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  • 表皮生长因子与胶原蛋白复合物对小型猪修复性牙本质形成作用的实验研究

    作者:刘俊;李玉晶;赵宝荣;刘晓勇;葛丽华;邓惠

    目的:观察表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)与胶原蛋白海绵(collagen sponge,CS)复合物对小型猪修复性牙本质形成的影响.方法:选用实验用小型猪牙齿36颗,采用EGF/CS复合物为材料进行直接盖髓术,通过组织病理学方法常规制备牙-颌骨联合切片,光学显微镜下观察修复性牙本质形成情况,并与氢氧化钙糊剂直接盖髓对照.结果:小型猪牙用EGF/CS直接盖髓术后2周,穿髓孔周边可见修复性牙本质团块形成,团块周围有成牙本质细胞样细胞围绕;术后4周有完整的修复性牙本质桥形成;术后12周修复性牙本质桥增厚且结构致密,严密封闭穿髓孔,桥体近髓腔面形成明显的管样牙本质,下方为整齐排列的典型成牙本质细胞.用氢氧化钙糊剂直接盖髓,术后2周可见穿髓孔处有炎症坏死区,只有少量钙化团块形成,术后4~12周逐渐形成完整的修复性牙本质桥,但形成速度较慢且牙本质桥厚度较薄.结论:EGF与胶原蛋白复合物显著促进牙髓细胞分化和修复性牙本质形成,是一种有临床应用价值的生物活性盖髓剂.

  • 蚯蚓提取物用于小型猪牙盖髓的实验研究

    作者:吕军;谢建云;刘晓勇;葛丽华;陈溯

    目的 观察蚯蚓提取物对小型猪牙修复性牙本质形成的作用.方法 用蚯蚓提取物对30颗小型猪牙进行直接盖髓,对照组30颗牙采用氢氧化钙盖髓;分别于术后2、4、12周运用组织病理学方法观察其促进修复性牙本质形成的效果.结果 蚯蚓提取物盖髓后2周,骨样修复性牙本质团块形成,未见到创面周围牙髓变性坏死.盖髓后4周,穿髓孔下有修复性牙本质形成,大部分牙已将穿髓孔封闭.盖髓后12周,穿髓处可见完整的牙本质桥形成,结构致密,髓腔及根管内牙髓组织基本正常.氢氧化钙盖髓组:术后2周界面可见牙髓变性坏死区,有薄层牙本质团块形成,4~12周逐渐形成完整的牙本质桥,形成速度与蚯蚓提取物组相似.结论 本实验提示蚯蚓提取物能促进小型猪牙髓组织损伤的修复,形成修复性牙本质.

  • 骨连接蛋白在正常牙髓和修复性牙本质形成中的基因表达

    作者:陈智;樊明文;张旗;朱奇;边专

    骨连结蛋白(osteonectin,ON)是一种重要的非胶原糖蛋白,可能参与了牙本质的生物矿化过程[1]。我们利用原位杂交技术,观察ON在正常牙髓和牙髓修复过程中的基因表达特征,探讨ON在修复性牙本质形成中的作用。 1.材料与方法:分别在Wistar大白鼠(体重150~250 g)的上下颌第一磨牙近中面制备单面洞,术后第3及15天处死动物。迅速分离上下颌骨,4%多聚甲醛4℃下固定,10%EDTA脱钙,系列乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,5 μm连续切片,4℃下保存备用。实验中所有试剂均由含DEPC水配制以消除RNA酶的作用。利用T7 RNA多聚酶(Boehringer Mannheim公司)体外转录体系合成ON单链RNA探针,地高辛标记RNA检测试剂盒(Promega公司)标记。根据Holland等[2]的方法将标本与已标记探针进行原位杂交。DAB显色,苏木素淡复染。光镜下检查呈棕色的阳性杂交信号。 2.结果:正常对照的大鼠第二磨牙,杂交信号主要表达于成牙本质细胞层内,成牙本质细胞层下方的牙髓细胞也呈阳性表达,但信号强度低于成牙本质细胞。固有牙髓内的牙髓细胞信号较微弱或不表达。术后3 d组标本可见窝洞下方的成牙本质细胞表达呈强阳性,成牙本质细胞层下方的牙髓细胞也呈阳性表达。固有牙髓内的牙髓细胞也呈阳性表达。前期牙本质和牙本质内表达阴性。15 d组标本,可见修复性牙本质形成。修复性牙本质下方的细胞无极化,缺乏典型的成牙本质细胞表型,为成牙本质细胞样细胞。在成牙本质细胞样细胞内,ON表达阳性,染色均匀。可见扩张的牙髓毛细血管内皮细胞也表达阳性。

