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基于ITS2序列的藁本与常见混伪品的分子鉴定
本文对药材藁本及其常见混伪品的rDNA ITS2进行了PCR扩增、测序,并运用MEGA软件对该区进行序列分析,比较了ITS2碱基序列的差异及其规律,同时为药材藁本及混伪品的指纹图谱鉴别提供分子标记.结果显示辽藁本的种内差异较小,而与其主要混伪品间存在较大的变异,差异性范围为5.7%～35.3%.根据ITS2序列特征构建的系统树,药材藁本的样品紧密的聚在一起,和其混伪品可以明确区分,支持率为100%.此外,ITS2的二级结构可作为鉴定药材藁本及混伪品种的一个方法,具有一定的系统学及分类学意义.本研究表明rDNA ITS2序列分析可作为药材藁本与混伪品的一种有效的分子鉴定方法,具有重要的应用价值.
关键词： 藁本 混伪品 核糖体DNA 第二内转录间隔区(rDNA ITS2) -
藁本、辽藁本和新疆藁本挥发油化学成分分析及其血管活性观察
目的:分析比较藁本、辽藁本及代用品新疆藁本共7个样品中挥发油的化学成分,并观察对离体血管的舒张活性.方法:采用水蒸气蒸馏法提取7个藁本样品的挥发油,运用气相色谱-质谱法(GC-MS)对其化学成分进行分析鉴定,并用面积归一化法计算各成分相对含量;离体血管实验观察不同品种藁本挥发油对KCI预收缩大鼠胸主动脉环张力的影响.结果:从7个藁本样品中共鉴定出82个成分,其中含共有成分14个,各样品所鉴定成分平均占其总挥发油的94%.离体血管实验显示,各样品挥发油对大鼠胸主动脉环均有不同程度的舒张作用,且量效曲线呈非线性关系;半数有效量(ED50)30.4～400.1μg·mL-1.结论:不同品种藁本挥发油化学成分的种类及含量差异显著,对大鼠离体血管的舒张活性明显不同.
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GC测定女金丸中7种挥发性成分的含量
目的:建立同时测定女金丸中桂皮醛、乙酸龙脑酯、丹皮酚、肉豆蔻醚、呋哺莪术二烯酮、藁本内酯和α-香附酮含量的方法.方法:采用HP-5毛细管柱(250 μm×30 m,0.25 μm),升温程序为初始温度50℃,保持1 min,以20℃·min-1的速率升温至130℃,保持10 min;再以2℃·min-1的升温速率升至180℃,保持1 min;进样口温度230℃,检测器温度250℃;分流进样,分流比10∶1.结果:7种成分实现完全分离,并与其他成分均能达到良好的分离;桂皮醛、乙酸龙脑酯、丹皮酚、肉豆蔻醚、呋喃莪术二烯酮、藁本内酯和α-香附酮分别在进样量0.013 4～1.342 3,0.003 4～0.343 0,0.023 0～2.302 7,0.017 3～1.728 5,0.030 1 ～3.008 5,0.0172～1.724 8,0.003 1～0.308 8μg与色谱峰峰面积呈良好线性响应;平均回收率(n=6)分别为99.6％,99.4％,99.3％,99.1％,99.8％,99.3％,99.0％;RSD分别为0.4％,0.4％,0.3％,0.2％,0.1％,0.4％,0.5％.结论:该方法多种成分同时测定,操作简便,准确、重复性好,可用于女金丸的质量控制.
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藁本的本草考证及资源研究进展
通过对藁本的本草学研究,查阅和分析历代本草到近现代本草著作的记载,考证其名称、基源、功效主治及其资源研究.结果发现藁本名称及其药用种类较多,不同地区藁本品种和功效也有一定差异;化学成分及其药理作用多,但特有成分仍未知;野生资源日渐枯竭,人工栽培发展缓慢,虽有进展,但仍需技术扩大.
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藁本药材的市场调查及正品与习用品对比研究
本文通过对藁本药材的市场流通情况进行调查,同时对相关文献加以整理,对正品藁本及习用品在本草考证、功能主治、化学成分及药理药效等方面作对比研究,并对研究结果进行讨论.
