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  • 中药九节茶提取物对应激负荷小鼠免疫功能的改善作用

    作者:何蓉蓉;王敏;李怡芳;戴毅;段营辉;姚新生;粟原博

    目的:研究中药九节茶对束缚应激小鼠免疫功能的改善作用.方法:实验将雄性C_(57)BL/6小鼠分为正常对照组,应激对照组,125,500 mg·kg~(-1)九节茶提取物给药组,制备脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群、NK细胞和NKT细胞比例及数目.结果:与应激对照组相比,中药九节茶可以提高束缚应激小鼠脾脏淋巴细胞总数,改善T淋巴细胞亚群比例,同时增加脾脏NK细胞和NKT细胞比例及数目.结论:中药九节茶可以改善应激负荷小鼠淋巴细胞数目及淋巴细胞亚群比例.

  • 慢性移植物抗宿主病患者外周血NK细胞、NKT细胞的检测及意义

    作者:周茂华;王春苗;龚彩平;罗盈;张敏

    本研究探讨同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患者外周血NK细胞、NKT细胞与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的发生发展及与病情严重程度的相关性.回顾性研究广东省人民医院2001年3月~2009年9月64例allo-HSCT植入成功患者,无cGVHD发生21例,43例发生cGVHD,其中轻度cGVHD 15例,中度cGVHD 18例,重度cGVHD 10例.采用流式细胞术分析患者外周血NK细胞、NKT细胞在淋巴细胞中的百分比,结合全自动血常规分析仪测定的淋巴细胞数得到NK细胞、NKT细胞的绝对值,分析non-cGVHD组与cGVHD组间及不同分级状态下cGVHD组间的NK细胞及NKT细胞百分比和数量是否存在差异.结果表明:与non-cGVHD组相比,cGVHD患者NK细胞百分比和数量明显减低(P<0.05),NKT细胞在两组间差异无统计学意义;随着cGVHD分级程度的加重,NK细胞百分比和数量逐渐下降,重度cGVHD组与轻度cGVHD组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论:allo-HSCT患者外周血NK细胞与cGVHD的发生发展有密切关系,对该细胞的检测有助于cGVHD的早期诊断,并为临床评估cGVHD的病情严重程度提供依据,NKT细胞似不影响cGVHD的发生发展.

  • 脐血与外周血NKT细胞的体外扩增及其表型比较

    作者:刘嬿;范华骅;阮鸣;高跞;聂晓绚;杨懿铭;陆华中;高峰

    为了建立体外有效扩增脐血与外周血天然杀伤T细胞(NKT细胞)的方法并研究其表型的差异,分别采用单加IL-2及同时加IL-2和α-半乳糖神经酰胺(α-Galcer)的方法,从人脐血单个核细胞(UCB-MNC)和人外周血单个核细胞(PB-MNC)中扩增NKT细胞;用流式细胞检测技术测定NKT细胞(TCR Vα24+TCR Vβ11+)的比例及其它表型特征.结果显示:UCB-MNC在第7天时,其TCR Vαβ+NKT细胞的扩增量占淋巴细胞的(24.48±4.19)%,是原来的(8.74±4.37)×102倍(P<0.01),而且大多不表达NK1.1(CD161);TCR Vβ11+较TCRVα24+高表达;第14天时,PB-MNC中的TCR Vαβ+NKT细胞扩增量占淋巴细胞的(11.1±3.61)%,是原来的(3.72±2.01)×102倍(P<0.01),且NK1.1高表达,TCR Vβ11+与TCR Vα24+表达率基本一致.结论:α-Galcer对NKT细胞有特异的扩增功能,且脐血NKT的扩增效率较外周血高.以表型划分,脐血中的NKT细胞多为NK1.1-,而外周血多为NK1.1+,是一种新的NKT细胞亚型.

