于对照组.结论 肝胆肿瘤患者其术前给予合理的营养支持有助于改善术后营养状况,应重视术前的营养评估,并给予必要的术前营养支持.
-
CpG ODN佐剂序列的筛选及其免疫刺激活性研究
目的 设计和筛选对入PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列,研发能用于人用疫苗的有效核酸佐剂. 方法 根据具有免疫刺激活性的CpG ODN序列结构特点,设计并合成出15条候选序列,分别合成并进行非硫代和硫代修饰.分选健康人PBMC细胞及Balb/c小鼠脾细胞,以不同CpG ODN进行体外刺激,MTT法检测CpG ODN诱导细胞增殖水平.随后将筛选出的有效CpG ODN序列与人类基因组序列进行同源性比较,以评估其安全性. 结果 在刺激人PBMC和小鼠脾细胞72h后,硫代和非硫代修饰的15条序列A值均高于阴性对照组,其中IMB-AC5序列刺激人PBMC后A值分别达到0.377和0.334,与阳性对照ISS1018序列A值(0.387和0.338)接近;刺激小鼠脾细胞72h后,A值同样高于其他序列,达到0.571和0.486,与阳性对照ISS1018序列A值(0.588和0.464)接近.综合上述结果,选择5号非硫代序列作为候选佐剂.同源性比较结果显示,该序列与人类基因组序列没有同源性,与部分蛋白编码基因的同源性只有50% ~65%,此外其部分序列与入18号染色体上的一些重复序列有同源性,高同源性达62%.证明筛选出的新型CpG ODN佐剂IMB-AC5安全性较高.结论 设计筛选出对人PBMC细胞和小鼠脾细胞具有免疫刺激活性的CpG ODN序列IMB-AC5,与人类基因组序列具有较低同源性,为进一步研发人用疫苗佐剂奠定基础.
-
吸烟对高血压前期体检人群血脂及静息心率的影响
目的 研究吸烟对高血压前期体检人群血脂及静息心率的影响.方法 采用问卷调查形式收集杭州及嘉兴两地4家医院健康体检中符合高血压前期诊断标准人群的吸烟状态,并根据其吸烟状态分为吸烟组及不吸烟组各150例,另设血压正常的健康体检者100例作为对照组,同时对3组体检获得的静息心率、血脂及体重指数等数据进行比较分析.结果 3组BMI、LDL-C差异无统计学意义(P>0.05),吸烟组TG、TC、FBG、SBP、DBP、RHR均显著高于不吸烟组及对照组(P<0.01),而HDL-C水平则低于不吸烟组及对照组(P<0.01),不吸烟组与对照组比较显示血清TG、TC、HDL-C、FBG水平差异无统计学意义(P>0.05),但不吸烟组SBP、DBP、RHR水平高于对照组(P<0.01).结论 吸烟会显著增高高血压前期人群的血压、血糖、血脂代谢及静息心率水平.
-
43例局限期小细胞肺癌术后预后分析
目的 对术后的局限期小细胞肺癌(SCLC)可能影响中位总体生存期(OS)的相关因素进行统计,分析其与预后的关系.方法 收集笔者医院肿瘤科2010年1月~ 2014年10月收治的术后局限期SCLC患者,共43例.统计纳入患者的临床资料,包括性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大直径、区域淋巴结转移、术前NSE水平、钠离子水平、D-二聚体水平和术后治疗方法等.采用电话形式进行随访,采用Kaplan-Meier曲线进行单因素生存分析,生存率比较采用Log-rank检验;将有统计学意义的变量,进入COX比例风险模型进行多因素生存分析.结果 患者中位OS是20.0个月.由单因素分析显示,肿瘤大直径(x2=6.345,P=0.042),术前NSE水平(x2=4.441,P=0.035)以及术后治疗方法(x2=8.793,P=0.012)对患者的中位OS有影响.多因素分析得出,术前NSE升高(OR=2.638)、术后未采取化疗±放疗(OR=1.938)是独立危险因素.结论 在行手术治疗的局限期SCLC患者中,术前NSE升高,术后未治疗预后较差.在临床诊治中,应结合患者的具体情况,给予合适的综合治疗.