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川芎(芎菊)的本草源流考
目的:通过本草文献,梳清芎藭的本草源流.方法:考证历代本草著作,并结合现代资料进行分析.结果:古代芎藭有东西两大产地,西部芎菊从唐代开始由于栽培分化出川芎、西芎,芎藭的原植物早为藁本Ligusticum sinense,西芎实为L.sinense的栽培品,川芎L.chuanxiong很可能为L.sinense在长期栽培下形成的园艺品种.结论:西芎古代作为芎藭使用,近代则归属于中药藁本,因此,需要通过现代研究搞清L.chuanxiong与L.sinense关系,确立L.sinense的中药归属.
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藁本中两种活性成分的高效液相色谱法测定
目的:为中药藁本内在质量的评价提供科学依据,建立了藁本中两种活性成分:阿魏酸(ferulic acid)、藁本酚(ligustiphenol)的定量分析方法.方法:反相高效液相色谱法,采用 7μm Nucleosil-C18键合相柱,流动相为MeOH-H2O(40～60),以H3PO4调至pH 3.6,2-萘酚为内标,280 nm为检测波长.结果:阿魏酸与藁本酚可达基线分离,两者标准品的进样量分别为0.27～4.38 μg和0.55～8.80 μg,对样品峰面积与内标峰面积比呈良好线性关系.平均回收率为97.4%～100.9%.用此法对不同产地野生及市售中国藁本及辽藁本的根及根茎进行了分析,测得了阿魏酸及藁本酚的含量,不同产地的藁本药材中此两种活性成分的含量差别较大.结论:此法简便、快速,适用于药材分析,可作为证实地道药材的化学依据.
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藁本药材化学成分、质量控制及药效学研究
目的对藁本药材的化学及药效学进行研究,确定藁本药材质量评价的指标并建立评价方法.方法采用柱色谱的方法,从中国藁本及辽藁本的根及根茎中共分离得到17个化合物.根据藁本药材的功能主治设计了抗炎、镇痛、镇静等药效学实验,对藁本药材粗提物及单一化合物进行了实验,并将实验结果进行了比较,确定了能够代表藁本药材功能主治的指标成分,建立了该指标成分的HPLC定量分析方法,分析了20个产地的藁本药材.结果藁本药材中主要成分阿魏酸是能够代表藁本药材功能主治的指标成分,而且在20个产地中均含有,可以做为评价藁本药材质量的指标成分.结论中草药的质量控制问题是中草药现代化研究的瓶颈问题,本实验为此方面的研究提供了可借鉴的方法.
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基于药物体系的藁本质量评价研究
目的 建立基于药物体系的藁本质量表征及其关联分析方法,为中药质量有效评价提供新模式.方法 采用HPLC同时测定7批藁本饮片中阿魏酸、洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、藁本内酯等5种有效指标性成分的含量,分析基于有效指标性成分含量的质量表征;以洋川芎内酯I含量为参比,对饮片进行有效指标性成分含量相对比值质量表征,并以批次4(已确定药效的饮片)为基准,作有效指标性成分含量相对比值的比值差,其绝对值之和表示为非关联系数δ,分析得关联度排序(δ/关联度).结果 基于有效指标性成分含量的质量表征:以阿魏酸含量排序为批次7＞批次6＞批次4＞批次3＞批次1＞批次5＞批次2,含量相差大约2.2倍;以洋川芎内酯I含量排序为批次7＞批次4＞批次3＞批次6＞批次1＞批次5＞批次2,含量相差大约4.9倍;以苯酞类含量和排序为批次7＞批次3＞批次6＞批次4＞批次1＞批次2＞批次5,含量相差大约3.6倍;批次7、3、4、6有效指标性成分总体含量较高.基于关键有效指标性成分含量相对比值的质量表征:批次4 (0/100％)＞批次7(1.21/79.8％)＞批次3(1.36/77.3％)＞批次6(1.83/69.5％)＞批次5(2.18/63.7％)＞批次1(2.28/62.0％)＞批次2(9.14),即批次7、3的质量表征与批次4关联度较高.综合基于有效指标性成分含量及其相对比值的质量表征,以批次4为基准,可得批次7、3质量较优.结论 基于有效指标性成分含量及其相对比值进行质量表征,并以具有确切药效的药材饮片为基准,进行质量表征关联度分析,以评价其质量整体关联性与应用有效性,这是中药质量评价提供一种新模式.
