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  • 中性粒细胞胞外诱捕网与糖尿病足溃疡的研究进展

    作者:何秀娟;林燕;李萍

    中性粒细胞活化后形成中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)发挥捕获和消灭病原体作用,这是固有免疫的重要发现.NETs是把双刃剑,过多或持续存在的NETs可导致糖尿病足溃疡创面愈合迟缓.

  • 尿毒症血液透析患者中性粒细胞胞外诱捕网水平与冠状动脉疾病的关系

    作者:刘娜娜;姜文

    目的:探讨尿毒症血液透析患者中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)水平与冠状动脉疾病(CAD)的关系.方法:选择2010年1月至2015年12月,榆林市第一医院肾病科接受血液透析的尿毒症患者96例.根据检查结果将患者分为无CAD发生组(n=60)和CAD发生组(n=36).记录所有入组患者的临床资料,采用Spearman秩相关性分析分析尿毒症血液透析患者NETs水平与其他临床指标的相关性.应用单因素、多因素非条件Logistic回归分析尿毒症患者各临床因素与CAD的关系.结果:CAD发生组在年龄、有糖尿病史例数、白细胞计数、中性粒细胞计数、尿素氮、血肌酐、TC、C反应蛋白、NETs、透析龄、血磷、钙磷乘积、收缩压、PTH、CACS方面显著高于无CAD发生组(P<0.05).NETs水平与年龄、白细胞计数、中性粒细胞计数、C反应蛋白、透析龄、CACS呈正相关(P<0.05).单因素、多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、有糖尿病史、白细胞计数、中性粒细胞计数、C反应蛋白、NETs、透析龄、CACS与CAD发生密切相关(P<0.05).结论:尿毒症血液透析患者NETs水平与CAD发生密切相关,可作为预测CAD发生的危险性因素.

  • 小鼠脓毒症模型外周血和肺组织原位中性粒细胞胞外诱捕网的检测

    作者:张玥;韩俊燕;李国力;贾蓓;曾辉;朱鏐娈

    目的:本研究旨在通过体内和体外实验建立在小鼠脓毒症模型中检测中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的方法,并初步探讨其与脓毒症肺组织损伤的相关性。方法采用盲肠结扎穿孔手术建立脓毒症小鼠模型,以假手术小鼠作为对照组。术后7 d,采用PicoGreen?染料定量检测小鼠血浆游离DNA,采用髓过氧化物酶(MPO)-DNA ELISA检测小鼠外周NETs复合物的形成,反映NETs生成量。对脓毒症小鼠的肺组织进行病理分析,反映肺组织损伤情况。采用免疫荧光染色法对肺组织原位的NETs形成情况进行鉴定。结果与对照组相比,脓毒症小鼠血浆中游离DNA含量(1650 ng/ml)显著升高(t =21.91,P =0.0021)。MPO-DNA复合物水平(4.85倍)也显著升高(t =15.40,P=0.0042)。脓毒症小鼠的肺组织可见明显损伤,免疫荧光检测显示脓毒症小鼠肺部的NETs形成增加。结论在小鼠中建立了稳定的NETs形成情况鉴定方法,且肺部NETs形成增加是脓毒症模型小鼠肺组织损伤的原因之一。

  • 建立体外诱导和检测中性粒细胞胞外诱捕网的方法

    作者:朱鏐娈;张玥;李国力;梁顺涛;郝禹;李蕊;曾辉

    目的:建立体外诱导和检测中性粒细胞胞外诱捕网的方法,旨在研究中性粒细胞胞外诱捕网(NET)产生和调节的机制。方法分离正常人外周血中性粒细胞,通过内毒素(LPS)和白细胞介素-8(IL-8)体外诱导NET产生。采用免疫荧光染色和激光共聚焦显微成像定性评价NET生成;采用PicoGreen?染料定量检测细胞上清游离DNA,反映NET生成量。结果 LPS体外刺激中性粒细胞3 h后,与对照组相比,产生大量胞外网状结构(NET),该结构包含DNA、组蛋白和髓过氧化物酶(MPO)成分;同时细胞上清中游离DNA(NET)含量显著升高(P<0.01)。采用IL-8体外刺激中性粒细胞3 h,与上述结果相似(P<0.05)。结论建立了体外诱导和定性、定量检测NET的方法,二者结合能更好地评价NET的产生。

