首页 > 文献资料
-
脱氧胞苷激酶表达与慢性淋巴细胞白血病氟达拉滨耐药的相关性研究
为了探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者白血病细胞内脱氧胞苷激酶(dCK)的基因表达水平与氟达拉滨(flud)耐药的相关性,采用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测30例CLL患者骨髓或外周血标本的dCK mRNA表达,比较Flud敏感与耐药患者dCK表达水平的差异.结果表明:敏感组dCK表达水平高于耐药组(p=0.001),dCK的表达与性别、年龄、Binet分期、IgVH基因突变、CD38、ZAP-70和ps3基因突变均无相关性(p＞0.05).结论:dCK表达水平低或缺陷的患者可能对Flud药物有耐药性,而dCK表达的预后意义有待进一步探讨.
-
丙戊酸联合伏立诺他增强阿糖胞苷对人Dami白血病细胞株杀伤作用的机制研究
目的 探讨丙戊酸(VPA)联合伏立诺他(SAHA)增强阿糖胞苷(Ara-c)对人Dami白血病细胞株的杀伤作用,并探讨其分子学机制.方法 设空白对照组、Ara-c组、VPA组、SAHA组、VPA+ Ara-c组、SAHA+ Ara-c组,VPA+ SAHA+Ara-c组,分别作用于对数生长期的Dami白血病细胞,MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;用PI法通过流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR方法检测转录因子GATA-1、胞苷脱氨酶(CDA)及脱氧胞苷激酶(DCK) mRNA水平的变化.结果 VPA和SAHA共同联合Ara-c用药组细胞生长抑制率明显高于VPA联合Ara-c组及SAHA联合Ara-c组,各组间相比,具有显著性差异.Dami细胞经过VPA和SAHA处理后均出现细胞周期阻滞现象,主要阻滞在G1期,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05);VPA和SAHA联合用药组G1期细胞所占比例高于SAHA组(P＜0.05),与VPA组差异无显著性(P＞0.05).VPA组、SAHA组、VPA和SAHA联合用药组GATA-1和CDA mRNA表达水平均低于对照组(P＜0.05),各组间差异无显著性(P＞0.05);VPA组DCK mRNA表达水平高对照组(P＜0.05)、SAHA组与对照组比较差异无显著性(P＞0.05)、VPA和SAHA联合用药组DCK mRNA表达水平高于VPA组和SAHA组(P＜0.05).结论 VPA联合SAHA可增强阿糖胞苷对Dami白血病细胞的杀伤作用,可能是通过增加DCK的表达,从而增加阿糖胞苷体内活性代谢产物所致.
关键词： 白血病 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 脱氧胞苷激酶 阿糖胞苷 -
急性白血病、恶性淋巴瘤患儿大剂量阿糖胞苷治疗的药代动力学及代谢关键酶基因表达研究
目的 探索大剂量阿糖胞苷(HD-AraC)治疗儿童恶性血液肿瘤的药代动力学,以及代谢关键酶基因表达与临床疗效的关系.方法 应用高效液相色谱法测定HD-AraC治疗时血液和脑脊液中药物浓度;采用RT-PCR法检测3种白血病细胞株和48例急性白血病(AL)患儿骨髓细胞中脱氧胞苷激酶(dCK)和胞苷脱氨酶(CDA)基因表达,通过分析不同类型AL患儿,以及初治和复发患儿dCK和CDA mRNA表达差异,探讨dCK和CDA mRNA表达与疗效的关系.结果 ①HD-AraC治疗时血浆药物浓度可达到常规剂量Ara-C的50倍,脑脊液中药物浓度达到血浆浓度的10%;②不同类型儿童AL,以及初治和复发患儿的dCK mRNA表达强度差异有统计学意义,与临床疗效明显相关;③体外实验发现经Ara-C不同剂量和时间作用后,白血病细胞株的dCK和CDA mRNA表达没有变化.结论 HD-AraC治疗可明显提高血浆和脑脊液中药物浓度,是治疗儿童AL的有效疗法.dCKmRNA表达强弱可能为儿童AL远期疗效的重要影响因素之一.
-
阿糖胞苷代谢酶与急性髓系白血病患者临床耐药关系的研究
阿糖胞苷(Ara-C)药理作用首先是在代谢酶的作用下转化成三磷酸阿糖胞苷(Ara-CTP),而人体内同时存在使得Ara-CTP分解的酶.为了明确代谢酶在AML耐药中所起的作用,我们特从酶基因的表达和蛋白活性两个角度对脱氧胞苷激酶(DCK,使Ara-C活化的限速酶)和胞苷脱氨酶(CDD,使Ara-C降解)在Ara-C耐药中所发挥的作用进行探讨.
