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刺槐素对小鼠Th17细胞的分化功能的影响及其机制的初步探讨
目的 建立小鼠Th17细胞的体外诱导及培养方法并探索刺槐素(Acacetin)对Th17细胞的分化、功能的影响及其机制的初步探索.方法 分离、纯化BABL/C小鼠脾脏CD4+ CD62L+ T细胞,用转化生长因子-β、IL-6、IL-23等促进CD4+ CD62L+ T细胞向Th17细胞分化.培养的Th17细胞分为五组:正常组、模型对照组、Acacetin 1 μM组、Acacetin 10 μM组、Acacetin 30 μM组.流式细胞术检测Th17细胞的比例,酶联免疫吸附试验检测IL-17A的表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-17A mRNA及ROR-γt mRNA的表达.结果 该培养方法可使Th17细胞的比例明显升高(P<0.01).与模型对照组相比,Acacetin 1 μM组、Acacetin 10 μM组、Acacetin 30 μM组的Th17细胞的比例呈剂量依赖性降低(P值均<0.05).IL-17A蛋白的表达也呈剂量依赖性降低(P值均<0.05),IL-17A mRNA和ROR-γt mRNA的表达与模型对照组比较明显降低(P<0.05),以Acacetin(30 μM)组明显(P<0.01).结论 Acacetin在体外可以抑制小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞向Th17细胞的分化,并抑制IL-17A mRNA和IL-17A蛋白的表达,其机制可能与抑制细胞内孤儿受体ROR-γt的表达有关.
关键词: 刺槐素 CD4+ CD62L+ T细胞 诱导 白介素17