  • 中性粒细胞胞外诱捕网在小鼠溃疡性结肠炎模型外周血和肠组织中的表达及意义

    作者:田佳雯;孙梅

    目的 探讨中性粒细胞胞外诱捕网( neutrophil extracellular traps,NETs)在小鼠溃疡性结肠炎模型中的表达及与肠道屏障功能损伤程度的相关性.方法 采用清洁级雄性Balb/c小鼠60只,随机分为正常组(n=30)和模型组(n=30).通过葡聚糖硫酸钠建立溃疡性结肠炎模型,并于造模后1、3、5 d留取肠组织及血液样本(每个时间点10只).通过观察小鼠疾病活动指数及常规病理学观察,反映肠组织损伤情况.采用PicoGreen?染料定量检测小鼠血浆游离DNA,免疫组织化学方法 观察肠组织中NETs主要组成成分髓过氧化物酶和瓜氨酸化组蛋白的表达及定位,Western blot方法 检测紧密连接蛋白(Claudin-1)的表达水平.结果 与正常组相比,造模后1、3、5 d结肠组织炎症活动指数DAI值均显著上升(P均<0. 05).血浆中游离DNA含量均显著升高(P均<0. 05).免疫组织化学检测可见模型组NETs形成增加,且随病情逐渐恢复,其含量呈逐渐下降的趋势. Western blot检测发现模型组Claudin-1表达下降(P均<0. 05),且随病情逐渐恢复,其含量呈逐渐上升的趋势.结论 在溃疡性结肠炎小鼠模型中,NETs形成增加,且NETs的形成增加与肠屏障功能损伤相关.

  • NETs与脓毒症及其凝血功能障碍的研究进展

    作者:王力军;王镜媛;郭菲;刘艳存;柴艳芬

    中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是中性粒细胞受到某种刺激后释放到胞外的一种网状结构.多种中性粒细胞受体(Toll样受体)参与NETs的形成.其通过"beneficial" suicidal NETosis和vital NETosis两种方式释放,受还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶和脱氧核糖核酸酶1等物质调节. NETs中的染色质(组蛋白)、酶类(髓过氧化物酶)产生局部高浓度的"抗微生物颗粒"等,在脓毒症杀菌过程中发挥重要作用.血小板通过P选择素与中性粒细胞P选择素糖蛋白配体1及蛋白酶活化受体相互作用,诱发NETs形成,NETs失控可激活、聚集血小板,同时导致组织、内皮损伤和血栓形成.未来,NETs将为脓毒症的治疗提供新方向.

