医学研究杂志
Journal of Medical Research 의학구잡지
- 主管单位: 中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位: 中国医学科学院
- 影响因子: 0.70
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-548X
- 国内刊号: 11-5453/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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多药耐药大肠杆菌OXA基因检测及聚类分析
目的 研究笔者医院多药耐药的大肠杆菌OXA基因的分布特性.方法 采用MIC法,用Microscan公司肉汤稀释法药敏板来检测细菌的药敏结果;PCR检测OXA -1 Cluster、OXA -2 Cluster、OXA - 10 Cluster、OXA - 20 Cluster、OXA - 23 Cluster、OXA - 24 Cluster、OXA - 51 Cluster、OXA - 58 Cluster等基因,阳性产物进行DNA测序以确定基因亚型;用SPSS 17.0软件作聚类分析.结果 药敏试验结果,实验菌株对阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为60%~70%,对亚胺培南、美洛培能的敏感率为100%,而对头孢菌素类抗生素的敏感率较低,在30%以下;OXA基因PCR结果:以OXA- 10 cluster和OXA -2 cluster流行为主,分别占检测菌株的31.3%和28.1%;测序结果:在OXA - 10 cluster中以OXA - 10基因与OXA - 17为主,分别占3/10(30.0%),OXA - 16基因次之,占2/10(20.0%);在OXA -2 cluster中以OXA - 15基因为主,占4/9(44.4%),OXA -3基因和OXA -53基因次之,分别占2/9(22.2%);对分别以1,2,3,…,31,32编号的32株实验菌株OXA基因的检测结果聚类分析结果表明:实验菌株28 -32 -6 -23 -26 -18 -22 -12 -15 - 11株,8- 30株,17 - 31 -3株,1- 24株,19 -27 -2 - 10 - 14 -5株,4- 29株,7-1株为OXA耐药基因克隆传播菌株;进一步对OXA基因测序结果作聚类分析结果表明:OXA - 25、OXA - 33、OXA -4、OXA - 13、OXA -56基因型,OXA - 10、OXA - 17基因型,OXA - 16、OXA - 24、OXA -1、OXA -3、OXA - 53基因型,OXA - 15、OXA - 20基因型为OXA耐药基因克隆传播的类型.结论 在笔者医院存在OXA耐药基因医院内感染的趋势,并有暴发性流行的可能.
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一种大鼠主动脉内皮细胞分离培养的改良方法
目的 探索一套原代培养大鼠主动脉内皮细胞( RAEC)简单实用的方法体系.方法 SD大鼠两只,无菌环境下分离胸腹主动脉,清除脂肪、结缔组织.显微剪剪开主动脉,内膜面向下贴附于少量Ⅰ型胶原酶上消化60min.离心收集内皮细胞置于1%明胶包被的六孔板,加入20%胎牛血清的M199中培养.3~4天后换液更换内皮细胞培养基(ECM)培养.当细胞长满约90%底面积时,玻璃探针机械剔除成纤维样细胞后传代.倒置显微镜和抗Ⅷ因子抗体对细胞分别做形态学和免疫细胞化学鉴定.结果 原代培养3~4天时,少量细胞开始贴壁并分裂生长.更换ECM后细胞增殖迅速,培养8~10天时可见细胞长满90%左右的底面积,呈典型的“铺路石”或“鹅卵石”征.免疫细胞化学鉴定表明在分离培养的内皮细胞中有特定Ⅷ因子表达.原代周期8~10天,传代周期3~4天,经纯化传代后纯度接近100%.传至第6代仍未见细胞分裂增殖活性下降.结论 本实验体系培养RAEC简单有效,重复性良好.获得细胞数量多、纯度高,有利于实验人员掌握.
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葛根散对小鼠结肠腺癌的抑制作用
目的 研究葛根散对荷结肠腺癌CT26小鼠的抑瘤作用,探求中药对结直肠癌的治疗价值.方法 取对数生长期的CT26细胞接种于BALB/c小鼠皮下,建立荷结肠腺癌CT26小鼠模型.随机分为对照组和中药大、中、小剂量组及5- FU组,分别灌胃0.9%生理盐水、葛根散大中小剂量(0.1 g/10g、0.05g/10g和0.025g(生药)/10g(体质量)以及腹腔注射5- FU(0.25mg/10g) 0.2ml,1次/周.2周后,各组小鼠称体质量,剥离皮下移植瘤,称瘤重,计算抑瘤率;并用TUNEL的流式细胞仪分析移植瘤细胞凋亡率.结果 葛根散各组抑瘤率及细胞凋亡率明显高于对照组(P <0.05或P<0.01).结论 葛根散可抑制结肠腺癌小鼠移植瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡,这可能是葛根散抗结肠腺癌的作用机制之一.
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腹部多发伤患者引流液sTREM-1检测对腹创伤脓毒症的诊断价值
目的 探讨腹部多发伤患者引流液可溶性髓系细胞触发受体-1 (sTREM -1)对腹源性脓毒症的早期诊断价值.方法 采用回顾性研究方法,选择2010年2月~2011年2月发病24h内的腹部多发伤患者60例为研究组,15例择期胃大部切除术患者作为对照组.采用双抗体夹心酶标免疫分析( ELISA)法定量测定腹腔引流液sTREM -1浓度,并检测同期患者血浆sTREM -1、血浆前降钙素(PCT)、超敏C反应蛋白(CRP)作为检测指标参照,研究此类患者术后腹腔引流液sTREM -1动态变化规律,分别评价sTREM -1、CRP和PCT对腹源性脓毒症的诊断价值并做比较,同时评价sTREM -1对病人预后的预测价值.结果 腹部多发伤患者引流液组sTREM -1浓度(102.298±9.63ng/ml)明显高于对照组引流液sTREM -1浓度(25.35±9.41 ng/ml,P<0.01);并发脓毒症组sTREM -1浓度(102.29±89.63ng/ml)显著高于非脓毒症组(65.35±37.26ng/ml,P<0.05);腹源性脓毒症患者存活组sTREM -1浓度低于死亡组(P<0.01).结论 早期腹腔引流液sTREM -1检测对腹源性脓毒症的早期诊断具有一定价值,与外周血sTREM -1、PCT及CRP联合诊断可能更有意义,对预后的预测有较高的准确性.
