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KPNA2在结直肠癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨结直肠癌组织中核转运蛋白KPNA2的表达及其与结直肠癌临床病理特征之间的关系.方法 收集110例原发性结直肠癌患者的肿瘤组织及对应的正常肠黏膜组织,应用免疫组化法检测组织中KPNA2的表达水平,分析其表达与临床病理特征及预后的关系.结果 KPNA2在结直肠癌组织中的表达明显高于正常组织,并且其高表达与组织分化、Dukes分期、T分期、N分期及M分期有关(P＜0.05).Kaplan-Meier法分析结果显示,KPNA2蛋白高表达的患者5年总生存率低于低表达的患者(P＜0.05).结论 结直肠癌组织中KPNA2的表达明显升高,KPNA2高表达可能促进了结直肠癌的发生和发展,具有成为判断结直肠癌预后的潜在价值.
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RNAi沉默KPNA2对人膀胱癌细胞系5637转移潜能的影响
目的 探讨RNA干扰技术(RNAinterference,RNAi)沉默KPNA2(karyopherin a2)基因表达对人膀胱癌细胞系5637迁移和侵袭能力的影响.方法 实验分为siRNA敲低组和阴性对照组.siRNA敲低组设计合成靶向KPNA2序列的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用LipofectaminTM 2000方法瞬时转染膀胱癌细胞系5637;阴性对照组采用无关序列RNA采集.转染后48 h,应用蛋白质印迹法检测KPNA2的蛋白表达;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 蛋白质印迹法检测结果显示,膀胱癌5637细胞转染KPNA2特异性siRNA 48 h,与阴性对照组相比较,敲低组细胞KPNA2蛋白表达水平下降92.1％,差异有统计学意义,P=0.004 3.Transwell实验检测结果显示,敲低组细胞迁移能力明显受到抑制,细胞抑制率为61.7％,差异有统计学意义,P=0.038;敲低组细胞侵袭能力也明显受到抑制,细胞抑制率为58.6％,差异有统计学意义,P=0.026.结论 靶向KPNA2的特异siRNA能够下调KP-NA2在膀胱癌5637细胞中的蛋白表达水平,有效抑制膀胱癌5637细胞的迁移和侵袭能力.以KPNA2为靶点的RNA干扰技术有望成为膀胱癌基因治疗的新方法.
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核转运蛋白KPNA2与肿瘤关系的研究进展
KPNA2作为核转运蛋白家族成员之一，通过核浆运输功能调节多种蛋白的核转位，而参与细胞分化、增殖凋亡、转录调节、免疫反应和病毒感染等多种生命活动。近年来研究表明KPNA2在多种肿瘤组织中表达上调，并且KPNA2的异常表达与患者预后差相关，提示KPNA2在肿瘤形成和进展过程中扮演重要角色。经细胞学研究证实，KPNA2亦参与细胞的恶性转化。因此，本文对KPNA2的功能及在肿瘤中的研究进展进行综述。
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KPNA2基因沉默对人肝癌细胞株 SMMC7721和 Bel7404增殖和侵袭能力的影响
目的：观察核转运蛋白基因α2（Karyopherin α-2，KPNA2）基因沉默对人肝癌细胞株 SMMC7721和 Bel7404增殖以及侵袭能力的影响。方法将 KPNA2 siRNA 干扰质粒用 LipofectaminTM 2000方法瞬时转染人肝癌细胞株SMMC7721和 Bel7404，转染后48 h 应用蛋白质印迹法检测转染细胞中 KPNA2蛋白表达。采用 MTT 法检测基因沉默细胞增殖能力，采用 Transwell 法检测基因沉默细胞侵袭能力。结果 SMMC7721细胞株对照组 mRNA 为1．02±0．13，高于 siRNA 转染组的0．37±0．07（t＝10．78，P ＜0．01）；肝癌 Bel7404细胞株对照组 mRNA 为1．05±0．17，高于 siRNA 转染组的0．36±0．06（t＝9．38，P ＜0．01）。肝癌 SMMC7721细胞株对照组蛋白定量值为0．