首页 > 文献资料
-
腹膜透析患者血清CHI3L1、FABP4水平和容量超负荷及蛋白质能量消耗的相关性研究
目的 探讨腹膜透析患者血清CHI3L1、FABP4、容量超负荷及蛋白质能量消耗的相关性.方法 本研究纳入160例临床状况稳定、在北京大学第三医院腹膜透析中心规律随访的腹膜透析患者.通过ELISA方法测定血清CHI3L1及FABP4浓度.根据多频生物电阻抗原理测定患者体成分,以水负荷(overdydration,OH)值来评估腹膜透析患者的容量负荷状态,OH值≥2L为容量超负荷,OH值＜2L为容量正常.纳入分析的生化指标包括血清白蛋白、尿毒氮、血肌酐、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇等.根据蛋白质能量消耗(protein energy wasting,PEW)诊断标准,将入组腹膜透析患者分为蛋白质能量消耗组(PEW组)和非蛋白质能量消耗组(非PEW组). 结果 腹膜透析患者血清CHI3L1和FABP4水平呈正相关(r=0.273,P=0.001).血清CHI3L1水平与容量超负荷呈负相关(r=-0.191,P=0.020),与肌肉重量呈负相关(r=0.443,P=0.000).血清FABP4水平与容量超负荷呈负相关(r=-0.172,P=0.040),与肌肉重量呈负相关(r=-0.188,P=0.025).与容量正常组相比,容量超负荷组的血清CHI3L1水平更低(289.6±117.9ng/ml比335.3±119.3ng/ml,t=2.349,P=0.020),FABP4水平也更低[152.0 (131.6,194.6) ng/ml比170.0(132.0,374.9) ng/ml,z=-2.051,P=0.040].容量超负荷患者的PEW发生率更高(61.7％比42.3％,x2=5.756,P=0.013),但是PEW组和非PEW组的CHI3L1、FABP4水平无显著性差异.Logistic回归分析提示PEW的独立危险因素是容量负荷(OR=2.744,95％CI 1.190～6.327,P=0.018)、血清白蛋白(OR=0.837,95％ CI 0.734～0.955,P=0.008)和肌肉重量(OR=0.936,95％ CI0.891～0.982,P=0.007). 结论 腹膜透析患者的血清CHI3L1、FABP4水平显著升高,首次发现两者呈正相关且均与容量超负荷呈负相关,并与肌肉量负相关;PEW发生的独立危险因素是低白蛋白血症、低肌肉量及容量超负荷,而与CHI3L1、FABP4水平无关.
-
去除脂肪型脂肪酸结合蛋白4阳性干细胞可影响肺部无纤毛(clara)细胞的增殖与自我更新
背景:近年来关于脂肪型脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)的研究已经很多,但肺中FABP4的表达情况与功能仍不明确.目的:探究FABP4在肺中的表达情况和功能.方法:利用FABP4 Cre;Rosa26-tdTomato小鼠示踪红色荧光蛋白表达以及免疫荧光染色共定位系统性地研究了FABP4在肺中的表达情况,并构建FABP4 Cre;iDTR转基因小鼠通过注射白喉毒素特异性去除肺部表达FABP4的细胞,初步探究FABP4在肺中的功能.结果与结论:FABP4能标记成年小鼠肺部的巨噬细胞、无纤毛(clara)细胞、Ⅱ型肺泡细胞、PDGFRα和vimentin阳性间质细胞,但不能标记平滑肌细胞和纤毛(ciliated)细胞.另外,当去除肺部表达FABP4阳性细胞时会出现小鼠无纤毛(clara)细胞及纤毛(ciliated)细胞比例减少的表型,推测可能是去除了FABP4阳性干细胞特性细胞后影响了肺部无纤毛(clara)细胞的增殖与自我更新.该研究比较全面地揭示了FABP4在小鼠肺中的表达情况,并初步探究了FABP4在肺中的作用,为肺的免疫反应及稳态维持等相关研究奠定了一定的基础,并可能成为肺部疾病治疗的潜在靶点.
-
含人FABP4基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及鉴定
目的 构建含有人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)基因启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-Ba.ic-FABP4-promoter,为脂类代谢相关药物研究提供基础.方法 根据已知人的FABP4基因启动子序列设计引物,以人DNA为模板,用PCR法扩增出人FABP4基因启动子的DNA大片段.经过限制性内切酶KpnI和XhoI双酶切后插入到pGL3-Basic载体中;测序鉴定;然后将这些重组质粒瞬时转染到K293细胞中,并在24h后检测其荧光素酶活性.结果 构建的含荧光素酶基因的质粒,经酶切及测序鉴定结果显示FABP4启动子插入的位置和序列正确.转染细胞后检测其荧光显示:重组pGL3质粒转录活性较pGL3-Basic质粒明显增强(P＜ 0.001).结论 成功构建了pGL3-Basic-FABP4-promoter质粒,为进一步研究FABP4基因的表达调控提供了工具和基础.