-
不同影像检查技术对孤立性肺结节的研究进展
临床上孤立性肺结节多由X线、CT扫描偶然发现.传统检测方法各有利弊,随着影像学的发展,一些新的检查技术,如双能量剪影技术、数字化断层融合技术、CT灌注成像、PET-CT、能谱CT等出现,以及CT与MRI后处理技术的完善,极大丰富了孤立性肺结节的检查手段,与传统检查相互取长补短,提高了孤立性肺结节的检出率和良恶性的鉴别准确性.本文就不同的影像检查技术对孤立性肺结节研究进展进行综述.
-
全膝关节置换术后措施减少出血量相关文献回顾
全膝关节置换术(TKA)主要用于膝骨关节炎晚期患者,如何减少失血量是手术成功的重要保障,但目前相关研究所述观点未能统一.术后出血是临床医生面临的一大难题,尤其是术后隐性出血常导致血红蛋白大幅度降低,增加术后输血和感染风险.因此,关注术中止血带使用、药物注射、假体匹配等方法,加强术后综合管理才能取得手术的成功.本文将对近年相关文献进行回顾、归纳和总结.
-
慢性前列腺炎疼痛症状在脊髓L5~S2段内相关因素的研究进展
目的 慢性前列腺炎病因机制复杂、治疗不理想,疼痛是其主要症状,长期困扰着无数患者,本文综述了近几年关于慢性前列腺痛在脊髓L5~S2段内相关因素的研究进展,为前列腺痛的治疗研究提供参考.方法 本文查阅了近几年关于研究慢性前列腺痛在脊髓L5~S2段内发病相关因素的文献资料,并进行总结和归纳.结果 慢性前列腺炎疼痛症状的产生和维持与脊髓L5~S2段的神经病理性改变有密切关系.结论 对于治疗慢性前列腺炎疼痛症状,不能只集中于原发病灶上,还应该不断探索脊髓L5~S2段内神经病理性改变的相关机制,有可能为治疗带来新的途径.
-
癌基因PARK7/DJ-1在肿瘤中的研究进展
DJ-1是近年来发现的一种新的癌基因,其有抗氧化、抗凋亡等多种功能.DJ-1可通过抗氧化、抑制凋亡途径、拮抗抑癌基因、参与拮抗抗肿瘤药物作用等途径促进肿瘤的形成及转移.现已证实在多种肿瘤中DJ-1的表达都显著增高,但其表达水平及特点各不相同.探讨DJ-1在恶性肿瘤中的作用及分子机制可为肿瘤患者的治疗方案提供新的思路.
-
非小细胞肺癌脑转移的治疗进展
脑转移瘤是颅内常见的恶性肿瘤,其原发灶通常来源于肺部.肺癌常见的病理类型是非小细胞是肺癌,有超过50%的进展期非小细胞肺癌患者在疾病进展过程中发生脑转移.一旦发生脑转移,患者预后差,病死率高.自然生存期约3个月,如经积极治疗,其中位生存期也仅有4~12个月.目前研究显示,脑转移患者的预后与影像学技术、放疗技术、手术方式等密切相关.20世纪中期,采用肾上腺皮质激素,可将中位生存期延长至2~3个月,20世纪70年代,全脑放疗(whole brain thera-PY,WBRT)使中位生存期延长至3~6个月.近期来,随着放疗技术的提高,手术方式的改进,以及新药的不断开发利用,患者的生存时间有了很大延长,生活质量也有了明显提高.本文就目前脑转移的主要治疗策略进行综述.
-
miRNA在肾癌中的研究进展
microRNA (miRNA)是一类大小为19~ 25nt的内源性非编码单链小分子RNA,在转录后水平调控基因的表达.miRNA的表达与细胞增殖、分化和凋亡等生理或病理过程密切相关.研究证实,在包括肾癌等多种人类肿瘤中均发现miRNA的表达异常.miRNA在肾癌的发生、发展过程中发挥了重要的作用.本文就miRNA在肾癌中的研究进展做一综述.
-
新技术在头颈肿瘤外科中的应用
头颈部肿瘤种类繁多,主要发生于上呼吸道及消化道的重要部位.考虑到头颈肿瘤发病部位和头颈部解剖及功能的特殊性,在治疗肿瘤的同时,需要兼顾重要器官的功能保护及外观的恢复.随着科学技术的发展,各种新技术和新材料的开发和应用,推动着头颈肿瘤外科的发展.本文将就近年来新技术在头颈肿瘤外科应用方面的进展做一简要介绍.
关键词:
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |