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小鼠牙胚发育过程中釉原蛋白和釉蛋白的表达特征
目的 观察釉原蛋白和釉蛋白在小鼠牙胚发育中的表达特征,进一步揭示釉原蛋白和釉蛋白的生物学特性.方法 分别制备出生后第1、3、7和14天小鼠下颌第一磨牙牙胚切片,采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应法检测釉原蛋白和釉蛋白的组织学定位和基因转录表达水平.结果 釉原蛋白表达于分泌期成釉细胞的胞质和釉质基质全层,在新生小鼠牙胚成牙本质细胞中有一过性表达;釉蛋白表达于分泌期釉质基质中,在成釉质细胞突边缘和釉质基质深层呈强阳性表达,釉原蛋白和釉蛋白在矿化成熟的釉质中均未见表达.釉原蛋白和釉蛋白在出生后第7天mRNA表达量的相对值分别为0.813±0.085和0.799±0.064,显著高于其他时间的表达水平(P<0.05).结论 釉原蛋白和釉蛋白主要由分泌期成釉细胞合成并分泌到釉质基质中,其表达具有高度的时空特异性,提示它们在釉质形成和生物矿化中有重要的作用.
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microRNA在牙发育和萌出中作用的研究进展
牙发育是上皮和间充质相互作用的结果,多种信号通路和蛋白质通过影响基因的转录,参与了牙发育和萌出的过程.miRNA作为一种非编码RNA,可通过调控参与牙发育和萌出的信号分子和转录因子,进而影响该过程.在牙发育过程中,miRNA表达谱十分复杂,miRNA表达上调或下调均可引起牙发育和萌出异常.国内有关miRNA对牙发育调控的报道较少.本文结合近几年国内外近研究进展,主要从miRNA在牙发育各时期的表达、miRNA调控牙发育祖细胞的增殖以及miRNA调控成牙本质细胞和成釉细胞的分化等方面,阐述miRNA在牙发育及萌出中的作用,为牙发育的生物学机制研究提供新思路,为miRNA的临床应用提供新方向.
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EMMPRIN在小鼠下颌第一磨牙形态发生及硬组织形成中的功能性作用
目的 研究小鼠下颌第一磨牙中后期牙胚发育过程中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达情况及其对牙齿细胞外基质分泌和矿化的影响.方法 采用免疫组织化学方法检测EMMPRIN在牙胚发育各个阶段中的表达定位;应用体外牙胚器官培养法以及抗体阻断的方法观察EMMPRIN功能性缺失对于牙胚形态发生的影响;采用Real-Time PCR技术检测EMMPRIN相关基因的表达变化.结果 EMMPRIN蛋白特异性地表达于牙胚的帽状期、钟状期以及其后的分泌期;阻断体外培养牙胚中EMMPRIN的蛋白活性可导致牙釉质形成障碍,同时下调牙胚培养物中EMMPRIN相关基因MMP-9、MMP-13、MMP-20、ALPL、ameloblastin、amelogenin和enamelin mRNA的表达.结论 EMMPRIN的表达贯穿于牙胚发生发育的多个阶段;EMMPRIN可能通过调控金属基质蛋白酶和(或)相关釉质基质蛋白而在成釉细胞的分化及釉质基质的分泌、矿化过程中发挥关键作用.
关键词: 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 釉质发生 牙胚 -
釉鞘蛋白在小鼠牙胚发育中的时空表达
目的:观察釉鞘蛋白(ameloblastin)在小鼠牙胚发育中表达的时空顺序及分布,探讨釉鞘蛋白在釉质发育矿化中的作用.方法:采用原位杂交的实验方法,观察釉鞘蛋白在牙胚发育的增殖分化期、分泌初期及分泌期的表达.结果:釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期表达为阴性,分泌初期细胞内及新生釉基质中开始出现弱阳性表达;至分泌期,细胞内及新生釉基质中均呈强阳性表达.成熟釉质中无釉鞘蛋白mRNA的阳性表达.结论:本实验从分子水平上进一步明确了釉鞘蛋白的时空表达,并推测釉鞘蛋白可能介导了釉质的发育矿化,它与牙齿发育、釉基质矿化反应等过程密切相关.