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  • 酪氨酸激酶受体RON在肿瘤发生和发展中的作用

    作者:汪宏;周坤

    酪氨酸激酶受体(receptors tyrosine kinase,RTK)介导许多关键的细胞功能,在肿瘤的发生、发展和转移中扮演着重要的角色.RON属于RTK亚家族中成员之一,主要表达在上皮来源的细胞,其配体是巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein,MSP).RON活化后引起细胞转化、生长、迁移和基质侵袭.我们就RON分子结构、激活方式和致癌机制作相关阐述,并探讨RON在肿瘤中的表达,有助于肿瘤的治疗.

  • 趋化因子MCP-1、MSP联合癌胚抗原检测在肺结核与肺癌鉴别诊断中的意义

    作者:彭春仙;郑晓燕;范剑;童向民

    目的 探讨肺结核、肺癌患者的胸腔积液和外周血中趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)和癌胚抗原(CEA)的表达及其临床意义.方法 选取2009年12月至201 1年12月在浙江省衢州市人民医院住院的34例肺结核患者和45例经病理学确诊的肺癌患者,另选30名健康献血成年人作为健康对照组.血清和胸水MCP-1和MSP检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),CEA检测采用化学发光法.通过受试者工作特征曲线确定MCP-1、MSP和CEA诊断肺结核或肺癌的临界值.结果 肺结核组和肺癌组患者血清中MCP-1、MSP和CEA水平均不同程度高于健康对照组.血清样本检测发现,肺结核组患者MCP-1水平高于肺癌组(t=2.69,P<0.05),CEA水平低于肺癌组(t=0.89,P>0.05),MSP水平与肺癌组比较差异无统计学意义(t=2.89,P<0.05);胸腔积液样本检测发现,肺结核组患者的MCP-1水平高于肺癌组(=3.54,P<0.05),而MSP和CEA水平则低于肺癌组(=3.47和3.48,P<0.05).诊断肺结核时,血清MCP-1水平在240 pg/mL时的特异度高,为95.6%;诊断肺癌时,胸水MSP水平在1100 pg/mL时的特异度高,为94.1%.结论 血清和胸水中MCP-1、MSP以及CEA联合检测可用于鉴别肺癌与肺结核.

  • 儿童艾滋病患者免疫因子水平断面研究

    作者:张福杰;靳昌忠;赵燕;姚航平;赵红心;吴灵娇;魏红山;李在村;吴南屏

    儿童艾滋病(acquired immunodeficiency disease, AIDS)患者的病情特点不同于成人患者,有其特殊之处,表现为高病毒载量,低免疫学状态,疾病进展快,常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等,而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见,病程与成人比较更为复杂.目前我国儿童AIDS方面的资料较少,治疗经验有限,因此,研究我国儿童AIDS患者的免疫状况十分必要.本实验对我国部分省份1992-2002年间感染的109例AIDS患儿Th1/Th2免疫因子、趋化因子及巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulated protein, MSP)等进行了初步分析研究,为我国儿童AIDS的防治提供基础资料.

  • 中国儿童与成人艾滋病患者的免疫活化水平比较

    作者:吴南屏;张福杰;靳昌忠;赵燕;姚航平;赵红心;吴灵娇;魏红山;李在村

    目的 比较中国儿童及成人艾滋病(AIDS)患者的免疫活化水平.方法 以103例儿童AIDS患者、38例成人AIDS患者、88名健康儿童和72名健康成人为研究对象,取抗凝血进行流式细胞计数检测CD4+T细胞数,荧光定量RT-PCR测定血清HIV-RNA滴度,采用ELISA法检测血清中Th1/Th2免疫因子(IL-10、IL-16、IL-18)、趋化因子[包括调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)]及巨噬细胞刺激蛋白(MSP)的水平,并以β2微球蛋白(β2-MG)和可溶性Fas(sFas)的表达水平作为机体免疫活化指标.结果 儿童AIDS患者组的CD4+T细胞数显著低于儿童正常对照组(P<0.01),各细胞因子水平较儿童正常对照组显著升高(P均<0.01).成人AIDS患者组的CD4+T细胞数显著低于成人正常对照组(P<0.01),除MSP水平显著低于成人对照组(P<0.01)外,其余各细胞因子均显著高于成人对照组(P<0.01).儿童AIDS患者组各因子水平除SDF-1α和β2-MG与成人AIDS患者组差异无显著性(P>0.05)外,其余均显著高于成人AIDS患者组(P<0.01).结论 儿童和成人AIDS患者的免疫系统均表现为明显的异常活化,儿童患者的免疫活化水平高于成人患者.

