芹黄素对氧化应激诱导的HaCat细胞XBP1表达的影响

目的 研究芹黄素对过氧化氢诱导的HaCat细胞氧化应激及XBP1表达的影响.方法 采用MTT法测定芹黄素对HaCat细胞的活力的影响,DCFH-DA法流式细胞术检测HaCat细胞活性氧(ROS)含量,实时定量PCR检测HaCat细胞XBP1的mRNA表达.结果 500 μmol/L的过氧化氢可显著诱导HaCat细胞ROS含量及XBP1smRNA表达升高(P＜0.01);10 μmol/L及25μmol/L的芹黄素可显著抑制过氧化氢引起的HaCat细胞ROS含量及XBP1s mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.01).而过氧化氢或芹黄素对HaCat细胞未剪切的XBP1 (XBP1u)的mRNA水平无明显影响.结论 芹黄素可能通过抗氧化,对过氧化氢引起的XBP1s表达升高具有抑制作用,因而可能具有开发成为治疗白癜风的新药的前景.

芹黄素对肾缺血再灌注损伤后Fas/FasL介导凋亡反应的影响

目的 探讨芹黄素抑制大鼠肾缺血再灌注损伤凋亡Fas、FasL基因表达的影响.方法 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,将60只大鼠分为5组:假手术组、缺血再灌注组、芹黄素低浓度组(2mg/kg)、芹黄素中浓度组(10mg/kg)、芹黄素高浓度组(50mg/kg),每组大鼠各12只.检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾组织氧化损伤和抗氧化指标(SOD、MDA和GSH-Px)含量,观察肾组织病理学变化,免疫组化检测FasL、caspase-3和Bcl-2表达,Western blot法检测Fas、FasL和Bcl-2表达水平.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组Cr和BUN水平均明显增高;SOD和GSH-Px含量明显降低,MDA含量显著升高;病理组织显示肾小管损伤严重;免疫组化示FasL、caspase-3蛋白表达增强,Bcl-2表达降低;Western blot法检测结果显示Fas和FasL表达水平明显升高,Bcl-2表达水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).与缺血再灌注组比较,芹黄素组Cr和BUN水平均明显降低;SOD和GSH-Px含量明显升高,MDA含量显著下降;病理组织显示肾小管损伤显著改善;免疫组化显示FasL、caspase-3蛋白表达较表达下调,Bcl-2表达上调;Western blot法检测结果显示,Fas和FasL和表达水平明显下降,Bcl-2表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 芹黄素能减轻肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能与其上调Bcl-2基因和阻断Fas/FasL系统有关,从而抑制肾缺血再灌注损伤后所造成的细胞凋亡.

芹黄素抗乳腺癌作用机制的研究进展

芹黄素是一种植物黄酮类化合物,具有多种生物学活性和药理作用,尤其在抗肿瘤方面,能抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,干扰肿瘤细胞的信号转导,诱导肿瘤细胞凋亡,抗氧化等.本文就其抗乳腺癌作用机制的研究进展作一综述.

268紫苏中芹黄素和2,4,5-三甲氧基肉桂酸在小鼠强迫游泳实验中的抗抑郁作用

芹黄素联合缺血后处理方案保护NRK-52E细胞缺氧/复氧损伤的实验研究

目的 观察芹黄素联合缺血后处理方案对大鼠肾缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞株(NRK-52E)的TLR4/NF-κB表达的影响.方法 2016年7—11月于武汉大学消化系统疾病湖北省重点实验室进行实验.用大鼠NRK-52 E建立肾缺血再灌注损伤模型,分为5组:正常组(N组)、缺氧/复氧组(I/R组)、I/R+芹黄素组(Api组)、缺血后处理组(IPO组)、芹黄素+缺血后处理联合治疗组(Api+IPO组).CCK8染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测SOD和MDA含量,Real time PCR检测TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1β表达情况,Western blot检测TLR4和NF-κB表达水平.结果 与N组比较,I/R组细胞存活率明显下降(P<0.01).Api组、IPO组和Api+IPO组相对于I/R组细胞存活率显著上升,其中Api+IPO组存活率高.与N组比较,I/R组细胞凋亡率增加(q=15.33,P<0.01);而与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组凋亡率明显下降(q=7.46、8.92、14.06,P<0.01).与N组比较,I/R组SOD含量明显降低(q=7.60,P<0.01),MDA含量明显升高(q=-7.51,P<0.01);与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组SOD含量显著增加(q=-3.49、-2.71、-4.97,P<0.05),MDA含量明显降低(q=2.95、2.29、4.07,P<0.05).与N组比较,I/R组TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1βmRNA表达明显上调(q=-7.74、-9.52、-10.88、-10.75,P<0.01);与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组的TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1βmRNA表达明显下调(q=2.99、3.71、3.98、4.52;2.57、3.03、3.50、3.37;4.47、5.03、5.87、5.56,P<0.05).结论芹黄素和体外缺血后处理均能明显缓解肾缺血再灌注损伤,其中芹黄素和体外缺血后的联合治疗方案效果明显,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关.

芹菜素对自发性高血压大鼠心血管重塑的保护作用

芹菜素(Apigenin,Api)又称芹黄素,化学名4,5,7-三羟基黄酮(4,5,7-trihydroxyflavone),属于黄酮类化合物.芹菜素广泛存在于芹菜、橘子、苹果、车前子、络石藤、藿香等植物中,是天然抗氧化剂.芹菜素已经被证实具有抗病毒、抑癌、抑制有丝分裂活化蛋白激酶(MAPK)、抗氧化、抗炎、雌激素样等作用[1-5].关于芹菜素对心血管的保护作用已研究很多,但它对自发性高血压大鼠血压以及心血管重塑的作用还未见报道.本文研究高血压大鼠长期喂养芹菜素对其血压有无改善作用,并探讨长期喂养芹菜素对高血压大鼠的心血管重塑有无保护作用.

芹黄素通过抗氧化作用减轻阿霉素对正常血细胞的损伤

本研究探讨芹黄素(apigenin,Api)对化疗药阿霉素损伤正常血细胞的保护作用及其机制.用MTT法测定芹黄素、阿霉素以及芹黄素联合应用阿霉素对K562细胞和正常人外周血多形核白细胞(PMN)的增殖抑制作用,用分光光度法检测正常人外周血PMN和K562细胞裂解上清液中的活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果显示,阿霉素培养1 h后添加芹黄素继续培养至48h,未能明显影响阿霉素对K562细胞的增殖抑制作用,但阿霉素对PMN的细胞增殖抑制率明显下降.两药联合实验组与阿霉素组相比,PMN和K562细胞裂解上清液中的ROS和MDA水平均明显降低,SOD和GSH-Px活性均明显升高;而细胞裂解上清液中的氧化应激指标变化趋势于.上述实验结果表明芹黄素在不影响阿霉素抗白血病细胞增值的同时对正常血细胞具有保护作用,其可能机制是芹黄素提高了正常细胞内抗氧化物酶活性,同时降低氧化产物含量,减轻了阿霉素的氧化应激损伤副作用.

芹黄素对SAMP8小鼠学习记忆及突触可塑性的影响

目的：探讨芹黄素对快速老化SAMP8小鼠学习记忆能力及突触囊泡蛋白（Syn）及生长相关蛋白43（GAP43） mRNA及蛋白表达的影响。方法6月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、芹黄素10、20、40 mg／kg剂量组，同龄SAMP1小鼠作为对照组，用Morris水迷宫训练测试其空间学习能力和记忆能力；用Western 印迹及RT－PCR方法测定海马区Syn及GAP43蛋白及mRNA表达。结果芹黄素各剂量组的平均逃避潜伏期均缩短，穿越平台区次数增加，在目标象限的停留时间延长（与SAMP8模型组相比，P＜0．05），海马区Syn、GAP43蛋白及mRNA表达均较模型组增加（P＜0．05）。结论芹黄素可能通过促进海马神经突触Syn及GAP43的表达，提高突触修复及再生能力，改善小鼠的学习记忆。

芹黄素和柚皮素对肝星状细胞增殖及其胶原合成的作用

中药在治疗肝纤维化方面已展现了良好的应用前景,黄酮类化合物是中药中普遍存在的有效成分,具有抗菌、消炎、清除自由基、抗肿瘤等多种药理作用,我们观察到芹黄素(apigenin,AP)和柚皮素(naringenin,NA)具有降低肝星状细胞(HSC)增殖和胶原合成的作用.

