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  • 细胞保存液提高中枢神经系统白血病检出率的实验研究

    作者:麦秋穗;何均娴;覃洁莉;林榕;黄一可;刘松坚;郑少燕;黄茜;杨默;江千里

    目的:探讨细胞保存液能否延长白血病细胞的存活时间,提高细胞存活率,从而提高中枢神经系统白血病的检出率.方法:在有细胞保存液或无细胞保存液的脑脊液上清中,分别加入Kasumi白血病细胞株,在不同时间点比较2组细胞的存活情况和生物学特性改变,研究方法包括细胞沉渣甩片镜检、细胞计数法、台盼蓝拒染法、CCK-8法和流式细胞术等,并以荧光定量RT-PCR检测肿瘤融合基因AML-ETO的表达.结果:在不同的时间点(8和24 h),已添加细胞保存液的脑脊液中细胞的存活状态和分子生物学特征,明显优于普通脑脊液的保存效果.结论:细胞保存液能有效提高白血病细胞的存活时间、存活率,从而提高中枢神经系统白血病检出率.

  • 液基薄层细胞学检查中不同样本的细胞保存液配制探讨

    作者:刘汉忠;张平安

    目的 在不同临床细胞样本液基薄层细胞学(TCT)检查中,配制其相应的液基细胞保存液,达到佳检测效果,提高临床细胞学的诊断率.方法 配制液基细胞保存液①、②、③号,在不同的临床细胞学标本中[常规标本用①号保存液、对于血液多的标本再加用②号保存液(②+①号)、对于黏液多的另加用③号保存液(③+①号)]处理,观察作用效果及诊断成功率,并与常规直接涂片的制片质量及诊断成功率做对照,比较其优缺点及临床应用价值.结果 配制的3种细胞保存液用于细胞制片效果良好,诊断成功率高(99.3%);与常规涂片细胞学检查有显著性差异(P〈0.05 ).结论 ①、②、③号液基细胞保存液配制在不同的临床细胞学样本诊断中有较重要的意义,能够提高临床细胞学诊断成功率.

  • 3种不同抗凝剂对外周血培养的NK细胞功能影响

    作者:陈玲;吕小婷;徐涛;周忠海;姚仁南

    目的 探讨外周血经3种不同抗凝剂处理后培养的自然杀伤(NK)细胞的增殖率和杀伤功能的影响研究.方法 采集10例年龄(35±5)岁健康志愿者15 mL外周血,分别置于含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2,EDTA组)、细胞保存液(细胞保存液组)和肝素钠(肝素钠组)的抗凝管中.用淋巴细胞分离液收集单个核细胞,在NK细胞培养液中培养单个核细胞12d,并观察细胞生长情况.在第4、6、8、10、12天时,收集细胞用CCK8法检测NK细胞的增殖情况.在细胞增殖明显的第12天收集细胞,通过流式细胞仪检测各组NK细胞的颗粒酶、穿孔素和CD 107a.台盼蓝染色检测细胞活性.通过CCK8法检测各组对肿瘤细胞株K562杀伤活性.结果 通过细胞增殖发现,EDTA组NK细胞增殖不明显,肝素钠组和细胞保存液组增殖明显.第12天时检测发现,肝素钠组增殖倍数为128.15±6.38,细胞保存液组增殖倍数为107.51±5.70;肝素钠组优于细胞保存液组(t=6.20,P=0.00).肝素钠组NK细胞纯度表达为(84.49±2.35)%,也明显高于细胞保存液组NK细胞表达[(77.63±1.37) %].经台盼蓝染色检测,肝素钠组和细胞保存液组细胞活性率均为100%.通过流式细胞仪检测发现,肝素钠组NK细胞颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=12.76、17.76、5.67,P=0.00、0.00、0.00).对肿瘤细胞株K562杀伤结果显示,肝素钠组NK细胞杀伤活性(50.12%±3.42%)明显高于细胞保存液组(41.88%±2.47 %)(t=4.78,P=0.001).结论 肝素钠和细胞保存液均可用于NK细胞培养的血液抗凝,但肝素钠组NK细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液组.

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