  • 巨噬细胞刺激蛋白及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病炎性机制中的作用

    作者:王涛;陈小菊

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以气道炎症为特征的慢性炎症性疾病,肺泡巨噬细胞在其中的作用正逐渐被人们所重视.巨噬细胞刺激蛋白(MSP)及其受体酪氨酸激酶RON是近年来倍受关注的一类细胞因子,本文就MSP/RON对巨噬细胞的调节及其在COPD的炎性机制中的作用作一综述.

  • 巨噬细胞刺激蛋白对烟熏大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响

    作者:陈小菊;王涛;陈小兵

    目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)对烟熏大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响.方法 培养正常和烟熏不同时间(1个月、2个月、3个月)的大鼠肺泡巨噬细胞,给予不同浓度MSP处理24 h,采用酶联免疫法检测细胞上清液中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介索8(IL-8)和IL-1β的浓度,比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平.结果 ①MSP呈浓度依赖性促进正常组和各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和IL-1β;经MSP处理后,各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和n-1β浓度均高于正常组(P<0.05);大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度随烟熏时间延长呈时间依赖性增加.②MSP呈浓度依赖性促进正常组和各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞分泌MDA,抑制其产生SOD;烟熏2个月组和烟熏3个月组大鼠肺泡巨噬细胞上清液中MDA水平均高于正常组(P<0.05),SOD水平均低于正常组(P<0.05);随着烟熏时间延长,大鼠肺泡巨噬细胞上清液中MDA水平呈时间依赖性增加,SOD水平呈时间依赖性降低.结论 MSP呈浓度依赖性促进正常和烟熏大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β和MDA,抑制其产生SOD.MSP促烟熏大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β、MDA及抑制其产生SOD的作用较正常大鼠更显著,且烟熏时间越长此作用越明显.

  • 血清和胸水中 MCP-1、MSP、LEP 在肺癌及肺结核鉴别中的应用价值

    作者:张韵;宗文宏;丁明东;姜继军;董苏荣

    目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)、血清瘦素(LEP)在鉴别肺癌及肺结核中的价值及意义。方法2015年1—12月江苏省泰州市人民医院感染科选取经痰涂片确诊为肺结核患者50例(肺结核组)及经病理组织学确诊为肺癌患者50例(肺癌组),另选取同期健康体检者45例为健康对照组。应用ELISA法测定血清及胸水中MCP-1、MSP、LEP水平。应用受试者工作特征曲线( ROC)确定MCP-1、MSP、LEP在肺癌及肺结核鉴别中的应用价值。结果与健康对照组比较,肺结核组、肺癌组血清中MCP-1、MSP、 LEP均升高( P <0构.05);与肺结核组比较,肺癌组血清LEP升高、MCP-1降低( P <0.05),而MSP无显著变化( P >0.05)。肺癌组胸水MSP、LEP高于肺结核组( P <0.05),而MCP-1低于肺结核组( P <0.05)。经ROC分析显示,诊断肺癌时,胸水中MSP在470 pg/ml时灵敏度高(91.1%),MSP在1200 pg/ml时,特异度高(94.2%);诊断肺结核时,胸水中MCP-1在500 pg/ml时灵敏度高(94.5%),MCP-1在1100 pg/ml时,特异度高(93.2%)。结论血清及胸水中MCP-1、MSP、LEP联合检测能有效鉴别肺结核与肺癌,灵敏度高,值得临床应用推广。

  • 异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病患者血浆与诱导痰巨噬细胞刺激蛋白表达及肺功能影响