  • 脓毒症患者中性粒细胞胞外诱捕网的水平及临床意义:附一项前瞻性观察性研究

    作者:张芳晓;章志丹;马晓春

    目的 探讨脓毒症患者血浆中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)水平的变化及其在早期诊断方面的临床价值.方法 采用前瞻性观察性研究方法,选择2014年11月至2015年2月中国医科大学附属第一医院重症医学科收治的年龄>18岁、预计重症加强治疗病房(ICU)住院时间>24 h的外科术后患者,根据1991年脓毒症诊断标准将患者分为非脓毒症组及脓毒症组;以同期健康体检者作为健康对照组.于患者入ICU后1 h取外周静脉血3 mL,健康体检者取清晨空腹血;应用荧光酶标仪检测血浆游离DNA(cf-DNA/NETs)水平,同时测定外周血白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比例(NEU)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP),并计算急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分及序贯器官衰竭评分(SOFA).应用Spearman相关分析法判定脓毒症患者血浆NETs水平与各影响因素的相关性.受试者工作特征曲线(ROC)分析cf-DNA/NETs和WBC对脓毒症的诊断价值.结果 入选脓毒症患者23例,非脓毒症患者20例,健康对照者22例;3组间性别、年龄比较差异均无统计学意义,说明基线资料均衡可比.脓毒症组血浆cf-DNA/NETs明显高于非脓毒症组和健康对照组(μg/L:453.44±185.37比188.35±29.66、203.83±43.25,均P<0.05),后两组间差异无统计学意义(P>0.05).脓毒症组WBC、NEU、PCT、CRP、APACHEⅡ评分及SOFA评分均较非脓毒症组明显升高〔WBC(×109/L):9.52±5.51比5.97±2.28,NEU:0.787±0.110比0.655±0.067,PCT(mg/L):7.14(3.60,13.29)比6.07(3.57,7.91),CRP(mg/L):64.44±13.14比27.00±19.47,APACHEⅡ(分):10.25±4.92比6.00±1.22,SOFA(分):6.0±5.1比5.0±1.2,均P<0.05〕.相关性分析显示,脓毒症患者NETs水平与性别、年龄、WBC、NEU、PCT、CRP、APACHEⅡ评分及SOFA评分均无相关性(r值分别为0.322、0.262、0.194、0.312、0.227、0.454、0.433、0.333,均P>0.05).血浆cf-DNA/NETs诊断脓毒症的ROC曲线下面积(AUC)为0.981,当血浆cf-DNA/NETs>257.96μg/L时敏感度为91.3%,特异度为95.2%,约登指数为0.865.WBC诊断脓毒症的AUC为0.663,当WBC>6.0×109/L时敏感度为78.3%,特异性为25.0%.结论 脓毒症患者NETs水平明显升高;较传统指标WBC相比,血浆NETs对脓毒症诊断有较好的优势,可以作为早期诊断脓毒症的生物标志物.

  • 中性粒细胞胞外诱捕网与脓毒症凝血功能障碍的研究进展

    作者:张芳晓;章志丹;马晓春

    中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是由中性粒细胞核内组分释放到细胞外形成的一种网状纤维结构,可由多种病原体或药物刺激中性粒细胞产生,具有限制病原体扩散、分泌杀菌蛋白等多种作用.NETs不仅可以加强中性粒细胞与血液的黏附,促进血小板介导的促凝反应,同时可以造成内皮细胞损伤,导致脓毒症凝血功能障碍发生.除此之外,NETs也在静脉血栓形成等病理生理过程中发挥了重要作用.因此,NETs可能成为评价脓毒症凝血功能障碍程度的生物学标志物,以及减轻脓毒症凝血功能障碍的潜在治疗靶点.

  • 肝素预处理对脓毒症小鼠血清及肺组织中性粒细胞胞外诱捕网水平的影响

    作者:蒋静;穆盛田;张芳晓;乔艳婷;吴永然;章志丹;马晓春

    目的 探讨肝素预处理对脓毒症小鼠血清及肺组织中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响及其作用机制.方法 按随机数字表法将雄性C57BL/6J小鼠分为对照组、模型组、肝素干预组,每组30只.腹腔注射脂多糖(LPS)30 mg/kg(溶于100μL生理盐水)建立脓毒症动物模型;肝素干预组于制模前30 min皮下注射普通肝素8 U(溶于20μL生理盐水).各组于制模后6 h取血清和肺组织,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及反映NETs水平的组蛋白2AX(H2AX)和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE);用PicoGreen荧光染料检测血清游离DNA(cf-DNA/NETs)水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织H2AX、NE蛋白表达.结果 模型组血清TNF-α、IL-6、H2AX、NE、cf-DNA/NETs水平及肺组织H2AX、NE蛋白表达均明显高于对照组〔TNF-α(ng/L):133.0±14.1比2.7±1.0,IL-6(ng/L):3911.2±189.2比298.9±52.5,H2AX(ng/L):545.5±40.0比21.9±8.3,NE(μg/L):6.48±0.12比0.47±0.15,cf-DNA/NETs(μg/L):846.3±137.5比152.7±36.4,H2AX蛋白(灰度值):1.14±0.09比0.68±0.04,NE蛋白(灰度值):0.56±0.03比0.32±0.04,均P<0.05〕.肝素预处理能明显降低脓毒症小鼠血清TNF-α、H2AX、NE、cf-DNA/NETs水平及肺组织H2AX、NE蛋白表达〔TNF-α(ng/L):83.2±7.6比133.0±14.1,H2AX(ng/L):435.0±39.0比545.5±40.0,NE(μg/L):4.26±0.17比6.48±0.12,cf-DNA/NETs(μg/L):606.5±73.9比846.3±137.5,H2AX蛋白(灰度值):0.91±0.03比1.14±0.09,NE蛋白(灰度值):0.42±0.03比0.56±0.03,均P<0.05〕,而对血清IL-6水平无明显影响(ng/L:3919.9±166.6比3911.2±189.2,P>0.05).结论 肝素预处理能降低脓毒症小鼠血清及肺组织中NETs水平,可能是对脓毒症发挥器官保护作用的潜在机制.

