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可溶性CD40在在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值
目的 探讨中可溶性CD40(sCD40)浓度水平在良恶性胸腔积液鉴别中的价值.方法 回顾性分析我院2016年1月至2017年12月间收治胸腔积液患者共98例,其中良性胸腔积液患者48例,恶性胸腔积液患者50例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测胸腔积液中sCD40的浓度水平,以受试者工作曲线(ROC)分析可溶性CD40(sCD40)浓度水平在胸腔积液良恶性鉴别中的价值.结果 恶性胸腔积液组中sCD40平均浓度为(248.6±20.8)pg/ml,明显高于良性胸腔积液组[(105.8±19.3)pg/ml],且差异有统计学意义(P<0.05).sCD40诊断恶性胸腔积液的佳临界值为121.6 pg/ml,特异度、敏感度、准确度分别为81.3％、90.0％、85.7％.相关性分析表明,sCD40表达与年龄正相关(r=0.673,P<0.05),与性别、胸腔积液类型无关(P>0.05).结论 sCD40在恶性胸腔积液中高表达,对良性及恶性胸腔积液的鉴别诊断具有重要价值.
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慢性肾衰竭患者血浆sCD40和sCD40L的变化
目的 探讨慢性肾衰竭(CRF)患者血浆中可溶性CD40(sCD40)和可溶性CD40配体(sCD40L)的变化以及在肾损伤和免疫异常中的可能作用.方法 选择2006年9月至12月首都医科大学附属北京同仁医院肾内科收治的慢性肾衰竭未透析患者(CRF组)30例,血液透析中心维持性血液透析3个月以上的尿毒症患者(HD组)30例,与患者年龄、性别相匹配的健康正常对照组20例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆sCD40和sCD40L的水平,并进行相关因素分析,观察血液透析对sCD40和sCD40L的影响.用方差分析和Pearson相关性分析进行统计学分析.结果 (1)CRF组和HI)组sCD40水平均明显高于对照组(P＜0.01),HD组sCD40水平较CRF组升高(P＜0.01);(2)CRF组和HD组sCD40L水平均明显高于对照组(P＜0.01),HD组sCD40L水平较CRF组轻度升高,但无显著差异(P＞0.05);(3)CRF组sCD40水平与血肌酐(Scr)和C-反应蛋白(CRP)之间成正相关(r=0.637,P＜0.01;r=0.551,P＜0.05),sCD40L水平与Scr和CRP之间也存在相关性(r=0.553,P＜0.05;r=0.686,P＜0.01),sCD40、sCD40L水平与血压、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、血白蛋白(Alb)、血糖(Glu)、尿素氮(Bun)及血脂等指标之间无相关性(P＞0.05).血液透析组sCD40、sCD40L与上述指标之间无相关性,与透析病程和透析充分性(Kt/V)之间也无相关性(P＞0.05);(4)一次血液透析过程,HD后sCD40水平较HD前略有升高,差异无统计学意义(P＞0.05),HD后sCD40L水平较HD前下降,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 CRF患者血浆中sCD40和sCD40L水平升高,HD患者更明显,有可能参与CRF患者肾损伤和免疫异常.
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重症肝炎患者与原发性肝癌患者血清可溶性CD40表达水平研究
目的：分析可溶性CD40在重症肝炎患者与原发性肝癌患者血清中的表达及其临床意义。方法随机选取自2014年12月至2015年8月于邯郸市传染病医院进行治疗的44例重症肝炎治疗患者和26例原发性肝癌患者为观察组1和观察组2，同时选取本院体检科健康体检者65例为对照组。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清CD40浓度并比较各组间的差异。结果观察组1患者血清CD40为（135.85±115.5）pg/ml，观察组2患者血清CD40为（150.95±75.5）pg/ml，对照组血清CD40为（45.58±28.9）pg/ml，观察组1和观察组2的CD40水平显著高于对照组，组间差异有统计学意义（t =5.644，P =0.0017），观察组1与观察组2患者血清CD40水平差异无统计学意义（t =0.028，P =0.476）。重症肝炎患者中病死患者的CD40水平为（200.2±135.6）pg/ml，显著高于存活患者的（85.93±75.2）pg/ml，差异有统计学意义（t =0.625，P =0.0017）。重症肝炎患者中肝性脑病患者治疗后血清CD40水平为（235.9±120.5）pg/ml，高于无肝性脑病患者（108.5±100.8）pg/ml，差异有统计学意义（t =5.412，P =0.0014）。观察组1和观察组2患者可溶性CD40浓度与ALT和AST水平均呈正相关（r =0.48、0.36，P =0.01、0.02；r =0.43、0.40，P =0.00、0.02）。重症肝炎患者中男性患者可溶性CD40平均浓度为（225.48±95.52）pg/ml，高于女性患者的（164.25±89.65）pg/ml，差异具有统计学意义（t =3.24，P =0.01）。结论重症肝炎患者与原发性肝癌患者血清中可溶性CD40水平显著高于健康人群，是评价肝细胞急性损伤和评估重型肝炎预后的免疫学指标。
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多发性骨髓瘤患者血清白细胞介素-6与可溶性CD40的变化及临床意义
