哈族食管鳞癌中PLCE1基因启动子甲基化水平的实验研究

目的 探讨PLCE1基因启动子甲基化与食管鳞癌发生发展的关系.方法 分别用免疫组化(IHC)和甲基化特异PCR(MSP)方法检测51例新疆哈萨克族食管鳞癌及相应癌旁正常组织中PLCE1蛋白表达水平及其启动子甲基化水平,分析其与病理资料相关性;分别用Western blot及MSP检测食管鳞癌细胞在5-aza-dC作用前后PLCE1蛋白表达及启动子甲基化变化情况.结果 新疆哈萨克族食管鳞癌组织中PLCE1蛋白表达高于癌旁正常组织,而其基因甲基化水平则较低(P<0.001),且蛋白高表达的癌组织中其甲基化水平低于蛋白低表达的癌组织(P=0.028),PLCE1甲基化水平与其蛋白表达水平具有明显的相关性(χ2=4.791,P=0.028),并与患者的淋巴结及远处转移(χ2=7.242,P=0.027)和TNM分期(χ2=7.883,P=0.019)明显相关;在食管鳞癌细胞系中PLCE1甲基化程度同样与蛋白表达水平成反比,5-aza-dC处理可抑制TE-1和Kyse150的PLCE1甲基化,提高其蛋白表达.结论 食管鳞癌组织中PLCE1甲基化低与其蛋白表达高、淋巴结和远处转移及TNM分期相关,5-aza-dC处理可抑制PLCE1甲基化程度,增高其蛋白表达.

PLCE1与肺腺癌A549细胞凋亡的相关性及机制研究

目的 探讨磷脂酶Cε1 (PLCE1)表达与肺腺癌A549细胞凋亡的关系及作用机制.方法 将肺腺癌细胞株A549分为空白组(仅给予正常培养液)、实验A组(正常培养液+5mmol/L PLCE1抑制荆U73122共培养)、实验B组(正常培养液+ 10mmol/L PLCE1抑制荆U73122共培养),观察各组,采用流式细胞仪技术检测培养12h、24h及48h时刻A549细胞的凋亡率,采用RT-PCR及Western-blot技术检测各组共培养48h后的PLCE1、p53、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达水平.结果 在培养12h、24h、48h后,实验A组、实验B组的肺腺癌A549细胞凋亡率显著高于空白组(P＜0.05);实验B组的肺腺癌A549细胞凋亡率显著高于实验A组(P＜0.05);在培养48h后,实验A组、实验B组的p53、Bax mRNA及蛋白水平显著高于空白组(P＜0.05),实验A组、实验B组的Bcl-2、PLCE1 mRNA及蛋白水平显著低于空白组(P＜0.05);在培养48h后,实验B组的p53、Bαx mRNA及蛋白水平显著高于实验A组(P＜0.05),实验B组的Bcl-2、PLCE1 mR-NA水平显著低于实验A组(P＜0.05).结论 通过抑制肺腺癌A549细胞PLCE1的表达,进而抑制上调细胞中p53、Bax表达,下调Bcl-2表达,从而达到促进肺腺癌A549细胞凋亡的目的.

胃腺癌中磷脂酶Cε1和基质金属蛋白酶-9表达及相关性

目的 检测胃腺癌中磷脂酶Cε(PLCE)1和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达特征,分析其意义.方法 经病理医师确诊为胃腺癌患者57例为观察组,正常胃黏膜组织18例为对照组,均留取完整的临床资料及术后蜡块组织.采用免疫组化方法检测两组中PLCE1和MMP-9的表达.结果 观察组PLCE1和MMP-9阳性率明显高于对照组,观察组中PLCE1和MMP-9表达与肿瘤脉管累犯和淋巴结转移密切相关,PLCE1表达与肿瘤细胞增殖有关.二者均与肿瘤性别、年龄无明显相关性.相关分析显示观察组中PLCE1和MMP-9无明显相关性.结论 胃腺癌中PLCE1和MMP-9高表达对肿瘤形成和进展有一定促进作用,二者可能通过各自途径起作用.