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Tei指数定量评价妊娠期高血压疾病对胎儿心功能的影响
目的 探讨Tei指数(TI)在评估妊娠期高血压疾病(HDCP)胎儿心功能的临床价值.方法 HDCP孕妇根据高血压严重程度分为妊娠期高血压组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组,正常孕妇为对照组;通过测量胎儿左、右心室相应的时间间期,计算胎儿左、右心室TI;采用方差分析比较各组间胎儿左、右心室TI的差异性.结果 子痫前期轻度组胎儿右心室TI高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);子痫前期重度组胎儿左、右心室TI分别高于对照组,差异具统计学意义(分别为P<0.05与P<0.01);将各组中宫内生长受限(IUGR)胎儿剔除后,仅子痫前期重度组胎儿右心室TI高于对照组(P<0.05).结论 子痫前期可引起胎儿心功能异常,IUGR的出现提示胎儿心功能异常发展到严重阶段,是预后不良的标志.
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神经刺激仪刺激电流的不同设定对臂丛神经阻滞时间及效果的影响
目的 观察神经刺激仪刺激电流的不同设定对肌间沟臂丛神经阻滞时间及效果的影响.方法 40例拟行择期骨科手术(上臂部位)的成年患者随机分为两组(每组20例),Ⅰ组神经刺激仪刺激电流由1mA到0.4mA逐步降低,Ⅱ组则固定刺激电流于0.5mA.局部麻醉药的配伍为1.2%利多卡因+0.2%布比卡因,0.5ml/kg.各组患者肌间沟阻滞的时间被记录,术中麻醉效果采用VAS评分、是否追加镇痛药或改全麻等指标进行评定.结果 两组患者年龄、性别、体重等指标无显著差异,Ⅰ组和Ⅱ组臂丛神经阻滞成功的时间分别为6.5±1.2分和2.2±1.0分,两组相比具有显著差异.Ⅰ组臂丛神经阻滞成功率和并发症的发生率与Ⅱ组相比均无显著差异.结论 臂丛神经阻滞中始终将刺激电流固定于0.5mA,在其操作时间显著缩短的情况下也可获得满意的麻醉效果.
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葛仙汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠TNF-α和iNOS表达的干预作用
目的 观察不同浓度葛仙汤对实验性溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织肿瘤坏死因子(TNF -α)和诱生型一氧化氮合酶( iNOS)蛋白表达的影响,探讨葛仙汤改善UC症状的可能机制.方法 随机将SD大鼠分为4组,包括模型对照组和葛仙汤高、中、低剂量治疗组,采用大肠杆菌加乙酸复合法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,连续给药21天后处死,进行结肠组织病理学评分( histopathological score,HS),免疫组化法检测各组大鼠结肠组织中TNF -α和iNOS蛋白的表达.结果 用药3周后,低、中、高剂量葛仙汤治疗组的结肠HS均明显低于模型对照组(P<0.01);3个治疗组的结肠组织中TNF-α和iNOS蛋白阳性表达积分值较模型对照组明显降低(P值<0.01).结论 葛仙汤能明显减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠的组织学损伤程度,可能与其下调TNF -α和iNOS蛋白的表达有关,其低剂量即发挥疗效.
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胆固醇酯转运蛋白TaqIB基因多态性与脑梗死关系
目的 探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP) TaqIB基因多态性与动脉粥样硬化性血栓性脑梗死之间的关系.方法 对220例脑梗死患者和220例健康者进行研究.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR - RFLP)方法测定所有研究对象血标本的CETP TaqIB基因多态性,通过对脑梗死组和对照组的CETP TaqIB基因多态性比较,对比分析.结果 脑梗死组B1B1、B1B2、B2B2基因型比例分别是59.09%、32.73%、8.18%,对照组分别为47.27%、39.09%、13.64%,两者比较差异有统计学意义.B1、B2等位基因在脑梗死组的频率分别为75.45%、24.55%,在对照组为66.36%、33.64%,两者差异也有统计学意义.结论 胆固醇酯转运蛋白TaqIB基因多态性可能与动脉粥样硬化性血栓性脑梗死的发生有关.其中B1等位基因可能是易感基因,而B2基因可能是保护基因.
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大鼠脑出血灶周HIF-1α和COX-2的动态变化
目的 观察大鼠脑出血后血肿灶周脑组织中HIF -1α、COX -2蛋白的动态表达,探讨二者与脑水肿的关系,以及HIF -1α和COX -2蛋白的表达在血肿灶周脑组织损伤中的作用机制.方法 SD大鼠35只,随机分为假手术组、脑出血6h、1、3、7、14、21天组,每组5只.采用自体血体内注射法建立脑出血动物模型,用免疫组化法检测脑出血后血肿灶周脑组织中HIF -1α和COX -2蛋白的动态表达,并用干/湿比重法测定脑含水量.结果 脑出血后6h HIF - 1α、COX -2蛋白的表达和脑水含量明显升高,3~7天达到高峰,第14天明显降低,COX -2及脑水含量在21天基本降至正常.HIF - 1α在21天仍有较高水平的表达.造模后6h,脑出血组与假手术组相比,HIF -1 α及COX -2蛋白的表达和脑水含量明显增高,其差异有统计学意义(P<0.05).脑出血组的各时间点间比较,其差异均有统计学意义(P<0.05).HIF - 1α蛋白的表达与脑水含量呈正相关(r =0.636,P<0.01);COX -2蛋白的表达与脑水含量呈正相关(r=0.927,P<0.01).结论 大鼠脑出血后血肿灶周HIF -1α、COX -2蛋白的表达呈一定的变化规律.随着脑出血时间的延长HIF -1α蛋白、COX -2蛋白的表达程度和脑组织水肿程度呈正相关.