  • 肝素减轻中性粒细胞胞外诱捕网诱导的内皮细胞损伤

    作者:乔艳婷;蒋静;章志丹;马晓春

    目的 明确中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对内皮细胞的损伤作用,探讨肝素能否减轻NETs诱导的内皮细胞损伤,发挥对内皮细胞的保护作用.方法 提取健康志愿者外周血,利用Percoll-Histopaque密度梯度离心法提取中性粒细胞(PMN),应用佛波酯(PMA)刺激PMN产生NETs,用免疫荧光染色联合荧光酶标仪对NETs进行定性及定量检测.用提取到的NETs诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并分别加入重组DNA水解酶(rhDNase)拮抗及肝素干预,6 h后应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各组HUVEC活性.结果 PMA刺激PMN可以产生NETs,免疫荧光染色显示在PMN周围可形成网状结构.荧光酶标仪检测显示,与对照组比较,经PMA刺激的PMN上清液中游离DNA含量(μg/L)显著增加(2 h:119.62±14.83比24.27±0.67,4 h:146.67±21.24比28.35±2.98,均P<0.05).应用NETs诱导HUVEC,随着NETs含量的增加内皮细胞抑制率逐渐上升,加入rhDNase后,NETs诱导的内皮细胞抑制率可被拮抗〔10、20、30μg/L NETs时内皮细胞抑制率分别为:(8.65±0.51)%比(10.99±0.35)%,(14.85±0.43)%比(16.85±0.49)%,(26.06±3.51)%比(27.54±0.62)%,均P<0.05〕.在NETs诱导内皮细胞损伤后,加入0.01、0.1、1和10 kU/L肝素可明显降低细胞抑制率,且呈剂量依赖趋势,10μg/L NETs时内皮细胞抑制率分别为(8.96±0.70)%、(5.32±1.36)%、(0.70±0.30)%、(0.75±0.20)%比(10.99±0.35)%,20μg/L NETs时内皮细胞抑制率分别为(15.57±0.62)%、(13.28±0.65)%、(6.91±0.15)%、(5.86±0.17)%比(16.85±0.49)%,30μg/L NETs时内皮细胞抑制率分别为(30.49±0.74)%、(29.41±1.41)%、(23.45±0.75)%、(21.72±1.52)%比(27.54±0.62)%,且1 kU/L和10 kU/L的肝素对所有浓度NETs诱导内皮细胞抑制均有改善作用,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NETs能够诱导内皮细胞损伤,且NETs含量越高细胞损伤程度越重;肝素能够减轻NETs诱导的内皮细胞损伤,可能是肝素内皮细胞保护及改善脓毒症器官功能损伤作用的一种潜在机制.