目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)患者可溶性CD40(sCD40)和白细胞介素(IL)-6的动态变化及临床意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测60例MM患者和40名健康体检者(对照组)血清IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α与sCD40的水平,并观察其与血清β2-微球蛋白(β2-MG)水平的相关性.结果 MM患者血清IL-6,TNF-α与sCD40的水平均明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并随MM临床分期增加、病情加重而逐渐升高(P<0.05),但不同免疫亚型间差异无统计学意义(P>0.05).同时IL-6,TNF-α与sCD40水平的变化与化学治疗效果有关,化学治疗有效患者IL-6,TNF-α与sCD40水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).血清IL-6,TNF-α与sCD40的水平与血清β2-MG水平呈正相关.结论 血清IL-6,TNF-α与sCD40的水平变化与MM的肿瘤负荷和化学治疗效果有关,可作为评估病情变化和治疗效果的有效指标.
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可溶性CD40酶联检测试剂盒的研制及其检测的临床意义
目的:建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD40(sCD40)酶标检测试剂盒及探讨其检测的临床意义.方法:采用该室制备的鼠抗人CD40单抗5C11作为包被抗体,另一株识别不同抗原位点的单抗3G3经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sCD40酶标检测方法和对各种质控参数进行优化.在此基础上测定了健康供血员、甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿性关节炎患者的血清、肺癌患者血清和胸水及多种多发性骨髓瘤(MM)、淋巴瘤细胞株培养上清中sCD40的含量.结果:成功地研制了人sCD40酶联检测试剂盒,其灵敏度为15.6 pg/ml.该试剂盒4℃放置3个月,离散度(CV)＜±7.9%,回收率为95%～114%,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性.用该试剂盒测得血清中sCD40含量的95%正常值范围(x±s)为105.00±18.88 pg/ml,甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿患者的血清、肺癌患者血清和胸水中sCD40的含量明显高于正常对照组(P＜0.01).结论:成功地研制了检测人sCD40酶标检测试剂盒,对一些与CD40分子表达或信号异常的疾病患者外周血检测结果显示,该试剂盒在临床检测中具有潜在的应用价值.
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肺癌患者血浆CD62P、血清sCD40/sCD40L水平的检测及临床意义
目的：通过测定肺癌患者血清中可溶性CD40（sCD40）、可溶性CD40L（sCD40L）、血浆CD62P的含量，探讨血小板源性CD40/CD40L在肺癌外周血中的表达及其临床意义。方法体外分离85例肺癌患者（肺癌组）和25名健康志愿者（对照组）的血清和血浆。用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P的含量进行测定。结果(1)肺癌组血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P含量明显高于健康对照组（P均＜0.01）。(2)不同病理类型肺癌患者血清sCD40、sCD40L含量、血浆CD62P含量差异均无统计学意义（P均＞0.05）。(3)肺癌患者sCD40、sCD40L、CD62P的含量随临床分期的进展而呈升高趋势。(4)有远处转移肺癌患者sCD40、sCD40L、CD62P的含量明显高于无远处转移患者（P均＜0.05）。(5)肺癌患者术后2周时血浆CD62P、血清sCD40L的含量均较术前下降，但血清sCD40含量与术前相比差异无统计学意义。且其CD62P、sCD40L的表达水平成正相关关系（r=0.300，P＜0.05）。结论(1)肺癌患者血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P含量增加，且表达水平与肺癌的进展程度相关，血小板源性CD40/CD40L系统在肺癌的发病中具有重要作用。(2)检测血小板源性CD40L、CD62P表达水平对研究肺癌的临床分期、预后判断有一定的参考价值。
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非小细胞肺癌组织和患者外周血中CD40的表达及其临床意义
目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织和患者外周血中CD40的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法检测经胸外科手术切除的60例NSCLC组织、15例癌旁肺组织和患者外周血中CD40的表达情况.结果 (1)NSCLC组织中CD40阳性表达率较癌旁肺组织明显增加(P＜0.05)；(2)有淋巴结转移组的CI4O阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ期NSCLC组织CD40阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05).(3) NSCLC外周血清可溶性CD40 (sCD40)的表达水平明显高于健康对照组(P＜0.05)；(4) NSCLC患者外周血清sCD40含量和NSCLC组织中CD40分子表达成正相关关系(P＜0.05).结论 NSCLC患者体内CD40含量增加可增强肺癌的侵袭和免疫逃逸能力；患者外周血清sCD40含量升高可能和肺癌细胞表面CD40分子释放有关.