-
dCK基因A9846G单核苷酸多态性与胰腺癌吉西他滨化疗预后的相关性
[目的]研究胰腺癌患者脱氧胞苷激酶(deoxyeytidine kinase,dCK) A9846G位点单核苷酸多态性(single nucleotidepolymorphism,SNP)分布情况,并探索其与吉西他滨化疗预后的关系.[方法]应用DNA直接测序法检测75例根治性切除的胰腺癌患者组织中dCK基因A9846G位点SNP序列,分析dCK基因SNP对胰腺癌患者吉西他滨化疗生存期的影响.[结果]75例胰腺癌患者dCK基因A9846G中野生型AA有14例、杂合型AG有38例,突变型GG有23例.dCK基因A9846G位点基因型与胰腺癌患者临床病理因素无相关性(P＞0.05).dCK基因A9846G位点AA基因型携带者较AG或GG基因型携带者对吉西他滨的化疗反应更敏感,患者总生存率和无病生存率更高(P＜0.05).[结论]可切除性胰腺癌患者dCK基因A9846G SNP与胰腺癌患者吉西他滨化疗预后有明显相关性,可能成为有效预判胰腺癌患者吉西他滨化疗预后的敏感指标.
-
脱氧胞苷激酶对HeLa细胞放化疗敏感性的影响
目的:研究脱氧胞苷激酶(DCK)对人官颈癌细胞HeLa药物敏感性与辐射敏感性的影响,为宫颈癌的基因治疗提供理论依据.方法:采用FuGENE 6转染HeLa细胞构建细胞模型,实验分为空白对照组、空载体阴性对照组及DCK基因沉默(siRNA)组,实时荧光定量PCR及Western blotting检测转染前后DCK mRNA及蛋白的表达变化,细胞计数法检测细胞的增殖情况,MTT法检测细胞对阿糖胞苷(AraC)的药物敏感性,克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性.结果:与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA转染HeLa细胞后DCK mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05)；3组细胞生长曲线无明显差异；siRNA组HeLa细胞对AraC药物的敏感性降低,辐射敏感性增高(P＜0.05).结论:抑制DCK基因表达可以降低宫颈癌细胞对药物的敏感性,增强辐射敏感性.
-
阿糖胞苷代谢酶的单核苷酸多态性与其临床疗效的关系
阿糖胞苷及其药理作用阿糖胞苷(Ara-C)为嘧啶抗代谢类药物,可抑制细胞DNA的合成,干扰细胞增殖.Ara-C进入细胞后,先在细胞内经脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,DCK)催化磷酸化,转变为有活性的Ara-C单磷酸(arabinoside-cytidine monophosphate,Ara-CMP),再转为Ara-C二磷酸(arabinoside- cytidine diphosphate,Ara-CDP)和Ara-C三磷酸(arabinoside-cytidine triphosphate,Ara-CTP)而起作用.
-
脱氧胞苷激酶与白血病耐药的关系
目的研究急性粒细胞白血病患者白血病细胞内脱氧胞苷激酶(DCK)的基因表达水平与阿糖胞苷(Ara-C)敏感性之间的关系.方法收集急性粒细胞白血病患者的骨髓标本,分离得到单个核细胞,采用RT-PCR技术半定量测定DCK mRNA表达水平,比较敏感与复发耐药患者DCK表达水平的差异.结果复发耐药患者DCK的表达水平要明显低于敏感患者(P<0.01).结论 DCK表达的降低可能与急性粒细胞白血病患者对Ara-C耐药相关,DCK 表达水平可作为临床评价白血病患者对 Ara-C 敏感性的一个指标,进而可以预测Ara-C 的药物疗效.
-
DCK基因多态性与阿糖胞苷治疗急性髓系白血病疗效的关系
目的 研究脱氧胞苷激酶(DCK)的单核苷酸多态性(SNP)及其对阿糖胞苷(Ara-C)治疗急性髓系白血病(AML)疗效的影响.方法 采用高温连接酶检测反应技术,检测126例接受Ara-C治疗的AML患者(AML组)和100名健康人(正常对照组)DCK基因7个SNP位点(SNP1～7)的基因型和等位基因分布频率,比较DCK不同基因型分布AML组患者的Ara-C治疗效果.结果 DCK基因SNP1(rs2306744)等位基因和SNP2(rs12648166)基因型分布频率,在正常对照组与AML组和Ara-C治疗无效组(n=35)之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05).在AML组,SNP1的CC型基因型和SNP2的多态性基因型(AG+GG型)以及SNP3(rs4694362)的野生型基因型,对Ara-C治疗表现出较好的临床反应.结论 DCK基因的SNP能作为潜在的Ara-C治疗AML患者预后的分子标志之一.