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下颈椎前路两种融合术式的三维有限元比较研究
目的 建立颈4/5/6节段的有限元模型.研究颈椎前路钛板加髂骨块和钛网两种植骨融合术式的载荷传导、界面应力及生物力学分布.方法 选择1名健康成年男性,以C4/5/6节段为研究对象.采用螺旋CT扫描获取断层图像,在Mimics软件中三维重建C4/5/6节段骨性结构,然后导入Ansys10.0软件进一步完善椎间盘、韧带等结构,根据临床术式分别建立钛板+髂骨块和钛板+钛网两种内固定融合有限元模型.对模型施加压缩、前屈、后伸、侧屈及旋转5种生理载荷并求解计算,分析模型各结构及椎体终板界面的位移变化和应力分布,比较研究各模型的载荷传导、生物力学分布及稳定性情况.结果 轴向压缩主要由钛网/髂骨块承载,伸、屈位主要由钢板螺钉承载,旋转位螺钉受到较大剪切应力,钛网内植物与终板界面处应力集中,两种术式稳定性相当.结论 两种融合术式能满足临床手术疗效,但钛网具有应力集中现象.
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肾移植受者巨细胞病毒隐性感染的筛查方法及应用
目的 探讨肾移植受者巨细胞病毒( cytomegalovirus,CMV)隐性感染的筛查方法,为临床早期发现CMV活动性感染提供诊断依据.方法收集笔者医院2009年10~12月期间门诊随访233例肾移植受者外周静脉血标本450份,分别采用实时荧光定量PCR( Real - time PCR)、巢式PCR(nPCR)以及酶联免疫吸附(ELISA)法对标本进行检测,同时采用ELISA法检测他克莫司( Tac)浓度.结果 233例肾移植受者CMV - IgG均为阳性,CMV - IgM则均为阴性;Real - time PCR技术检测CMV -DNA阳性85例(36.48%),以低拷贝数为主.nPCR技术检测CMV-DNA阳性10例(4.29%),两种技术检测总阳性率存在显著性差异(P<0.05);随着Tac药物浓度升高,CMV-DNA阳性率呈增高趋势,药物高浓度组CMV- DNA阳性率高于低浓度组(P<0.05).结论 Real - time PCR是筛查肾移植受者CMV隐性感染较为理想的方法,尤其在受者药物浓度偏高时更具有临床应用价值.
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35例视路病变的视野改变与临床分析
目的 探讨视路病变的眼科表现,从眼科角度提高对视路病变的早期认识.方法 分析首诊于眼科经CT或MRI确诊的35例视路病变的部位以及临床表现、视野检查结果.结果 视交叉前病变1例(2.86%),视交叉病变8例(22.86%),视交叉后枕叶前病变8例(22.86%),枕叶病变18例(51.43%).主诉视物模糊者34例(97.14%),有偏盲症状者6例(17.14%).视野检查有偏盲者34例(97.14%).8例视交叉疾病中4例6眼有视神经萎缩.结论 有视物模糊主诉或视乳头萎缩而无眼科病变可解释者,应把视野检查作为常规,必要时行CT/MRI检查.
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108例食管结核手术治疗的临床分析
目的 探讨食管结核的手术方式及手术适应证.方法 回顾性分析国内1998年1月1日~ 2011年9月30日所有文献报道过经手术治疗的食管结核病例107例以及笔者医院手术1例患者的诊治经过.本组病例共108例,其中行病变食管切除+胃食管吻合术73例,局部病灶清除术27例,开胸探查后关胸7例,食管狭窄环松解术2例.所有病例手术后都经过抗结核药物治疗6 ~18个月.结果 本组病例全部治愈,术后随访3个月~20年均无复发.结论 对于在术中确诊的食管结核患者,术前吞咽困难在1~2级者只需行局部坏死组织清除术,如吞咽困难在3~4级的,可加做食管狭窄环松解术.术后辅以抗结核治疗12个月,同样能治愈.
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不同内固定方法治疗老年股骨转子间骨折的疗效评价
目的 评价动力髋螺钉(DHS)和股骨近端髓内钉(PFN)治疗老年股骨转子间骨折的疗效.方法 对笔者医院收治的178例股骨间转子骨折患者的临床资料进行回顾性分析.比较采用DHS固定(98例)和PFN固定(80例)的患者手术时间、手术出血量、术后引流量、固定效果及术后并发症发生情况.结果 PFN组的手术时间(t=25.301,P=0.000)、术中出血量(t=55.093,P=0.000)、术后引流量(t=119.581,P=0.000)和术后并发症发生率(x2=4.298,P=0.038)均低于DHS组.两组间的固定效果存在差异(Z=2.005,P=0.045),PFN组的固定效果优于DHS组,固定效果优良率分别为PFN组88.8%,DHS组76.5%.结论 PFN内固定法在治疗老年股骨转子间骨折的过程中取得了较好的效果,相对于DHS内固定具有手术时间短、术中出血量少、术后并发症少的优点,具有较高的临床应用价值.
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肾嫌色细胞癌的螺旋CT诊断价值及临床应用
目的 分析肾嫌色细胞癌(CRCC)的影像特征及临床应用价值.方法 对10例经手术病理证实为CRCC的CT特点及临床资料进行回顾性分析.结果 10例病例均为单发,位于肾实质中部8例,肾皮质2例.膨胀性生长9例,浸润型生长1例.5例肿块直径< 5cm,其中密度绝对均匀3例,小钙化2例,小灶性低密度1例;>5cm有5例,其中3例肿块>7cm,肿块密度大致均匀,伴小钙化3例,多灶性或星状低密度4例,有团片状高密度1例.CT平扫肿块呈等密度或稍高密度,动态增强扫描为缺乏血供的特点,呈轻度或轻中度强化,强化峰值在静脉期.下腔静脉、肾静脉无瘤栓.肾门、腹主动脉旁无淋巴结肿大.手术全肾切除6例,保肾手术4例.病理报告CRCC.4例获随访,随访3~ 32个月,4例均无瘤生存.结论 CRCC有一定的CT特征,有助于指导治疗,具有重要的临床应用价值.