    作者:武琰娇;张娜娜;柏少锋

    目的 探讨异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血浆和诱导痰巨噬细胞刺激蛋白(MSP)表达及肺功能的影响.方法 选取兰州大学第二医院自2017年10月至2018年10月收治的62例COPD患者为研究对象.采用随机数字表法将其分为A、B两组,每组各31例.A组采用异丙托溴铵治疗,B组采用异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸治疗.分析并比较两组患者治疗前、后血浆及诱导痰中MSP表达水平、肺功能情况及临床疗效.结果 B组患者的治疗总有效率为87.1%(27/31),显著高于A组的71.0%(22/31),两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组患者血浆及诱导痰中MSP表达水平较治疗前均降低,且B组显著低于A组,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组患者肺功能较治疗前显著改善,且B组改善情况显著优于A组,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸治疗COPD患者,可有效改善患者的血浆及诱导痰中MSP表达水平及肺功能.

  • 血清巨噬细胞刺激蛋白在慢加急性肝功能衰竭患者血清中水平及其与免疫调节因子的相关性

    作者:冯婷婷;阚延婷;邹婷;黄小平;孙蔚;甘建和

    目的 观察慢加急性肝功能衰竭(ACLF)患者血清中巨噬细胞刺激蛋白(MSP)水平,并探讨其在疾病进展过程中的临床意义及其与免疫调节因子的相关性.方法 双抗原夹心ELISA法检测45例ACLF和32例CHB患者血清MSP水平,比较不同预后ACLF患者的MSP水平.以健康体检者作为对照.同时测定肝功能、HBV DNA,流式细胞仪检测外周血CD4+γ干扰素+(Th1)、CD4+ IL-4+(Th2)、CD4+ IL-17+ (Th17)、CD4+ CD25+ Foxp3+ (Treg)淋巴细胞的表达.两样本均数比较采用t检验,并行单因素方差分析和直线相关分析.结果 ACLF组血清MSP为(1.65±0.46) ng/mL,CHB组为(1.43±0.32) ng/mL,健康对照组为(1.23±0.21) ng/mL,ACLF组高于CHB组(t=2.163,P=0.035)和健康对照组(t=4.032,P=0.01).ACLF存活组MSP水平为(2.29±0.42) ng/mL,高于死亡组的(1.42±0.17) ng/mL(t=1.973,P=0.042).ACLF组外周血Th2、Th17分别为(1.51±0.27)%和(1.94±1.02)%,CHB组为(0.42±0.08)%和(0.55±0.36)%,健康对照组为(0.23±0.19)%和(0.26±0.19)%,差异均有统计学意义(F值分别为7.759和37.229,均P<0.01).MSP水平与Th2(r=0.386,P=0.032)、Th17(r=0.644,P=0.000)和Th17/Treg比值(r=0.605,P=0.000)呈正相关,与Th1(r=-0.212)、Treg(r=-0.262)和Th1/Th2比值(r=-0.394)无相关性(均P>0.05).结论 MSP参与ACLF病程进展过程,且与ACLF的临床转归和患者细胞免疫水平失衡有一定关系.

  • 酪氨酸激酶受体RON与艾滋病相关脑病

    作者:冯婷婷;姚航平;吴南屏

    酪氨酸激酶受体RON即巨噬细胞刺激蛋白(MSP)受体,是肝生长因子受体家族成员之一,拥有独特的表达类型和生物学活性.MSP与RON相互作用后,阻止了前炎症介质的产生,并诱导消除炎症相关基因的表达;而HIV-1的转录与前炎症介质的关系非常密切,RON可以通过抑制NF-?B的活性,部分阻止HIV-1的转录,有研究观察到艾滋病患者脑组织与正常人脑组织相比RON表达量下降.因此,对于HIV感染后和艾滋病进展,RON的作用不容小觑,此文对RON在艾滋病相关脑病发病过程中的作用进行了综述.