-
长期传代后HL-60细胞内脱氧胞苷激酶与阿糖胞苷耐药性的关系
目的 通过观察人早幼粒白血病细胞系(HL-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)经过长期传代后细胞内脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,dck) mRNA表达及其酶活性的变化规律,探讨dck与阿糖胞苷(Ara-C)疗效及耐药现象发生的相关性.方法 分别采用实时PCR方法和核素液闪法测定HL-60和HL-60/R细胞内dck的mRNA表达水平及其酶活性水平.通过体外培养传代,观察2种细胞株经长期传代(5、10、20、30、40、50代)后细胞内dck的mRNA表达及酶活性的变化规律.结果 传代初期结果显示,HL-60和HL-60/R两组细胞株之间的mRNA表达水平分别为0.37±0.03和0.17±0.03,活性值分别为0.069±0.006 nmol·min-1·mg-1 protein和0.019±0.007 nmol· min-1·mg-1 protein,HL-60的dck mRNA表达水平和酶活性均明显高于HL-60/R(P＜0.01).并且两组细胞株之间的显著性差异(P＜0.01)持续存在于各传代过程中.HL-60和HL-60/R两组各传代节点(10、20、30、40和50代)的dckmRNA表达水平与酶活性与本组第5代细胞相比,则无明显变化(P＞0.05).结论 HL-60及HL-60/R两组细胞株间的dck mRNA表达和酶活性在传代初期存在显著差异,且两组间的差异持续存在.但与各自的初期传代相比,长期传代后的dck mRNA表达和酶活性变化并不明显,提示dck仅与Ara-C的初期疗效明显相关,而与Ara-C耐药现象的发生可能无关.
关键词： 阿糖胞苷 人早幼粒白血病细胞系(HL-60) 脱氧胞苷激酶 基因表达 酶活性 -
急性白血病细胞内dCK和CDA含量与临床疗效的关系
目的了解急性白血病细胞内脱氧胞苷激酶(dCK)、胞苷脱氨酶(CDA)的含量与临床疗效的关系.方法应用核素闪烁计数仪,对7例ALL,24例AML化疗前细胞内dCK、CDA进行检测.结果 AML细胞内dCK、CDA活性均高于ALL(P＜0.05).AML完全缓解者dCK活性3倍于未缓解者(P＜0.001),CDA/dCK比值明显降低(P＜0.05).AML初发者dCK活性是复发者的2.5倍(P＜0.01).M3细胞内dCK活性高于其他髓系白血病细胞,其CDA/dCK比值显著降低(P＜0.01).细胞内CDA活性在50岁以上者明显升高(P＜0.05),男性患者细胞内dCK显著高于女性患者(P＜0.01).结论细胞内dCK活性高、CDA活性低,CDA/dCK比值小,临床对Ara-C疗效佳,故可作为预测对Ara-C是否敏感的一个监测指标.
-
急性白血病患儿脱氧胞苷激酶和胞苷脱氨酶基因表达
目的通过测定急性白血病(AL)患儿脱氧胞苷激酶(DCK)和胞苷脱氨酶 (CDA)基因的表达,探讨其与阿糖胞苷(Ara-C)耐药及临床疗效间的关系.方法应用RT-PCR方法检测32例AL患儿DCK和CDA基因mRNA表达水平,采用ANOVA比较初治与复发及不同亚型白血病患儿间DCK和CDA基因表达的差异.结果 ALL患儿DCK表达水平(1.914±0.127)明显高于AML患儿(0.838±0.093 P=0),初治患儿DCK基因表达水平(1.474±0.547)为复发患儿(0.778±0.059)的2倍.AL患儿CDA基因表达水平为0.518±0.107,初治与复发以及各亚型间无显著性差异(P＞0.05).初治患儿CDA/DCK比值(0.422±0.049)明显低于复发患者(0.640±0.031 P=0.001),经DA或HA方案治疗1、2疗程缓解的AML患儿CDA/DCK比值低于未缓解患儿(0.561±0.053 vs 0.728±0.066 P=0).结论 DCK基因表达水平、CDA/DCK比值可作为监测AL儿童对Ara-C治疗反应一个指标.
-
脱氧胞苷激酶及其对急性白血病治疗效果影响的研究进展
阿糖胞苷(Ara-C)是治疗急性白血病(AL)主要的药物之一,参与组成AL的各种联合化疗方案.脱氧胞苷激酶(DCK)是Ara-C体内代谢过程的限速酶.因此,DCK表达异常或功能异常,均可直接影响细胞内Ara-C的代谢速率,并终影响AL的治疗效果.笔者拟就DCK基因单核苷酸多肽性(SNP)、DCK基因mRNA水平和DCK蛋白磷酸化3方面对DCK结构和功能的影响,以及其与AL治疗效果的关系进行综述.
-
非小细胞肺癌吉西他滨药物耐药相关基因研究进展
随着药物基因组学、药物遗传学的发展,基因指导下个体化治疗成为提高非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)化疗疗效的有效途径之一.确定药物的相关预测性分子标志物从而指导临床治疗、提高疗效被广泛关注.吉西他滨是目前NSCLC常用化疗药物之一,本文主要阐述了近年来吉西他滨药物耐药相关基因在NSCLC个体化治疗方面的研究进展.
关键词： 肺肿瘤 吉西他滨 平衡型核苷转运载体1 核糖核苷酸还原酶亚基1 脱氧胞苷激酶