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原发性青光眼并发睫状体脱离的临床观察及讨论
目的 观察各种类型原发性青光眼的睫状体脱离发生情况,探讨睫状体脱离发生的机制,寻找有效的预防及治疗方法,评价超声生物显微镜在其诊断及预防术后浅前房发生中的应用价值.方法 对2008年5月~2009年12月收住入院的162例原发性青光眼患者术前常规行超声生物显微镜检查,其中原发性急性闭角型青光眼患者82例,原发性慢性闭角型青光眼患者45例,原发性开角型青光眼患者35例.根据是否有睫状体脱离,将急性闭角型青光眼急性发作期眼分为睫状体脱离组(A组)和无睫状体脱离组(B组),B组眼压控制正常后手术,A组术前予以降眼压、使用或不使用激素治疗后手术,观察两组前房深度、眼压及术后浅前房情况.结果 原发性慢性闭角型青光眼及原发性开角型青光眼患者中未见睫状体脱离,急性闭角型青光眼中仅急性发作期眼检出睫状体脱离,发生率为12.2%,余各期均未检出睫状体脱离.睫状体脱离激素治疗有效,治疗后恢复时间和脱离的高度相关.A组和B组术后浅前房均见于小梁切除术后,差异无统计学意义(P =0.882).结论 急性闭角型青光眼急性发作期可合并睫状体脉络膜脱离,经皮质激素治疗能痊愈,术前有睫状体脱离者不会增加术后浅前房的发生.术前行UBM检查,能有效的发现睫状体脱离,预防术后并发症的发生.
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ATM在淋巴结阴性乳腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨淋巴结阴性乳腺癌组织中ATM蛋白的表达,及其与淋巴结阴性乳腺癌临床病理特征和预后之间的关系.方法 采用SP免疫组织化学染色方法检测64例淋巴结阴性乳腺癌标本及48例乳腺良性肿瘤组织或正常乳腺组织标本中ATM蛋白的表达.结果 ATM在64例淋巴结阴性乳腺癌组织中的阳性率为53.1%,而在48例乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中的阳性率为72.9%,二者比较差异具有统计学意义(P =0.033).ATM的表达与患者的HER2受体状态有关(P =0.028),而与患者病理类型、病变部位、年龄、肿块大小、ER状态、PR状态、P53表达状态以及患者总生存率无关.结论 ATM表达降低可能在淋巴结阴性乳腺癌的发生中起到重要作用.ATM可能作为淋巴结阴性乳腺癌患者预后判断的指标.
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蛋白芯片检测在儿童结核病诊断中的应用研究
目的 应用结核分枝杆菌蛋白芯片检测儿童血清,初步评价其在儿童结核病诊断中的临床应用价值.方法 入选临床诊断结核病患儿42例,肺部其他疾病患儿及体检患儿各30例,应用蛋白芯片检测血清标本.结果 42例结核病患儿中任意抗体为阳性的患儿为25例,阴性的患儿为17例.蛋白芯片检测结核病的灵敏度为59.5%,特异度为66.7%.结论 结核分枝杆菌蛋白芯片对儿童结核病的诊断有较好的辅助作用,多项抗体阳性可提高诊断特异度.
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椎间盘造影术在经皮腰椎间孔镜手术中的应用
目的 探讨椎间盘造影术在经皮腰椎间孔镜手术中的作用.方法 笔者医院2009年11月~ 2011年6月间共收治腰椎退行性疾病患者218名,诊断为腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH) 130例;诊断为腰椎管狭窄88例;2例为术后感染再次行椎间孔镜手术予以处理.既往有开放手术内固定史12例;合并退变性脊柱侧弯6例.经制定穿刺麻醉计划,在手术室C臂X线机透视定位辅助下行240例椎间盘造影试验.结果 共作椎间盘造影240次,其中168次(70%)造影前诊断为病变椎间盘作诱发试验结果阳性(有20个病人两个椎间盘阳性);27次(11.2%)拟作为阴性对照的椎间盘诱发试验结果阳性.43次(18%)临床表现或影像学有阳性表现,但椎间盘诱发试验结果阴性,其中12次(5%)造影见纤维环破裂、造影剂外溢.2例(0.8%)腰椎间孔镜手术后感染者未作加压诱发试验,仅注射少量造影剂定位.判断为阳性椎间盘时造影剂的用量为0.1 ~3.5(1.7±0.8)ml.被诱发的疼痛常为腰痛、患侧臀部、股部、小腿或足部疼痛,偶有腹部疼痛.疼痛性质、部位与术前相似率达85%.造影后疼痛加重,但经其进一步明确病情后的腰椎间孔镜手术治疗如髓核射频消融减压或摘除、纤维环成形、骨赘黄韧带、碎片等清除后一般能使症状明显减轻,残余症状用药物等容易控制,一般在48h内消失.造影过程中所有病人均未发生明显的出血.2例其造影示椎体前缘有造影剂泄露,在诱发试验后诉以前曾有的腹部不适加重,经卧床休息数小时后自然缓解.2例术后发生感染经综合治疗后得以控制.结论 经皮腰椎间孔镜手术将椎间盘造影术融合为一个步骤,能进一步明确腰部疾病的本质,有助于这一微创手术的顺利进行并提高CLBP尤其是盘源性疾病诊断和治疗水平.但是,其中某些细节仍需改进,并应对此设计大样本的随机、多中心、对照的临床研究深入探讨.
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冠心病患者人格特征与行为类型的调查分析
目的 探讨冠心病患者人格特征与行为类型情况及相关性.方法 对158例冠心病患者用艾森克人格问卷和A型行为类型问卷进行调查,并与全国常模和南方人常模进行对比分析.结果 冠心病患者艾森克人格问卷的神经质和掩饰性评分显著高于全国常模(P<0.01);A型行为类型问卷冠心病患者的TH、CH、TH +CH评分显著高于南方人常模(P<0.05);人格特征与行为类型相关分析冠心病患者的精神质与内外向维度都与竞争敌意感呈正相关;掩饰性与竞争敌意感呈负相关.结论 冠心病患者具有一定的人格特征即不稳定性,A型行为模式是冠心病患者的重要危险因素.临床护理工作中应对这组患者的人格特征、行为模式加以关注,提供信息支持,从而达到管理和控制冠心病的目的.