  • TGF-β1、NCPs直接盖髓后对牙髓修复的探讨

    作者:张纯妍;李延雷

    目的 观察转化生长因子(Transforming Growth Factor-TGF-β1);非胶原蛋白(Noncollagen Proteins,NCPs)对修复性牙本质形成的作用.方法 用SD大鼠牙作直接盖髓实验,并用组织学方法评价每组材料对修复性牙本质形成的效果.结果 各组材料在不同时间对修复性牙本质促进作用不同.结论 TGF-β1、NCPs对大鼠牙髓组织修复有明显的促进作用.

  • 外界刺激对内源性生长因子TGF-β1的影响

    作者:顾令婉;周莉;张睿;李昱良;王凯

    目的:观察备洞对家犬牙髓中TGF-β1表达的影响及修复性牙本质的形成情况,探讨牙本质牙髓复合体原位形成和内源性生长因子的相关性。方法6只健康家犬,分别选取四颗磨牙,随机分为1、2、3、4四个组,每组6颗牙;1组不予任何处理,作为对照组,2、3、4组为实验组,分别给予长3 mm,宽3 mm,洞深2、2.5、3 mm的备洞刺激,予氧化锌丁香油粘固剂暂封窝洞,分别于2、4、6周麻醉下拔除,制作病理切片,显微镜下观察修复性牙本质的形成情况,图像分析和免疫组化方法观察转化生长因子-β1的表达。结果在2.5 mm洞深刺激强度下,2周时,每组都没有修复性牙本质形成;3 mm洞深刺激强度,4、6周时,前期牙本质增宽,成牙本质细胞空泡变性,有第三期牙本质形成;每组都有转化生长因子-β1表达,结果表明:随着刺激度强和时间增加,呈表达增强趋势(P<0.05)。结论备洞刺激可能激活了内源性转化生长因子-β1,且可能参与了牙本质牙髓复合体的形成,内源性转化生长因子-β1的诱导表达与时间和刺激强度成正相关关系。

  • 碱性成纤维细胞生长因子对牙髓细胞Delta蛋白表达的影响

    作者:吴珺瑢

    研究已证明碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能明显地刺激体外培养的人牙髓细胞(hDPCs)增殖,有剂量依赖性[1].同时还可能参与牙齿的发育及修复性牙本质的形成[2].本实验通过研究不同浓度bFGF对体外培养的人牙髓细胞合成Delta蛋白的影响.

  • 羟磷灰石类纳米与仿生材料盖髓的研究

    作者:杨清岭;李宝花;荣光影;王志群;赵玥

    目的:对比两种羟磷灰石作盖髓剂促修复性牙本质形成方面的差异.方法:对机械穿髓的狗牙直接盖髓,实验组(nHM、nHPM),对照组CH.观察7d和70d时穿髓处修复性牙本质的形成并进行统计分析.结果:nHPM能诱导完整的牙本质桥而nHM则不能.结论:nHA/PA66作为盖髓剂促修复性牙本质形成能力强于nHA,是一种发展前景较好的盖髓材料

  • TGF-β1在大鼠可复性牙髓炎中的表达

    作者:

    转化生长因子-β( transforming growth factor, TGF-β)是一族具有多种生物学功能的细胞因子,对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用,有利于胚胎发育和细胞修复,参与牙胚的发生、发展以及牙体组织的修复过程[1].

  • 不同年龄组修复性牙本质生成情况探讨

    作者:徐晓;赵隽隽;韩俊力

    目的观察不同年龄段人的牙齿在受到龋损刺激后,修复性牙本质的生成情况.方法收集5组不同年龄组含有牙本质浅层龋的离体牙,每组各5颗牙齿.制作标本切片,HE染色,显微镜下观察.测量修复性牙本质厚度,作统计学检验.结果5组不同年龄牙齿的修复性牙本质平均厚度分别为:3.36、2.6、2.8、4.2、3.36,统计学检验无明显差异.结论受龋损刺激后,不同年龄牙齿的修复性牙本质生成情况无明显差异.