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HPLC法测定中疼片中欧前胡素
中疼片系纯中药复方制剂,主要由白芷、川芎、藁本等多味中药组成,具有止痛功效,主要用于头疼、牙痛等症.中疼片系院内制剂,没有质量控制标准.为提高药品质量,确保用药安全有效,本实验对方中君药白芷中有效成分欧前胡素采用HPLC法进行测定研究.结果证明该方法简便、准确、重现性好.
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六经头痛片HPLC指纹图谱建立及多指标成分定量测定研究
目的 建立六经头痛片(LTT) HPLC指纹图谱,并采用波长切换技术同时定量测定3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元,为评价UT质量提供依据.方法 采用HPLC法,以Diamonsil C18(250 rnm× 4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1％磷酸水为流动相,分别建立LTT高极性和低极性部分指纹图谱,并采用波长切换技术同时测定LTT中3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元5种指标性成分量.结果 分别建立了11批LTT高、低极性部分指纹图谱,其相似度均大于0.90;低极性指纹谱确定了16个共有峰,对其中12个共有峰进行了归属,11、12、13号峰来源于白芷,1、2、3、7号峰来源于葛根,8号峰来源于女贞子,5、6号峰来源于川芎,15号峰来源于藁本,4号峰为川芎和藁本的共有峰,对其中7个共有峰经对照品指认,分别为葛根素(1号峰)、3'-甲氧基葛根素(2号峰)、大豆苷(3号峰)、阿魏酸(4号峰)、大豆苷元(7号峰)、欧前胡素(11号峰)和异欧前胡素(13号峰);高极性指纹图谱确定了10个共有峰,其中2～9号峰来源于葛根,1、10号峰来源于女贞子,对其中5个共有峰经对照品指认,分别为3L羟基葛根素(2号峰)、葛根素(3号峰)、3'-甲氧基葛根素(4号峰)、大豆苷(7号峰)和特女贞苷(10号峰).多成分定量测定中,3'-羟基葛根素在71.60～716.00 ng (r=0.999 1)、葛根素在407.78～4 077.80 ng (r=0.999 4)、大豆苷在90.72～907.20 ng (r=0.999 9)、特女贞苷在95.80～958.00 ng (r=0.999 1)、大豆苷元在21.98～219.80 ng (r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率和相应的RSD分别为101.1％、1.38％,97.8％、0.72％,99.1％、0.75％,97.8％、2.75％,98.7％、0.70％;10批样品中3'-羟基葛根素量为3.08～3.84 mg/mL、葛根素17.71～21.24 mg/mL、大豆苷3.51～4.71 mg/mL、特女贞苷1.40～5.69 mg/mL、大豆苷元0.66～0.86 mg/mL.结论 该法稳定可靠、重复性好,通过HPLC指纹图谱结合多指标定量测定方法较全面地反映了LTT内在质量,为其质量控制提供了可靠的科学依据.
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用中药治疗头痛效果好
一、偏头痛:表现为头部一侧疼痛.1、藁本、苦丁茶各6克,鲜荷叶15克,水煎,分2次服,每日1剂.2、细辛3克,白芷6克,菊花10克,水煎,分2次服,每日1剂.3、全蝎、生地龙、甘草各10克,共研细末,每次3克,每日3次,以温开水送服.
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羌活胜湿汤
羌活胜湿汤载于金元时期医家李东垣所著的《内外伤辨惑论》,为祛风胜湿剂.方药组成:羌活3克,独活3克,藁本1.5克,防风1.5克,甘草(炙)1.5克,川芎1.5克,蔓荆子0.9克.上药哎咀,都作一服.用水300毫升,煎至150毫升,去滓,食后大温服.