96±0．10，高于转染组的0．42±0．05（t＝11．83，P ＜0．01）；肝癌 Bel7404细胞株对照组蛋白定量值为0．93±0．09，高于转染组的0．48±0．06（t ＝10．19， P ＜0．01）。SMMC7721和 Bel7404细胞株在24、48和72 h 时对照组增殖能力高于转染组，且差异有统计学意义（P ＜0．05）。SMMC7721细胞株对照组侵袭能力值为126．20±21．61，高于 siRNA 转染组的51．13±10．2（t ＝7．68，P ＜0．01）；肝癌 Bel7404细胞株对照组侵袭能力值为125．124±8．04，高于 siRNA 转染组的55．20±18．54（t ＝8．48，P ＜0．01）。结论 KPNA2基因沉默可以调节人肝癌细胞株 SMMC7721和 Bel7404的增殖能力和侵袭能力。
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肝癌患者癌组织及癌旁正常组织 KPNA2检测及临床意义分析
目的：探讨核转运蛋白受体KPNA2在肝癌组织中的表达水平及其临床意义。方法采集28例肝癌患者癌组织和癌旁正常组织标本，采用免疫印迹法进行KPNA2检测。结果28例肝癌组织中，23例（82．14％） KPNA2呈高表达；28例肝癌旁正常组织中，4例（14．29％）KPNA2呈高表达。KPNA2高表达比例组间比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 KPNA2在肝癌组织中呈高表达，在癌旁正常组织中呈低表达。KPNA2可作为肝癌诊断的标志物。
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KPNA2基因沉默和过表达对人膀胱癌细胞株5637增殖能力的影响
目的：观察KPNA2（karyopherin a2）基因沉默和过表达对人膀胱癌细胞株5637增殖能力的影响。方法将KPNA2 siR‐NA干扰质粒和过表达质粒pcDNA3．1（＋）‐KPNA2用LipofectaminTM 2000方法瞬时转染膀胱癌细胞株5637，转染后48 h ，应用蛋白质印迹法检测转染细胞中 KPNA2蛋白表达，CCK‐8（cell counting kit‐8）法检测细胞增殖活性，通过生长曲线检测KP‐NA2基因沉默和过表达后细胞增殖能力的改变。结果与阴性对照组比较，KPNA2 siRNA干扰质粒转染5637细胞后，转染组细胞KPNA2蛋白表达水平显著下降，细胞增殖能力明显受到抑制，pcDNA3．1（＋）‐KPNA2过表达质粒转染5637细胞后，转染组细胞KPNA2蛋白表达水平显著升高，细胞增殖能力明显增强（P＜0．05）。结论 KPNA2基因沉默和过表达可以调节人膀胱癌细胞株5637的增殖能力，为膀胱癌的临床治疗提供了新方向。
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肝癌患者KPNA2表达与凝血指标变化及临床意义探讨
目的探讨肝癌患者KPNA2表达与凝血指标变化及其临床意义。方法收集我院2012年1月~2013年8月肝癌患者30例,正常人对照40例。采用RT-PCR法从转录水平上检测KPNA2在肝癌组织及癌旁正常肝组织中的表达水平。用法国STA COMPACT CT全自动血凝分析仪检测患者及正常人对照的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶时间(TT),并与对照进行比较。结果30例肝癌患者中25例(83.33%)肝癌组织KPNA2的mRNA灰度值与癌旁正常肝组织之比>2倍。凝血指标PT、APTT、TT、FIB含量±次为：肝癌组14.0±1.3,35.8±6.1,3.76±1.31,18.9±1.7；正常对照组为12.9±0.8,34.0±4.4,3.1±0.5,16.4±1.1。经统计学处理,肝癌组织KPNA2的mRNA灰度值与癌旁正常肝组织有显著性差异(<0.01)；凝血指标肝癌组与正常对照组比较：血浆PT、APTT、TT、FIB含量均存在着显著性的差异(<0.05),有统计学意义。结论 KPNA2在肝癌组织中高表达,在癌旁正常肝组织中低表达可作为肝癌诊断的指标；监测肝癌患者血浆PT、APTT、TT、FIB的含量变化,可较好地了解患者肝功能的状况,为评估患者肝脏受损程度和病情判断及治疗效果观察提供科学±据。
