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MicroRNA-940在乳腺癌中的表达变化及作用机制
目的 探讨microRNA-940(miR-940)在乳腺癌组织和细胞中的表达以及对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及其相关分子机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测2016年1月～2017年1月我院手术切除的78例患者的乳腺癌组织、癌旁组织和人乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231、BT-549及人正常乳腺细胞系MCF-10 A中miR-940的表达情况.在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中利用脂质体LipofectaminsTM 2000转染miR-940模拟物上调miR-940的表达,CCK-8实验检测细胞增殖活性的改变,小室侵袭及迁移实验(transwell)检测细胞侵袭、迁移能力的改变.生物学信息法预测miR-940的可能作用靶基因,双荧光素酶报告实验检测miR-940与CXC趋化因子受体2(CXCR2)的3'UTR区结合情况,Western blotting检测miR-940对CXCR2蛋白表达的影响.结果 miR-940在乳腺癌组织和细胞中表达明显降低(P＜0.01),并且miR-940的表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关(P＜0.01).上调MDA-MB-231细胞miR-940表达后,细胞的增殖活性明显下降(P＜0.01),侵袭及迁移能力明显下降(P＜0.01).双荧光素酶报告显示,miR-940可与CXCR2的3'UTR区特定序列结合显著抑制荧光素酶活性(P＜0.01),上调miR-940后细胞中CXCR2蛋白的表达均明显下降(P＜0.01).结论 miR-940在乳腺癌中的表达降低,miR-940可以通过靶向CXCR2抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力.
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中药白疕合剂对HaCaT细胞CXCR2蛋白表达及TNF-α诱导的HaCaT细胞IL-6表达的影响
目的:观察中药白疕合剂对人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)CXC趋化因子受体2(CXCR2)蛋白表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的HaCaT细胞分泌白细胞介素(IL)-6和IL-6 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制.方法:用白疤合剂干预HaCaT细胞,Western-blot检测CXCR2蛋白表达;用白疕合剂干预TNF-α诱导的HaCaT细胞,ELISA检测IL-6分泌量,RT-PCR检测IL-6 mRNA表达.结果:白疤合剂中、高剂量组对CXCR2蛋白的表达有明显的抑制作用;白疕合剂低、中、高剂量组对IL-6分泌量和IL-6 mRNA表达均有明显的抑制作用且呈浓度依赖性.结论:白疕合剂可能通过抑制IL-6分泌,降低IL-6 mRNA、CXCR2蛋白表达发挥对银屑病的治疗作用.
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溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的 CINC-1及其受体CXCR2表达的作用
目的 探讨溃结灵对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠黏膜的中性粒细胞趋化因子-1(cytokine-induced neutrophil chemoattractant-1,CINC-1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXC chemokine receptor 2,CXCR2)表达的作用.方法 90只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾迪莎组、溃结灵高剂量组、溃结灵中剂量组和溃结灵低剂量组,共6组,每组15只.用5%2,4,6-三硝基苯璜酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBs)灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型.造模成功后,除正常组外,各组分别给予生理盐水0.33 mL、艾迪莎0.125 g*kg-1*d-1、溃结灵高(18.3 g*kg-1*d-1)、中(9.2 g*kg-1*d-1)、低(4.6 g*kg-1*d-1)剂量处理,7 d后处死动物.肉眼观察结合显微镜观察对结肠组织形态学评分;运用荧光定量PCR法及免疫组化染色法分别检测各组大鼠CINC-1及CXCR2 mRNA及其蛋白表达.结果 溃结灵具有明确改善大鼠UC的效应,与艾迪莎组相比,溃结灵高剂量组的疗效差异无统计学意义(P>0.05),中、低剂量组的疗效差异有统计学意义(P<0.01);与正常组相比,模型组CINC-1及CXCR2 mRNA及蛋白质表达呈明显上升趋势(P<0.05),与炎症呈正相关;经过溃结灵和艾迪莎干预后,随着炎症改善,CINC-1及CXCR2 mRNA及其蛋白表达呈下降趋势.结论 溃结灵可能通过干预CINC-1及CXCR2的表达来抑制中性粒细胞趋化,从而达到缓解TNBs诱导溃疡性结肠炎的效应.