原发性肝细胞癌组织中磷脂酶CE1和基质金属蛋白酶-14的表达及意义

目的 检测原发性肝细胞癌组织中磷脂酶Cε(PLCE)1和基质金属蛋白酶(MMP)-14的表达,关注其相关性.方法 以61例原发性肝细胞癌的临床资料及术后新鲜组织为观察组,以18例距肿物边缘>5 cm的正常肝组织新鲜组织为对照组,应用流式细胞术检测两组PLCE1和MMP-14表达.结果 两组中PLCE1和MMP-14表达量差异有统计学意义(P<0.001),观察组PLCE1和MMP-14表达量与病变脉管累犯和肿瘤大径密切相关,PLCE1表达与肿瘤增殖指数和炎细胞浸润程度密切相关.相关分析显示观察组PLCE1和MMP-14表达呈正相关.结论 PLCE1和MMP-14在原发性肝细胞癌术后组织中表达明显升高,且具有协同正向作用,对肿瘤形成和发展有一定调节作用.

鼻用糖皮质激素对变应性鼻炎鼻黏膜中PLCε1表达的影响及意义

目的 通过检测磷脂酶Cε1(PLCε1)在变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜中的表达水平,探讨鼻用糖皮质激素治疗AR的作用机制及意义.方法 选取2013年7月至2014年12月AR患者55例,其中25例术前2周使用鼻用糖皮质激素治疗(鼻用激素组),30例患者鼻腔局部及全身未使用激素治疗(对照组),采用免疫组织化学法对两组患者鼻黏膜PLCε1的表达进行检测,分析鼻腔局部用糖皮质激素对PLCε1表达的影响.结果 AR患者鼻黏膜组织重塑,主要表现为黏膜纤毛上皮损伤(纤毛脱落和部分上皮细胞剥脱);细胞外基质沉积,黏膜下腺体增生、新生血管等改变.对照组中PLCε1强阳性8例,阳性17例,弱阳性3例,阴性2例,PLCε1高表达率为83.3％ (25/30);鼻用激素组PLCε1强阳性2例,阳性4例,弱阳性10例,阴性9例,PLCε1高表达率为24.0％(6/25).鼻用激素组鼻黏膜PLCε1的阳性表达率较对照组明显降低,两组比较差异有统计学意义(x2=19.519,P＜0.01).结论 AR术前鼻腔局部应用糖皮质激素后鼻黏膜PLCε1表达明显下调,提示糖皮质激素抑制了PLCε1的表达,进而可能恢复AR的免疫平衡状态,达到治疗目的.

PLCE1调控p53诱导食管癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨磷脂酶Cε1( PLCE1)基因抑制食管癌细胞凋亡的作用机制。方法选用人食管癌细胞株OE33和CP-C作为研究对象。采用qRT-PCR、Western blot法分别检测转染PLCE1 siRNA前、后食管癌细胞OE33和CP-C中PLCE1、p53 mRNA和蛋白水平的表达；甲基化特异性PCR重亚硫酸盐法检测p53启动子区甲基化状态；流式细胞仪检测细胞凋亡。结果食管癌细胞株OE33和CP-C均高表达PLCE1,抑制PLCE1表达后食管癌细胞CP-C中p53表达上调并促进p53去甲基化,细胞凋亡明显增加。结论 PLCE1通过促进p53启动子区甲基化抑制p53的表达,从而抑制食管癌细胞凋亡。

磷脂酶Cε1蛋白在不同部位胃癌细胞中的表达

目的:观察磷脂酶Cε1(PLCE1)在不同部位胃癌组织中的表达,探讨PLCE1在不同部位胃癌组织中的表达情况及PLCE1与胃癌生物学特征的关系.方法:采用免疫组化sp法测定60例贲门部胃癌组织(贲门癌)、60例胃窦部胃癌(胃窦癌)组织和30例正常胃粘膜组织中PLCE1的表达情况.结果:PLCE1在贲门癌组织中阳性表达率为73.3％,高于在胃窦癌组织中的表达率51.7％,高于在正常胃粘膜组织的表达率16.7％；PLCE1在胃窦癌组织中的表达率高于正常胃粘膜组织中的表达率.贲门癌与胃窦癌组织PLCE1的表达与淋巴结转移、原发肿瘤侵润深度及分化程度均有关(P＜0.05),与性别、年龄均无关(P＞0.05).结论:PLCE1在贲门癌与胃窦癌的表达率不同,其表达率在不同病理分期中存在差异.

