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MTERF2对人子宫颈癌HeLa细胞线粒体氧化磷酸化活性的影响
目的 探究过表达或下调线粒体转录终止因子2(MTERF2)基因对人子宫颈癌HeLa细胞线粒体氧化磷酸化活性的影响.方法 将人子宫颈癌HeLa细胞分为6组:空白对照组未转染HeLa细胞,阴性对照1和2组分别转染p3×FLAG-CMV-14和pSi-NK,实验1、2和3组分别转染pCMV-MTERF2-FLAG、pSi-MTERF2-1和pSi-MTERF2-2.比较MTERF2蛋白在各组HeLa细胞中的表达情况,并分别检测各组线粒体呼吸链复合体Ⅰ ～ Ⅴ酶活性、线粒体呼吸控制率(RCR)、线粒体跨膜电位、细胞内ATP含量以及线粒体活性氧(ROS)水平的变化.结果 实验1组MTERF2蛋白的表达比空白对照组高,实验2和3组MTERF2蛋白的表达水平比空白对照组低(P<0.01).与阴性对照2组比较,实验1组线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ相对酶活性以及线粒体跨膜电位下降(P<0.01,P<0.05),线粒体ROS水平升高(P<0.01).与空白对照组比较,实验1组的线粒体RCR和细胞内ATP含量下降(P<0.01).而实验2和3组上述指标与空白对照组或阴性对照2组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 过表达MTERF2基因能显著抑制子宫颈癌HeLa细胞线粒体氧化磷酸化活性,下调MTERF2基因对线粒体氧化磷酸化活性无显著影响.
关键词： 线粒体转录终止因子2 宫颈肿瘤 线粒体 氧化磷酸化 -
人线粒体转录终止因子2蛋白的生物信息学分析
目的:探讨人线粒体转录终止因子2 (mitochondrial transcription termination factor2,MTERF2)的生物学功能.方法:采用生物信息学的方法和工具对人MTERF2的理化性质、跨膜区和信号肽、二级结构功能域、亚细胞定位、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模进行系统的分析与研究.结果:人MTERF2蛋白分子量为44.41 kD,等电点为9.15,不具有信号肽和跨膜区.该蛋白定位于细胞线粒体中,N端1-35个氨基酸为前导肽序列,其二级结构主要构成元件为螺旋和无规则卷曲,包含4个MTERF基序.三级结构预测显示该蛋白为球状结构,N端为螺旋结构,C端为无规则卷曲.对该蛋白进行多重序列比对和聚类分析显示,人MTERF2属于直系同源蛋白质,与猩猩MTERF2相似性高,二者在系统发育树上聚为一类.结论:人MTERF2是一种典型的线粒体DNA结合蛋白质,本研究为进一步探索人MTERF2蛋白的功能提供参考资料和理论依据.
关键词： 人类 线粒体转录终止因子2 生物信息学 蛋白功能