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sCD40-EGFP融合基因的构建及其在树突状细胞DC2.4中的表达
目的 构建携带鼠可溶性CD40分子(sCD40)及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合蛋白真核表达质粒pEGFP-N1/sCD40并检测其在树突状细胞(DC2.4)中的表达水平.方法 采用基因工程技术构建CD40胞外区与EGFP重组载体质粒pEGFP-N1/sCD40,经酶切及序列分析鉴定,脂质体介导转染DC2.4细胞株,荧光显微镜,荧光分光光度计及SDS-PAGE检测sCD40-EGFP融合蛋白的表达,流式细胞仪检测其活性.结果 融合基因在瞬时转染的树突状细胞中获得表达,并分泌至上清,且sCD40-EGFP融合蛋白中分子标签未影响可溶性sCD40膜外活性区的生物学活性.结论 可溶性CD40分子与EGFP融合基因载体构建成功,在树突状细胞中表达的融合蛋白具有生物活性,为进一步研究基因修饰树突状细胞诱导特异性移植免疫耐受奠定了实验基础.
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可溶性CD40的研究进展
CD40分子是属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族的Ⅰ型跨膜糖蛋白,可溶性CD40(sCD40)与膜型CD40(mCD40)共存,并具有与CD40L结合的能力,是CD40-CD40L作用的天然拮抗剂.研究显示健康人血清中存在低水平的sCD40,而肾脏疾病、肝脏疾病、血液病、神经系统疾病等患者血液和体液中异常高表达sCD40,且其水平与病程发展和预后有关,具有重要的临床意义.
关键词： 可溶性CD40 CD40配体 特异性酶联免疫吸附实验 -
煤工尘肺患者血清可溶性CD40及其配体水平变化研究
目的 探讨血清可溶性CD40(sCD40)及其配体(sCD40L)水平在煤工尘肺(CWP)中变化及意义.方法 采用酶联免疫吸附法检测95例CWP患者(CWP组)、61例健康井下接尘矿工(接尘对照组)及48例非接尘井上健康人员(正常对照组)血清sCD40及sCD40L水平,并根据CWP期别及有无并发症进行分析.结果 与正常对照组比较,接尘对照组sCD40L水平降低明显,差异有统计学意义(P<0.05).Ⅱ期CWP患者血清sCD40水平明显高于I期,CWP并发肺结核患者血清sCD40水平明显高于单纯CWP,差异均有统计学意义(P<0.05).正常对照、接尘对照和CWP组血清sCD40及sCD40L水平均呈正相关(P<0.05).结论 sCD40L在CWP的早期炎症反应中起一定作用;而sCD40则可能预示着CWP的严重程度,两者共同参与CWP的发生发展过程.