  • 百草枯体外诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网形成的实验研究

    作者:金卫;陆健;谢晖;蒋逸群;孟潇潇;朱勇;王瑞兰

    目的 探讨百草枯(PQ)能否诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的形成.方法 分离健康者外周血中性粒细胞,苏木素-伊红(HE)染色后进行细胞鉴定;分别采用浓度为0(对照)、200、400、600、800、1 000、1 200 μmol/L的PQ溶液处理细胞,建立PQ中毒的体外模型,应用CCK-8细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒检测细胞存活率,选择半数致死量的PQ浓度作为实验干预点.根据细胞活性检测结果进行细胞染毒(PQ染毒组),以未染毒细胞作为对照.采用免疫荧光染色显微成像定性鉴定NETs形成情况;采用PicoGreen核酸定量分析试剂盒检测细胞上清中游离DNA含量;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞上清中瓜氨酸化组蛋白3 (H3Cit)、髓过氧化物酶(MPO)的蛋白表达.结果 HE染色鉴定中性粒细胞纯度约95%;经不同浓度PQ建立中毒体外模型后发现,PQ浓度为800 μmol/L时细胞存活率为(58±2)%,以该半数致死量作为实验干预点.免疫荧光定性观察显示,对照组中性粒细胞仅有少量H3Cit及MPO表达,无NETs形成;而800 μmol/L PQ可以刺激中性粒细胞产生由DNA、H3Cit和MPO形成的NETs.定量结果显示,与对照组比较,PQ染毒组细胞上清中游离DNA含量显著升高(μg/L:2235±462比561±87,P<0.01);且PQ染毒组细胞上清中H3Cit和MPO蛋白表达量均较对照组明显升高[H3Cit蛋白表达(灰度值):0.23±0.03比0.11±0.01,MPO蛋白表达(灰度值):0.47±0.05比0.21±0.04,均P< 0.05].结论 800 μmol/L的PQ可以诱导人外周血中性粒细胞形成NETs.

  • 补阳还五汤对中性粒细胞胞外诱补网形成的血栓溶解作用研究进展

    作者:程旭希;孙瑜;董倩楠;董鑫鑫;祁嘉莹

    补阳还五汤可减少脑缺血再灌注后脑梗死体积,并有助于缓解脑缺血的症状.近年来多用中药方剂预防或治疗心肌梗死、缺血性脑血管疾病和冠心病等一些心脑血管栓塞类疾病.补阳还五汤可以抑制血小板的聚集,保护血管内皮细胞,抑制凝血酶和相关蛋白的形成,抑制内皮因子的表达.中性粒细胞是人体中的一类免疫细胞,可以通过形成胞外诱捕网捕获病原微生物,并抑制其扩散、灭活产生的内毒素以及清除病原体,从而发挥抗菌活性,完成免疫应答.近年来,研究发现冠心病、心房颤动、感染性心内膜炎、深静脉血栓等疾病形成的血栓中,均有中性粒细胞胞外诱捕网发挥作用.其可以刺激血小板的聚集,激活内皮细胞启动凝血,增强凝血酶及凝血酶依赖的纤维蛋白生成,促进组织因子的生成,从而引起血栓的形成.故补阳还五汤对中性粒细胞胞外诱捕网形成的血栓具有溶解作用.本文将就补阳还五汤对中性粒细胞胞外诱捕网形成的血栓溶解作用研究做一综述.

  • 中性粒细胞胞外诱捕网促进类风湿关节炎血管新生的初步研究

    作者:孟海妹;焦亚冲;刘宜昕;万春友;邢冬红;马骏;郑芳

    目的:研究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对类风湿关节炎(RA)炎症尤其是血管新生的作用。方法取RA及骨关节炎(OA)患者的滑膜组织切片行组织免疫荧光染色,观察NETs在关节滑膜中的存在情况。分离健康人外周血中性粒细胞,刺激NETs形成,并提取NETs作为刺激剂。MTT评估NETs对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)及RA滑膜成纤维细胞(RAFLS)增殖的影响,分别对HUVECs组和RAFLS组处理如下:对照(等体积培养基);NETs (0.28 mg/L NETs)。细胞划痕实验评估NETs对HUVECs迁移能力的影响,分为3组:对照组、血管内皮生长因子组(40μg/L VEGF)和NETs组(0.28 mg/L NETs)。结果(1)与OA相比,RA滑膜组织中有较多的NETs存在。(2)体外培养的中性粒细胞刺激后可形成NETs,提取的NETs-DNA浓度为27.8 mg/(L·106细胞)。(3)MTT实验结果显示,分别与各自对照组相比,低浓度NETs(0.28 mg/L)可以促进HUVECs(0.499±0.011 vs.0.393±0.009,P<0.05)及RAFLS (0.266±0.007 vs.0.192±0.007,P<0.05)增殖。(4)划痕实验显示,低浓度NETs(0.28 mg/L)可促进血管内皮细胞迁移。结论 RA滑膜组织中有较多的NETs存在,低浓度NETs可以促进血管新生。

