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水果中测定β-胡萝卜素的皂化及直接提取方法比较
目的 研究比较皂化法和直接提取法两种不同前处理方法测定水果中β-胡萝卜素含量.方法 以福建省30种本地水果为检测对象,采用优化后的直接提取法和皂化法测定β-胡萝卜素含量,分析比较二者的测定结果及可操作性等.结果 皂化法的平均回收率为93.1％～96.2％,相对标准偏差为6.9％～8.4％;直接提取法的平均回收率为73.2％～80.4％,相对标准偏差为2.8％～4.2％.皂化法的平均回收率高于直接提取法.两种方法所测定大部分水果的含量结果有明显的统计学差异(P<0.001),建阳桔柚等4种柑橘类水果含量测定结果相差不大(P>0.05).结论 水果的β-胡萝卜素含量测定中,虽然皂化法实验操作稍微繁杂、耗时,但其测定结果较为准确.
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FTA-DNA直接提取法的研究与应用
目的 建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法.方法 取直径1.2mmFFA卡血样,分别用FTA-DNA直接提取法及FTA(R)常规提取方法提取DNA,AB-IdentifilerTM试剂盒分别进行10 μl和25μl体系检测比较,并筛选批量FTA卡血样DNA自动化提取程序.结果 200份FFA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板,25μl体系PCR-STR检测,分型结果均良好.10μl体系检测,FTA-DNA直接提取法优于FFA(R)常规提取方法,图谱RFU值为1000～2000,采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳;采用FFA(R)常规提取方法检测,图谱RFU值100～2000,小片段优先扩增现象明显,且有19%的样本出现丢峰现象,采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显.经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10μl体系检测本2万余份FTA卡采集的血样,均获得16个STR基因座DNA分型结果.结论 本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA(R)卡血样自动化DNA建库.
