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  • 脱细胞神经基质材料在周围神经修复中的研究进展

    作者:吴昊;敖强

    脱细胞神经基质是天然的神经支架结构,即采用适当方法去除同种异体(或异种)神经中的细胞及髓鞘成分,保留各层神经膜性结构支架。脱细胞基质构建的人工神经具有以下特性:可接纳神经轴突长入,对轴突再生起机械引导作用,残留部分生物活性因子。各种物理方法尽管取得一定的效果,但均无法清除细胞和髓鞘崩解产物,也即无法根本上降低移植物的抗原性,从而制约了这些方法的应用。应用三硝基甲苯X -100和脱氧胆酸钠溶液脱细胞较为彻底。既往研究表明,脱细胞神经进行宿主再细胞化后进行异体神经移植修复大鼠周围神经较短缺损,效果与不进行宿主再细胞化的脱细胞神经无显著性差异。在修复较短缺损(<3 cm)时,可能再细胞化意义不大,修复较长缺损(>3 cm)时,再细胞化可能会弥补宿主细胞迁移能力的不足。建立标准化、可普遍接受的动物实验研究模式非常必要。选择大动物为实验对象,力求尽可能接近人体生理功能;建立对损伤和修复效果的评估标准,获得大量有效、可靠的实验数据,将使实验研究成果更具实际意义和临床应用价值。

  • 以脱细胞犬动脉为基质的血管支架体外再细胞化

    作者:涂秋芬;张怡;吴江;葛冬霞;李艳;陈槐卿

    目的 对已成功制备的以脱细胞犬动脉为基质的血管支架进行体外再细胞化研究.方法 多聚环氧化合物家族的乙二醇缩水甘油醚(ethylene glycol diglycidyl ether,EX-810)、去离子水和超声共同作用于犬主动脉,制备血管支架,并在体外对其进行有效的再细胞化,包括人脐动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)的种植,人脐静脉内皮细胞(endothelial cell,EC)的种植,以及两种细胞的复合种植.结果 本文提出的制备血管支架适合SMC和EC的生长,以合适的接种密度进行再细胞化即可获得致密的细胞层;提高细胞的种植密度可以加速支架的再细胞化进程.SMC和EC复合种植模型中,高密度接种的EC能够在不同密度的SMC上生长,形成较为致密的EC单层;但共培养的EC的形态和覆盖率受SMC接种密度的影响.结论 在脱细胞犬动脉上成功实现EC和SMC的单独种植和联合种植.

  • 肾脱细胞支架与再细胞化技术的研究进展

    作者:耿光瑞;李清刚;陈香美

    肾脱细胞支架是生物人工肾重要的材料支撑,理想的肾脱细胞支架应具备血管网络和独特的组织特异性结构,既有与天然组织相同的机械强度,又能提供微观和宏观的组织框架结构,利于细胞增殖分化,终完成工程化的器官构建.本文就肾脱细胞支架的制作方法及质量评价、脱细胞支架再细胞化、肾生物打印技术、未来发展潜力及面临的挑战等做一综述,为未来实践提供参考.

  • 脱细胞肝脏支架制备及再细胞化:生物人工肝离我们还有多远?

    作者:苏文君;张蕾

    背景:临床上已展开了大量生物人工肝脏的相关研究,其中肝脏脱细胞支架是已知有前景的人工肝脏支架材料.目的:对现阶段3D肝脏脱细胞支架的制备、鉴定、应用等研究现状进行总结,并展望其未来在临床上的发展方向.方法:检索 PubMed 数据库、中国知网数据库(CNKI)2001年1月至2016年11月期间有关3D肝脏脱细胞支架的相关文献.中文检索词为脱细胞支架,种子细胞,再细胞化,动物实验;英文检索词为decellularized liver scaffolds,recellularization,bioengineered liver.共64篇文献纳入分析并进行引用及讨论.结果与结论:采用化学方法、物理方法或酶消化法将细胞从肝脏组织中移除,保留完整的细胞外基质三维结构,然后对该支架进行再细胞化,可制得生物人工肝.研究显示将生物人工肝移植入动物体内,可短时间代偿肝脏功能,在未来,将这类生物人工肝真正应用于临床仍需要面临巨大挑战.

  • 基于脱细胞基质的心脏全器官再造研究进展

    作者:陈威震;林秋霞;王常勇

    心脏移植是终末期心脏病患者唯一有效且经济的治疗手段,然而,却面临着供体严重不足及移植后免疫排斥等问题.近年来,基于心脏全器官脱细胞技术进行心脏再造的研究为心脏移植供体来源提供了新的出路,有望解决这些问题.我们对基于脱细胞基质的心脏全器官再造研究进展进行了综述.

