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多重位点特异性PCR鉴别霍山石斛、铁皮石斛与齿瓣石斛药材
为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题.通过比对石斛药材ITS及trnL-trnF序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别.结果在退火温度为61℃、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带.本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1%、1%和5%.表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛.
关键词: 霍山石斛 铁皮石斛 齿瓣石斛 多重位点特异性PCR 掺伪鉴别 -
一种快速鉴别三七粉中掺入伪品的鉴别方法
目的 建立联合使用薄层色谱法和HPLC法鉴别三七粉中掺伪品的方法.方法 采用薄层色谱法鉴别三七粉中掺入的三七茎叶、水田七与菊三七,展开剂为二氯甲烷-甲醇(体积比为40∶1);采用HPLC法建立三七药材的指纹图谱,并鉴别三七粉中掺入的三七茎叶皂苷提取物和水田七,采用Ultimate Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为203 nm.结果 薄层色谱法可鉴别出三七粉中掺入的三七茎叶和菊三七,小可检出的掺入质量比分别为2%和20%;HPLC指纹图谱法可鉴别出三七粉中掺入的三七茎叶皂苷提取物和水田七,小可检出的掺入质量比分别为2%和10%.结论 本方法可作为三七粉的质量控制方法之一,以鉴别出掺入三七粉中的多种伪品.
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几种常用中药的掺伪鉴别
1 红花1.1 掺假喷洒盐水,掺玉米面.1.2 鉴别手抓有湿感,口尝有咸味,为盐水;可见黄白色细粉状物附着,放入杯中,用水浸泡可见黄白色细粉沉淀为玉米面.
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HPLC-ELSD测定灵芝孢子油中甘油三酯的含量
目的 采用HPLC-ELSD法研究灵芝孢子油中甘油酯组成.方法 采用ACCHROM Unitary-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5am),流动相为乙腈-异丙醇(51∶49),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测器为蒸发光散射检测器.结果 甘油三亚油酸酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、甘油三油酸酯、1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二-油酸-3-硬脂酸甘油酯的线性范围分别为0.028 70~0.861 0 ag、0.146 8~4.404 μg、0.0507 5~1.523 μg、0.279 6~8.388 μg、0.242 1~7.263 μg、0.613 2~18.40 μg、0.341 6~10.25 μg、0.0691 5~2.075 μg(r2=0.999 3,0.998 8,0.999 4,0.999 3,0.998 9,0.998 9,0.999 0,0.999 5),加样回收率分别为103.3%,99.0%,103.3%,97.9%,100.1%,104.4%,96.4%和105.0%,RSD分别为4.9%,4.7%,3.8%,5.0%,5.0%,3.4%,4.6%和3.2%.灵芝孢子油中8个甘油酯中相对含量较高的依次是1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、甘油三油酸酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯,约占8个成分总量的90%.结论 该方法简便、专属性、重复性良好,可为灵芝孢子油的品质鉴定及油脂掺伪鉴别提供理论依据.
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鸡内金、全蝎、牛黄的掺伪鉴别
中药材掺伪后很难鉴别,一些掺伪药材杂质极其相似,笔者结合多年工作经验,将鸡内金、全蝎、牛黄3种动物类中药掺伪、掺杂质现象,以宏观鉴别法介绍如下.