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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响
目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)联合染毒对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)睾酮合成的影响.方法 将TM-3细胞分为对照(完全培养基)组、MBP(LC50,500 μmol/L)单独染毒组、MEHP(LC50,450 μmol/L)单独染毒组和MBP(500 μmol/L)+MEHP(450 μmol/L)联合染毒组,培养24h后,观察线粒体超微结构,检测细胞线粒体膜电位和上清液中的睾酮水平.结果 MBP、MEHP单独染毒及联合染毒均可引起线粒体结构损伤.与对照组相比,MBP、MEHP单独染毒组和MBP+MEHP联合染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与MBP+MEHP联合染毒组相比,MBP、MEHP单独染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均较低,差异有统计学意义(P＜0.01),MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平的交互作用均表现为拮抗作用.结论 MBP、MEHP联合染毒对睾酮合成水平的下降呈拮抗作用,可能与线粒体损伤机制有关.
关键词： 邻苯二甲酸单酯 睾丸间质细胞(TM-3) 联合作用 线粒体 睾酮 -
孕妇尿中邻苯二甲酸单酯含量及其对新生儿出生体重影响
目的 检测孕妇尿液中邻苯二甲酸酯(PAEs)含量,分析其对新生儿出生体重的影响.方法 收集来自天津某妇产医院80名孕妇尿液,采用固相萃取-三重四极杆高效液相色谱串联质谱技术检测孕妇尿中3种邻苯二甲酸单酯的含量；以问卷收集孕妇一般资料,应用多因素Logistic回归分析PAEs含量对新生儿出生体重的影响.结果 邻苯二甲酸单甲酯(MMP)含量的P50为67.06 μg/g cr,邻苯二甲酸单乙酯(MEP)含量的P50为28.51 μg/g cr,邻苯二甲酸单丁酯(MBP)含量的P50为9.95 μg/g cr.3种PAEs单酯中,孕妇体内MEP含量与新生儿出生体重相对较低有关(P＜0.05),其OR(95％CI)为2.724(1.376～5.396).结论 本次调查的孕妇体内检出了PAEs,尿液中较高的MEP含量与新生儿出生体重较低有关.应减少孕妇PAEs暴露,保护母婴健康.
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MBP和MEHP联合染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及其可能机制
[目的]探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、活化转录因子4(ATF4)与C/EBP同源蛋白(CHOP)参与的可能机制.[方法]培养小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)并且测出细胞生长曲线,用CCK-8法检测细胞在染毒浓度400 μmol/L状况下的细胞活性变化;用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用免疫印迹法检测GRP78、ATF4和CHOP含量的变化.单因素方差分析法分析染毒组与对照组之间的关系,2×2析因设计法判断联合染毒的交互作用,当|(MBP+MEHP组指标-对照组指标)|＜|(MBP组指标-对照组指标)|+|(MEHP组指标-对照组指标)|,可判定交互作用类型为拮抗作用.[结果]细胞在24～60h时间段内处于对数生长期,且细胞正常状态下的凋亡数量比较稳定.细胞活性检测结果显示MEHP染毒对细胞的抑制率比MBP的大,并且MBP+MEHP联合染毒且具有交互作用,其作用方式为拮抗作用[24h:|(53.21±7.68) ％|＜| (42.99±8.23)％|+| (65.46±8.29)％)|,36h:|(79.87±3.76)％|＜| (53.12±4.33)％|+| (74.80±4.96)％|;48h:|(85.97±6.07)％|＜| (38.98±9.59) ％|+|(80.73±4.99)％|]具有统计学意义(P＜0.05);细胞凋亡比例也呈现出MEHP组[早期凋亡(17.44±0.82)％,总凋亡:(44.24±0.89)％]大于MBP染毒组[早期凋亡 (14.58±0.97)％,总凋亡 (29.46±0.58)％],同时出现MEHP+MBP联合染毒组[早期凋亡:(8.58±0.35)％,总凋亡:(32.28±0.41)％]的凋亡比例小于各单独染毒组之和,呈现出拮抗作用;ATF4和GRP78在MEHP染毒组的表达量高于MBP染毒组,MEHP+MBP联合染毒组表达量低于MEHP染毒组但高于MBP染毒组,并且表现出拮抗作用.CHOP的表达量与对照组相比也有变化,MEHP染毒组表达量较MBP染毒组表达量高,在MEHP+MBP联合染毒组表达量低于单独染毒组,并且表现出拮抗作用,但MBP染毒组没有主效应.[结论]MBP、MEHP染毒致TM-3细胞凋亡具有主效应,MBP和MEHP联合染毒致TM-3细胞凋亡具有交互作用,呈现拮抗作用.GRP78-ATF4-CHOP通路可能参与MBP、MEHP染毒致TM-3细胞的凋亡过程.
关键词： 邻苯二甲酸单酯 睾丸间质细胞 凋亡 联合染毒 GRP78-ATF4-CHOP -
电喷雾液相色谱串联质谱法测定人尿中10种邻苯二甲酸单酯
目的 建立同时测定人尿中10种邻苯二甲酸单酯的电喷雾高效液相色谱串联质谱法.方法 尿样经β-葡萄糖醛酸酶水解,全自动固相萃取仪净化后,采用高效液相色谱串联质谱电喷雾电离,多反应监测模式检测,同位素内标法定量.结果 本方法在0 μg/L～ 100μg/L时具有良好线性关系,相关系数均≥0.995,检出限在0.003μg/L～0.11 μg/L,回收率为77.6％～ 122.5％,精密度为1.40％ ～ 9.27％.结论 本方法灵敏度好,准确度高,适用于实际尿样中多种邻苯二甲酸单酯的测定.
关键词： 电喷雾高效液相色谱串联质谱法 尿样 同位素内标法 邻苯二甲酸单酯 全自动固相萃取