微小RNA-145调控磷脂酶Cε1抑制食管鳞癌的研究

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-145调控食管鳞癌(ESCC)细胞增殖与侵袭的分子机制.方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-145和磷脂酶Cε1(PLCE1)mRNA表达;Western blot检测PLCE1蛋白水平;Targetscan软件预测PLCE1是否为miR-145的靶基因;荧光素酶报告基因检测miR-145是否作用于PLCE1 mRNA的3’端非编码区域(3'UTR);噻唑蓝(MTI)和划痕实验检测细胞增殖和侵袭能力.结果 4种ESCC细胞miR-145相对表达量分别为0.63±0.06、0.72±0.05、0.55±0.05、0.79±0.04,均明显低于正常食管上皮细胞(P =0.000,P=0.001,P=0.000,P=0.003).ESCC组织中miR-145相对表达量为0.68±0.03,较正常组织降低31.9％(P=0.000).miR-145低表达与肿瘤浸润深度及TNM分期相关(x2=8.380,P=0.039;x2=6.810,P=0.033).Targetscan预测PLCE1是miR-145的靶基因;荧光素酶报告基因证实miR-145作用于PLCE1 mRNA的3'UTR.ESCC细胞中PLCE1相对表达量分别为1.69 ±0.04、1.46±0.06、1.31±0.06、1.60±0.08,均明显高于正常食管上皮细胞(P=0.000,P=0.000,P=0.004,P=0.001).ESCC组织中PLCE1相对表达量为1.85 ±0.04,为癌旁正常组织的1.85倍(P=0.000).PLCE1表达水平与miR-145表达水平负相关(r=-0.828,P=0.002).过表达miR-145抑制Eca109增殖(P =0.006),侵袭能力降低22.1％ (P =0.013);过表达PLCE1促进增殖(P =0.003),侵袭能力增强24.9％(P =0.029);而同时过表达miR-145与PLCE1则可抑制PLCE1的促增殖(P=0.003)和侵袭能力(P =0.001).结论 miR-145通过靶向调控PLCE1抑制ESCC细胞增殖和侵袭.

磷脂酶Cε1对鼻黏膜Th2细胞极化的促进作用研究

PLCE1基因突变与激素耐药性肾病综合征的关系

漫性肾小球硬化(diffuse mesangial sclerosis,DMS);而错义突变可导致局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS).但其确切发病情况及机制目前尚不清楚,本文就PLCE1基因及其编码蛋白与激素耐药性肾病综合征之间的关系作一简要综述.

磷脂酶Cε1在胃癌组织中的表达及与胃癌患者预后的关系

目的：探讨磷脂酶Cε1（PLCE1）在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集浙江省人民医院2005年1月至2007年12月间125例胃癌手术标本及其癌旁胃黏膜组织，应用免疫组织化学染色方法检测PLCE1在胃癌及癌旁组织中的表达，并通过实时荧光定量PCR检测其中41例胃癌及其癌旁组织中PLCE1 mRNA表达水平。分析PLCE1蛋白表达与胃癌临床病理特征及预后的关系。结果 PLCE1蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为53．6％（67/125）和24．0％（30/125），差异有统计学意义（P＜0．01）；在65．9％（27/41）的胃癌组织中PLCE1 mRNA表达水平较癌旁胃黏膜上调2倍以上。 PLCE1蛋白表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关（均P＜0．01）。 PLCE1阴性与阳性表达者5年总体生存率分别为54．0％和31．2％，差异有统计学意义（P＜0．01）；但多因素分析显示，PLCE1表达并不是影响胃癌患者预后的独立因素（P＞0．05）。结论 PLCE1在胃癌组织中高表达，且与胃癌的恶性生物学行为相关。

PLCE1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其与临床病理特征和患者预后的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测PLCE1在83例OSCC组织和20例正常口腔黏膜组织中的表达,并分析 PLCE1表达与OSCC临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox风险比例回归模型分析影响OSCC患者预后的独立因素.结果:PLCE1在OSCC组织与口腔正常黏膜组织中高表达率分别为53.01%和15.00%,差异有统计学意义(P=0.002).PLCE1的表达与患者年龄、性别、吸烟无相关性,而与肿瘤分化程度、T分期、临床分期、N分期有密切关系.单变量分析显示临床分期、PLCE1、T分期、N分期是影响OSCC预后的因素,双变量分析显示PLCE1是其独立预后因素.结论:PLCE1过表达与OSCC的发生、发展密切相关,可作为判断OSCC恶性程度和不良预后的参考指标.