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国产全自动染色机在常规染色中的应用
随着医学技术的快速发展和自动化仪器应用的普及,病理科常规染色从繁琐的人工染色发展到了全自动染色机的大量使用.全自动组织切片染色机避免了人工染色中的随意性、工作效率低、质量不稳定等因素的影响,逐渐为各大医院病理科及相关实验室所接受并使用[1].我科于2017年底引进国产全自动染色机应用于常规HE染色,至今染色了15～20万张切片,染色效率明显提高,染色效果稳定,可与手工染色媲美.开始使用时遇到了一些困难,经过不断的摸索总结经验,目前已经解决了遇到的技术难题,染色质量稳定,现将使用体会报告如下.
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微小隐孢子虫卵囊的形态结构与染色观察
目的 研究隐孢子虫卵囊的形态与染色特点.方法 应用图像分析系统,观察隐孢子虫卵囊的形态与内部结构,并应用Adobe Photoshop CS4软件绘制各种卵囊形态的模拟图.卵囊经改良抗酸染色法、姬姆萨染色法、阿利新蓝染色法和苏木精-伊红染色法染色后观察其染色特点.结果 隐孢子虫卵囊呈圆形或椭圆形,外层有一薄的卵囊壁,内部含有0～4个月牙形子孢子和圆点状残留体,个别卵囊呈空泡状.隐孢子虫卵囊经改良抗酸染色、姬姆萨染色、阿利新蓝染色和HE染色后,分别呈现玫瑰红色、蓝色、绿色和红色.结论 隐孢子虫卵囊形态和内部结构多样,改良抗酸染色法染色效果较好.
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射频能量对关节软骨细胞活性的实验研究
目的 研究射频能量对关节软骨细胞活性的影响效果,进而验证该方法临床可行性.方法 选取10对牛关节软骨中的5对作为射频能量的实验对象,每对两侧分为4个单元格,其中3个单元格作为研究组,分别对应SCULPTOR单极射频头、SAPHYRE双极射频头、TAC-CⅡ软骨温控头,处理的时间设定为1 min,剩余1个单元格作为对照组,不做射频处理.取剩下的5对牛关节软骨作为处理时间的实验对象,分别使用SAPHYRE双极射频头以5、10、20、30 s进行射频处理,其中4组作为研究组,剩余1组不作处理,作为对照组.观察研究组与对照组苏木精-伊红染色(简称HE染色)、荧光染色和GAG释出率测定数值的差异,分析其细胞活性和组织受损情况的差异.结果 SCULPTOR单极射频头组、SAPHYRE双极射频头组、TAC-CⅡ软骨温控头组的细胞HE染色、荧光染色的空泡率和死亡率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);第1天,SCULPTOR单极射频头组、SAPHYRE双极射频头组、TAC-CⅡ软骨温控头组的软组织GAG释出率显著低于对照组,第2、3天,SAPHYRE双极射频头组、TAC-CⅡ软骨温控头组的软组织GAG释出率显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);采用5、10、20、30 s时间处理组的细胞HE染色、荧光染色的空泡率和死亡率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);第1、2、3天,采用5、10、20、30 s时间处理组的软组织GAG释出率均显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 射频能量和处理时间的增加都会导致关节软组织受损,且与增加数值成正相关,因此需要适当降低射频能量和处理时间,避免治疗时对患者形成组织损伤.
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大鼠双侧卵巢切除术后不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的研究
目的 观察双侧卵巢切除(OVX) SD大鼠不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的关系.方法 分别于6月龄雌性SD大鼠假手术(Sham)组和双侧卵巢切除术(OVX)组术后2、4、8、12周随机取样,每组每个时间点处死4只,取血清测量雌二醇(E2)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平,取胫骨用显微CT(Micro-CT)和组织学HE染色观察胫骨骨小梁微结构变化.结果 术后2周,OVX组E2较Sham组开始下降,4周时差异有统计学意义(P＜0.05),一直持续到12周,Sham组E2水平随时间变化不大;OVX组血清BALP在术后2周达峰值,然后迅速下降,12周时降至术前水平;OVX组血清TRAP活性在术后迅速升高,术后4周达峰值,然后下降,术后12周时仍高于Sham组及术前水平;Micro-CT分析胫骨干骺端相对骨体积(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、Conn.Dn、骨密度(BMD)在2周时与Sham组比较差异无统计学意义,第4周开始出现明显差异,12周差异更加明显,骨小梁厚度(Tb.Th)始终无明显差异;Micro-CT重建显示术后12周OVX组骨小梁较Sham组稀疏,缺失严重;HE染色显示术后12周OVX组大鼠胫骨干骺端骨骺板下骨小梁变细且排列稀疏,骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端,小梁壁厚度不一致.结论 OVX术骨质疏松模型建立过程中大鼠成骨及破骨细胞活跃度先增高后降低,破骨细胞相对而言上升周期更长且下降后能维持在更高水平,比成骨细胞更活跃,骨吸收大于骨生成导致骨质疏松,主要体现为骨小梁BV/TV、Tb.N、Conn.Dn、BMD下降,Tb.Sp升高,组织学表现为骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端.