  • 移植再细胞化的猪股动脉在犬体内的抗钙化作用

    作者:于珺;李永顺;黄长荣

    血管移植术是解决动脉严重狭窄等病变的主要方法之一,组织工程血管能克服现有人工血管的不足,但是否如此尚待验证,为此我们进行组织工程血管的体内研究.

  • 去细胞组织工程心脏瓣膜再细胞化的研究进展

    作者:白鹏;乔韡华;张楠;刘春耕;史嘉玮;董念国

    心脏瓣膜疾病已经成为严重威胁人类健康的疾病之一.瓣膜置换手术作为治疗心脏瓣膜疾病的重要手段已在临床上广泛应用多年,据估计每年有超过20万患者接受主动脉瓣置换手术[1-2] .目前临床上所用人工瓣膜均存在明显缺陷,机械瓣置换者需要终身抗凝治疗,具有出血栓塞等风险[3];而生物瓣耐久性差,因远期存在钙化、衰败等变化,平均使用周期仅约10 ~ 15 年[4-5] .近些年研究较多的组织工程瓣膜,有望解决目前瓣膜替代物存在的问题,使植入瓣膜具有自我修复、生长的能力,这对于一些儿童患者更显得尤为重要.

  • 再细胞化牛心包纤维支架试片体内移植:1年的动物实验研究

    作者:龙小毛;龚光甫;胡建国;林辉;李香伟

    目的 进一步观察移植后内皮细胞(EC)抗切应力和抗钙化能力以及肌成纤维细胞迁移和自身修复能力.方法 新鲜牛心包片经脱细胞、鞣制、改性后备用;A、B组试片上依序种植宿主肌成纤维细胞和EC,C组试片上不种植细胞,随后将3组试片分别移植于猪的腹主动脉壁上;2个月后对A组试片,12个月后对B、C组试片进行厚度、钙含量、扫描电镜及组织学的检测.结果 A、B组试片钙含量显著低于C组(P<0.05),但显著高于新鲜牛心包(P<0.05);A、B组试片钙含量差异无显著性(P>0.05);A、B组试片显著厚于C组试片(P<0.05).A、B组试片的厚度差异无显著性(P>0.05);B组试片80%~90%的表面覆盖EC,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的3/4;C组试片表面无细胞,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的1/4~1/3,大部分胶原纤维间隙消失.结论 人工EC化使生物材料抗钙化能力增强;种植肌成纤维细胞使生物材料具有自身修复能力.但增厚的瓣叶是否影响其功能,尚有待进一步研究.

  • 异丙肾上腺素在去细胞化肝脏再细胞化过程中的作用研究

    作者:温旭东;宦宏波;吴黎雳;张亮;杨大鹏;夏锋

    目的 通过制备去细胞化肝脏生物支架,研究自主神经递质对再细胞化过程的影响.方法 使用全器官灌注法制备C57小鼠去细胞化肝脏生物支架,行HE和Massion染色鉴定并检测DNA残留量;RT-PCR和免疫荧光化学检测再细胞化肝脏中种子细胞(L02细胞株)肾上腺素能受体及亚型表达情况;检测平面以及生物支架内异丙肾上腺素对种子细胞增殖的作用,以及对再细胞化肝脏白蛋白分泌和尿素合成水平的影响.结果 成功制备去细胞化肝脏生物支架,L02细胞株表达肾上腺素能受体,并且β2受体亚型表达相对较高;异丙肾上腺素显著促进平面及再细胞化肝脏内L02细胞株增殖,并增强再细胞化肝脏分泌白蛋白和尿素.结论 异丙肾上腺素可促进去细胞化肝脏生物支架再细胞化进程.

  • 有活性细胞的生物瓣的构建

    作者:吴向阳;朱洁;刘迎龙;曹学文

    理想的人工心脏瓣膜必须以瓣膜内具有活的有正常功能的细胞为基础;目前临床应用的经液氮深低温保存的同种瓣虽有活性细胞,但经移植前多种因素的影响后细胞数量、活性及功能会受到不同程度的影响,这种瓣膜被植入受体体内后大多数细胞会在短期内自溶或凋亡,失去重塑细胞外基质的能力;残留的活性细胞会引起受体的体液及细胞免疫;细胞损伤或死亡后所释放的蛋白酶会引起瓣膜基质的降解,致耐久性下降;无活性细胞或细胞残核则成为钙化的中心而引起瓣膜钙化.无细胞的天然瓣膜基质经受体细胞再细胞化后具备活性细胞和一定的细胞功能两个条件,可望有效的解决生物瓣的耐久性,构建出具有生长、修复、塑型潜能的人工心脏瓣膜.

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