  • 高效抗逆转录病毒治疗对AIDS患者MCP-1和MSP水平的影响

    作者:姚航平;靳昌忠;张福杰;冯磊;魏红山;吴灵娇;郜桂菊;Armin Bader;Norbert Brockmeyer;吴南屏

    目的:研究高效抗逆转录病毒治疗(HAART)对AIDS患者血清中MCP-1、MSP水平的影响.方法:采用ELISA法检测40例经HAART 3个月的国内AIDS患者及84例经HAART 3至6年的德国患者血清MCP-1、MSP的水平,荧光定量PCR测定HIV-RNA滴度,流式细胞术检测CD4+T细胞计数.结果:HIV-1感染者血清MCP-1的水平显著高于正常人群(P<0.01),MSP则显著低于正常人群(P<0.01);经短期HAART(3月)后,MCP-1水平下降(P<0.01),MSP无明显改变;长期HAART(3至6年)后MCP-1水平显著升高(P<0.01),而MSP显著下降(P<0.01),MCP-1和MSP水平的变化呈负相关(r=-0.99,P=0.029).结论:MCP-1、MSP与AIDS病程进展有密切关系,HAART对AIDS患者MCP-1、MSP水平有显著的改变,进而改善患者病程进展.

  • 慢性阻塞性肺疾病患者巨噬细胞刺激蛋白 和炎性因子及生活质量的关系研究

    作者:李云辉;潘彬;杨凯;姜轶;任柏沉

    目的 研究慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者巨噬细胞刺激蛋白(Macrophage stimulating protein,MSP)和炎性因子及生活质量的关系.方法 将2013年1月-2017年12月于我院治疗的138例COPD患者纳入实验组,选择同期我院健康体检者138例纳入对照组,观察实验组急性期、缓解期及对照组血气分析、炎性因子、诱导痰及血浆MSP水平与COPD生活困扰得分.结果 对照组PaO2、SaO2均高于实验组急性期、缓解期,PaCO2低于实验组急性期、缓解期(P<0.05);实验组缓解期PaO2、SaO2均高于急性期,实验组缓解期PaCO2低于实验组急性期(P<0.05).对照组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT,诱导痰、血浆MSP水平及SGRQ得分均低于实验组急性期、缓解期(P<0.05).实验组缓解期IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT,诱导痰、血浆MSP水平及SGRQ得分均低于急性期(P<0.05).诱导痰及血浆MSP与PaCO2、SaO2均呈负相关关系(P<0.05);与PaCO2、IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP、PCT、SGRQ得分均呈正相关关系(P<0.05).结论 MSP与COPD患者血气分析指标、炎性因子、SGRQ得分均具有统计学上的相关性,可能在机体炎性反应、免疫炎性反应过程中具有重要的调节作用.

  • 受体酪氨酸激酶RON的研究进展

    作者:怀静;王波;任国平

    RON(recepteur d'origine nantais)是受体酪氨酸家族MET原癌基因亚家族中的一员,主要在上皮细胞中表达,其配体是巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein,MSP).激活后的RON在体外引起细胞的分化、迁移、形变和基质侵袭.RON的过度表达、突变及其剪切变异体与人类的结直肠癌、乳腺癌、肺癌及肾癌等多种人体上皮源性肿瘤的发生、发展有关.

  • 巨噬细胞刺激蛋白表达水平与慢性阻塞性肺疾病患者肺功能的关系

    作者:杨阳;刘行仁

    目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)表达水平与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能的关系.方法 选取急性加重期COPD(AECOPD)患者50例为AECOPD组,缓解期COPD患者50例为缓解期组,同期健康体检志愿者30例为对照组.采用酶联免疫吸附法检测3组入选次日的血浆MSP水平及AECOPD组和缓解期组诱导痰中的MSP表达水平,检测1 s用力呼出量(FEV1)、用力肺活量(FVC)等肺功能指标、6 min步行距离(6MWD)及圣乔治呼吸问卷(SGRQ)得分等.采用Pearson相关分析法分析AECOPD组和缓解期组血浆和诱导痰MSP表达水平与其FEV1、FVC、6MWD及SGRQ等的关系.结果 与对照组比较,AECOPD组和缓解期组血浆MSP表达水平和SGRQ得分均升高,FEV1、FVC、6MWD均降低(P<0.05).与缓解期组比较,AECOPD组血浆和诱导痰MSP表达水平及SGRQ得分升高,FEV1、FVC、6MWD降低(P<0.05).Pearson相关分析结果显示,AECO-PD组血浆和诱导痰MSP表达水平与其FEV1、FVC、6MWD均呈负相关(血浆:r=-0.842、-0.816、-0.822;诱导痰:r=-0.818、-0.825、-0.816,P<0.05),与其SGRQ得分则呈正相关(血浆:r=0.866;诱导痰:r=0.875,P<0.05);缓解期组血浆和诱导痰MSP表达水平与其FEV1、FVC、6MWD均呈负相关(血浆:r=-0.874、-0.826、-0.818;诱导痰:r=-0.815、-0.802、-0.798,P<0.05),与其SGRQ得分呈正相关(血浆:r=0.886;诱导痰:r=0.852,P<0.05).结论 COPD患者血浆和诱导痰MSP表达水平较高,且与其肺功能及疾病对患者生活的影响相关,这可能与MSP调控巨噬细胞参与气道炎症反应相关,COPD血浆和诱导痰MSP可能辅助评估其肺功能及病情从而指导其治疗干预.