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Leica ST5020全自动染色机在常规病理中的应用
介绍了Leica ST5020全自动染色机在石蜡切片苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及细胞学涂片巴氏染色中的应用体会.根据Leica ST5020全自动染色机能够针对石蜡切片和细胞学涂片编写相应的程序并进行染色的原理以及全自动染色机智能化的设计,解决了以往传统手工染色繁琐、费时费力、质量不稳定等问题,提高了切片的染色质量,有助于病理医生做出准确、快速的诊断.
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一种病理组织切片恒温染色台的设计
目的 设计一种可提高组织切片苏木精-伊红(HE)染色速率及染色质量的病理组织切片染色装置.方法 设计制作由水浴箱、带盖染色缸、电控箱三部分构成的组织切片恒温染色台,实验比对组织石蜡切片上的石蜡膜溶于二甲苯的互溶速率和镜下染色效果.结果 在37.0℃条件下,石蜡膜在二甲苯中的溶脱时间比室温条件下缩短了近一半的时间,互溶速率两组比较差异有显著统计学意义(P＜0.001);在减少1/2染色时间染制的切片组织色泽与室温条件下的染色效果类似,而且细小颗粒着色清晰.结论 应用该设备条件的组织切片染色效果优于传统常温方法.
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人脐带间充质干细胞分离鉴定及移植后对肺癌小鼠化疗的影响
背景：间充质干细胞具备多向分化潜，能促进细胞植入和免疫调节，研究人脐带间充质干细胞分离鉴定方法及移植后对肺癌小鼠化疗的影响能为肺癌治疗提供新的思路。
目的：观察人脐带间充质干细胞分离、鉴定方法及移植后对肺癌小鼠化疗的影响。
方法：取新鲜的新生儿脐带，利用组织块培养法和酶消化法分离、鉴定人脐带间充质干细胞。将Balb/C裸小鼠肺癌模型20只，随机分为化疗组和人脐带间充质干细胞移植组，两组均给予化疗治疗，人脐带间充质干细胞移植组化疗期间联合移植人脐带间充质干细胞治疗。
结果与结论：①瘤质量、肠黏膜组织形态及血常规指标：与单纯化疗的肺癌模型小鼠相比，人脐带间充质干细胞移植组胃肠道红润、有光泽，肠黏膜光滑、完整，瘤质量和血常规指标稳定(P<0.05)；②结果证实：通过组织块培养法和酶消化法能获得成熟的人脐带间充质干细胞，与化疗联合应用可明显减少胃肠道的损害，稳定外周血象。 -
玻璃酸钠及胎盘间充质干细胞和诱导的软骨细胞膝关节腔内注射：修复膝骨关节炎
背景：胎盘间充质干细胞已被证实具有较强的增殖能力，能向神经细胞、血管内皮细胞、表皮细胞以及胰岛样细胞等诱导分化，但向软骨细胞诱导分化并修复膝骨关节的研究不多。
目的：人胎盘间充质干细胞体外诱导软骨细胞膝关节腔内注射修复兔膝骨关节炎，并比较璃酸钠和胎盘间充质干细胞膝关节腔内注射的修复效果。
方法：①选新西兰大白兔制作骨关节炎模型，左后肢膝关节炎造模后石膏固定5.5周，镜下观察关节软骨情况。②利用Ⅳ型胶原酶消化分离培养人胎盘间充质干细胞，流式细胞仪检测细胞表面标志物，证实为胎盘间充质干细胞。取第3代胎盘间充质干细胞进行实验，将胎盘间充质干细胞加入软骨诱导培养基向软骨细胞分化，倒置显微镜观察结果。③将大白兔随机分成玻璃酸钠膝关节腔内注射组、胎盘来源间充质干细胞膝关节腔内注射组和诱导软骨细胞膝关节腔内注射组，分别给予膝关节腔内注射，连续5周取膝关节软骨镜下观察，比较软骨修复情况。