芹黄素对体外人大肠癌Lovo细胞生物学活性的影响及机制研究

目的 探讨芹黄素对体外人大肠癌Lovo细胞生物学活性的影响及其可能的作用机制.方法 不同浓度的芹黄素作用于体外培养的人大肠癌Lovo细胞24、48或72 h,采用光学显微镜和透射电镜分别观察芹黄素对Lovo细胞形态和超微结构的影响;采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和平板克隆形成实验分别检测芹黄素对Lovo细胞增殖和克隆形成能力的影响;采用PI染色法、Annexin V FITC/PI双染法,流式细胞术分别检测芹黄素对Lovo细胞周期分布和凋亡的影响;采用Western blot法检测芹黄素对Bcl-2、pro-caspase-3、cleaved caspase-3表达的影响.结果 芹黄素可浓度-时间依赖性的抑制人大肠癌Lovo细胞的增殖及克隆形成,作用48、72 h时的半数抑制浓度IC50分别为98.05 μmol·L-1及33.91 μmol·L-1;细胞周期分布发生改变,主要表现在G0/G1期细胞比例减少、G2/M期细胞比例增加,细胞周期阻滞于G2/M期;细胞凋亡率增加;Bcl-2、pro-caspase-3表达下调;cleaved caspase-3表达上调;差异具有统计学意义(P<0.05).结论 芹黄素可通过阻滞细胞周期于G2/M期抑制Lovo细胞增殖,通过下调Bcl-2、pro-caspase-3表达,上调cleaved caspase-3表达,诱导Lovo细胞凋亡,是一种有开发前景的大肠癌化疗药物.

芹黄素对Aβ25-35诱导损伤的海马神经元的保护作用

目的探讨中药提取单体芹黄素对体外原代培养条件下Aβ25-35诱导的海马神经元损伤的影响.方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为5、10、20、40、80μmol·L-1的芹黄素预处理后,用10 μmol·L-1的Aβ25-35处理24 h,MTT法比较神经元的存活情况、Hochesst荧光染色检测神经元的凋亡,并测定SOD活性及Bcl-xl蛋白表达的变化.结果芹黄素10、20、40 μmol·L-1组可提高海马神经元存活率和引起Bcl-xl蛋白表达的增加,增加Mn-SOD活性、促进Cu与聚集型Aβ25-35结合,而且10、20 μmol·L-1芹黄素剂量组与雌二醇抗Aβ25-35毒性损伤效果相同(P＞0.05).结论芹黄素对Aβ25-35的毒性损伤的海马神经元具有保护作用,其保护作用可能与提高Bcl-xl蛋白表达、增加Mn-SOD活性、促进Cu与聚集型Aβ25-35结合,使之转变成无毒性的可溶状态有关.

芹黄素类脂纳米囊的制备与理化性质考察

目的 制备芹黄素类脂纳米囊并考察其理化性质.方法 选择聚乙二醇单硬脂酸酯、卵磷脂作为表面活性剂,中链甘油三酯为油相,采用相转化法制备芹黄素类脂纳米囊；并初步研究其理化性质.结果 按照优化处方制得的芹黄素类脂纳米囊载药量为1.26％,包封率为95.7％,平均粒径为46.1 nm,透射电镜下呈类球形,Zeta电位为-28.18 mV.结论 该纳米囊制备方法简单,包封率较高,粒径较小.

芹黄素联合缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及机制探讨

目的 探讨芹黄素联合缺血后处理(IPO)对大鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤的影响及其机制.方法 选择SD大鼠50只,分为假手术组(Sham组)、I/R组、I/R+芹黄素组、IPO组、芹黄素+IPO组各10只.I/R组、I/R+芹黄素组、IPO组、芹黄素+IPO组均制备肾I/R模型.其中,I/R+芹黄素组在制备I/R模型前经腹腔注射芹黄素10 mg/kg预处理;IPO组在阻断左肾动脉血流45 min后,给予反复3次的恢复血流10 s、阻断血流10 s的IPO处理,再完全恢复肾脏血流供应;芹黄素+IPO组在制备I/R模型前先予腹腔注射芹黄素10 mg/kg预处理,再给予IPO处理.Sham组仅分离肾包膜及肾动静脉而不阻断血流.各组干预24 h后,均经心脏取血测定血清BUN及Cr水平;取各组大鼠左肾组织,观察肾组织病理学变化;采用Real time PCR法检测肾组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)、NF-κB、TNF-α和细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达;采用Western blot法检测肾组织HMGB1蛋白表达.结果 I/R+芹黄素组、IPO组、芹黄素+IPO组血清BUN及Cr水平均低于I/R组(P均<0.05);芹黄素+IPO组血清BUN及Cr水平均低于I/R+芹黄素组及IPO组(P均<0.05).病理检查示,Sham组未见明显的形态学改变;I/R组肾小管上皮细胞肿胀,部分细胞明显变性坏死;芹黄素+IPO组、I/R+芹黄素组和IPO组肾小管损伤程度明显减轻.I/R+芹黄素组、IPO组、芹黄素+IPO组HMGB1、NF-κB、TNF-α和ICAM-1 mRNA及蛋白表达均低于I/R组(P均<0.05);芹黄素+IPO组HMGB1、NF-κB、TNF-α和ICAM-1 mRNA及蛋白表达均低于I/R+芹黄素组及IPO组(P均<0.05).结论 芹黄素预处理联合IPO能够明显减轻肾脏I/R损伤,且其效果优于单一采用芹黄素预处理或IPO,其机制可能与抑制肾组织炎症反应有关.