  • 层粘连蛋白在修复性牙本质形成中的免疫定位

    作者:陈智;樊明文;张旗;边专;彭彬

    目的研究层粘连蛋白(laminin,LN)在牙髓修复中的免疫定位和分布特征.方法在大鼠第一磨牙制备单面洞,分别观察3d、15d和30d后修复性牙本质的形成情况.以免疫组化技术检测LN的免疫反应.结果术后3d,修复性牙本质尚未形成.牙髓内成牙本质细胞呈阳性染色,前期牙本质为弱阳性.术后15d,可见修复性牙本质形成和成牙本质细胞样细胞的出现,成牙本质细胞样细胞和牙髓细胞免疫染色呈阳性.术后30d,已形成的修复性牙本质内LN染色阳性,免疫活性特别集中于修复性牙本质与牙髓交界处,成牙本质细胞样细胞染色呈强阳性.结论 LN的分布特征提示,在修复性牙本质形成过程中,LN可能是牙髓细胞附着的一个有利因素.

  • 辛伐他汀凝胶盖髓剂初步研究Ⅰ

    作者:祝雪芳;金燕;王珏;刘茜;梅予锋

    目的:制备辛伐他汀温敏性凝胶缓释系统,初步探索辛伐他汀促进牙髓修复的作用。方法:制备辛伐他汀壳聚糖温敏性缓释凝胶,紫外分光光度法检测缓释效果并绘制释放曲线。大鼠磨牙行活髓切断术,分别以载有辛伐他汀的壳聚糖缓释凝胶(简称辛伐他汀缓释凝胶)、壳聚糖/甘油磷酸钠凝胶(简称空白凝胶)、氢氧化钙盖髓,并设对侧为空白对照组,术后1、3、7、14、28 d处死,拍摄X线片,HE染色观察牙髓情况。结果:37℃下,空白凝胶15 min内凝固,辛伐他汀缓释凝胶8 min内凝固。48 h辛伐他汀快速释放,60 d后达到溶质梯度平衡,凝胶内的辛伐他汀持续平稳释放,累计释放率为61.5%。活髓切断术后,氢氧化钙组28 d受试牙根管口见高密度钙化屏障,辛伐他汀缓释凝胶组术后7、14、28 d的根管口见高密度钙化屏障,空白凝胶组未见高密度影像。 HE染色结果显示,辛伐他汀组术后7 d盖髓断面牙髓结构正常,成牙本质样细胞向断面聚集并形成早期钙化团块,28 d形成早期钙化桥;氢氧化钙组术后7 d表现为盖髓剂下方断面和髓腔内牙髓组织凝固性坏死现象,失去正常结构,与周围组织界限明显。结论:辛伐他汀缓释凝胶缓释性能良好。作为盖髓剂,其组织相容性好,有促进修复性牙本质形成的潜能。

  • 富血小板血浆促进人牙髓细胞增殖的实验研究

    作者:唐凤勤;邹德荣;陆家瑜;华丽;曹春花

    目的 探讨不同浓度富血小板血浆(Platelet rich plasma, PRP)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)的增殖作用.方法 两步离心法制备PRP,通过ELISA的方法 测定PRP中两种主要生长因子血小板源性生长因子(PDGF-AB)和转化生长因子(TGF-β1)的浓度;用四唑盐比色法(MTT)观察5%、10%、20%PRP在2 d、4 d时对牙髓细胞的增殖作用,并探讨这种作用是否依赖于胎牛血清(FBS)的存在.结果 所制备的PRP中血小板的浓度大于1 000×109个/L,为全血中的4倍以上,经ELISA的方法 测定PRP及贫血小板血浆(Platelet poor plasma,PPP)中PDGF-AB、TGF-β1 的浓度分别增加4倍以上.MTT法测定不同浓度组的PRP 对牙髓细胞均有增殖作用,以10%PRP增殖效应明显,P值均<0.05;4 d时PRP对细胞的增殖作用明显强于2 d时,P值<0.05;10%PRP组较10%胎牛血清组增殖作用明显,P值<0.05.结论 本实验制备的PRP含有较高浓度的PDGF-AB及TGF-β1,不同浓度的PRP均能有效促进牙髓细胞增殖,以10%PRP浓度增殖效应明显;并且这种增殖作用并不依赖于胎牛血清的存在;随着时间延长,PRP对细胞增殖作用增加.