结果与结论：体外诱导培养的人胎盘间充质干细胞增殖形成大量贴壁细胞，贴壁细胞具有典型的间充质细胞形态；应用软骨诱导培养基培养后，细胞只保持微团，不继续增殖形成贴壁细胞，微团基部无贴壁细胞，显示人胎盘间充质干细胞可以分化为软骨细胞。苏木精-伊红染色镜下观察发现，各组兔膝关节软骨细胞均有修复，诱导软骨细胞膝关节腔内注射后兔膝关节软骨修复情况较好，优于玻璃酸钠和胎盘间充质干细胞膝关节腔内注射组。 -
重复经颅磁刺激联合嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤
背景:传统观念认为哺乳动物的脑和脊髓损伤后不能再生,脊髓损伤后功能恢复的预后希望很渺茫.目的:分析经颅磁刺激联合嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的修复效果.方法:对80只大鼠进行脊髓损伤模型制备,随机等分成4组,胸髓横断损伤组、嗅鞘细胞移植组、重复经颅磁刺激组及联合组.各组大鼠行T10全椎板切除建立胸髓横断损伤动物模型,造模24 h后,嗅鞘细胞移植组和联合组大鼠在损伤区附近注射嗅鞘细胞,重复经颅磁刺激组及联合组大鼠于左前囟上方接受重复经颅磁刺激治疗.结果与结论:移植4周后,与其他3组相比,重复经颅磁刺激联合嗅鞘细胞移植组大鼠运动功能恢复明显,运动功能BBB评分升高,坐骨神经电生理功能明显恢复,损伤脊髓修复较好.提示重复经颅磁刺激联合嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤可以获得显著疗效,两者联合应用可明显促进脊髓损伤后的轴突再生及功能恢复.
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激素性股骨头缺血性坏死动物模型的建立及综合评估
背景:建立简便可行、失败率低的激素性股骨头缺血性坏死动物模型,是研究激素性股骨头缺血性坏死的主要途径.目的:建立激素性股骨头缺血性坏死动物模型,并进行病理学、影像学、骨/血清生化、血流变学评价.方法:将20只大耳白兔随机分2组,实验组经耳缘静脉注射马血清10 mL/kg,14 d后再注射1次,再次注射14 d后,臀肌注射醋酸泼尼松龙8 mg/kg,1次/d,连续注射6 d,建立激素性股骨头缺血性坏死模型;对照组注射等量生理盐水.造模后8周,进行股骨头X射线、MRI检查;造模后10周,进行骨生化、血清生化、血液流变学及股骨头组织学观察.结果与结论:①X射线:对照组骨皮质较厚,骨小梁清晰;实验组关节间隙变窄,骨皮质显著变薄,骨密度明显降低,骨小梁重度紊乱;②MRI检测:对照组未见股骨头坏死现象,实验组表现典型的双线征;③骨生化:实验组氨基己糖、钙/羟脯胺酸、氨基己糖/羟脯胺酸、钙含量低于对照组(P<0.05);④血清生化:实验组钙磷乘积、胆固醇、钙水平低于对照组(P<0.05),三酰甘油水平高于对照组(P<0.05);⑤血液流变学:实验组全血高切黏度及低切黏度、血浆黏度比及红细胞压积高于对照组(P<0.05);⑥组织学观察:实验组骨小梁中大部分骨细胞坏死,未坏死的骨细胞肿胀,细胞核严重变形、边聚,还有细胞核碎化、溶解、空鼓等现象,多核破骨细胞明显增多,造血干细胞明显减少;对照组未见上述现象;⑦结果表明,采用马血清联合大剂量和醋酸泼尼松龙可得到较理想的激素性兔股骨头缺血性坏死动物模型,X射线、MRI检查及骨/血清生化、血流变学评价可作为激素性股骨头缺血性坏死辅助诊断手段.
