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电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子影响的研究
目的:观察电针督脉经穴"大椎"、"百会"对大鼠缺血区脑组织神经细胞凋亡及NGLF的影响.方法:用凝闭一侧大脑中动脉的脑缺血大鼠为动物模型,采用TUNEL染色法和免疫组化染色S-P法进行观察.结果:缺血+电针组中,大脑皮层梗塞区内TUNEL染色阳性细胞较缺血组显著减少(P＜0.01),NGFR免疫阳性表达在细胞数量上及强度上也均较缺血组及假手术组明显增强(P＜0.01).结论:电针能抑制脑缺血后脑内神经细胞的凋亡,可增强局灶性脑缺血大鼠脑组织的NGFR的表达,对缺血性脑损伤具有一定的保护作用.为临床针灸治疗缺血性脑血管疾病奠定了理论基础.
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康欣胶囊及其拆方对肾虚血瘀型大鼠神经细胞的保护作用
目的 探讨康欣胶囊全方及其补肾、健脾、养血活血3组拆方对肾虚血瘀型血管性痴呆(VD)大鼠神经细胞的影响. 方法 采用双侧椎动脉永久性封闭和摘除单侧性器官建立肾虚血瘀型VD模型大鼠,分别给予康欣胶囊全方(全方组)、康欣胶囊补肾方(补肾组)、康欣胶囊健脾方(健脾组)、康欣胶囊养血活血方(养血活血组)、阳性对照药喜得镇(西药组)和蒸馏水(模型组). 结果 全方组大鼠空间探索能力显著优于其他组(P＜0.01);全方组海马神经细胞器及细胞核固缩情况轻于其他各组;全方组能增加海马乙酰胆碱含量(P＜0.01),提高VD大鼠海马酪氨酸激酶A、核转录因子、原癌基因C-fos、神经生长因子受体的表达(P＜0.01),降低胶质纤维酸性蛋白的表达(P＜0.05). 结论 康欣胶囊全方对肾虚血瘀型血管性痴呆大鼠神经细胞具有保护作用.
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成人基底前脑巢蛋白免疫阳性神经细胞的细胞化学观察
目的探讨巢蛋白(nestin)免疫阳性细胞在人基底前脑内的分布规律及化学特性. 方法采用nestin 331B、10C2、Rat 401抗体显示人基底前脑的nestin免疫阳性细胞,并应用NSE、p75NGFR、ChAT、GFAP抗体分别对nestin免疫阳性细胞进行了双标免疫细胞化学研究,同时还应用NADPH-d进行组织化学染色.结果在成人基底前脑有一个连续的nestin免疫阳性细胞带,胞体较大,呈卵圆形或梭形,有1～3个突起,分布于隔核、斜角带核、Meynert核、无名质及杏仁核群.双标染色显示,nestin阳性细胞被NSE抗体标记,并与ChAT、NGFR、NOS阳性神经元间杂分布,多数不呈交叉反应.约28%nestin免疫阳性细胞为ChAT阳性神经元,15%为NGFR阳性神经元,6%为NOS阳性神经元.此外,透明隔及隔区靠近软膜处有少量nestin免疫阳性细胞,其形态与星形胶质细胞相似,不与GFAP有交叉免疫阳性反应.结论成人基底前脑存在一个有别于ChAT、NGFR、N0S神经元的nestin免疫阳性神经元簇,其生物学意义值得进一步研究.
关键词： 巢蛋白 乙酰胆碱转移酶 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶 神经生长因子受体 基底前脑 -
吡哆醇诱导性大鼠感觉神经元病的神经再生微环境
目的 观察吡哆醇诱导的感觉神经元病大鼠在坐骨神经挤压伤后神经再生相关蛋白的表达水平,探讨神经元分子微环境变化对神经再生修复的重要意义.方法 制作吡哆醇诱导的感觉神经元病模型,在此基础上制作双侧坐骨神经挤压伤模型.观察神经挤压损伤后7、14、21和28 d大鼠的背根神经节TUNEL标记阳性细胞百分比变化;利用蛋白印迹技术,观察神经再生相关蛋白(GAP-43)和神经生长因子受体(trk A)表达水平变化.结果 背根神经节细胞早期有较多的TUNEL标记细胞,但21～28 d由于大部分细胞变性坏死,TUNEL标记细胞反而减少.背根神经节细胞GAP-43和trk A蛋白有一定水平的表达,但总体水平低于单纯坐骨神经损伤时.结论 中毒造成的感觉神经节病变危及神经元的生存,导致基因表达体系不完整,使损伤神经的再生修复能力下降.