芹黄素对人眼Tenon囊成纤维细胞增生的影响

背景 青光眼滤过手术后人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的增生是滤过手术失败的丰要原因,寻找抑制术后HTFs增生的药物可提高滤过手术的成功率. 目的 观察芹黄素对HTFs体外生长的抑制效应并探讨其作用机制.方法 斜视手术中获取的人眼Tenon囊组织剪成1 mm×1 mm×1 mm的组织块,进行原代培养,免疫荧光法进行细胞波形蛋白检测以鉴定培养的HTFs.取第3～5代HTFs接种于96孔板中,加入0、20、40、80、160 μmol/L芹黄素后继续培养,于24、48、72 h后分别取一块96孔板,在酶联免疫检测仪上检测560 nm波长处各组细胞的吸光度(A560)值,磺基罗丹明B(SRB)法测定细胞的增生能力.分别在培养基中加入40、80、160 μmol/L芹黄素,同时在不同浓度芹黄素组培养基中均加入10 μg/L BrdU,继续培养48 h,在各组同一个视野下分别拍摄荧光显微镜和光学显微镜照片,计算BrdU的标记率,以未添加任何芹黄素(0μmol/L)组为对照组.用Hoechst 33258染色后在荧光显微镜下观察培养细胞的形态学改变,采用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和细胞周期的变化. 结果 培养的细胞生长状态良好,免疫荧光法检测可见细胞对波形蛋白呈阳性反应,为细胞质中均匀的绿色荧光,确定培养的细胞为HTFs.SRB法检测结果显示,HTFs的增生值(A560)随着芹黄素浓度的增加而逐渐下降,同浓度芹黄素组HTFs A560值随着作用时间的延长逐渐下降,差异均有统计学意义(F组别=480.306,P=0.000;F时间 =555.144,P=0.000).0、40、80 μmol/L芹黄素作用HTFs 48 h后BrdU的标记率分别为(87.860±0.632)％、(61.520±4.306)％、(23.480±4.472)％,各组之间的总体比较差异有统计学意义(F=299.347,P=0.000),其中40 μmol/L、80 μ mol/L芹黄素组HTFs BrdU的标记率均明显低于0 μmol/L芹黄素组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Hoechse 33258染色发现,不同浓度芹黄素组的细胞数目减少,随着芹黄素浓度的增加,细胞核固缩和变形的细胞数目增加.流式细胞术检测发现,随着芹黄素浓度的增加,G0/G1期细胞的百分数逐渐增加,而S期和G2/M期细胞的百分数逐渐下降,差异均有统计学意义(FG0/G1 =58.621,P=0.000;Fs=32.357,P=0.001；Fc2/M =83.998,P=0.000).0、40、80、160 μmol/L芹黄素作用72 h后,细胞的凋亡率分别为(4.77±0.21)％、(13.24-±1.35)％、(18.33±1.86)％、(31.58±2.77)％,4个组的总体差异有统计学意义(F=204.791,P＜0.05). 结论 芹黄素通过诱导细胞凋亡,并将细胞阻滞于G0/G1期而抑制HTFs的增生,其作用呈剂量和时间依赖性.

芹黄素对乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-435S侵袭和增殖能力的影响

透明质酸酶(Hyalase)是一种基质降解酶,它参与了肿瘤的侵袭转移过程[1].有研究表明,芹黄素可以抑制Hyalase的活性[2].我们通过建立乳腺癌细胞体外侵袭模型,观察芹黄素对两种乳腺癌细胞株侵袭和增殖能力的影响.