  • 小鼠NKT细胞在5型腺病毒感染所致肝损伤早期的免疫调节作用

    作者:虞涛;王佳;曾叶;宋娜;鲍连生;游上游

    目的 使用5型腺病毒(AdS)感染小鼠模型来研究肝脏NKT细胞(natural killer Tcell)在肝损伤早期的免疫调节机制.方法 C57BL/6小鼠尾静脉注射1.5×109PFU和3×109PFUAdS病毒以构建两个剂量组病毒感染的小鼠肝损伤模型,通过观察病毒感染后5 d内小鼠肝组织病理学及小鼠血清丙氨酸转氨酶/天门冬氨酸转氨酶(ALT/AST)水平改变来判断肝损伤程度,使用流式细胞术(FACS)分析感染5 d内肝单个核细胞亚群比例、NKT细胞表面FasL表达水平以及NKT细胞合成IL-4和IFN-γ水平的变化,应用RT-PCR检测小鼠肝内趋化因子及趋化因子受体表达水平.结果 高滴度(3×109 PFU)的AdS病毒感染小鼠1 d后,小鼠肝脏内NKT细胞明显增加,其表面FasL表达上调,肝脏NKT细胞合成IL-4和IFN-γ的水平明显增加,肝组织内淋巴细胞浸润明显;低滴度AdS病毒(1.5×109PFU)感染小鼠后,肝脏NKT细胞比例变化不明显,CD8+T细胞在肝脏的浸润明显弱于高滴度AdS病毒感染;RT-PCR检测结果 显示:3×109PFU AdS病毒感染2 d后,小鼠肝内活化后可调节的及正常的T细胞分泌的趋化因子(RANTES)、人干扰素诱导蛋白10(IP-10)以及巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1β表达增加,3d后相关趋化因子受体CCR5、CCR1、CXCR3表达上调.结论 NKT细胞在淋巴细胞向肝脏趋化的过程中起重要的作用,这种作用与病毒感染诱导NKT细胞合成IL-4和IFN-γ及上调其表面的FasL,从而促进肝细胞内IP-10、Mig等趋化因子的产生有关.

  • 中国HIV/AIDS患者NK细胞及NKT细胞变化的检测

    作者:姜拥军;尚红;张子宁;耿文清;刁莹莹;代娣;韩晓旭;张旻;王亚男;刘静;王树祥;苏艳丽;王琪

    目的探讨HIV感染后机体NK(natural killer cells)及NKT细胞的变化情况. 方法取外周血细胞,用标记荧光的抗体进行染色,流式细胞仪分析HIV/AIDS患者NK和NKT细胞的变化. 结果 HIV/AIDS患者NK、NKT细胞和CD4+ T细胞显著低于正常对照;CD8+ T细胞显著高于正常对照.HIV/AIDS患者NK百分数显著低于正常对照,与CD4+ T细胞数量成正比,r=0.289,P<0.01;NKT细胞数量与CD4+ T细胞数量成正比,r=0.378,P<0.01;与CD8+ T细胞数量成正比,r=0.340,P<0.01;长期不进展组NKT、NK细胞数量与正常对照组差异无显著性. 结论 HIV感染可明显降低HIV/AIDS患者NK和NKT细胞数量,NK和NKT细胞变化与疾病进展密切相关.

    关键词: HIV AIDS NK细胞 NKT细胞
  • 外周血异型淋巴细胞增高细胞免疫变化的探讨

    作者:陈伟雄

    目的 探讨异型淋巴细胞(异淋)增高的细胞免疫特点.方法 对44例外周血涂片异淋>2%的患者,应用流式细胞术检测外周血T细胞亚群、NK细胞、NKT细胞、T细胞.结果 44例异淋增高的患者血中CD3+CD4+、NKT明显降低,CD3+CD8+明显增高,当外周血出现大量异淋(>10%)时还存在CD4/CD8比例明显降低,T细胞增多(均P<0.05).结论 外周血中出现大量异淋时,机体内存在免疫功能紊乱.

  • NKT细胞在肝脏疾病中的作用

    作者:汤伯宗;高月求

    自然杀伤T细胞(natllral killer T cells.NKT细胞)是一种同时具有NK细胞和T细胞部分表型及功能的细胞亚群.他能将先天性免疫应答和获得性免疫应答连接起来,限制性识别CDld-糖脂抗原、活化后迅速分泌大量细胞因子从而调节机体的免疫应答.人体的肝脏内富含NKT细胞,因此,NKT细胞在肝脏中的作用引起了人们的广泛兴趣.

    关键词: NKT细胞 免疫调节
  • 肿瘤脂类提取物对肿瘤病人NKT细胞激活作用的实验研究

    作者:刘立真;唐锁勤;张晓飞;王建文;黄东升

    目的:研究神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)脂类提取物对神经母细胞瘤病人外周血NKT细胞增殖程度和对NKT细胞介导的对自身肿瘤细胞的细胞毒作用的影响.方法:甲醇/氯仿法提取神经母细胞瘤脂类提取物作为刺激物,采集神经母细胞瘤病人外周血单核细胞,加入IL-4/GM-CSF培养出成熟的树突细胞,采集并分离同一个体外周血T细胞与树突细胞共同培养,加入脂类提取物,MTT法检测T细胞增殖程度的变化,流式细胞仪检测NKT/T比例并分选出NKT细胞,MTT法检测NKT细胞对NB细胞毒作用.结果:肿瘤脂类提取物刺激组T细胞增殖程度是对照组的1.3倍(P=0.001),NKT/T比例是对照组的3.3倍(P=0.003),NKT细胞毒作用高于对照组19.84%(P=0.049).结论:NB脂类提取物可以有效激活NKT细胞,发挥对自身肿瘤细胞的细胞毒作用.

  • NKT细胞及其在眼科中的研究进展

    作者:任亚琳;杨培增

    NKT细胞是T细胞中一类独立的细胞,它既表达T淋巴细胞的表面标志,又表达NK细胞的表面标志,因此具有不同于传统T淋巴细胞的特点.NKT细胞不仅与自身免疫系统疾病,肿瘤排斥反应及抗细菌感染等全身性疾病有关,而且在眼部免疫赦免的形成、角膜移植片存活等方面也起着重要作用.本文主要就NKT细胞及其在眼科的研究进展综述了有关资料,并对其研究进行了展望.

    关键词: NKT细胞 CD1d α-Galcer ACAID
  • 补充蒺藜提取物对过度训练大鼠T淋巴细胞亚群和NK、NKT细胞的影响

    作者:孙婧瑜;杨文吉;王茹;曲静;游盛中;王晓慧

    目的:研究补充蒺藜提取物对过度训练大鼠免疫功能的影响及其可能机制.方法:30只雄性健康SD大鼠随机分为安静对照组、过度训练组和蒺藜+过度训练组.后两组进行6周递增负荷跑台运动(每周训练6天,从第1周的15m/min×30 min,坡度5%逐渐增至第6周的35 m/mm×120min,坡度15%).蒺藜+过度训练组每日运动前灌胃蒺藜提取物(120 mg/kg体重)1次,每周6次,其余两组补充等体积生理盐水.于第7周周一检测外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞因子IFN-Y、IL-4,自然杀伤细胞(NK)、自然杀伤T细胞(NKT)及皮质酮(C)、睾酮(T)等免疫和内分泌指标.结果:①与对照组相比,过度训练组大鼠体重、T/C比值均显著下降,在运动后期反应迟钝,精神萎靡,眼神暗淡,毛发脱落等,CD3+T细胞和NK细胞数量显著降低.②与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠外周血T水平、T/C比值、CD4+/CD8+比值均显著升高,但CD3+T细胞数量无明显;NK和NKT细胞显著增加,超过安静对照组水平.③与安静对照组相比,过度训练组大鼠IFN-γ(Th1细胞的特异性细胞因子)/IL-4(Th2细胞的特异性细胞因子)比值显著下降,其Thl/Th2失衡,向Th2偏移.与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠IFN-γ/IL-4比值显著增加,其Th1/Th2失衡情况改善,平衡恢复.④蒺藜+过度训练组大鼠血浆C水平显著降低,约是过度训练组的50%.结论:补充蒺藜提取物能增强过度训练大鼠免疫功能,防止运动性免疫抑制的发生,包括增加CD4+/CD8+比值、促进Th1/Th2平衡的恢复、增加NK和NKT细胞数量.蒺藜提取物增强过度训练大鼠免疫功能的作用很可能与其降低血浆皮质酮有关.

  • NKT细胞与免疫耐受的研究进展

    作者:芦丽淦;王军朋;卫琮玲

    自然杀伤T细胞(nature killer T cells, NKT细胞)是一类新型的免疫调节细胞,不仅具有NK细胞的自然杀伤功能,也具有T细胞的免疫调节作用,因此已成为现代免疫学的研究的热点之一.尽管NKT细胞在体内数量相对较少,但种类复杂,功能多样.近年来研究发现,NKT细胞在免疫耐受中也扮演着重要的角色,如可以防止母体妊娠时对胎儿的免疫排斥、抑制自身免疫病的发生、介导器官移植免疫耐受的形成等.本文将对NKT细胞在免疫耐受中的作用的研究进展做一综述.

  • 肺结核患者T辅助细胞、NKT细胞、NK细胞水平与疾病发展及预后的关系

    作者:李利娟

    目的 研究肺结核患者T辅助细胞、自然杀伤T细胞(NKT细胞)、自然杀伤细胞(NK细胞)水平与疾病发展及预后的关系.方法 选取2015年12月~2016年12月四川大学华西广安医院(以下简称“我院”)收治的肺结核病患者100例,选取同期我院体检的健康者100例;根据初诊、复诊、结核菌素情况将其分为四组(Ⅰ~Ⅳ组分别为初诊肺结核组、复诊肺结核组、结合菌素阳性健康组、结合菌素阴性健康组).使用流式细胞仪检测四组治疗前外周血T细胞、NKT、NK细胞表达率.结果 与Ⅲ组比较,Ⅰ组患者NKT细胞表达率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),两组T细胞及NK细胞表达率差异无统计学意义(P>0.05);与Ⅳ组比较,Ⅰ组患者NKT细胞表达率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),两组T细胞及NK细胞表达率差异无统计学意义(P>0.05);与Ⅰ组比较,Ⅱ组患者T细胞表达率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),但两组NKT细胞及NK细胞表达率差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ组及Ⅳ组在T细胞、NK、NKT细胞表达率差异无统计学意义(P>0.05).Ⅰ组患者中轻症、中症及重症亚组T细胞表达率差异有统计学意义(P<0.05),表达率:重症>中症>中轻症.三个亚组的NKT细胞及NK细胞表达率差异无统计学意义(P>0.05).100例肺结核患者治疗后均随访6个月,2例痰菌复阳,1例病灶恶化,其余均未复发.结论 初诊患者T细胞表达水平与健康者相当,与疾病严重程度相关.复诊患者T细胞表达率明显升高.活动性结核患者中NKT细胞表达增加.因此,NK、T细胞测定可辅助诊断活动性结核.

  • CD3+CD56+NKT细胞及亚群在甲状腺癌患者的表达及临床意义

    作者:谢澎;苏文;王艳峰;贾莉;丁弋;武帅;武乃旺

    目的 本研究通过测定甲状腺乳头状癌患者外周血中CD3+CD56+NKT细胞及其亚型CD3+CD56+CD4+NKT、CD3+CD56+CD8+NKT细胞的表达,初步探讨其在甲状腺肿瘤中的免疾调控作用.方法 采用流式细胞术分析53例甲状腺乳头状癌患者及37例健康对照组外周静脉血中NKT细胞以及两种亚型的表达.结果 甲状腺乳头状癌患者外周静脉血中NKT细胞表达率明显高于对照组(P<0.01);CD4+NKT细胞表达率也高于对照组(P<0.01),而CD8+NKT细胞表达率与健康对照组之间无统计学差异(P>0.05);甲状腺乳头状癌TNM分期中,三种细胞的表达率在I、II、III期之间无统计学差异(P>0.05);结论 NKT细胞在甲状腺乳头状癌患者中的高表达提示其在甲状腺乳头状癌免疫调控中的重要作用,而发挥这一作用的主要为CD4+NKT细胞;NKT细胞及其两种亚型的测定对甲状腺乳头状癌临床分期的辅助诊断意义不大.

  • ConA、α-Galcer与LPS/D-GalN诱导免疫性肝损伤小鼠NKT细胞功能 改变的比较研究

    作者:游佳;陈薇;郑琦;陈靖;朱月永

    目的:通过比较三种免疫性肝损伤模型小鼠NKT细胞功能改变情况,寻找一种在病理生理机制上更接近临床特点的免疫性肝损伤动物模型.方法:40只小鼠随机分为空白对照组、Con A模型组、α-Galcer模型组、LPS/D-Gal N模型组,每组10只.Con A模型组尾静脉注射ConA溶液(18 mg/kg),α-Galcer模型组腹腔注射 α-Galcer溶液(40μg/kg),LPS/D-Gal N模型组腹腔注射LPS溶液(10μg/kg)和D-Gal N溶液(700 mg/kg).造模完成后8 h,检测小鼠血清转氨酶ALT、AST水平,计算肝指数,采用HE染色法观察肝组织病理改变情况,流式细胞仪分析肝组织NKT细胞含量,Western blot法检测肝组织中TNF-α、IFN-γ、IL-6蛋白表达情况.结果:与空白对照组比较,各模型组小鼠血清ALT、AST水平均显著升高(P<0.01),肝指数增加(P<0.01或P<0.05),肝组织病理损伤明显,NKT细胞含量显著增加(P<0.01或P<0.05),TNF-α、IFN-γ、IL-6表达均明显上调(P<0.01);各模型组之间比较,α-Galcer模型组血清ALT、AST含量显著低于Con A组(P<0.05),病理损伤也相对较轻,LPS/D-Gal N模型组NKT细胞含量明显低于其余两组(P<0.05).结论:Con A、α-Galcer和LPS/D-Gal N诱导的免疫性肝损伤模型小鼠NKT细胞明显激活,介导炎症紊乱;其中,以Con A诱导的动物模型肝脏病理损伤及免疫紊乱为明显,更符合疾病临床特点,可作为免疫性肝损伤的首选模型.

  • 免疫调节细胞在自身免疫性糖尿病中的作用

    作者:何凌;周智广

    免疫调节细胞CD4+CD25+T细胞和NKT细胞在逃避自身免疫、维持自身耐受方面发挥重要作用.在自身免疫性糖尿病患者和动物模型中均已发现这两类细胞数量减少和(或)功能异常.CD4+CD25+T细胞在体外主要通过细胞间直接接触、在体内通过细胞因子发挥作用;NKT细胞则借调节辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞间的平衡发挥作用.对其他类型的免疫调节细胞的认识正进一步扩展.免疫调节细胞在自身免疫性糖尿病研究领域中具有广阔的应用前景.

  • NKT细胞与生殖免疫

    作者:罗璐;曾耀英

    生殖免疫学的核心问题是母体对同种异体抗原(胚胎)的耐受机制.母体界面免疫细胞--NK细胞和Th细胞与生殖免疫耐受状态密切相关.近年来发现的第4类淋巴细胞--NKT细胞,在维持妊娠或诱发流产过程中起重要作用.综述NKT细胞的研究现状及其与生殖免疫的关系.

  • NKT细胞的生物特性及其在多发性骨髓瘤中应用的研究进展

    作者:姜凤娟

    NKT细胞是一种特殊的T淋巴细胞亚群,其表面既有T细胞受体,又有NK细胞受体.NKT细胞在肿瘤、自身免疫性疾病和微生物感染中起到调节免疫应答的作用,是联系固有免疫和获得性免疫的"桥梁"之一.多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种浆细胞异常增殖的恶性血液系统疾病.MM细胞表达CD1d分子并且可被具有CD1d限制性的NKT细胞杀伤.近些年,NKT细胞的抗MM作用成为研究热点,本文就NKT细胞生物特性及其在MM治疗中的应用进行综述.

  • 缺血性脑卒中患者急性期外周血中NKT细胞比例变化的意义

    作者:张慧颖;许盼;郝俊巍;金薇娜;薛蓉;施福东;吴伟

    目的 探讨在缺血性脑卒中患者急性期外周血中NKT细胞占淋巴细胞比例的动态变化趋势,在卒中后免疫抑制过程、感染并发症方面的作用.方法 选择40例缺血性脑卒中急性期患者,其中感染组6例,非感染组34例,另外选择无缺血性脑卒中健康查体者20人(对照组).采用流式细胞术检测外周血中NKT细胞在发病后第1天、第3天、第7天占淋巴细胞比例(后均简称比例)的动态变化趋势.结果 与对照组比较,卒中组的NKT细胞比例在发病第1天、第3天、第7天显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).与对照组比较,感染组的NKT细胞比例在发病第1天、第3天、第7天显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 缺血性脑卒中发病后第1天出现外周血中NKT细胞比例的降低,这种变化持续1周,其细胞比例在发病后1周内动态改变不明显.外周血中的这两种细胞比例与卒中后感染的发生无明显相关性.

  • NKT细胞激活剂α-Galcer对小鼠肺肿瘤细胞生长的影响

    作者:田雨;王娜;宋天姣;曹倩文;王姗;郑全辉

    ①目的探讨自然杀伤性T细胞(NKT)特异激活剂α-半乳糖苷神经酰胺(α-Galcer)对小鼠肺肿瘤细胞生长的影响。②方法体外培养小鼠 Lewis 肺癌细胞(LLC),经腋部皮下注射雌性C57 BL/6小鼠制备肺肿瘤模型。将LLC接种小鼠进一步分为实验组和对照组。实验组小鼠腹腔注射α-Galcer,对照组小鼠注射等量溶剂二甲基亚砜(DMSO)。LLC接种两周后处死小鼠,观察肿瘤生长情况及流式细胞仪检测小鼠外周NKT细胞变化。③结果 LLC细胞接种两周后,实验组小鼠肺肿瘤重量明显小于对照组,而实验组小鼠外周NKT细胞数量显著高于对照组。④结论α-Galcer通过促进NKT细胞数量的增加,抑制小鼠肺肿瘤的生长。

  • Ⅰ型及Ⅱ型NKT细胞在肿瘤免疫应答中的作用综述

    作者:朱静;徐笑红

    NKT细胞是机体固有免疫和获得性免疫的桥梁,对于免疫应答和肿瘤监视起到重要作用.Ⅰ型及Ⅱ型NKT细胞不仅存在相互作用,还可调节一系列免疫细胞,诸如NK细胞、DC细胞、B细胞、T细胞等.NKT细胞在一定程度上促进或抑制周围免疫细胞的影响宿主能力,进而对临床肿瘤治疗产生积极的意义.本文将探讨Ⅰ型及Ⅱ型NKT细胞的研究进展以及在肿瘤免疫中的调控作用和潜在临床应用价值.

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