关键词： 溃结灵 溃疡性结肠炎 中性粒细胞趋化因子-1 CXC趋化因子受体2 -
血清IL-8 CXCR1 CXCR2表达与2型糖尿病视网膜病变的相关性研究
目的 检测2型糖尿病视网膜病变患者血清白细胞介素-8(IL-8)、CXC趋化因子受体1(CXCR1)及CXC趋化因子受体2(CXCR2)的表达水平,并探究其与视网膜病变的关系.方法 选取2015年1月至2016年5月诊治的2型糖尿病视网膜病变患者61例为研究组,并根据分期标准将其分为增殖性视网膜病变(PDR)35例与非增殖性视网膜病变(NPDR)26例.另选取同期进行体检的健康人员55例设为对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组血清IL-8、CXCR1、CXCR2?mRNA表达水平,Western?blotting法检测CXCR1、CXCR2蛋白表达水平,测定并观察患者临床指标即空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,Pearson法分析IL-8、CXCR1、CXCR2的相关性及其与患者临床指标的相关性,采用Logistic回归分析影响2型糖尿病视网膜病变的相关因素.结果 与对照组比较,研究组患者血清IL-8与CXCR1、CXCR2?mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),且PDR组显著高于NPDR(P<0.05);Western?blotting分析结果显示研究组CXCR1、CXCR2蛋白表达显著高于对照组(P<0.05);研究组患者FPG、TC、LDL-C、TG与HbAlc均显著高于对照组(P<0.05);Pearson法分析结果显示CXCR1、CXCR2均与IL-8呈显著正相关,IL-8、CXCR2均与FPG、TC、LDL-C及HbAlc呈显著正相关(P<0.05),CXCR1与FPG、TG、TC呈显著正相关(P<0.05);Logistic多元回归分析结果显示IL-8、CXCR1、CXCR2均为2型糖尿病视网膜病变的危险因素.结论 2型糖尿病视网膜病变患者血清IL-8、CXCR1、CXCR2均呈高表达,且均与视网膜病变发生发展密切相关.
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肿瘤坏死因子对于骨髓基质干细胞CXCR2表达的影响
目的：观察肿瘤坏死因子( TNF-α)对于大鼠骨髓基质干细胞( MSCs)表达CXCR2的影响。方法采用有利于MSCs生长及增殖的全骨髓贴壁法分离及培养干细胞；成骨、成脂诱导检测其分化特性。采用TNF-α干预MSCs细胞培养。细胞分为：对照组、低剂量组(5 ng/mL)和高剂量组(10 ng/mL)。选取P3代细胞,培养10天后提取蛋白,Western blot分析MSCs表达CXCR2变化。结果所培养的 MSCs 成骨、成脂诱导后染色均阳性,证实所培养的即为MSCs细胞。提高培养液中TNF-α的浓度,则MSCs表达CXCR2的量显著增加,差异具有统计学意义。结论 TNF-α能够刺激MSCs表达CXCR2增加,这可能是急性肺损伤时, MSCs细胞动员和定植的机制之一。
关键词： CXC趋化因子受体2 骨髓基质干细胞 肿瘤坏死因子-α -
巨噬细胞炎性蛋白2及其受体在假体无菌性松动周围组织及外周血中的表达及临床意义
[目的]通过与正常髋关节患者比较,探讨人工髋关节置换术后假体无菌性松动周围组织及外周血中炎性因子巨噬细胞炎性蛋白2(Chemokine(C-X-C motif) ligand 2,CXCL2)及其受体CXC趋化因子受体2(C-X-Cchemokine receptor type 2,CXCR2)的表达变化,分析其与无菌性松动间的关系.[方法]以2008年1月～2013年1月22例人工髋关节置换术后假体无菌性松动行人工髋关节翻修术患者作为试验组,20例因其他原因行人工髋关节翻修术患者作为对照组.两组患者年龄及性别比较,差异无统计学意义(P＞0.05).取两组患者清晨空腹抗凝外周血,以及髋关节翻修术时取假体(或)骨周围组织,采用荧光定量PCR、Western blot以及ELISA法检测CXCL2、CXCR2基因mRNA、蛋白的表达程度及其浓度.免疫组化染色检测CXCL2、CXCR2在组织中表达.[结果]荧光定量PCR检测示,试验组CXCL2基因mRNA在外周血及周围组织中相对表达量(2-△△Ct)分别为(18.39±1.11),(8.07±1.18),显著高于对照组的(1.00±0.18)(t=119.47,P＜0.01)及(1.00±0.02) (t=45.50,P＜0.01).CXCR2基因mRNA在外周血及周围组织中相对表达量(2-△△Ct)分别为(18.51±1.45),(8.40±1.02),显著高于对照组的(1.00±0.09) (t=91.87,P＜0.01)及(1.00±0.02) (t=55.40,P＜0.01).Western blot检测示,试验组CX-CL2蛋白在外周血及周围组织中相对表达比分别为(0.41±0.13), (0.97±0.24),显著高于对照组的(0.17±0.07)(t=12.83,P＜0.01)及(0.37±0.09)(t=17.947,P＜0.01).试验组CXCR2蛋白在外周血及周围组织中相对表达比分别为(0.96±0.30), (1.15±0.29),显著高于对照组的(0.64±0.20)(t=6.91,P＜0.01)及(0.52±0.10) (t=15.38,P＜0.01).ELISA检测外周血CXCL2浓度示,试验组为(3.26±0.59) ng/ml,显著高于对照组的(1.69±0.40) ng/ml(=17.11,P＜0.01).免疫组化染色显示松动的假体周围组织中CXCL2、CXCR2表达均显著高于对照组.[结论] CXCL2和CXCR2表达增高可能与人工髋关节置换术后假体无菌性松动有关.