芹黄素抑制小胶质细胞活化作用研究

目的 探讨芹黄素对小胶质细胞活化的抑制作用.方法 原代培养SD大鼠小胶质细胞,实验随机分为空白对照组、脂多糖组(LPS组)、LPS+芹黄素(10 μM)组、LPS+芹黄素(20μM)组、LPS+芹黄素(50 μM)组.MTT法检测芹黄素对小胶质细胞活性的影响;ELISA法检测IL-1、IL-10等炎症相关因子以及BDNF、PDNF等神经营养因子的表达;RT-PCR、western blot检测炎症相关基因iNOS转录以及表达水平.结果 MTT检测结果表明,芹黄素对小胶质细胞活性无明显抑制.LPS刺激后,芹黄素预处理组IL-1等炎症因子表达水平明显低于单独LPS组(P＜0.05);而芹黄素预处理组IL-10的表达则高于单独LPS组(P＜0.01);与此同时,BDNF、PDNF等神经营养因子的分泌也有相同趋势(P＜0.05).芹黄素预处理组iNOS表达和转录水平也低于单独LPS组(P＜0.05).结论 芹黄素可抑制活化状态小胶质细胞炎症因子以及炎症相关蛋白的表达,并可同时促进与神经元分化成熟相关神经营养因子的分泌.

芹黄素对黑素细胞氧化应激相关凋亡信号通路的影响

目的:探讨芹黄素对黑素细胞氧化应激相关凋亡信号通路的影响.方法:Western blot检测芹黄素对PIG1细胞Nrf2、p-Nrf2活化的影响;以H2 02损伤PIG1细胞,采用MTT法检测芹黄素对氧化应激PIG1细胞形态和活力的影响;流式细胞术检测芹黄素对氧化应激PIG1细胞凋亡的影响;倒置显微镜观察芹黄素对氧化应激PIG1细胞形态的影响.结果:与空白对照组比较,芹黄素组PIG1细胞内Nrf2蛋白和p-Nrf2蛋白表达显著升高(P＜0.05);siRNA+芹黄素组PIG1细胞形态、活力及凋亡率与模型组比较无显著差异;与模型组比较,芹黄素组PIG1细胞形态明显改善,细胞活力显著升高,凋亡率显著降低.结论:芹黄素在人黑素细胞中通过激活Nrf2-ARE通路发挥抗氧化作用,抑制黑素细胞凋亡.

芹黄素纳米脂质载体制剂的制备及理化性质考察

制备芹黄素纳米脂质载体制剂并进行质量评价.方法:采用高温乳化-低温固化法制备芹黄素纳米脂质载体制剂,并对其形态、粒径、表面电位、包封率、载药量、体外释药等特性进行考察.结果:得到的芹黄素纳米粒为类球形,粒径分布均匀,平均粒径为212.1 nm,Zeta电位为- 14.65 mV,平均包封率为82.4％,平均载药量为0.97％,体外2h累积释药30％,随后释药过程趋于缓慢.结论:所制备的芹黄素纳米脂质载体制剂性质稳定,有良好的应用前景.

芹黄素对老年痴呆小鼠学习记忆能力的影响

目的研究芹黄素对老年痴呆(AD)小鼠学习和记忆能力的改善作用.方法取10个月龄的小鼠,以D-半乳糖和AlCl3复制老年痴呆动物模型,建模成功的AD小鼠用不同浓度的芹黄素腹腔注射,利用Y-型迷宫进行被动回避反应实验和信号方位辨别反应实验,测试小鼠学习记忆能力及信号方位辨别能力改变.结果腹腔注射芹黄素的小鼠学习能力和记忆保持率均显著优于模型对照组(P<0.01).结论芹黄素能有效改善老年痴呆症小鼠的学习和记忆能力.

芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响

目的 探讨芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响.方法 采用MTT法测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖活性;用Transwell法测试细胞的迁移情况;用流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 芹黄素与紫杉醇单独用药对细胞的抑制作用随药物浓度的提高而增强,呈浓度依赖性,联合用药有协同作用;两药联用后,抑制细胞的迁移能力和诱导细胞的凋亡作用增强.结论 芹黄素与紫杉醇联用可协同抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移,并诱导细胞的凋亡.