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阿尔茨海默病与轻度认知障碍患者血浆sCD40及sCD40L浓度研究
目的：探索阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）及遗忘型轻度认知障碍（amenstic mild cognitive impairment，aMCI）患者血浆可溶性CD40（soluble CD40，sCD40）和可溶性CD40配体（soluble CD40 ligand， sCD40L）浓度变化特点及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测20例AD患者、35例aMCI患者和32名正常对照者血浆sCD40和sCD40L浓度水平，简易精神状态检查表（mini-mental state examination，MMSE）评估患者认知功能。结果 AD组、aMCI组和对照组血浆sCD40浓度中位数（上下四分位数）分别为[123.3（97.4，149.5）pg/mL]、[102.9（63.6，124.0）pg/mL]和[70.66（51.0，90.8）pg/mL]，3组间sCD40浓度差异均有统计学意义（P<0.05）。AD组、aMCI组和对照组血浆sCD40L浓度中位数（上下四分位数）分别为[537.0（316.0，1134.0）pg/mL]、[316.0（190.0，546.0）pg/mL]和[167.0（107.5，478.0）pg/mL]，3组间sCD40L浓度差异均有统计学意义（P<0.05）。aMCI组血浆sCD40L浓度与MMSE得分呈负相关（r=-0.74，P<0.01）。结论 sCD40和sCD40L浓度水平在AD和aMCI患者血浆中异常增高，因此sCD40和sCD40L可作为AD的早期检测指标，并提示CD40-CD40L信号可能参与AD的发生发展。
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尿毒症患者血浆中可溶性CD40水平的变化及其临床意义
目的:检测可溶性CD40(sCD40)在尿毒症患者血浆中的水平并探讨其临床意义.方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20例尿毒症未透析患者(尿毒症组)、20例血液透析患者(血液透析组)和20例正常对照者(对照组)血浆标本中sCD40的浓度,分析sCD40与血肌酐(Scr)和C-反应蛋白(CRP)的相关性,并观察血液透析对sCD40的影响.结果:尿毒症组和血液透析组sCD40水平均明显高于对照组(P<0.01),血液透析组sCD40水平较尿毒症组升高(P<0.01).尿毒症组sCD40水平与Scr、CRP之间成正相关(P<0.01,P<0.05),血液透析组sCD40水平与上述指标之间无明显相关性(P>0.05).一次血液透析过程,透析前、后sCD40水平差异无显著性(P>0.05).结论:尿毒症患者血浆中sCD40水平升高,血液透析患者更明显,有可能参与尿毒症的免疫异常.
关键词： 尿毒症 血液透析 可溶性CD40 CD40/CD40配体 -
子痫前期患者血清sCD40及其配体含量与肾功能损伤的相关性研究
目的:探讨子痫前期患者血清sCD40及其配体含量与肾功能损伤的相关性.方法:收集本院收治的子痫前期患者68例,分为轻度子痫前期组38例、重度子痫前期组30例,另取同期在本院进行产检的健康孕妇57例作为对照组.采用ELISA检测血清可溶性CD40(sCD40)及其配体(sCD40L)以及肾损伤指标的含量;采用全自动生化分析仪检测肾功能指标的含量;采用彩色多普勒超声仪检测肾主动脉血流动力学参数.结果:重度子痫前期组、轻度子痫前期组血清中sCD40、sCD40L、BUN、β2-MG、Scr、Cys C的含量以及尿液中KIM-1、NGAL的含量均显著高于对照组且重度子痫前期组血清中sCD40、sCD40L、BUN、β2-MG、Scr、Cys C的含量以及尿液中KIM-1、NGAL的含量均显著高于轻度子痫前期组;重度子痫前期组、轻度子痫前期组AT、RI水平高于对照组,Vs、Vd水平低于对照组且重度子痫前期组AT、RI水平高于轻度子痫前期组,Vs、Vd水平低于轻度子痫前期组;子痫前期患者血清sCD40、sCD40L含量与肾功能损伤严重程度具有相关关系.结论:子痫前期患者血清中sCD40、sCD40L含量显著升高且与患者肾功能损伤程度具有相关关系,能够用于肾损害程度的评估.
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可溶性CD40在肝病患者血清中的表达及其临床意义
目的: 研究可溶性CD40(soluble CD40, sCD40)在急性肝炎、重型肝炎和原发性肝癌患者血清中的表达, 探讨其与生化指标和疾病预后的关系.方法: 使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测急性肝炎(49例)、重型肝炎(22例)和原发性肝癌(13例)患者入院次日清晨空腹血清标本和健康体检者(44例)血清标本中sCD40浓度, 分析其与急性肝炎患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的关系, 并初步探讨sCD40水平与重型肝炎患者疾病预后的关系.流式细胞术检测患者血清sCD40与CD40配体(CD40L)的结合活性.结果: 三种肝脏疾病患者血清中sCD40水平(149.70±86.82) pg/mL较健康对照组(47.33±27.49) pg/mL显著升高(P＜0.001), 但各组患者之间无统计学意义(P=0.475).重型肝炎死亡患者血清sCD40浓度较存活患者显著升高(P＜0.05).急性肝炎患者血清sCD40浓度与ALT、 AST水平呈显著正相关(r=0.50, P＜0.001; r=0.47, P＜0.01).体外实验显示患者血清sCD40具有与CD40L结合的活性.结论: 肝脏疾病患者血清异常高表达sCD40, 这是评价急性肝细胞损伤的辅助指标, 有助于判断重型肝炎患者的病情和预后.CD40-CD40L作用可能参与了肝细胞损伤和免疫失调的病理过程.