  • 巨噬细胞刺激蛋白在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达及意义

    作者:张文波;陈小菊;冷长燕;向小均

    目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)发病机制中的作用.方法 收集2013年7月至2013年12月于川北医学院附属医院体检、门诊或住院患者,纳入健康对照者、慢阻肺稳定期和慢阻肺急性加重期患者各30例分成三组,采用酶联免疫吸附法检测三组受试者血浆中MSP、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度,以及慢阻肺急性加重期和稳定期组患者诱导痰中MSP的浓度.结果 慢阻肺急性加重期和稳定期组患者血浆中MSP、IL-6、IL-8、TNF-α的浓度均明显高于健康对照组(P<0.05),而慢阻肺急性加重期组患者血浆中MSP、IL-6、IL-8、TNF-α的浓度又明显高于慢阻肺稳定期组(P<0.01).慢阻肺急性加重期组患者诱导痰中MSP的浓度高于慢阻肺缓解期组(P<0.01).慢阻肺患者血浆和诱导痰中MSP、血浆IL-6、IL-8、TNF-α的浓度水平与其FEV1占预计值百分比均呈负相关.慢阻肺患者血浆和诱导痰中MSP浓度水平与血浆中IL-6、IL-8、TNF-α的浓度水平均呈正相关.结论 慢阻肺患者体内合成和释放MSP、IL-6、IL-8、TNF-α明显增多.慢阻肺患者血浆和诱导痰中MSP的浓度及慢阻肺患者血浆中IL-6、IL-8、TNF-α的浓度均与其气流受限严重程度相关.MSP在慢阻肺的发病机制中发挥重要作用,可能主要是参与气道炎症的调节.

  • 巨噬细胞刺激蛋白及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

    作者:王涛;陈小菊;张文波

    目的 研究巨噬细胞刺激蛋白(MSP)及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症中的作用及相关机制.方法 单纯熏香烟法建立COPD大鼠模型;分离、培养正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞(AM),分别予不同剂量的MSP处理24h.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中MSP及AM上清液中IL-1β、TNF-α、IL-8和IL-10的浓度,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中酪氨酸受体激酶RON mRNA的表达情况,免疫组化法观察大鼠肺组织和离体培养的AM中RON蛋白的表达情况,比色法检测AM上清液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的水平.结果 与正常对照组比较,COPD组大鼠血清和BALF中MSP的浓度显著增高(P<0.01).COPD组大鼠肺组织RON mRNA表达较正常对照组明显上调(P<0.01),COPD组大鼠支气管上皮及AM中RON蛋白水平也较正常对照组显著增加(P<0.01).MSP呈剂量依赖性刺激正常和COPD大鼠AM细胞产生MDA增加并导致其SOD活性降低,亦能刺激两组大鼠AM释放炎症因子TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10呈剂量依赖性增加.在相同剂量MSP作用下,COPD组大鼠AM上清液中MDA及TNF-α、IL-8和IL-1β的浓度均高于正常对照组(P<0.01),而IL-10的浓度和SOD的活性则低于正常对照组(P<0.01);其中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度的增加幅度及SOD活性降低的幅度大于正常对照组(P<0.01),而MDA和IL-10升高的幅度则低于正常对照组(P<0.01).相关分析显示MSP和RON分别与BALF中细胞总数和AM计数呈正相关(P<0.01),与肺气肿指标呈一定的相关关系(P<0.01).结论 MSP及其受体RON参与了COPD的气道炎症调节,其机制可能是MSP/RON促进了AM释放炎症因子和诱导氧自由基产生增多.