  • 血清淀粉样蛋白A诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成

    作者:苏慧慧;万春友;魏蔚;孟海妹;焦亚冲;邢冬红;郑芳

    目的 探究血清淀粉样蛋白A(SAA)能否在体外诱导中性粒细胞形成中性粒细胞胞外诱捕网(NETs).方法 建立稳定的体外诱导NETs形成方法,包括外周血中性粒细胞的分离、细胞体外培养、NETs的诱导和形态学观察.提取健康志愿者的外周血中性粒细胞,分为阴性对照(NC)组、SAA组和脂多糖(LPS)组,给予相应的刺激后,观察NETs的形成并计算百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中人组蛋白3(h3)的含量.结果 提取的外周血中性粒细胞纯度与细胞活力均在95%以上.显微镜下观察到部分细胞的细胞核失去原有核型,向外扩散形成网状,即NETs.与NC组相比,接受SAA刺激的中性粒细胞有更多的NETs形成(P<0.05).培养液上清中的h3含量显著高于NC组(P<0.05).结论 SAA可在体外诱导中性粒细胞形成NETs.

  • 类风湿关节炎患者血清中性粒细胞胞外诱捕网水平的检测及其意义

    作者:陈本露;钱龙;李向培;厉小梅;汪国生;陶金辉;谭悦

    目的 比较中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在RA患者与健康对照组血清中的水平的差异,以探讨其在RA中可能存在的作用.方法 用PicoGreen dsDNA染色结合荧光强度进行定量测45例RA患者和18名健康对照组血清中游离dsDNA/NETs,并分析与RA患者ESR,DAS28,抗CCP抗体等指标的相关性,同时分析使用DMARDs(32例)与未使用DMARDs(13例)RA患者血清中NETs差异.数据分析采用秩和检验或t检验,相关性分析用Pearson或Spearman相关分析.结果 ①RA患者血清中dsDNA/NETs [0.523 0(0.282 0,1.637 0)μg/ml]高于健康对照组[0.410 5(0.140 0,0.966 0)μg/ml],差异有统计学意义(Z=-2.419,P=0.016).②RA组患者血清中dsDNA/NETs的含量与ESR,DAS28评分呈正相关(r=0.357,P=0.016;r=0.325,P=0.029),而与抗CCP抗体无相关性(r=0.146,P=0.434).③RA患者中使用DMARDs组血清中dsDNA/NETs浓度[0.516 5(0.282 0,1.637 0)μg/ml]较未使用DMARDs组[0.523 0(0.369 0,1.485 0)μg/ml]低,但差异无统计学意义(Z=-1.215,P=0.225).结论 中性粒细胞可能通过一种新的死亡方式,即网捕死亡形成NETs,参与RA的发病,其高低可能与疾病的活动程度有关.

  • 肽酰基精氨酸脱亚胺酶4可能通过影响中性粒细胞胞外诱捕网的形成参与类风湿关节炎发病

    作者:陈本露;钱龙;李向培;厉小梅;汪国生;陶金辉;程琳

    目的 比较RA患者与健康对照肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)的表达、中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)水平,以探讨两者在RA中可能存在的作用及两者的关系.方法 RT-PCR检测43例RA、20名健康对照组中性粒细胞PAD4 mRNA表达水平,用PicoGreen dsDNA Quantitation Kits (Invitrogen)测其血清中游离dsDNA (cf-DNA)/NETs.并分析两者与RA患者ESR,DAS28,抗CCP抗体等指标的相关性.计量资料符合正态分布用(x)±s,不符合正态分布用M(P25,P75)表示,数据分析使用t检验或秩和检验,相关性分析用Pearson相关或Spearman相关分析.结果 ①RA组外周血中性粒细胞PAD4 mRNA[1.493(0.831,2.607)]表达水平高于健康对照组[0.631 (0.358,1.489)],差异有统计学意义(Z=-2.07,P=0.039),使用DMARDs(31例)[1.293 (0.576,2.430)]低于未用DMARDs(12例)[1.978 (1.407,5.646)],但差异无统计学意义(Z=-1.19,P=0.234);②RA患者血清中dsDNA/NETs的浓度(0.49±0.18) μg/ml高于健康对照组(0.25±0.12) μg/ml,差异有统计学意义(t=3.4,P=0.001).③相关性分析:RA组患者血清中dsDNA/NETs的含量与DAS28评分,ESR,CRP、PAD4 mRNA表达呈正相关(r=0.36,P=0.036;r=0.345,P=0.042;r=0.36,P=0.043;r=0.42,P=0.017),而与抗CCP抗体无相关性(r=0.277,P=0.154).结论 ①RA患者外周血中性粒细胞PAD4 mRNA表达显著增高,其可能在RA的发病和病理过程中起重要作用.②中性粒细胞可能通过一种新的死亡方式NETosis形成NETs参与RA的发病,其高低可能与疾病的活动程度有关.③PAD4可能通过参与NETs形成而影响RA的发病.