-
血清高迁移率族蛋白B1、可溶性CD40L、脂肪型脂肪酸结合蛋白和髓过氧化物酶在重度子痫前期患者中的表达及意义
目的 探讨血清高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)、可溶性CD40L (sCD40L)、脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)、髓过氧化物酶(MPO)在重度子痫前期患者中的表达及意义,为临床诊断和病情评估提供参考依据.方法 2016年1-12月,选择67例重度子痫前期患者,其中早发型组28例和晚发型组39例以及同期正常妊娠者60例作为对照组.采用酶联免疫吸附法检测血清HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO的表达水平.结果 重度子痫前期组患者血清HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO水平为(76.23±21.59) mmol/L、(6.37±2.23) ng/L、(158.61±36.68)μg/L、(15.69±1.28) ng/L,而对照组为(26.39±6.38) mmol/L、(3.25±1.26) ng/L、(89.76±11.39) μg/L、(11.29±0.62) ng/L,两组比较差异有统计学意义(均P＜0.05).早发型组血清HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO均高于晚发型组,两组比较差异有统计学意义(均P＜0.05).四项指标联合检测的ROC曲线下面积为0.859,明显高于HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO各个指标单独检测,差异有统汁学意义(Z=7.861,8.061,8.672,7.541,均P＜0.001).Pearson积差相关性显示,重度子痫前期患者中HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO表达均呈显著相关性,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 血清HMGB1、sCD40L、FABP4和MPO的表达与重度子痫前期发生、发展密切相关,可作为血清标志物用于重度子痫前期的诊断和病情评估.
-
左归丸与右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏PPARγ、FABP4表达的影响
目的 观察左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏PPARγ、FABP4基因与蛋白表达的影响,并探讨补肾法对绝经后妇女脂代谢紊乱的改善.方法 将90只SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、补佳乐组、左归丸组、右归丸组、共同药组、滋阴药组、补阳药组.除假手术、空白组外均进行双侧卵巢切除.经12周治疗分别以Q-PCR法、Western blot法检测PPARγ、FABP4在肾脏中基因和蛋白的表达.结果 与空白组相比,除假手术组外,PPARγ、FABP4 mRNA及蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,各用药组PPARγ、FABP4 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.01);与补佳乐组比较,各用药组PPARγ、FABP4表达高,其中左归丸组表达较低.结论 左、右归丸及其拆方可以明显影响肾脏中脂代谢相关指标,其中以左归丸改变为显著.
-
同型半胱氨酸对FABP4启动子活性的影响
目的 通过克隆脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子,确定其活性核心区和功能片段,分析心血管疾病独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)对FABP4启动子活性的影响.方法 应用生物信息学预测FABP4基因启动子区顺式转录作用元件和反式作用因子,以pGL3-Basic为载体,采用基因重组法构建启动子截取片段,转染HEK-293A细胞,观察不同截取片段的荧光素酶活性变化,确定活性强的片段.进一步将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞,观察不同浓度Hcy和DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)对FABP4基因启动子活性的影响.结果 不同长度截取片段转染HEK-293A细胞后检测荧光素酶活性结果显示,与pGL3对照组比较,-2000/-1片段转录活性强.将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞并用不同浓度Hcy干预后,与0μmol/L Hcy组比较,100和200μmol/L Hcy组启动活性升高;与100μmol/L Hcy组比较,在100μmol/L Hcy基础上用AZC干预后,FABP4基因启动活性升高(P<0.05).结论 成功克隆FABP4启动子的4个片段,且确定FABP4基因核心启动子位于-2000/-1片段;Hcy可以促进FABP4基因核心启动子片段活性,补充AZC后可以进一步促进Hcy引起的FABP4启动子活性升高.
-
脂肪酸结合蛋白4 DNA甲基化在L-NAME干预胎盘滋养细胞脂代谢异常中的作用
目的 观察并分析一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对滋养细胞脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子区DNA甲基化及脂质代谢异常的影响.方法 体外培养人胎盘滋养细胞(HTR-8)并用100μmol/L-NAME干预48 h后检测胎盘滋养细胞脂质含量;qRT-PCR和Western blot检测胎盘滋养细胞中DNA甲基转移酶1(DNMT1)、FABP4 mRNA和蛋白表达改变;巢式甲基化特异性PCR(NT-MSP)检测胎盘滋养细胞中FABP4启动子区DNA甲基化的程度改变.结果 L-NAME干预滋养细胞后脂质含量明显增多,且细胞内FABP4 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05),而FABP4基因启动子区甲基化程度以及DNMT1的表达水平显著减低.结论 FABP4启动子区低DNA甲基化可能参与了L-NAME诱导的胎盘滋养细胞脂代谢异常的调控过程.