  • Osterix在小鼠牙本质生成和修复过程中的表达

    作者:李功臣;胡凌玮;许婷婷;孙瑶

    目的 通过免疫组织化学方法观察小鼠牙本质生成过程中Osterix(Osx)的表达变化,探索其功能及意义.方法 取小鼠不同年龄段及建立修复性牙本质模型的下颌骨,石蜡包埋切片后分别进行HE染色和免疫组织化学染色.结果 在钟状期晚期,Osx在牙尖处成牙本质细胞核内表达.小鼠出生后3 d,Osx在牙冠的全部成牙本质细胞核内高表达.2周龄小鼠,冠部成牙本质细胞核内几乎不表达Osx,磨牙根部成牙本质细胞核内Osx高表达.牙尖磨损建模7 d后,Osx在成牙本质细胞核内表达升高,14 d时表达量下降.结论 Osx在促进成牙本质生成和修复过程中发挥作用.

  • 羟基磷灰石盖髓研究进展

    作者:陈富波;徐晓

    盖髓剂的选择是盖髓术成功与否的一个重要方面,目前已有多种材料被用作盖髓剂.羟基磷灰石是其中一种新型盖髓材料,本文对羟基磷灰石用作盖髓剂在生物相容性、组织修复再生、抗菌性以及羟基磷灰石复合盖髓剂发展作一综述.

  • 重组人骨形成蛋白用于狗直接盖髓的实验研究

    作者:严瑾;郭雯;严奉国

    目的观察重组人骨形成蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic prote in-2,rhBMP-2)对修复性牙本质形成的诱导作用.方法用rhBMP-2与羟基磷灰石(HA)复合,用于狗恒牙人为穿髓后直接盖髓,并与氢氧化钙直接盖髓对照,通过组织病理观察修复性牙本质的形成.结果 rhBMP-2-HA盖髓术后3周,穿髓孔下方可见形成的修复性牙本质团块,团块周围有类造牙本质细胞;术后6周,穿髓孔下方可见完整的修复性牙本质桥;术后1 2周,修复性牙本质桥增厚而且致密,牙本质桥近髓可见排列规则的成牙本质细胞.氢氧化钙盖髓对照组,术后3周,穿髓孔下方可见钙质团块形成,有炎症细胞浸润;术后6周,可见有修复性牙本质形成,但不连续;术后12周,修复性牙本质形成但较rhBMP-2-HA盖髓后形成的修复性牙本质桥薄而且疏松.结论 rhBMP-2-HA可以直接诱导牙髓细胞分化为成牙本质细胞,形成修复性牙本质.

  • 无机三氧化物聚合体保留少儿外伤露髓恒牙活髓的治疗效果分析

    作者:肖成琦

    目的 观察外伤露髓前牙用无机三氧化物聚合体(MTA)盖髓的远期临床疗效.方法 对13例8~15岁少儿的23颗外伤露髓患牙,行活髓切1断、MTA直接盖髓术治疗.3年后进行临床评价,包括MTA直接盖髓后的临床症状,牙髓活力,牙本质桥形成及露髓孔关闭情况.结果 外伤露髓患牙修复性牙本质桥形成,露髓孔关闭,牙髓保持活力.结论 MTA用于少儿外伤露髓恒牙治疗是一种良好的活髓保存剂.