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运用FISH和多重PCR技术检测Y染色体的分子细胞学异常对生育的影响
目的 通过运用FISH和多重PCR技术,对不育和配偶难免流产的男性患者进行细胞染色体检查和Y染色体分子学方面的检测和比较,了解Y染色体异常对生育造成的影响.方法 对研究对象分为3组,无精症组16例,少精症组11例;另有7例配偶难免流产的男性患者,进行外周血细胞培养和染色体G显带、C显带分析,并用荧光原位杂交(fluorescence in situ hyhdizacion,FISH)和多重PCR检测分子学异常.结果 3组病人中无精症患者组中细胞染色体异常率高(31.25%,5/16),其中3例为47,XXY及嵌合体;1例46,XX性发育异常,SRY阳性,AZFa,b,c区段完全丢失;1例46,X,del(Y) (q11.2)伴AZFb,c区段丢失;弱精少精症中微缺失检出1例(9.09%,1/11);难免流产组中FISH检出染色体异常1例,为46,XY/47,XXY.结论 染色体异常和AZF微缺失是导致男性不育,尤其是无精症的重要原因,常规染色体检查及Y染色体异染色体长度占总Y染色体比率、FISH技术及多重PCR技术对AZF微缺失的系统检测可以男性不育患者明确病因,为临床诊断和遗传咨询提供帮助.
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用于CMV启动子序列检测的绝对定量PCR方法的建立及验证
目的 建立和验证用于CMV启动子序列检测的绝对定量PCR方法.方法 针对CMV启动子序列设计探针和引物,用SYBR Green I熔解曲线分析引物扩增的特异性.对反应体系进行系统优化.用含CMV启动子的基因治疗产品和质粒标准品验证建立的PCR方法.结果 上游引物为5′-AGACTTGGAAATCCCCGTGAGT-3′,下游引物为5′-CGTATTAGTCATCGC-TATTACCATGGT-3′,探针为5′- AACCGCTATCCACGCCCATTGATG -3′.扩增的特异性较强,反应体系优化后能达到较高的灵敏度.Ct值的变异系数都小于2%.标准曲线的定量范围为1.5×102~ 1.5×107拷贝,灵敏度为30拷贝.质粒标准品和基因治疗产品的扩增效率相近.结论 建立了检测CMV启动子序列的绝对定量PCR方法.
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血沉质控品在全自动血沉分析仪的应用
目的 验证血沉质控品在检验工作中的可行性.方法 将BIO - RAD公司质控品分装,在全自动血沉分析仪上测定.(1)连续30天检测首次开瓶后、开瓶1周后及开瓶2周后的BIO - RAD质控品.(2)连续检测6个月BIO - RAD质控品.(3)检测放置血沉仪不同孔的BIO - RAD质控品.结果 (1)首次开瓶后、开瓶后1周及开瓶后2周质控结果的差异均无明显统计学意义(P>0.05).(2)6个月低水平BIO - RAD质控结果的差异无统计学意义(P>0.05).6个月中前3个月高水平BIO -RAD质控结果差异无统计学意义(P>0.05),但第4、5、6个月分别与第1个月比差异均有统计学意义(P<0.05).(3)血沉仪上不同孔质控品的检测结果差异均无统计学意义(P>0.05).结论 正确使用血沉质控品监测仪器稳定性,确保血沉结果的准确性与可比性.
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真皮多潜能细胞体外分化为成肌细胞的初步研究
目的 观察真皮来源多潜能细胞(dermal multipotent cells,DMCs)在体外经诱导剂诱导为成肌细胞的能力.方法 将从新生BALB/c小鼠真皮中分离获得DMCs,由成肌诱导液诱导,观察DMCs在体外是否能被诱导成肌细胞.结果 DMCs在诱导剂中培养后出现肌形态细胞,由免疫组织化学技术检测,平滑肌细胞特异性抗体alpha actin阳性.结论 DMCs可以在体外分化为肌细胞,可能作为肌细胞来源.
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BAFF通过非经典NF-κB途径对Raji细胞增殖调节作用的研究
目的 研究BAFF对Raji细胞促增殖作用的机制,分析其对非经典NF - κB信号途径的调节作用,并初步探讨RIPK2与BAFF/BAFF-R介导的信号通路的相关性.方法 以不同浓度重组人BAFF刺激Raji细胞,MTT法分析BAFF对Raji细胞的促增殖作用,应用实时荧光定量PCR( real time q - PCR)与蛋白质印迹实验(Western blotting)检测Raji细胞中BAFF、BAFF-R、NIK、p52、Bcl - XL及RIPK2的表达.结果 BAFF能促进Raji细胞的增殖,且具有明显的剂量效应与时间效应依赖关系;BAFF、BAFF-R、NIK、p52、Bcl - XL及RIPK2在mRNA及蛋白水平的表达均随重组人BAFF浓度的增加而升高(P<0.05).结论 重组人BAFF刺激Raji细胞后能激活非经典NF - κB信号途径,并引起下游靶蛋白Bcl - XL等抗凋亡因子的过表达,促进肿瘤细胞的存活和增殖.BAFF可以上调RIPK2的表达,提示RIPK2与非经典NF - κB信号途径之间可能存在功能联系.
