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补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞对延缓大鼠衰老作用
目的:观察补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)延缓大鼠衰老的有效性,明确中医药协同静脉注射BMSCs治疗延缓机体衰老的可行性.方法:75只SD大鼠随机分为补肾化瘀生新方高、中、低剂量组、模型组和正常组.每组12只,按照125 mg·kg-1 ·d-1的剂量颈背部皮下每日1次注射D-半乳糖溶液,连续45 d,建立大鼠衰老模型.补肾化瘀生新方高、中、低剂量组(27.28,13.64,6.82 g·kg-1)灌胃给药,模型组生理盐水灌胃,正常组不给药,早晚各1次,连续45 d.同时尾静脉注射BMSCs注射3.0 ×106个/mL的BMSCs,每周1次,连续4次.免疫荧光法测定脑、肝、肺、心中CD105,p53,p21,p16INK4a阳性细胞数,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠的脑、肝、肺、心中p16INK4a,p53,p21 mRNA表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显降低,p16INK4a,p21,p53阳性细胞数明显升高(P＜0.05),大鼠的脑、心脏、肺脏、肝脏中p16INK4a,p53,p21 mRNA表达明显上调(P＜0.05);与模型组比较,补肾化瘀生新各剂量组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显升高,p16INK4a,p53,p21阳性细胞数明显降低(P＜0.05),补肾化瘀生新各剂量组均能明显降低脑、肝、肺、心组织中p16INK4a,p53,p21阳性细胞数mRNA表达明显下降(P＜0.05).结论:补肾化瘀生新法协同静脉注射BMSCs可能影响p16INK4a/Rb和p53/p21途径上的关键基因p16INK4a,p53,p21的表达而延缓BMSCs衰老,显示了中医药协同静脉注射BMSCs抗衰防衰的可行性.