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天麻壮骨丸
天麻壮骨丸源于经验方.处方组成:天麻4.4克,独活17.7克,豹骨2.1克,人参2.1克,细辛2.1克,鹿茸2.1克,杜仲(盐炙)17.7克,五加皮17.7克,秦艽8.9克,豨莶草17.7克,防风4.4克,当归4.4克,川芎4.4克,防己4.4克,桑枝17.7克,白芷4.4克,藁本8.9克,羌活8.9克,老鹳草17.7克,常春藤17.7克,滑石粉7克,阿拉伯酸3.3克,淀粉18克,白虫蜡0.025克,活性碳6克,制为1000丸.
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塑造一双纤纤美手
相传,南朝陈武帝对美手之女情有独钟,于是后宫佳丽争相收集名方护手,以取悦皇上,章要儿素手出众,被封为皇后.<千金方>中载有她用以洗手的药散,此散方为:藿香、甘松、白芷、藁本、瓜萎根、零陵香各60克,大皂角240克,茅香75克,白檀30克,楮桃儿90克,糯米粉500克.
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藁本内酯对照品提取与稳定性的研究
目的:通过提取与分离等实验从中药材藁本中得到藁本内酯的对照品.为其质量标准的建立和稳定性的研究提供依据,并能够掌握该方法.方法:中药材蒿本中含有藁本内酯、正丁烯酞内酯等多种成分,通过硅胶G柱层析分离制得藁本内酯,经GC-14B气相色谱检测纯度,以UV-2401(PC)S考察其质量标准.结果:制得藁本内酯纯度为98%以上,稳定性实验发现藁本内酯于-20℃下在氟仿溶液中稳定,乙醇溶液中不稳定,四氯化碳溶液中末见漂浮物.结论:该试验分离提取的藁本内酯纯度高、杂质少,质量标准符合中国药典限量规定,并对其稳定性提供依据.
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藁本挥发油中肉豆蔻醚的含量测定
本文选用气相色谱法,从藁本挥发油中分离出7种组分,并用内标法对其主要成分之一的肉豆蔻醚进行定量分析,回收率为98.69%,变异系数为1.29%(n=3).
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藁本化学和药理研究
藁本为中医常用的祛风散寒止痛药,主要用于治疗风寒感冒,风湿关节痹痛等,中国药典规定药用藁本来源于伞形科藁本属二种植物,藁本(Ligusticumsinense Oliv)和辽藁本(L.jehelense)[1].另外新疆藁本(Coniosellium vaginatum)产量较大,销往全国20余省市,作为藁本代用品用于临床[2].药理实验表明藁本具有明显的抗炎镇痛作用,新疆藁本具有较强的肝保护作用,而这三种藁本的化学成分研究较少,仅有一些挥发成分的GC/MS研究报道[3,4].为系统开展常用中药化学成分研究,提高我国中药研究水平,促进新药的研制,加强中药质量控制,以利于与国际药学研究接轨,笔者选择了该项研究课题.
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不同产地不同品种藁本挥发性成分研究
进行不同产地不同品种藁本药材挥发性成分研究.方法:采用水蒸汽蒸馏提取,应用GC-MS联用技术对藁本药材挥发油化学成分进行分离分析.结果:通过GC-MS联用技术数据检索与相关文献鉴定出29个成分,12批不同产地不同品种藁本药材挥发油化学成分主要含有的烯丙基苯类衍生物和苯酞类衍生物是相同的.结论:该方法可用于藁本药材质量评价.
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芎羌汤治疗顽固性头痛
1 临床资料芎羌汤药物组成:川芎10 g,羌活6 g,当归12 g,熟地黄20 g,荆芥6 g,防风6 g,蔓荆子10 g,细辛3 g,藁本6 g,旋覆花10 g,生石膏30 g,半夏曲10 g,炙甘草6 g.