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CXCL1在乳癌MCF-7细胞上皮-间质转化中作用
目的 探讨趋化因子CXC型趋化因子配体1(CXCL1)对人乳癌细胞MCF-7迁移能力和上皮-间质转化(EMT)的影响及其机制.方法 体外培养人乳癌细胞MCF-7,分为对照组、CXCL1处理组、CXC趋化因子受体2(CXCR2)抑制剂组,应用CCK8方法检测各组细胞增殖活性,以ELISA法检测各组细胞E-cadherin、Vimentin、p-PI3K、p-AKT蛋白表达,RT-PCR方法检测E-cadherin、Vimentin mRNA表达.结果 CCK8检测结果显示,与对照组比较,CXCL1处理组细胞增殖活性升高(F=58.89,q=8.96,P＜0.01),CXCR2抑制剂组细胞增殖活性降低(q=6.31,P＜0.05).RT-PCR结果显示,与对照组相比较,CXCL1处理组E-cadherin mRNA表达下调(t=4.07,P＜0.01),Vimentin mRNA表达上调(t=3.62,P＜0.05).ELISA检测结果显示,与对照组比较,CXCL1处理组E-cadherin蛋白表达下调(F=8.95,q=2.02,P＜0.05),Vimentin蛋白表达上调(F=111.50,q=14.48,P＜0.01),CXCR2抑制剂组E-cadherin表达上调(q=2.04,P＜0.05),Vimentin蛋白表达下调(q=6.08,P＜0.05);与对照组比较,CXCL1处理组PI3K、PAKT蛋白表达明显升高(F=60.35、28.15,q=10.52、5.37,P＜0.01),CXCR2抑制剂组细胞内p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低(q=4.65、4.97,P＜0.05).结论 乳癌细胞可能通过CXCL1/CXCR2轴活化PI3K/AKT信号通路发生EMT.
关键词： CXC型趋化因子配体1 CXC趋化因子受体2 乳房肿瘤 上皮-间质转化 迁移 -
神经干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠CXC趋化因子1和2及其趋化因子受体2表达的影响
目的 探讨神经干细胞( NSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注损伤梗死区CXC趋化因子1(CXCL1)和CXC趋化因子2(CXCL2)及CXC趋化因子受体2(CXCR2)表达的影响.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,实验动物随机分为假手术组、模型组和NSCs组.NSCs组尾静脉注射PKH26 标志的NSCs细胞悬液,缺血72 h后行神经功能损害评分(NSS),2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测脑梗死体积,苏木精-伊红(HE)染色观察梗死区病理变化,Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测梗死区CXCL1、CXCL2、CXCR2蛋白和mRNA表达.结果 脑缺血后72 h,模型组和NSCs组NSS评分和脑梗死体积高于假手术组(P＜0.05)；NSCs组NSS评分和脑梗死体积低于模型组(P＜0.05).HE染色可见模型组梗死区大量炎性细胞浸润,而NSCs组梗死区炎性细胞浸润较少；NSCs组在梗死区有红色荧光信号表达,而假手术组和模型组未发现红色荧光信号.模型组CXCL1、CXCL2、CX-CR2蛋白和mRNA相对表达高于假手术组(P ＜0.05);NSCs组CXCL1、CXCL2、CXCR2蛋白和mRNA相对表达低于模型组(P＜0.05).结论 NSCs移植具有促进脑缺血损伤神经功能恢复和减少脑梗死体积的作用,其机制可能与其下调炎症趋化因子CXCL1、CXCL2及其受体CXCR2表达、进而抑制炎症反应有关.
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CXC趋化因子受体2和白细胞介素-22结合蛋白联合表达及其在胃癌进展中的作用
目的 探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)和白细胞介素-22结合蛋白(IL-22BP)在胃腺癌表达及两者之间的关系在胃腺癌中的作用.方法 通过免疫组织化学和聚合酶链反应(PCR)序列检测112例胃腺癌中CXCR2和IL-22BP蛋白的联合表达,并分析临床意义.结果 与无癌组织比较,胃腺癌中分别为82例的CXCR2及85例IL-22BP蛋白过表达,且均大部分在细胞质中表达.64例CXCR2及60例IL-22BP mRNA水平呈现共表达.两者蛋白联合表达及CXCR2和IL-22BP阳性表达与pTNM分期、淋巴结转移、肿瘤浸润深度明显相关,差异有统计学意义(P＜0.05).相对于阴性表达,Kaplan-Meier法分析认为蛋白表达的患者具有较差的总生存期.结论 CXCR2和IL-22BP参与到更复杂的机制及作用中,在进展期胃腺癌中是预后较差的预测指标.
关键词： CXC趋化因子受体2 白细胞介素-22结合蛋白 胃癌