  • 三氧化矿化物凝聚体用于深龋意外穿髓的疗效观察

    作者:范华南;刘漪;李慧

    目的 评价三氧化矿化物凝聚体(MTA)用于深龋意外穿髓时直接盖髓术的临床疗效.方法 将38例患者(38颗牙)按随机数字表法分为MTA组和氢氧化钙糊剂组,每组19颗.先用2%利多卡因小棉球置于龋洞内表面麻醉,去尽腐质,备洞,生理盐水缓慢冲洗窝洞,隔湿.分别将MTA和氢氧化钙糊剂覆盖于暴露的牙髓上约1.0mm厚,用小棉球吸取多余水分,然后用丁香油氧化锌糊剂暂封,观察15 d无症状后行永久充填.治疗后6个月和1年随访,观察盖髓后患牙症状、牙髓活力、X线片等的变化指标.结果 所有患者术后均获6个月和1年的随访,MTA组19颗患牙16颗成功,成功率为84.2%.牙髓活力正常,X线片可见修复性牙本质形成;3颗失败.氢氧化钙糊剂组19颗患牙7颗成功,成功率为36.8%;12颗失败.2组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 MTA是用于成人恒牙直接盖髓术有效的盖髓剂.

  • iRoot BP Plus直接盖髓后比格犬牙髓的反应性变化

    作者:梅雪;谢俐萍;金幼虹;叶芳;熊伟;岳黎;姜珊

    目的:iRoot BP Plus直接盖髓于比格犬牙颈部,观察术后损伤部位钙化桥的形成程度和牙髓炎症反映情况,探索iRoot BP Plus作为直接盖髓材料的可行性.方法:选取2只10月龄健康比格犬,选择72颗牙齿作为研究对象,8周和12周实验周期,随机分为iRoot BP Plus组、MTA组和玻璃离子实验对照组,分别以iRoot BP Plus、MTA及玻璃离子盖髓.术后8周和12周分别拔出实验牙,获取标本,组织学切片,苏木精-伊红(HE)染色,将标本牙髓内钙化桥形成程度和牙髓内炎症反应程度进行组织学评估并分级,统计学分析采用秩和检验.结果:8周和12周后iRoot BP Plus组和MTA组大多数标本可形成完整钙化桥,牙髓无炎症,但MTA组使牙齿变色,而iRootBP Plus组不使牙齿变色;玻璃离子组标本均无钙化桥形成,牙髓均有炎症反应及网状萎缩和成牙本质细胞空泡变性,但不使牙齿变色.结论:1)iRoot BP Plus、MTA都能诱导钙化桥形成.2)iRoot BP Plus、MTA都具有良好的炎症调节作用.3)iRoot BP Plus是一种优于MTA的盖髓剂.

  • 牙本质非胶原蛋白诱导牙髓-牙本质复合体反应的动物实验观察

    作者:李俊;李政权;高原

    目的:观察提取的猪牙本质非胶原蛋白对修复性牙本质形成的诱导活性.方法:用提取的猪EDTA可溶性牙本质非胶原蛋白作盖髓剂,对Wistar大鼠的健康第一磨牙进行直接盖髓实验,采用氢氧化钙(Dycal)和空白组为对照,通过组织学实验观察牙髓-牙本质复合体的反应.结果:盖髓术后7 d,各组之间软、硬组织反应的差异无统计学意义.术后14 d,NCPs组和Dycal组的修复反应均明显优于空白对照组(P<0.01),且NCPs组对牙髓的刺激小于Dycal组(P<0.05).结论:NCPs对牙髓刺激性小,可以诱导牙髓细胞分化为成牙本质细胞样细胞,形成修复性牙本质,其诱导活性至少与常规盖髓剂相当.

  • TGF-β1在修复性牙本质形成早期的基因表达

    作者:陈智;樊明文;张旗;朱奇;边专;彭彬

    目的:利用原位杂交技术,观察TGF-β1在大鼠牙髓修复性牙本质形成早期的基因表特征.方法:在Wistar大鼠上下颌第一磨牙近中面制备一单面洞.分别观察3天和15天后处死动物.组织学处理后切片.体外转录合成单链RNA探针并标记地高辛.将标记探针与标本进行原位杂交.利用生物素标记的抗地高辛抗体和SABC标记,DAB显示杂交信号.苏木素复染.结果:TGF-β1 mRNA在备洞3天后的成牙本质细胞和成牙本质细胞层下方的牙髓细胞内表达强阳性.15天后,修复性牙本质下方的成牙本质细胞样细胞表达TGF-β1.结论:在牙髓修复早期,TGF-β1通过自分泌途径,参与了修复性牙本质的形成.

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