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不同剂量维甲酸诱导骨质疏松大鼠模型的稳定性
背景:骨质疏松严重危害老年人的健康和生活质量,建立理想的实验动物模型对骨质疏松的病因和治疗的研究有着重要的意义.目的:通过不同剂量的维甲酸诱导建立大鼠骨质疏松模型,筛选出理想的造模剂量.方法:将80只雌性SD大鼠按体质量随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,各20只.低剂量组、中剂量组和高剂量组分别以80,100,120 mg/(kg?d)维甲酸连续灌胃14 d.结果与结论:与对照组相比,低剂量组大鼠骨密度、成骨细胞和破骨细胞计数及骨微观结构无明显变化,而中、高剂量组大鼠股骨骨密度、血清钙含量明显下降,股骨破骨细胞数量增加,骨微观结构明显发生改变,其中以中剂量组为明显.结果说明100 mg/(kg?d)维甲酸灌胃14 d可诱导大鼠建立骨质疏松模型,且稳定性良好.
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顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞
背景：肿瘤干细胞具有自我更新、耐药和转移成瘤能力，对肿瘤的发生、发展以及肿瘤的转移等具有重要的功能。目前，确认肿瘤干细胞的方法主要有2种，即体外瘤球培养实验以及小鼠体内成瘤实验，但临床上通过化疗在大鼠体内富集胃癌细胞尚缺乏研究报道。目的：观察顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞的情况，研究其表面标志蛋白的筛选方法。方法：建立BGC-823胃癌模型大鼠，采用随机对照方法将大鼠分为2组，实验组大鼠分别尾静脉注射质量浓度0.1，0.2，0.25，0.3 g/L的顺铂，而对照组则尾静脉注射生理盐水。经过3期化疗，后得到富集胃癌干细胞组织；采用高通量蛋白芯片对肿瘤表面蛋白进行提取，并采用Western blot对芯片进行验证，比较顺铂在大鼠体内富集胃癌干细胞及其表面标志蛋白的筛选方法。结果与结论：顺铂剂量为0.3 g/L×200μL时治疗效果佳，且化疗药物浓度越高，耐受力越差，不良反应发生率越高。移植瘤经苏木精-伊红染色验证均为癌组织；Western blot检测结果与蛋白芯片结果显示，HLA-DQ， PMP22和Claudin7蛋白在胃癌组织中表达增强，HLA-DR，CD14，CD16和CD56蛋白表达减弱。结果证实，顺铂化疗能够在体内富集胃癌干细胞，能够成功筛选出相应的表面标志物蛋白。
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人腰椎小关节软骨不同染色方法的差异比较
背景:随着现代病理技术的不断创新及发展,在疾病诊断方面显著减少其误诊率,但特殊染色法依然是病理诊断的主要手段.目的:比较不同的特殊染色方法显示人腰椎小关节结构的优缺点.方法:收集腰椎手术患者的L4/5小关节软骨标本,行苏木精-伊红染色、番红O染色、甲苯胺蓝染色、Masson染色、番红-固绿染色,观察软骨结构.结果与结论:苏木精-伊红染色、番红-固绿染色和甲苯胺蓝染色均可清晰观察到关节软骨各层结构.其中苏木精-伊红染色能较清楚显示软骨层、潮线及软骨下骨,软骨细胞核呈蓝紫色.番红-固绿染色清晰显示软骨4层结构:浅层(软骨表面),中间层(细胞圆形,着色较淡,排列规律),柱状细胞层(细胞较大,多核,排列整齐),显示软骨基质呈均匀浅红,软骨下骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明.甲苯胺蓝染色显示组织结构层欠清,胞核染色清晰,胞浆几乎不着色,基质呈淡蓝紫色.而番红O染色软骨层及软骨下骨层分界比较清晰,软骨层呈均匀深红色,细胞染色较淡,与软骨基质分界不明显.Masson染色对胶原纤维较为清晰,但只能大致显示软骨与软骨下骨结构.结果说明番红-固绿染色显示软骨各层和软骨下骨结构佳;苏木精-伊红染色观察软骨细胞形态变化较其他方法清楚,Masson染色次.
