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血液兴奋剂的使用及检测研究进展
血液兴奋剂使用是指采用某种技术和/或药物使机体红细胞数量增加,增加氧气到肌肉的转运,从而增强机体耐力和运动成绩,主要包括促红细胞生成素(EPO)注射、人工合成氧气携带剂的使用和血液回输等.相应的也有人为逃避兴奋剂检测而使用利尿剂、血液膨胀剂、掩盖剂等.现在国际通用检测方法是采用运动员生物护照(ABP).尽管该方法在运动员血液兴奋剂检测方面有比较显著的效果,但也存在许多弊端.因此,急需找到更加敏感、准确、稳定的指标和方法对血液兴奋剂进行监控.本文对常用血液兴奋剂及其检测手段进行概述,希望为兴奋剂检测研究提供思路.
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血红蛋白总量在运动员生物护照兴奋剂检测中的意义
目的:观察注射微量重组人促红细胞生成素(rHuEPO)后,受试者在不同时间段血液某些参数指标的变化,为兴奋剂rHuEPO 检测运动员生物护照(ABP)提供实验依据.方法:采用单盲方式对14 名健康青年男性受试者进行两个阶段随机安慰剂(n=14)和微量rHuEPO(n=14)皮下注射,每阶段7 周,每周2 次.EPO 注射期间给予每天口服铁剂105 mg;在注射前第7 日?第一次注射后第3?10?17?24?31?38 和45 日?以及第7 周后一次注射后第7?14?21 日分别采取静脉血测试血液基础参数(红细胞?血红蛋白浓度[Hb]?红细胞压积?网织红细胞),改良一氧化碳(CO)吸入法测试血红蛋白总量(tHb)以及全血量(BV)?血浆量(PV)的变化情况;分析这些指标在ABP 中的使用,观察总量指标和浓度指标在检测中的有效性和时效性.结果:与安慰剂组相比,14 名受试者在微量rHuEPO 注射后第2 周,即开始出现红细胞数量和[Hb]增加,在注射期间第5 ~6 周达到高峰(分别增加9% 和10%左右,P<0. 01),一直持续到后一次注射后3 周左右;tHb 在注射后1 周即开始增加,5 周达到高峰(增加10%左右,P<0. 01)并一直持续到后一次注射后1 周才开始逐级恢复到注射前水平;红细胞总量在实验第5 周上升至峰值,幅度为10. 89% (P<0. 01),总血量(BV)变化不明显,血浆量(PV)出现下降,血液浓缩.结论:7 周微量rHuEPO 注射可以显著增加血液总量指标和浓度指标,其中血红蛋白总量更加敏感,可以用ABP 血红蛋白总量等监测微量EPO 注射;在后一次注射结束后,血液总量指标如血红蛋白总量恢复正常,而浓度指标仍保持较高水平,可能是血液浓缩的结果.
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气相色谱质谱联用法对运动员尿液中内源性类固醇水平特征的研究
目的:建立气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时测定尿液中6种内源性类固醇激素水平的方法,对广东省运动员体内的类固醇激素代谢特征进行统计归纳和比较分析,为广东省运动员尿液中类固醇激素的生物护照的建立提供数据支持.方法:选取1 474名广东省运动员(包括814名男队员,660名女队员)在赛前训练期间的尿样,并对其中主要的6种内源性类固醇进行酶解、提取及衍生化后采用气质联用(GC-MS)方法定量分析.分析采用HP-1MS色谱柱(17 m×0.2 mm,0.11 μm),恒流模式,使用氯气为载气,流量为1mL·min-1,进样量:1μL;分流比:10∶1;进样口温度和EI离子源温度分别为280℃和200℃;质谱SCAN模式定性确证,扫描范围m/z40～460;选择离子模式(SIM)下定量分析.结果:广东省女运动员尿液中6种类固醇激素浓度及睾酮/表睾酮比值平均值均显著低于国外女运动员(P＜0.05),其中睾酮浓度平均值仅为国外女运动员的12.2％;广东省男运动员尿液中雄酮、本胆烷醇酮、睾酮、5 β-雄烷-3α,17β-二醇4种类固醇激素浓度及睾酮/表睾酮比值平均值均显著低于国外男运动员(P＜0.05),而表睾酮浓度平均值明显高于国外男运动员(P＜0.05),5α-雄烷-3α,17β-二醇浓度平均值与国外男运动员基本持平(P＞o.05).广东省男、女运动员尿液中类固醇5α-雄烷-3α,17β-二醇/5β-雄烷-3α,17β-二醇浓度比值则均显著高于国外男、女运动员的水平(P＜0.05),雄酮/本胆烷醇酮浓度比值与国外运动员基本持平.结论:本研究选取6种内源性类固醇激素进行气质联用分析,并通过与国内外运动员相关代谢指标的对比分析,对广东运动员训练期间的尿液中类固醇代谢特征进行归纳,为广东省运动员尿液内源性类固醇指标生物护照的建立提供数据支持.