  • 酪氨酸激酶受体 RON 在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达及意义

    作者:张文波;陈小菊;向小均;冷长燕

    目的:观察酪氨酸激酶受体 RON 在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者肺组织中的表达及分布,以探讨 RON 在人类 COPD 发病机制中的作用。方法:收集2013年5月至2013年12月在川北医学院附属医院心胸外科因肺癌进行手术治疗的患者,将其分为对照组(25例)和 COPD 组(20例),于手术切除标本中选取距肺癌病灶5 cm 以上的新鲜肺组织。采用免疫组化方法观察两组患者肺内 RON 蛋白的表达和分布情况。结果:COPD 组患者肺组织中肺泡区与支气管区 RON 蛋白的表达较对照组均明显增强(P <0.05),而且 COPD 组患者支气管区的 RON 蛋白表达量多于肺泡区(P <0.01)结论:COPD 患者肺组织中 RON 的合成与表达增强,其表达量与患者气流受限严重程度相关。

  • MSP影响非小细胞肺癌PC14细胞周期和上皮间质转化的研究

    作者:施雪旎;魏诗航;彭旭;刘艳;何学令;尹海林

    目的 研究巨噬细胞刺激蛋白(MSP)在无巨噬细胞刺激蛋白受体(RON)的情况下对非小细胞肺癌PC14细胞周期的影响,并分析其对PC14上皮间质转化(EMT)的影响.方法 取MSP阴性、RON阴性的PC14细胞系,稳定表达MSP的细胞系PC14-Mst1-pEGFP-N1和稳定表达荧光蛋白的空载质粒细胞系PC14-pEGFP-N1,流式细胞术检测各细胞系细胞周期的影响;透射电镜观察在细胞增殖期间细胞之间的连接间隙;逆转录(RT)-PCR和Western blot分别检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin) mRNA、蛋白表达水平.结果 流式细胞术结果显示与PC14、PC14-pEGFP-N1相比,PC14-Mst1-pEGFP-N1细胞G1/G0期数量增多,S期与G2/M期减少;透射电镜发现PC14-Mst1-pEGFP-N1细胞之间的细胞连接较紧密,细胞之间空隙距离缩小;RT-PCR和Western blot检测结果显示,与PC14细胞相比,PC14-Mst1-pEGFP N1细胞E cadherin的mRNA和蛋白表达水平升高,而Vimentin的mRNA、蛋白表达水平降低.结论 MSP在RON阳性的情况下,可使G1期肺癌细胞增多、分裂相减少,抑制EMT.

  • Msp对人非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的实验研究

    作者:刘霞;魏诗航;施雪旎;左忆楠;何学令;尹海林

    目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein,Msp)对人非小细胞肺癌细胞株PC14增殖、迁移和侵袭能力影响的研究.方法 构建Msp编码基因Mst1真核表达载体,将Mst1导人Msp(一)和RON(-)人非小细胞肺癌细胞株PC14,并用G418筛选出稳定表达的细胞株.通过RT-PCR方法检测已转染Ms1载体PC14细胞中Mst1的表达,用Western blot检测Msp在PC14、PC14-Mst1-pEGFP-N1、PC14-pEGFP-N1中的表达水平,同时检测RON在PC14和RON(+)细胞SKBR-3中的表达情况.通过计算RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞)和SKBR-3细胞在各转染组细胞培养上清液的刺激下穿过Transwell微孔膜的细胞数来评价Msp的生物学活性.利用MTT法检测Msp对PC14细胞增殖力的影响,采用Transwell小室和基质胶侵袭实验观察Msp对PC14细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 转染Mst1基因后,形成PC14-Mst1-pEGFP-N1,稳定表达Mst1mRNA及蛋白,其本身的增殖能力被明显抑制,迁移能力和侵袭能力均较PC14和PC14-pEGFP-N1降低.它还通过旁分泌的方式对RON(+)阳性的癌细胞RAW264.7和SKBR-3的迁移起促进作用.结论 Msp表达可降低人非小细胞肺癌细胞PC14的增殖、迁移和侵袭能力,却对RON(+)阳性的癌细胞迁移通过旁分泌的方式有促进作用.

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