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白介素10-819 C>T位点多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性的关系
目的 探讨白介素-10基因-819 C>T位点多态性与膀胱癌易感性的关系.方法 以病例对照研究方法,应用等位基因特异性PCR( AS - PCR)分别检测400例膀胱癌患者和400例健康体检者的IL-10-819 C>T基因多态性,对各基因型和等位基因进行统计学分析.结果 膀胱癌组变异纯合TT基因型的频率(54.5%)高于对照组基因型(42.0%),差异有统计学意义[x2=4.740,P<0.05,OR =1.977(95% CI:1.064~3.674)],膀胱癌组携带变异T等位基因的频率(72.0%)高于对照组基因型(63.0%),差异有统计学意义[X2=7.385,P<0.01,OR=1.510(95% CI:1.121 ~2.035)];IL-10-819 C>T的基因型频率在浅表型和浸润型膀胱癌之间无统计学意义.结论 IL-10-819 C>T基因多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性有关.
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不同伴生物三七总皂苷指纹图谱研究
目的 建立不同伴生物三七总皂苷的指纹图谱,对其化学成分进行综合评价.方法 对4种不同伴生物三七总皂苷,各6批,采用HPLC法进行分析,制定以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1为参照物的指纹图谱;运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)版”,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度.结果 不同伴生物三七总皂苷各有10个共有峰、6批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度均在0.99以上,并得出了各自相应的对照指纹图谱.结论 该指纹图谱方法简便、重现性好,表明了不同伴生物三七总皂苷成分分布及比例稳定、均匀一性良好,制备方法稳定、合理、可靠.
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老年髋部骨质疏松性骨折患者生活质量的调查
目的 探讨影响老年髋部骨质疏松性骨折患者出院后生活质量的相关因素.方法 随访69名近3年内因髋部骨质疏松性骨折曾笔者医院接受住院治疗的老年患者,就出院后生活质量(FRS功能评分)、抗骨质疏松治疗情况、再骨折情况等开展调查.结果 (1)出院后继续抗骨质疏松治疗组患者的FRS功能评分大于未抗骨质疏松治疗组(P<0.05).(2)5例患者出院后发生再骨折,再骨折率7.2%,其中4例未行系统抗骨质疏松治疗.(3)能否积极抗骨质疏松治疗与受教育水平有相关性(P<0.05),与年龄、性别无明显相关性.结论 老年髋部骨质疏松性骨折患者出院后积极抗骨质疏松治疗有利于提高生活质量,防止再骨折的发生.
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电子喉镜下声带息肉手术前后的嗓音声学评估
目的 比较电子喉镜下声带息肉手术前后声带形态及声学参数的变化,评价声学测试在声带息肉诊断和疗效评估中的意义.方法 对40例嗓音正常成年人及40例声带息肉患者手术前后在电子喉镜下进行声带形态学评估,同时采用上海泰亿格公司生产的Dr.Speech4.0软件行嗓音声学比较分析.结果 声带息肉术前可见一侧声带的前、中1/3交界处半透明、白色或粉红色表面光滑的肿物,可带蒂;术后复查术侧声带表面光滑,声门闭合良好.声带息肉组术前各元音的jitter、shimmer及NNE值均高于正常组,HNR及SNR值低于正常组,差异具有统计学意义;声带息肉术后各元音的jitter、shimmer及NNE值降低,HNR和SNR值上升,与术前各参数值相比,差异均具统计学意义;术后各元音的jitter、shimmer及NNE仍高于正常,HNR和SNR值增高,与正常组比较差异无统计学意义.结论 嗓音声学参数可作为声带息肉术后疗效的客观评价依据.
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儿童脊柱结核的MRI特征分析
目的 探讨MRI在儿童脊柱结核诊断和随访中的应用价值.方法 对26例脊柱结核患儿的MRI资料进行回顾性分析,着重分析病变的部位、信号及其随访特征.结果 26例中发现87个椎体受累,其中颈椎16个,胸椎32个,腰椎21个,骶尾椎18个;累及单个椎体6例,多个椎体20例.病变椎体早期呈稍长T1长T2信号,中晚期椎体不规则破坏,呈混杂长T1长T2信号,在STIR呈明显高信号,病变椎体呈楔形、变扁或融合等改变;随访12例中,9例出现脊柱后凸畸形.26例中,22例出现椎间盘形态及信号改变,表现为椎间隙狭窄或消失;22例出现椎旁软组织肿胀、脓肿,8例合并硬膜囊或脊髓受压.结论 MRI不仅有助于儿童脊柱结核早期诊断,而且在判断病变类型、范围,以及病变预后等方面为临床提供更多的信息.
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芬太尼-丙泊酚-罗库溴铵快速诱导无辅助通气不同时限的安全性研究
目的 观察芬太尼-丙泊酚-罗库溴铵快速诱导无辅助通气不同时限用于择期手术麻醉诱导的安全性和可行性.方法 ASAⅠ或Ⅱ级男性患者30例,随机分为3组(n=10),预纯氧去氮5min后静注芬太尼2μg/kg,3min后快速静脉注射丙泊酚2.5mg/kg、罗库溴铵0.9mg/kg,无辅助通气,分别在罗库溴铵给药后1min(A组)、1.5min(B组)、2min(C组)后行气管内插管.观察诱导期血气分析、血流动力学和BIS值变化,记录相关时间及并发症发生情况.结果 诱导期血流动力学以A组波动为明显,但观察期各点均在正常范围.3组无通气期间SaO2均>99%,PaO2均>200mmHg,仅出现暂时性轻度高CO2血症(PaCO2高值58mmHg)及无需纠正的暂时性酸血症(pH值低7.21),机械通气后PaCO2及pH值均在3min内恢复至正常,3组PaO2、PaCO2及pH值变化以C组明显.3组患者插管条件均满意.结论 以芬太尼-丙泊酚-罗库溴铵配合无辅助通气的快速诱导,虽然都具临床安全性与可行性,但以无通气时限在1.5min为妥当.
