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  • miR-99a-5p在MDS患者骨髓中的表达及功能分析

    作者:乐颖;张绪湃;熊艳秋;李虹颖;赵卫华;龙媛;罗军;程鹏;刘振芳

    目的:检测miR-99a-5p在骨髓增生异常综合症(MDS)患者中的表达,利用生物信息学预测其靶基因并进行功能分析,探讨miR-99a-5p在MDS的发生发展中可能的作用.方法:利用qRT-PCR技术检测miR-99a-5p在初治MDS患者骨髓中的表达量,分析其与MDS临床病理参数的相关性;运用靶基因在线预测软件Targetscan、Miranda和Microcosm预测其可能的靶基因,取预测结果的交集作为miR-99a-5p在MDS中的潜在靶基因.结果:与正常对照组相比,MDS患者骨髓中miR-99a-5p表达升高(P< 0.001).按IPSS的预后评分,将MDS患者分为相对低危组(包括低危险组和中危1组)和相对高危组(包括中危2组和高危组)发现,在相对低危组中miR-99a-5p的表达量是正常对照组的2.40倍(P<0.001),相对高危组中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.66倍(P<0.001),相对高危组中miR-99a-5p表达量是相对低危组的2.80倍(P<0.001);转白血病组(t-MDS)中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.35倍(P<0.001).相关分析显示,患者骨髓miR-99a-5p表达量与原始细胞比例呈显著正相关(P< 0.001);而与染色体核型、外周血血象无明显相关.利用靶基因在线预测软件预测miR-99a-5p的可能靶基因,并结合文献,得出ST5可能是miR-99a-5p在MDS中的潜在靶基因.结论:miR-99a-5p在MDS患者中表达明显上调,且随着危险度的增加其表达呈上升趋势,并可能通过负性调控靶基因ST5参与MDS的发病.

  • miR-99a-5p对人骨髓间充质干细胞分化能力的影响

    作者:徐慧;汪健;叶勖;明静;李素君;王祥;何彩霞;王兴兵

    目的:探讨microRNA-99a-5p (miR-99a-5p)对人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)分化能力的影响.方法:贴壁培养BM-MSC,用miR-99a-5p类似物或抑制物转染细胞,实时定量PCR检测转染效率.通过分化实验检测miR-99a-5p对BM-MSC成脂和成骨分化能力的影响.结果:与对照组相比,转染miR-99a-5p类似物能显著上调miR-99a-5p表达水平(P<0.001),反之转染miR-99a-5p抑制物则下调其表达水平(P <0.001).在成骨分化实验中,茜素红染色后镜下观察显示:过表达miR-99a-5p能促进成骨分化,下调miR-99a-5p的表达则抑制其成骨分化.分光光度计半定量检测也得到相同的结果.在成脂分化试验中,转染miR-99a-5p类似物或抑制物对BM-MSC成脂分化无明显影响.结论:过表达miR-99a-5p可促进BM-MSC成骨分化,但对其成脂分化无明显影响.

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