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3种不同抗凝剂对外周血培养的NK细胞功能影响
目的 探讨外周血经3种不同抗凝剂处理后培养的自然杀伤(NK)细胞的增殖率和杀伤功能的影响研究.方法 采集10例年龄(35±5)岁健康志愿者15 mL外周血,分别置于含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2,EDTA组)、细胞保存液(细胞保存液组)和肝素钠(肝素钠组)的抗凝管中.用淋巴细胞分离液收集单个核细胞,在NK细胞培养液中培养单个核细胞12d,并观察细胞生长情况.在第4、6、8、10、12天时,收集细胞用CCK8法检测NK细胞的增殖情况.在细胞增殖明显的第12天收集细胞,通过流式细胞仪检测各组NK细胞的颗粒酶、穿孔素和CD 107a.台盼蓝染色检测细胞活性.通过CCK8法检测各组对肿瘤细胞株K562杀伤活性.结果 通过细胞增殖发现,EDTA组NK细胞增殖不明显,肝素钠组和细胞保存液组增殖明显.第12天时检测发现,肝素钠组增殖倍数为128.15±6.38,细胞保存液组增殖倍数为107.51±5.70;肝素钠组优于细胞保存液组(t=6.20,P=0.00).肝素钠组NK细胞纯度表达为(84.49±2.35)％,也明显高于细胞保存液组NK细胞表达[(77.63±1.37) ％].经台盼蓝染色检测,肝素钠组和细胞保存液组细胞活性率均为100％.通过流式细胞仪检测发现,肝素钠组NK细胞颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=12.76、17.76、5.67,P=0.00、0.00、0.00).对肿瘤细胞株K562杀伤结果显示,肝素钠组NK细胞杀伤活性(50.12％±3.42％)明显高于细胞保存液组(41.88％±2.47 ％)(t=4.78,P=0.001).结论 肝素钠和细胞保存液均可用于NK细胞培养的血液抗凝,但肝素钠组NK细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液组.
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两例假性血小板减少症的原因分析及预防措施
近年来随着血细胞自动计数仪及EDTA-K2抗凝剂的采血管广泛应用于临床,时有关于假性血小板减少的临床报道.统计我院近2年来血小板减少症病人19例其中有2例假性血小板减少的病人,现报告如下.1病案例1,患者,女,33岁.2008年12月11日以“发热4天”入院.血常规:WBC9.8×109/L,Hb134g/L,PLT9×109/L,患者有感冒病史,无咯血,呕血及黑便.查体皮肤黏膜无出血点,瘀点,瘀斑.脾肋下未及.入院复查血常规PLT7×109/L.血涂片示:血小板不少.
关键词： 假性 血小板减少 乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)