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椎体后凸成形术治疗老年陈旧性椎体压缩性骨折的近期疗效分析
目的 评价经皮椎体后凸成形术( PKP)治疗陈旧性椎体骨质疏松性骨折的近期疗效.方法 从2006年8月~2010年9月应用PKP治疗了35例陈旧性椎体骨质疏松性骨折患者共47个骨折椎体,并比较患者术前与术后的视觉模拟评分、活动能力评分以及骨折椎体高度.结果 所有患者均成功实施了PKP,平均每个椎体骨水泥用量为1.89±0.50ml.术后24h的视觉模拟评分平均为2.8±0.7,显著低于术前的7.1±1.0(P<0.05);术后24h的活动能力评分平均为1.5±0.7,低于术前的2.7±0.7(P<0.05).骨折椎体的术后平均高度为26.2 ±4.4mm,显著高于术前的21.8±5.6mm (P<0.05).结论 PKP能够有效地缓解陈旧性椎体骨质疏松性骨折引起的疼痛,增加病椎的高度,并能显著改善患者的活动能力.
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ROC曲线评价弥散加权成像对直结肠癌肝转移灶的检出价值
目的 比较磁共振弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)与多层螺旋CT( multi - slice CT,MSCT)动态增强扫描对直结肠癌肝脏转移灶的检出率,评价DWI对肝转移的早期诊断价值.方法 53例直结肠癌术后患者,分别行肝脏磁共振DWI扫描和MSCT动态增强扫描,采用受试者工作特征曲线(receive operating characteristic curve,ROC)分析扫描结果.结果 DWI诊断方法的曲线下面积(Az)、灵敏度、特异度和阳性预测值分别为0.964、98.9%、88.5%和96.9%,MSCT诊断方法则分别为0.818、91.5%、51.3%和80.2%,两组结果有统计学差异(P<0.05).结论 对于直结肠癌肝转移灶的早期检出及阳性预测,磁共振弥散加权扫描更具优势.
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HBSAg阳性原发性肝癌患者血清蛋白电泳图谱分析
目的 探讨HBSAg阳性原发性肝癌(HCC)患者血清蛋白电泳谱的特点,并揭示相关蛋白质的检测意义.方法 采用美国Helena REP3蛋白电泳仪对乙型肝炎病毒表面抗原(HBSAg)阳性原发性肝癌患者及其他HBV感染性肝病患者的血清蛋白电泳进行分析,同时检测血清清蛋白(ALB)、α1抗胰蛋白酶(AAT)、甲胎蛋白(AFP)、触珠蛋白(Hp)、铜蓝蛋白(Cp)、转铁蛋白( TRF)、补体C3(C3)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、C反应蛋白(CRP),并以健康成年人为对照组,对检测结果进行统计学分析.结果 HCC患者清蛋白百分比低,与正常对照组、慢乙肝组比较差异均有统计学意义(P<0.05);而α1-球蛋白百分比高,与正常对照组、乙肝肝硬化组比较差异均有统计学意义(P<0.05),α2-球蛋白百分比也显著高于其他疾病组.HCC患者血清AAT、AFP、Cp、CRP含量显著高于其他组(P <0.05);Hp、C3除了比正常对照组稍低外,也显著高于其他疾病组(P<0.05).结论 HBSAg阳性原发性肝癌患者血清蛋白电泳谱的改变主要表现在清蛋白降低,而α(包括α1和α2)球蛋白相对其他疾病组升高,α球蛋白的升高与正向急性时相蛋白及AFP的增加有关.血清蛋白电泳结合相关特定蛋白的检测对疾病的诊断及病情发展变化的评估具有重要意义.
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谷氨酸受体调节剂对N2a细胞中DISC1及Camk2γ的影响
目的 观察谷氨酸受体调节剂对小鼠神经瘤N2a细胞中精神分裂症断裂基因1(DISCl)及钙/钙调素依赖性蛋白激酶2γ(Camk2y)的影响.方法 将N2a细胞随机分为4组(n=6),分别加入DMSO(D组,对照组)、1μmol/L氯胺酮(K组)、2μmol/L MK - 801(M组)及2μmol/L NBQX(N组).采用Western blotting检测DISC1及Camk2γ表达.结果 与D组相比,K组及M组DISC1表达下调,N组DISC1表达上调(P<0.05);K组及M组Camk2γ下调,N组Camk2γ下调(P<0.05).结论 谷氨酸受体调节剂影响小鼠神经瘤N2a细胞中DISC1及Camk2γ的表达,这可能与谷氨酸受体调节剂诱发精神分裂样不良反应有关.
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肠和脑来源神经干细胞的nNOS表达研究
目的 对同一胎鼠的肠神经干细胞和脑神经干细胞进行体外培养,比较两种不同来源神经干细胞的神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达情况.方法 从孕20天的SD胚鼠中分别提取肠神经干细胞和脑神经干细胞,采用改良的神经干细胞培养液反复传代.取传代培养6 ~10天后得到的两种不同来源的神经干细胞球,通过琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测法及流式细胞仪检测法测定神经干细胞nNOS的表达.结果 通过本实验室改良的神经干细胞培养液及分离方法能培养出两种不同来源的神经干细胞.琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测显示,两种不同来源神经干细胞的nNOS表达,分别与相应对照组比较,均有统计学显著性差异(P<0.05),两种不同来源神经干细胞间的nNOS表达比较,也均有统计学显著性差异(P<0.05).流式细胞仪检测显示,nNOS阳性细胞在肠和脑来源神经干细胞分别占14.13%和5.80%,有统计学显著性差异(P<0.05).结论 两种不同来源的神经干细胞中均有表达nNOS,但消化道来源的肠神经干细胞nNOS表达较中枢神经系统来源的神经干细胞高.
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睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展
睾丸支持细胞( sertoli cell,SC)的结构首先由意大利组织学家Enricol sertoli在1865年进行了描述,多年以来,SC作为生精细胞的支架,为生精细胞提供免疫屏障及营养支持的作用已经得到人们的认可,随着免疫学及分子生物学的不断深入研究,各种免疫特殊组织,如睾丸、眼前房、脑、胎盘滋养层等,受到人们的广泛关注,特别是近代人们通过对凋亡机制和各种信号传导通路的研究,加深了对SC细胞特殊免疫状态及营养作用在分子水平的认识,近研究发现SC免疫豁免的功能和营养作用可应用与某些细胞的培养与移植,SC可以延长某些移植物的存活时间及功能状态,同时SC还可以和某些细胞在体外共培养,改善细胞的生存状态和功能.