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激素性股骨头缺血性坏死模型兔股骨组织中间隙连接蛋白Cx43的表达
背景：激素性股骨头缺血性坏死的发病机制至今尚未完全阐明，间隙连接蛋白 Cx43作为骨组织细胞间的主要间隙连接，通过介导骨细胞间信息、能力的正常传递参与调控骨组织细胞生长、分化，代偿性的骨增加或减少，间隙连接蛋白Cx43与激素性股骨头坏死发生发展的关系国内外尚少见报道。
目的：通过建立兔激素性股骨头坏死模型，初步探讨间隙连接蛋白Cx43在激素性股骨头坏死中的表达变化。方法：将新西兰大白兔40只随机等分为两组，模型组采用内毒素+激素方法构建激素性股骨头坏死模型，对照组于相同时间点注射等量生理盐水。
结果与结论：建模4周后，苏木精-伊红染色结果显示，模型组股骨头软骨下区骨小梁变细，结构紊乱，空骨陷窝明显增多，脂肪细胞增多，髓腔内造血细胞明显减少；对照组股骨头软骨下区骨小梁排列整齐、很少见空骨陷窝，骨髓造血细胞丰富，脂肪细胞较少；免疫组织化学检测显示：Cx43蛋白阳性表达于骨小梁边缘成骨细胞及骨小梁内骨细胞胞浆上及骨髓细胞间质。Western blot检测显示，碱性磷酸酶和Cx43蛋白的表达在模型组中低于对照组(P<0.05)。结果证实，在激素性股骨头坏死兔模型组织中Cx43蛋白表达下降，可能是激素性股骨头坏死发生发展的重要环节。 -
丹参接骨胶囊对闭合性股骨骨折模型大鼠骨折愈合的影响
背景：丹参接骨胶囊是因有显著活血化瘀、消肿止痛的功效而成为治疗骨折的常用中药制剂之一。目的：观察丹参接骨胶囊对闭合性股骨模型大鼠骨折愈合的影响。方法：将大鼠随机分为丹参接骨胶囊组、生理盐水组及正常组，丹参接骨胶囊组和生理盐水组制备闭合性股骨骨折模型大鼠，骨折后分别给予生理盐水、丹参接骨胶囊2粒灌胃；正常组正常饲养。观察骨折后7，14，28 d丹参接骨胶囊组及生理盐水组苏木精-伊红染色情况、血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达、骨痂转化生长因子β1蛋白/mRNA的表达。结果与结论：①苏木精-伊红染色显示，骨折后7 d，丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折组织病理变化无显著差异，骨折后14，28 d丹参接骨胶囊组股骨骨折病理修复较生理盐水组明显。②骨折后3，7 d丹参接骨胶囊组、生理盐水组大鼠血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达均明显升高(P <0.05)，两组表达趋势一致，其中丹参接骨胶囊表达量始终较生理盐水组高，且骨折后14，28 d表达量差异有显著性意义(P <0.01)。③骨痂转化生长因子β1表达在丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折后第3天出现1个峰值，随后浓度逐渐下降，直至骨折后第14天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达又再度升高，出现第2个峰值，至骨折后第28天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达浓度再次出现下降。此过程丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达趋势一致，在7，14，28 d愈合时期，丹参接骨胶囊组大鼠转化生长因子β1表达均高于生理盐水组。④结果证实，丹参接骨胶囊能够促进骨折的愈合，其机制可能与促进血清骨钙素、Ⅰ型胶原及转化生长因子β1的表达有关。
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乙醇性脂肪肝模型大鼠早期生长反应因子1表达及水飞蓟素的干预