关键词： 吡哆醇 后根神经节 神经损伤 神经生长相关蛋白-43 神经生长因子受体 -
神经生长因子受体p75在膀胱癌组织和缺氧条件下膀胱癌T24细胞株中的表达
目的 探讨神经生长因子受体p75(p75NGFR)在膀胱癌组织中的表达及缺氧条件下在膀胱癌细胞表达的变化.方法 免疫组织化学方法检测107例膀胱癌组织标本(男85例,女22例,平均年龄61岁;T117例、T2 77例、T3～T4 13例;病理分级Ⅰ～Ⅱ级75例、Ⅲ～Ⅳ级32例)和24例转移淋巴结组织标本中p75NGFR的表达,癌旁正常黏膜组织50例为对照.选取膀胱移行细胞癌T24细胞株,免疫组织化学、半定量RT-PCR方法检测常规氧分压和微缺氧条件下 p75NGFR在细胞株中的表达.结果 107例膀胱癌组织标本中p75NGFR阳性表达46例(43.0%),正常对照组标本均为阴性表达.p75NGFR阳性表达率与患者性别、年龄、肿瘤组织学分级和分期无相关性(x2值分别为1.509、3.759、0.011和2.324,P值均0.05).24例转移淋巴结组织标本中p75NGFR阳性表达5例(20.8%),与膀胱癌组织标本阳性率比较差异有统计学意义(r=0.077,P<0.05).微缺氧条件下第3天T24细胞株的p75NGFR mRNA吸光度值为0.52±0.07,正常对照组为0.91±0.01,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 膀胱癌组织中p75NGFR表达与淋巴结转移呈负相关;微缺氧条件下p75NGFR mRNA在膀胱癌细胞株中的表达降低.
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TrkA及PPTA mRNA在咬合创伤犬三叉神经节内的表达变化
目的:观察咬合创伤时犬三叉神经节(TG)中神经生长因子受体TrkA mRNA及前速激肽原-A(PPTA)mRNA的表达变化,探讨咬合创伤导致口面痛的可能机制.方法:将高出咬合面1.5 mm的镍铬合金嵌体粘固于10只杂种犬右侧上颌第一、二磨牙咬合面的一类嵌体洞形内,造成对(牙合)牙的创伤.粘固嵌体后3、7、14、30、60天时取双侧TG.用反转录-聚合酶链式反应(RT_PCR)检测TG中TrkA及PPTA mRNA的表达变化并与无咬合创伤的对照组作比较.结果:(1)创伤后3-60天内创伤侧TG的TrkA和PPTA mRNA表达水平比对侧明显上调.(2)创伤侧TrkA mRNA的表达量在3-60天内均高于对照组,7-30天内维持较高水平.(3)3-30天内PPTA mRNA水平明显高于对照组,3-14天达到高,60天组与对照无差异.结论:咬合创伤能导致TG内TrkA mRNA及PPTA mRNA表达水平的上调.TrkA和PPTA可能参与了咬合创伤所导致的口面痛.
关键词： 创伤咬合 神经生长因子受体 前速激肽原A 三叉神经节 反转录-聚合酶链式反应 -
实验性糖尿病大鼠坐骨神经损伤后神经再生微环境变化
目的 观察实验性糖尿病大鼠在坐骨神经挤压伤后神经生长相关蛋白的表达水平;探讨神经元分子微环境变化对神经再生修复的重要意义.方法 制作实验性糖尿病大鼠模型,在此基础上制作双侧坐骨神经挤压伤模型.观察神经挤压损伤后7、14、21和28 d大鼠背根神经节TUNEL标记阳性细胞百分比变化;利用免疫组化和蛋白印迹技术(Western-blot),观察神经生长相关蛋白(GAP-43)和神经生长因子受体(trk A)表达水平变化.结果 实验性糖尿病大鼠坐骨神经损伤后,所有时程背根神经节细胞均有较多的TUNEL标记细胞,但以14～21 d显著;各时程背根神经节细胞GAP-43和trk A蛋白均有一定水平的表达,但其表达水平低于非糖尿病组.结论 实验性糖尿病大鼠坐骨神经背根神经节存在凋亡应激,其神经再生相关基因表达体系不完整,对神经损伤的再生修复能力下降.