  • 中性粒细胞胞外诱捕网对单核细胞分泌炎症介质的影响

    作者:贾庆龄;杨琨;唐莎;张静波;袁发焕;张莹

    目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对单核细胞分泌炎症介质的影响.方法:采用健康人中性粒细胞体外诱导NETs形成,用该NETs刺激单核细胞,LEGENDplex人炎症因子试剂盒检测培养上清多种炎症介质的变化.结果:单核细胞与NETs共培养12 h后,NETs组与对照组相比,IL-1β诱生量分别为(97.60±60.11) pg/ml、<1.17 pg/ml,IFN-α诱生量分别为(208.90±77.38)pg/ml、<1.17 pg/ml,TNF-α诱生量分别为(218.88 ±86.27) pg/ml、<0.17 pg/ml,MCP-1诱生量分别为(1 063.25±740.01)pg/ml、(157.16 ±3.86)pg/ml,IL-6诱生量分别为(67.76±15.51) pg/ml、(2.76±0.47)pg/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05),IL-10、IL-12表达水平差异无统计学意义.结论:NETs能显著促进单核细胞分泌IL-1β、IFN-α、TNF-α、MCP-1、IL-6.

  • 脓毒症与凝血功能紊乱

    作者:刘一娜;马晓春

    脓毒症凝血反应是一柄“双刃剑”.早期凝血激活有助于感染的局限,但凝血活化与炎症反应相互作用,一旦超过机体的调控能力甚至转化为失控的弥漫性微血管内血栓形成可导致器官损害.血管内皮细胞在脓毒症时抗凝及纤溶功能受损,而促凝反应占优势.阻断过度的凝血-炎症反应可能对脓毒症治疗有益,血小板、中性粒细胞胞外诱捕网、微粒体和多糖包被在脓毒症凝血-炎症反应中的作用值得关注脓毒症抗凝治疗是否改善预后的关键在于选择合适的治疗对象及恰当的时机.

  • 固有免疫细胞在炎症性肠病发病机制中的作用

    作者:田佳雯

    炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一类慢性肠道炎症,包括克罗恩病(Crohn'sdisease)和溃疡性结肠炎(ucerative colitis)两种类型.IBD的发病机制目前尚不明确.研究表明,IBD的发生与各种原因引起的肠上皮屏障完整性破环导致细菌与环境相关抗原引发的免疫过表达密切相关,固有免疫是抵御各种病原微生物入侵的第一道防线,固有免疫细胞包括中性粒细胞、巨噬细胞、树突细胞及固有淋巴细胞等,在IBD的发生、发展及转归中发挥着重要作用.该文将对固有免疫细胞在IBD发病机制中的作用研究进展进行综述,以期为IBD的发病机制研究及临床治疗提供新的思路.

  • 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)及其在相关炎性疾病的研究进展

    作者:曹维嘉;邵子玮;段孟洮;高玲玲;张有成;徐小东

    中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是活化的中性粒细胞释放的去聚化染色质DNA和多种抗菌蛋白组成的纤维网状复合物.已有研究证实,NETs能够通过捕杀病原菌参与机体免疫应答,其形成方式和调节与白介素-8(IL-8)等促炎因子以及不同病原体的刺激密切相关.近有研究表明,炎性疾病发生时NETs还可以通过不同的作用机制加重或缓解疾病的进展.本文重点就NETs及其在相关炎性疾病中的新研究进展进行综述.

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