背景：促炎性转录因子以及炎性因子在乙醇性肝病的发生中起着重要作用，而早期生长反应因子1正是炎症启动的关键因子之一。目的：观察并分析水飞蓟素对乙醇性脂肪肝模型大鼠早期生长反应因子1的影响。方法：将大鼠采用高脂饮食联合乙醇灌胃方式建立脂肪肝动物模型，每次灌胃后分别给予水飞蓟素高、低剂量(200，100 mg/kg)干预，并设正常组进行对照，共灌胃8周。结果与结论：血清学指标检测和苏木精-伊红染色结果显示，与模型组相比，水飞蓟素高剂量组大鼠体质量增高(P <0.05)，血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性、肝组织早期生长反应因子1和肿瘤坏死因子α的表达降低(P <0.05)，病理分级结果均占优(P <0.01)。结果证实，高剂量水飞蓟素能有效保护大鼠肝功能，减少肝功能损害的发生，可能与水飞蓟素抑制大鼠体内早期生长反应因子1，从而减少肿瘤坏死因子α的形成有关，但具体机制尚待进一步研究。
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血管冻干前后的显微变化分析
背景：血管纵向方面的拉伸力学特性、径向方面必要的血管张力，是组织灌注和压力维持的重要保证。目的：通过拉伸、穿刺指标的测试和分析表征血管性能，侧面地预测移植入受体后血管的健康状况。
方法：采用猪主动脉血管为材料，利用动态力学分析仪对血管周向拉伸、轴向拉伸及穿刺方面的力学性能进行了测试实验，并结合切片及染色分析，分析冻干后的血管移植入体内后，能否承受血液对其造成的各个方向的压力。
结果与结论：冻干后血管的周向拉伸、轴向拉伸及穿刺过程曲线都分别与新鲜血管该段过程曲线的趋势比较接近，说明血管在冻干后结构成分及排列方式没有发生大的改变；同时结合切片及拉伸断面的显微观察，研究和解释了各项力学性能实验数据和结果出现的原因，利用微观结构的变化分析了宏观力学的实验结果。结果说明真空冷冻干燥的方法能够较好地保持血管力学方面的各项性能。 -
口腔软组织缺损兔模型的构建
背景：在口腔种植临床，对术区软组织缺损修复方法及材料的研究一直在深入。而通过建立可靠的实验动物口腔软组织缺损模型，会对该领域的探索研究产生积极的深远影响。
目的：实验旨在建立一种兔口腔软组织缺损动物模型，以供对口腔软组织缺损修复治疗进行深入的研究。方法：在18只3月龄雄性新西兰兔的硬腭前部中份，分别距上颌门齿、左右硬腭黏膜边缘2 mm 处以直径为5 mm 的组织环切钻制备圆形软组织全层缺损。分别于建模后3，7，14，21，28，56 d 对创面进行形态学和组织学观察。
结果与结论：①创面形态：建模后3，7 d，创口炎症反应明显；随着时间推移，炎性反应消退，伤口逐渐愈合。在建模后21，28，56 d 可见明显瘢痕形成；②创面组织学变化：在伤后3，7 d，炎细胞大量浸润，组织坏死面积较大，建模后7 d 后，随着结缔组织增殖和新生毛细血管的广泛形成，伤口逐渐塑形完整；③结果说明：实验成功构建口腔软组织缺损模型兔，符合创伤愈合的生理规律和人类口腔软组织缺损愈合特点。 -
Dako CoverStainer全自动染色封片一体机在常规病理中的应用
目的 分析Dako CoverStainer全自动染色封片一体机在石蜡切片苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色中的应用,为自动染色技术的广泛使用进一步奠定实验基础.方法 参考国内一级病理科全自动染色程序及该科室手动染色效果的前提下,经过多次校准调试,编写Dako CoverStainer全自动染色封片一体机相应染色以及染色封片程序.结果 切片的处理效率明显提高,HE染色效果均一性和稳定性也有了明显改善.结论 Dako CoverStainer一体智能化的设计,解决了以往传统手工染色繁琐,费时费力,质量不稳定等问题,提高了切片的染色质量,有助于病理医师做出精准、快速的诊断.
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小鼠组织冰冻切片3种包埋方法效果比较
目的 比较冰冻切片技术中几种包埋方法的效果.方法 小鼠经心脏灌注固定并取其不同组织,组织经后固定后,进行常规蔗糖脱水.分别使用直接包埋、模具包埋、OCT浸透包埋等3种方法后行冰冻切片、苏木精-伊红染色后,比较其染色效果,选出佳包埋方法.结果 直接包埋法染色均匀,组织结构清晰可见,但组织有轻微皱缩,偶有冰晶出现,核质对比度尚可;模具包埋法组织结构清晰无皱褶,核质着色清楚,核浆对比度好,色彩鲜艳;OCT浸透法组织结构完整,染色效果良好,部分组织胞质着色不良,对比度稍欠佳.结论 模具包埋是这3种包埋方法中有利于冰冻切片的方法.