关键词： 链脲霉素 糖尿病 神经损伤 神经生长相关蛋白-43 神经生长因子受体 -
神经生长因子与其受体的信号转导
1952年2月Levi-Montalcini[1]在研究鸡胚的神经发育过程中发现了神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF),开辟了一个全新的研究领域.
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神经生长因子受体p75表达影响喉癌Hep2细胞系增殖的初步研究
目的 初步探索神经生长因子低亲和力受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)在喉癌Hep2细胞系的表达情况并研究其相关生物学功能.方法 应用免疫细胞化学及免疫荧光染色法,检测p75NTR在喉癌Hep2细胞系中的表达;应用RNAi法下调p75NTR表达,通过Real-Time-PCR及Western blot方法验证基因干扰有效,MTT法观察下调p75NTR蛋白水平对喉癌Hep2细胞存活及增殖的影响.结果 喉癌Hep2细胞系内小部分肿瘤细胞显示p75NTR免疫染色强阳性,多数呈强阳性显色的细胞处于旺盛的分裂增殖状态.通过Real-Time-PCR及Western blot方法均证实预先设计的小干扰RNA(siRNA)可以有效下调p75NTR蛋白的表达,转染siRNA抑制p75NTR表达能够抑制喉癌Hep2细胞系的增殖.结论 p75NTR高表达于喉癌Hep2细胞系中具有较强增殖活力的细胞.p75NTR表达对支持和促进喉癌细胞增殖具有重要作用,p75NTR受体信号途径激活与喉癌细胞存活及增殖密切相关,其能否成为肿瘤治疗的靶点有待进一步深入研究.
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神经生长因子受体TrkA在喉癌中的表达及意义
目的:探讨神经生长因子受体TrkA在人喉鳞状细胞癌(喉癌)中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学方法,检测34例喉癌组织、11例癌旁黏膜、6例喉乳头状瘤及8例正常声带黏膜组织中TrkA的表达.结果:34例喉癌组织中TrkA受体蛋白均有阳性表达,喉癌、癌旁黏膜及喉乳头状瘤中TrkA的表达均高于正常声带黏膜;喉癌伴随颈部淋巴结转移的病例组中TrkA表达的强阳性率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论:TrkA的高表达与喉癌的恶性进展及淋巴结转移有相关性,这为临床诊断及治疗喉癌提供了新的途径.
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神经生长因子与支气管哮喘
神经生长因子(NGF)是神经元细胞生长和分化的营养因子.近来发现它不仅与炎性细胞的调节有关,参与炎症反应,而且介导支气管哮喘(哮喘)时气道高反应性的形成,是连接哮喘气道炎症和高反应性的一座桥梁.
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神经生长因子对眼科疾病治疗展望
神经生长因子（nerve growth factor，NGF）是神经营养因子的一种，广泛存在于神经组织和周围靶组织。在中枢神经系统，NGF兼有神经营养和促进神经突起生长的效应，从而参与神经细胞的分化、发育和损伤修复过程。近些年的研究表明，视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGC）表达包括NGF在内的多种神经营养因子，表达的NGF通过结合于其受体发挥作用，其高亲和力受体（酪氨酸蛋白激酶A受体）存在于视神经节细胞上，而其低亲和力受体（p75NTR）则在胶质细胞中广泛表达，这些研究提示NGF可能在眼科疾病的治疗中发挥作用，该文就神经生长因子及其受体在眼组织中的表达、对视神经和视网膜损伤的保护、角膜损伤修复以及对青光眼、干眼病的治疗进行了综述。
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心理护理干预对银屑病患者负性情绪的影响研究
目的 观察心理护理干预对银屑病患者负性情绪的改善情况.方法 选取我院2016年1月至2018年1月收治的386例银屑病患者,将其随机分为观察组和对照组,每组各193例.两组患者均行常规临床治疗和护理干预,观察组患者则在此基础上给予心理护理干预,比较两组患者干预前、后负性情绪的改善情况.结果 两组患者护理干预前、后SDS、SAS评分均有显著地降低(P＜0.05),干预后,观察组患者的SDS、SAS评分显著低于对照组患者(P＜0.05).干预后观察组患者的QOLI-74评分优于对照组患者(P＜0.05).结论 在常规治疗与护理的基础上,对患者进行心理护理干预,可有效改善患者的负性情绪,提高患者的生活质量.
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银杏叶复方对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠下丘脑NGFR表达的影响
目的:观察银杏叶复方对急性全脑缺血再灌注大鼠下丘脑神经生长因子受体(NGFR)表达的影响.方法:21只SD大鼠随机分为3组,假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和治疗组(GBE组).采用pulsinelli四血管法制作大鼠急性全脑缺血再灌注损伤动物模型.GBE组大鼠在造模前1个月至造模后1周灌服银杏叶复方.免疫组化染色脑组织切片.电镜观察下丘脑视上核与室旁核的NGFR阳性细胞,并在200um X200um的方格测微尺内计数形态清楚的NGFR阳性细胞数,计算细胞密度值.结果:GBE组大鼠下丘脑视上核、室旁核NGFR阳性细胞数比I/R组与Sham组明显增多(P<0.01).结论:银杏叶复方可促进脑缺血再灌注损伤大鼠下丘脑NGFR的表达而产生神经保护作用.
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免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向神经细胞定向分化
目的:利用免疫磁珠法分离成人骨髓神经生长因子受体阳性细胞,获得同质性骨髓间充质干细胞,并向神经细胞诱导分化.方法:实验于2005-01/08在吉林大学第一医院中心实验室完成.①骨髓来源于正常成人献髓者,由解放军三零七医院骨髓库提供.采用Percoll密度梯度离心法分离收集骨髓单个核细胞,分别进行常规贴壁分离及免疫磁珠分离.②常规贴壁分离法是将2×107骨髓单个核细胞接种于添加骨髓间充质干细胞培养液的25 cm2 培养瓶中孵育,48 h后除去未贴壁细胞,更换新鲜培养液,待细胞生长至90%融合时消化传代.③免疫磁珠分离法是将骨髓单个核细胞先后与鼠抗人神经生长因子受体单克隆抗体、羊抗鼠IgG免疫磁珠4℃反应15 min,然后将细胞放入分离系统的细胞分离柱内,经免疫磁珠标记的骨髓单个核细胞(神经生长因子受体阳性部分)由于磁场作用滞留于分离柱中.移走磁场后,冲洗分离柱即得到神经生长因子受体阳性细胞.④分别检测神经生长因子受体阳性细胞和常规贴壁培养所获骨髓间充质干细胞体外扩增和集落形成能力,分析其细胞表型和细胞周期,并将骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导分化.结果:①平均在每百个骨髓单个核细胞中有(2.6±1.2)个神经生长因子受体阳性细胞存在.经过免疫磁珠分离获得的神经生长因子受体阳性细胞数占骨髓单个核细胞总数的(0.57±0.31)%,纯度为(90.6±5.1)%.②神经生长因子受体阳性细胞培养4周后,神经生长因子受体、CD34、HLA-DR、CD133、CD105阳性率分别为(35.5±5.9)%,(2.3±1.7)%,(2.6±2.3)%,(1.4±1.1)%,(89.8±12.8)%.③经免疫磁珠分离获得的1×106个神经生长因子受体阳性细胞平均可以形成3 100个集落,而接种同样数目的骨髓单个核细胞平均只能形成56个成纤维细胞集落.④神经生长因子受体阳性细胞可以在体外扩增10周,其扩增倍数较常规贴壁法纯化骨髓间充质干细胞平均高出2～3个数量级.⑤培养4周后,免疫磁珠法分离的骨髓间充质干细胞中处于分裂期的细胞比例高于常规贴壁法(12.37%,9171%,P＜0.05).⑥诱导后5 h,约60%细胞变成双极形、多极形和锥形,出现类似神经元细胞的形态,并可见多数细胞相互交织成网络结构.⑦经诱导分化后的骨髓间充质干细胞微管蛋白生物素单克隆抗体TuJ-1表达明显增强,无神经胶质纤维酸性蛋白表达.结论:①利用免疫磁珠分离骨髓神经生长因子受体阳性细胞可以获得同质性原始骨髓间充质干细胞.②免疫磁珠分离的神经生长因子受体阳性细胞较常规贴壁分离获得的骨髓间充质干细胞具备更强的增殖能力和成神经分化潜能.
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神经生长因子及其在眼科领域的应用
神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经经营养因子的一种.广泛存在于神经组织和周围靶组织,在神经系统的发生、发育和损伤修复过程中起着重要作用,可促进神经细胞的存活增殖、分化及功能表达.本文就NGF的生物学特性、眼组织中表达及对眼病的影响进行综述.
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Fas/FasL与妊娠免疫耐受及病理妊娠研究进展
Fas属于TNFR/NGFR(肿瘤坏死因子受体/神经生长因子受体)超家族的Ⅰ型跨膜蛋白,胞内区有一段80个氨基酸的序列与细胞的凋亡信号传递有关,称为死亡功能区.
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Fas/ FasL在宫颈癌组织中的表达及意义
肿瘤不仅是增殖和分化异常的疾病,同时也是凋亡异常的疾病,肿瘤常表现出细胞增生亢进及凋亡减少.Fas/FasL系统是凋亡相关基因[1,2].Fas,又名CD95或APO-1,属于肿瘤坏死因子受体(TNFR)和神经生长因子受体(NGFR)家族.人Fas基因定位于第10号染色体长臂2区(10q24.1),包含8个内含子和9个外显子.Fas配体(Fasl),又称CD95L,属于肿瘤坏死因子(TNF)家族成员,人Fas L基因定位于第1号染色体长臂2区3带(1q23),包含3个内含子和4个外显子.Fas/FasL系统在肿瘤免疫监视过程中起重要作用[3].本研究的目的在于了解Fas/FasL蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达,探讨Fas/FasL系统在宫颈癌发生发展过程中的意义.
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免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向成软骨细胞分化
目的 利用免疫磁珠法分离成人骨髓神经生长因子受体 (nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,获得同质性骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs) ,并进行向软骨细胞诱导.方法 采用Percoll密度梯度离心法分离成人骨髓中单个核细胞 (mononuclear cells,MNCs),对MNCs进行常规贴壁培养或应用磁分离技术分离NGFR+细胞.分别检测NGFR+细胞和常规贴壁培养所获BMSCs体外扩增和集落形成能力,分析其细胞表型和细胞周期,并进行成神经细胞诱导.结果 免疫磁珠分离获得NGFR阳性细胞的纯度为(90.6±5.1)%,NGFR阳性细胞较贴壁培养获得BMSCs具备更强增殖能力和向软骨分化潜能.结论 利用免疫磁珠分离骨髓NGFR阳性细胞可以获得同质性原始BMSCs.
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后肢接振对家兔神经生长因子及其受体的影响
[目的]研究后肢接振对家兔血清及组织中神经生长因子与受体的影响.[方法]将32只新西兰兔随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组3个实验组和1个对照组.3个实验组的接振剂量(4h等能量频率计权加速度)分别为4.33、8.67、17.34 m/s2进行接振试验,对照组只接触与中剂量组相同的噪声声级.接振试验结束后,用酶联免疫法测定家兔血清及组织中神经生长因子及受体的浓度.[结果]与对照组比较,中剂量组、高剂量组血清及组织中神经生长因子的含量均升高(P＜0.05,P＜0.01),中剂量组、高剂量组组织中神经生长因子受体含量均升高(P＜0.01).[结论]后肢接振所致家兔血清及组织中神经生长因子与受体浓度的升高,可能与振动性神经损伤的发生有一定联系.
