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一种新型HIV-1 DNA检测试剂的临床应用评价
目的 对一种新型HIV-1 DNA检测试剂的临床应用性能进行评价.方法 本实验选择抗体确证实验确诊的HIV-1感染人群、未感染的正常人群血样,及弱阳性样本、不确定样本、特异性样本等比较考核试剂的检测结果与HIV-1感染状态结果(参考《全国艾滋病检测技术规范》2015版)的一致性,验证考核试剂在临床检测中的准确性;同时选择已上市的RNA定量检测试剂盒作为对比试剂进行平行检测,评价考核试剂与HIV RNA定量检测试剂检测结果的差异.结果 本次补充实验考核试剂检测全血样本95例,结果表明,以HIV-1感染状态为相对标准,考核试剂检测的阳性符合率为100％(95％CI:93.94％ ～100％),阴性符合率为100％(95％CI:90.26％ ～100％),总符合率为100％(95％CI:96.19％ ～100％),所得Kappa值为1(95％CI:1.00～1.00),考核试剂对于弱阳性、早期感染不确定标本均可检出,能有效区分抗原抗体试剂检测假阳性标本,特异性样本无假阳性结果.结论 考核试剂检测结果与HIV-1感染状态一致,可以认为与现在我国所采用的HIV-1检测试剂等效,能有效鉴别出感染早期的不确定标本.与RNA定量检测试剂相比,能有效检测出病毒储存库中HIV-1 DNA.
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福尔马林固定的猴淋巴组织中HIV-1DNA的扩增
本文尝试从福尔马林固定的猴淋巴组织提取HIV-1CNA,并用PCR方法进行扩增和对扩增产物HIV-1 DNA进行检测.结果认为,采取从福马林固定标本中提取PNA的方法是可行的.在提取DNA中,采用过量TE(pH9.0)长时间浸泡标本,并适当提高蛋白酶K(1000μq/ml)和SDS(2%～3%)的浓度,可有助于DNA的提取;同时适当提高提取液的pH值(pH 9.0),对DNA具有一定的保护作用.