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淋巴转移相关因子在乳腺癌研究中的进展
乳腺癌发病率在世界范围内已居妇女恶性肿瘤的前列.对乳腺癌的预后评估需综合分析多方面因素.已知腋窝淋巴结状况是一独立的预后预测因子,它为乳腺癌的病理分期及后续辅助治疗提供了重要依据.然而,对于同为腋窝淋巴结阴性的乳腺癌患者,其预后仍有着不小的差别.
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血管稳定性概述及评价方法
血管生成是指在原有血管的基础上生成新血管的过程[1].新生血管在诸多生理(如再生、伤口愈合和胚胎发育等)、病理(如风湿性关节炎、糖尿病引起的视网膜炎和肿瘤发生发展)过程中起着重要作用,是肿瘤微环境中肿瘤细胞的主要营养支撑,与肿瘤的生长、维持和转移密切相关[2~4].
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三阴乳腺癌的中西医治疗进展
三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)是2006年由Bryan等[1]首次明确提出的,指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体(HER -2)均阴性的一类乳腺癌,具有恶性程度高、复发转移快、病死率高、治疗手段有限等特点.在临床上TNBC被作为一种难治性乳腺癌看待,而其发病率在乳腺癌患者中有近1/4,因此了解TNBC的治疗进展对于临床乳腺癌的诊治能有很大帮助[2].
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运动障碍疾病生活质量研究现状
运动障碍疾病( movement disorders,MD),以往称为锥体外系疾病( extrapyramidal diseases),是一组以随意运动迟缓、不自主运动、肌张力异常和姿势步态障碍等运动症状为主要表现的神经系统疾病[1].由于本组疾病多表现有运动障碍、情绪失调、社交困窘、孤独等,不但使患者感到生理功能上的损害,而且也影响到他们的情感和社会生活,从而影响其QOL( quality of life,QOL).
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生物瓣置换术后经导管再次生物瓣置换
随着心脏瓣膜置换手术技术的提高和人工瓣膜材料的进步,在过去10年间,生物瓣在国外的使用增长了近78.4%[1,2].根据长期临床随访研究的结果,已有许多国外学者建议将生物瓣的推荐使用年龄从65岁降至60岁[3].目前,我国国内的生物瓣使用比例仍明显低于国际水平.生物瓣膜的衰坏、失功及二次手术的风险依然是限制其使用的主要原因.
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MiRNA-129与肿瘤
microRNA是一类广泛存在于真核生物中的长度约为21~25碱基的内源性小型非编码RNA,能够识别特定的目标mRNA,超过50%的miRNAs基因定位在肿瘤相关的脆性位点或基因组区域,提示miRNA的表达可能与肿瘤密切相关.若对这些基因进行转录后调控,miRNA则发挥促癌或抑癌的作用.
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循环肿瘤细胞检测分子标志物的研究现状及进展
循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)指自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞.这些进入循环的肿瘤细胞大部分在机体免疫识别及杀伤等作用下发生凋亡,极少数存活下来形成微小癌栓,在一定条件下发展为转移灶.
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细胞周期激酶CHEK2和p53在恶性肿瘤细胞周期和凋亡中的作用
细胞周期检测点激酶2 (cell cycle checkpoint kinase 2,CHEK2)是由抑癌基因CHEK2编码的丝氨酸/苏氨酸激酶,CHEK2激酶是DNA双链断裂损伤中重要的信号转导蛋白,参与细胞周期G1、S或G2/M期的阻滞,促进细胞对损伤进行修复.
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天然药物鱼藤素抗肿瘤作用机制研究进展
天然产物鱼藤素是近年来的研究热点之一.鱼藤素是鱼藤酮类化合物的一种,是从非洲灰毛豆叶尖部分离出的一类物质[1],初作为杀虫剂广泛使用,近几个体内外研究表明,鱼藤素很有希望成为癌症预防和治疗药物,初报道鱼藤素具有潜在的化学预防活性是来自Pezzuto等人对乳腺癌和皮肤癌的形成过程研究发现的,随后的研究揭示了鱼藤素对多种癌细胞形成及发展具有预防和治疗作用[2].
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重组新城疫病毒抗肿瘤研究的新进展
恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一.当前,人类治疗肿瘤的方式仍然依赖于手术、化疗和放疗等传统治疗模式.尽管这些传统的治疗模式可以有效治疗部分肿瘤,但尚不能全面降低肿瘤的复发率和病死率.
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血清蛋白质组学技术在肿瘤血清标志物筛选中的应用
至今为止,癌症作为病死率高的疾病正严重威胁着人类健康,早期发现、早期诊断、早期治疗是降低癌症病死率的有效手段.但是目前为止还没有发现特异性和敏感度均能达到100%的血清肿瘤标志物( tumor marker,TM)[1].
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分化型甲状腺癌的分子诊断进展
甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤,占头颈部肿瘤首位.甲状腺肿瘤包括占绝大多数的分化良好的甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC),约占甲状腺癌的50% ~70%,滤泡状癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)约占10% ~ 15%,及未分化癌(undifferentiated thyroid carcinoma)占5% ~10%,甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)占2% ~3%[1].
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血中游离DNA检测在肺癌诊断中的应用
肺癌是常见的恶性肿瘤之一,全世界每年死于肿瘤的患者约有1/3为肺癌患者,由于缺乏有效的早期诊断指标,往往进展到中晚期才被明确诊断,近2/3的患者确诊时已发生转移,其5年存活率只有8%~16%[1,2].随着20世纪80年代,基于PCR的分子生物学实验技术的出现,学者们发现了多个特异性的分子生物学标志物[3].
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推动肿瘤转化研究实现双赢
陈竺部长曾说,我们不仅要发展一些新的基础理论并转化到临床为患者服务,同时在临床实践过程中,也应多加留心,提出问题,并把这些问题带到实验室进行研究,再返回到临床,为患者服务,这就是“From bedside to bench,and back to bedside”.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |