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当飞利肝宁胶囊调控炎性小体改善非酒精性脂肪肝病大鼠肝损伤敏感性
目的:探索当飞利肝宁胶囊对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝损伤敏感性的防治作用及潜在机制.方法:雄性Wistar大鼠随机分为6组,正常组(NCD)、正常饮食加CCl4组(NCD-CCl4)、高脂饮食组(HFD)、高脂饮食加CCl4组(HFD-CCl4)、当飞利肝宁胶囊组(DF)、甘草酸二铵组(G).NCD、NCD-CCl4组大鼠喂食普通饲料,余大鼠均喂食高脂饲料,且DF、G组同时分别采用两药灌胃干预.8周后,除NCD、HFD组外,其余各组大鼠均腹腔注射CCl4造成大鼠急性肝损伤,并于48h后处死大鼠,收集血清和肝组织.检测各组大鼠血清白蛋白(ALB)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)水平;实时荧光定量PCR法检测肝脏组织NLRP3、ASC、Caspase-1、Pannexin、IL-1β、IL-18.IL-33 mRNA的表达,Western blot法检测肝组织核因子-κB(NF-κB)蛋白表达.结果:对正常大鼠不构成肝损伤的小剂量CCl4可使高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝组织炎性损伤显著加剧,血清GGT、ALP水平明显升高,NLRP3炎性小体相关基因的表达及NF-κB蛋白的表达显著升高(P＜0.05);而当飞利肝宁胶囊组和甘草酸二铵组各指标均得到明显改善(P＜0.05).结论:NAFLD大鼠肝细胞损伤敏感性增加,当飞利肝宁胶囊可有效改善NAFLD大鼠的肝细胞损伤敏感性,降低NLRP3炎性小体相关基因的表达及NF-κB蛋白的表达,从而减轻肝脏炎性损伤、保护肝细胞可能是当飞利肝宁胶囊防治NAFLD大鼠肝细胞损伤敏感性的作用机制之一.
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炎性小体在脂多糖诱导小鼠巨噬细胞中的表达及大黄素干预作用
目的:探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞炎性反应的保护机制.方法:分离C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞进行培养,MTT法筛选大黄素浓度.LPS诱导小鼠巨噬细胞,分为空白组、LPS组、LPS+大黄素组,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞核苷酸结合寡聚化结构域受体(NLRP3)、半胱氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、白介素-1β (IL-1β)的mRNA表达水平.结果:LPS处理后NLRP3、 IL-1β的mRNA表达量高于空白组,而Caspase-1的mRNA表达量低于空白组(P＜0.01);大黄素干预后,NLRP3、IL-1 β的mRNA表达量低于LPS组,而Caspase-1 mRNA表达量高于LPS组(P＜0.01,P＜0.05).结论:大黄素对LPS诱导NLRP3/IL-1 β炎性小体信号通路的激活具有保护作用.
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NO抑制体外IFN-γ刺激成肌细胞/肌管NLRP3炎性小体活化
目的 观察一氧化氮供体硝普钠(SNP)、一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)对体外炎性培养(IFN-γ刺激)成肌细胞/肌管NLRP3炎症小体活化的影响.方法 利用IFN-γ刺激小鼠C2C12成肌细胞/肌管,qPCR和Western blot分析炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1)的形成及活化、ELISA检测细胞培养上清IL-1β的分泌.进一步利用L-NAME和SNP处理IFN-γ诱导的C2C12细胞/肌管,分析炎性小体的形成、活化及IL-1β的分泌.结果 IFN-γ刺激培养后,成肌细胞/肌管中NLRP3、ASC和mature-caspase-1表达水平上调(P＜0.01).较之未刺激的细胞,IFN-γ诱导会显著上调成肌细胞/肌管培养基中的IL-1β浓度(P＜0.01).SNP处理后6h,分化肌管(IFN-γ刺激48 h)内炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1) mRNA和蛋白水平较单纯刺激细胞显著下调(P＜0.01),L-NAME则上调ASC、NLRP3、caspase-1表达水平(P＜0.05).与上述结果一致,SNP和L-NAME处理同时分别下调或上调培养基中IL-1β浓度(P＜0.05).结论 在炎性条件下,成肌细胞/肌管具备合成并活化NLRP3炎性小体的能力.NO对炎性小体的形成及活化有一定的抑制作用.
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细胞焦亡及相关疾病的研究进展
细胞焦亡是由Gasdermin蛋白介导的一种程序性炎性细胞死亡方式,分为依赖caspase-1的经典途径和依赖caspase-4/5/11的非经典途径.炎性小体的激活在此过程中扮演重要角色.细胞焦亡参与肾脏疾病、动脉粥样硬化、神经系统疾病、感染性疾病等的发生发展,并发挥重要作用.通过对细胞焦亡作用机制及相关疾病的研究,为临床疾病的防治提供新思路.
关键词： 细胞焦亡 炎性小体 caspase-1/4/5/11 GSDMD -
NLRP3炎性小体研究进展
炎性小体是一种多蛋白复合体，它能够识别多种病原微生物及应激相关内源性信号分子，在固有免疫中发挥重要作用。炎性小体可通过活化半胱氨酸天冬氨酸酶-1（caspase-1）诱导促炎因子IL-1β和IL-18的成熟、释放，引起炎性反应，参与多种疾病如家族性周期性自身炎性反应、缺血再灌注损伤和动脉粥样硬化等的发生发展过程。
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痛风发病机制研究进展
痛风是一种由于单钠尿酸盐(MSU)晶体与组织微环境相互作用导致的反复发作的急性炎性反应.MSU晶体启动机体的炎性级联反应涉及多种信号通路,其中包括MSU晶体直接与细胞表面Toll样受体的结合,MSU晶体与细胞膜表面脂类分子的结合以及MSU晶体以内吞的方式进入细胞.NLRP3炎性小体的活化处于炎性反应的中心环节.
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细胞焦亡与组织纤维化
细胞焦亡是一种特异性依赖caspace-1的新型细胞程序性死亡方式.相关刺激激活炎性小体并启动细胞焦亡,终致使细胞死亡并释放促炎因子IL-1β、IL-18.细胞焦亡在多种纤维化疾病中介导形成"焦亡-炎性反应-纤维化"轴样病理改变,扩大炎性级联反应,加重组织纤维化病程进程.因此,细胞焦亡的启动逐渐成为药物靶点研究的新方向.
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炎性小体在阿尔茨海默病发病中作用的研究进展
阿尔茨海默病(Alzheimer''s disease,AD)是一种神经退行性疾病,严重威胁老年人的身体健康.近年研究发现,脑内炎性小体的活化参与该病的发生、发展过程.炎性小体作为一种大分子蛋白复合物,激活Caspase-1前体蛋白,导致炎性因子如IL-1β、IL-18等的成熟与释放,从而引起炎症反应.目前炎性小体与AD的关系仍需进一步研究,本文就炎性小体与AD的研究现状进行综述.
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炎性小体在能量代谢中的作用
炎性小体(inflammasomes)又称炎症小体,是由胞浆内模式识别受体(patten recognition recep-tors,PRRs)的一种,分子量约为700kD.2002年,Tschopp研究小组首次提出了这个概念,并认为它主要通过胱冬肽酶-1(cysteinyl aspartate-specific protease-1,caspase-1)来参与人体的免疫及代谢进程.近的研究表明,炎性小体在机体的糖类,脂质等的代谢上都发挥着重要作用,并且参与调控多种病理性进程,如炎症反应、糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎,动脉粥样硬化等.本文综述了炎性小体在能量代谢中的作用.
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NLRP3炎性小体与2型糖尿病及冠心病并发症的关系
NLRP3炎性小体是炎性免疫反应的重要组成部分,它能够识别内源性危险信号,激活caspase-1,继而活化白细胞介素IL-1β和IL-18等细胞因子,参与诸多慢性疾病体内非感染性炎性反应.本文拟对NLRP3炎性小体与慢性炎性疾病2型糖尿病及冠心病并发症的关系作一综述.
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右美托咪定对创伤性脑损伤大鼠认知功能和海马炎性反应的影响
目的 观察右美托咪定(Dex)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠认知功能和海马炎性反应的影响,初步探讨NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的作用机制.方法 雄性3~4月龄SD大鼠80只随机分为C组(对照组)、Dex组、TBI组和TBI+Dex组,每组20只.建立TBI模型,Dex组和TBI+Dex组连续4 d腹腔注射盐酸Dex注射液20μg/kg,C组和TBI组连续4 d腹腔注射0.9%生理盐水.TBI后第7天行Moris水迷宫实验观察大鼠认知功能变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠海马组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6浓度,Western blot检测海马组织中炎性小体相关蛋白NLRP3和p20的表达.Sigmaplot 12.0统计学软件进行分析,组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用重复测量方差分析,P<0.05为差异有统计学意义.结果 与对照组比较,TBI组行为学训练第3~5天逃避潜伏期明显延长,探索时间明显缩短(P<0.05);与TBI组比较,TBI+Dex组训练第3~5天逃避潜伏期缩短,探索时间延长(P<0.05).与对照组比较,TBI组海马IL-1β和IL-6含量明显高于其他3组(P<0.001);与TBI组比较,TBI+Dex组海马IL-1β和IL-6含量更低(P<0.001).与对照组比较,TBI组NLRP3和p20表达明显上调(P<0.001);与TBI组比较,TBI+Dex组NLRP3和p20表达明显降低(P<0.001).结论 Dex可改善TBI引起的认知功能障碍,其作用机制可能是Dex抑制NLRP3炎性小体活性,进而降低海马区域炎性反应,改善认知功能.
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视网膜损伤中细胞焦亡研究进展
细胞焦亡(pyroptosis)是特异性依赖于Caspase-1和/或Caspase-4/5/11活化的致炎性、程序性细胞死亡的一种方式,主要有经典炎性小体(inflammasome)途径和非经典炎性小体途径介导,常发生于感染性疾病、神经系统疾病和自身免疫性疾病.视网膜损伤病变中主要是经典炎性小体途径参与,而抑制炎性小体和下游分子能够减轻视网膜损伤,因此焦亡成为视网膜损伤相关疾病干预的潜在靶点.
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短期高脂饮食缓解冈田酸诱导的大鼠认知功能损伤
观察短期高脂饮食对阿尔茨海默病模型鼠认知功能损伤的影响及相关机制.建立阿尔茨海默病模型并给予高脂饮食喂养后,对大鼠进行水迷宫(Morris water maze,MWM)行为学实验检测动物的学习记忆能力.取材后对海马切片进行尼氏染色检测神经元损伤,Western blot检测NLRP3 (NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3)和caspase-1通路的表达.水迷宫结果表明短期高脂饮食能缓解冈田酸造成认知功能损伤,海马病理检测表明短期高脂饮食可能通过调节NLRP3及caspase-1信号通路缓解对神经元的损伤,发挥了神经保护功能.
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细胞焦亡在肾脏疾病中的作用
细胞焦亡是一种依赖于半胱天冬氨酸蛋白酶caspase-1/4/5/11且由GSDMD介导并伴有炎性介质释放的程序性细胞死亡.NLRP3炎性小体调控细胞焦亡并促使炎性因子的活化与释放.NLRP3炎性小体调控的细胞焦亡参与多种肾脏疾病的病理生理过程.本文就NLRP3-caspase-1介导的细胞焦亡在肾脏疾病中的作用研究迸展做一简述.
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NLRP3在缺血再灌注损伤中的作用及意义
缺血再灌注损伤(ischemia -reperfusion injury,IRI)是导致多种疾病死亡的主要原因,如心肌梗死、缺血性中风、急性肾损伤、循环骤停、睡眠呼吸暂停综合征等.在创伤性休克、器官移植、外科手术、血栓、体外循环心脏手术时都可以出现IRI.
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细胞焦亡的研究进展
细胞焦亡(pyroptosis)是促炎形式的程序性细胞死亡,并且依赖于半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(caspases)活性.由caspases通过切割gasermin D(GSDMD)的氨基端和羧基端的连接体调控,后者移位到膜上并穿孔,诱导水分渗透,细胞肿胀并释放炎性因子,继而发生细胞焦亡.细胞焦亡的形态学特征、发生及调控机制等均不同于凋亡、坏死等其他细胞死亡方式,其是机体一种重要的天然免疫反应,在抗击感染以及疾病中均有重要作用.通过对细胞焦亡的更深入研究,可以认知其在相关疾病中的作用,为临床提供新的治疗思路.
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炎性小体与肝脏疾病关系的研究进展
炎性小体广泛存在于细胞内,是由多种不同功能的蛋白组成的蛋白复合体.体内的病原体及危险损伤信号能够激活炎性小体,使炎性小体半胱天冬氨酸蛋白酶1前体(Pro-caspase-1)组分及其下游底物Pro-IL-1β、Pro-IL-18和Gasdermin D活化成熟,从而参与机体的免疫炎性反应.越来越多的研究提示炎性小体在肝脏疾病的发生、发展中起着重要的作用.文章就炎性小体在肝纤维化、非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎、肝癌、药物性肝损伤等肝脏疾病中的研究进展进行综述,为肝脏疾病的诊治提供新的思路.
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微RNA-223及核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族蛋白3炎性小体的表达及临床意义
目的 检测SLE患者PBMCs中微RNA-223(miR-223)及核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体组分[NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶(caspase)-1]mRNA表达水平,探讨其在SLE发病中的作用及临床意义.方法 实时荧光定量PCR技术检测35例初诊SLE患者、30名健康对照及20例治疗后SLE患者PBMCs中miR-223及NLRP3炎性小体组分mRNA表达量,采用x2和t检验进行统计学分析;采用Pearson检验分析SLE患者miR-223及NLRP3炎性小体组分mRNA表达水平与抗dsDNA抗体、抗核小体抗体(AnuA)、ESR、SLEDAI的相关性.结果 SLE患者PBMCs中miR-223、caspase-1 mRNA表达水平高于健康对照[(1.17±0.15)和(0.68±0.14),t=2.416,P=0.0186;(1.89±0.13)和(1.32±0.13),t=3.123,P=0.0027],NLRP3、ASC mRNA表达水平低于健康对照[(0.64±0.05)和(0.98±0.06),t=4.442,P<0.01;(0.98±0.08)和(1.32±0.12),t=2.391,P=0.0198];相关分析显示SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平与NLRP3 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.7849,P<0.05),而与ASC、caspase-1 mRNA表达水平无相关性;SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平与抗dsDNA抗体、ESR、SLEDA呈正相关(r=0.7035、0.6923、0.6873,P均<0.05),与AnuA无相关性;给予药物治疗后,SLE患者PBMCs中miR-223、caspase-1 mRNA表达水平明显降低[(1.30±0.22)和(0.79±0.11),t=2.07,P=0.0453;(2.05±0.19)和(1.50±0.11),t=2.471,P=0.0183],NLRP3 mRNA表达水平明显升高[(0.69±0.08)和(0.94±0.07),t=2.445,P=0.0193];在LN患者与SLE无肾损害患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平差异无统计学意义.结论 miR-223、caspase-1在SLE患者PBMCs中呈高表达,NLRP3、ASC在SLE患者PBMCs中呈低表达,miR-223 mRNA表达水平与NLRP3 mRNA表达水平呈负相关,且SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA的表达水平与疾病活动呈正相关,治疗后miR-223 mRNA表达水平明显下降,提示miR-223可能在SLE发病中扮演重要角色.
关键词： 红斑狼疮 系统性 微RNA-223 NOD样受体家族蛋白3 炎性小体 -
姜黄素抑制NRLP-3表达对抗肿瘤坏死因子α诱导的人血管内皮细胞炎症
背景：前期研究表明，姜黄素对细胞氧化应激炎症有重要作用。
目的：拟进一步阐明姜黄素在血管内皮细胞病理性炎症反应中的生物学作用及机制。
方法：以人血管内皮细胞为细胞模型，应用肿瘤坏死因子α(10μg/L)作为刺激因子，姜黄素(0，50，100μmol/L)孵育24 h作为干预治疗组。应用HRP标记的BSA检测内皮细胞通透性，应用罗丹明标记的鬼笔碱染色检测F-actin 变化，酶联免疫吸附实验检测细胞分泌白细胞介素1β的变化，进一步通过免疫荧光染色检测细胞内核转录因子κB蛋白表达和转位；应用Western blot方法检测炎症小体相关基因NRLP-3和caspase-1的表达。
结果与结论：HRP-BSA检测提示，姜黄素可呈剂量依赖性对抗刺激引起的血管内皮细胞通透性增加。同时，抑制F-actin应力纤维的形成。ELISA检测发现，姜黄素治疗后，可呈剂量依赖性抑制肿瘤坏死因子α刺激引起的血管内皮细胞白细胞介素1β分泌。同时，免疫荧光分析证实，肿瘤坏死因子α刺激后，对照组血管内皮细胞中核转录因子κB表达持续增高且发生明显的入核转位现象，而100μg/L姜黄素干预组细胞中炎症递质转录因子核κB表达定位无明显改变。Western blotting结果证实，炎症小体调控基因NRLP3和caspase-1表达在姜黄素干预组受到明显抑制。结果表明姜黄素可通过减少核转录因子κB 的表达对抗肿瘤坏死因子α刺激引起的炎症小体活化和白细胞介素1β分泌，对抗细胞病理性炎症损伤发生。 -
细胞焦亡及炎性小体在大鼠术后认知功能障碍中的作用
目的 探讨细胞焦亡及炎性小体在大鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用.方法 24只雄性SD大鼠,体重260 ～ 290 g,随机分成4组:NS组、POCD 2W组、POCD 4W组、POCD 6W组,每组6只.采用海马区注射Aβ1-40法制备大鼠POCD模型,NS组大鼠注射等量的生理盐水进行对照.分别于术后2、4、6周行水迷宫行为学测试后处死各组大鼠.采用Western blot法检测各组大鼠海马内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况,采用ELISA法测定大鼠海马IL-1β和IL-18的含量,采用吖啶橙/溴乙锭荧光比色测定海马内细胞焦亡情况.结果 与NS组相比,POCD 2W组大鼠上台前路程和逃避潜伏期变化差异均无统计学意义(P＞0.05),而POCD 4W组和POCD 6W组大鼠上台前路程和逃避潜伏期均延长(P＜0.05);与NS组和POCD 2W组相比,POCD 4W组和POCD 6W组大鼠海马内ASC、IL-1β和IL-18表达显著增强(P＜0.05).与NS组、POCD 2W组和POCD 4W组相比,POCD 6W组大鼠海马内caspase-1表达增强,OD值升高(P＜0.05).结论 大鼠术后认知功能障碍形成的部分机制可能与海马内炎性小体激活后所致的细胞焦亡有关.
关键词： 细胞焦亡 炎性小体 术后认知功能障碍 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 炎症反应
