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基于MTT法的波棱瓜子抗肝纤维化用量初步研究
目的 制定波棱瓜子质量控制标准含量上下限,以此确定波棱瓜子用于肝纤维化治疗的合理用量范围.方法 本文采用中压制备色谱收集不含波棱甲素(herpetrione,PEDX)的阴性样品,加入不同剂量的PEDX,制备不同浓度梯度的PEDX系列样品溶液,建立PEDX系列样品HPLC指纹图谱,四甲基偶氮唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法观察PEDX系列样品溶液对人肝星状细胞系LX-2细胞增殖的影响,并比较PEDX系列样品溶液与波棱瓜子提取物溶液的抑制率差异.结果 (1)指纹图谱结果显示,不同浓度梯度的PEDX系列样品相似度良好;(2)PEDX系列样品能抑制LX-2细胞增殖,加入样品的剂量M与细胞抑制率I值呈现一定的"量-效"关系,确定了波棱瓜子中药效成分PEDX的小有效用量为0.68 mg,大有效用量为8.2 mg.结论 波棱瓜子用于肝纤维化治疗的合理用量范围为3.27~39.42 mg.
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波棱瓜子乙酸乙酯部位抗免疫性肝损伤活性谱效关系分析
目的:探讨波棱瓜子乙酸乙酯部位HPLC特征图谱与其抗免疫性肝损伤活性的相互关系.方法:采用硅胶柱色谱分离结合均匀设计获得不同化学成分组成的9批波棱瓜子乙酸乙酯部位样品,应用HPLC建立9批样品特征图谱并通过聚类分析评价9批样品的差异性;建立卡介苗+脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型测定给药组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量;结合灰色关联分析法及偏小二乘回归分析法(PLSR)研究其谱效相关性.结果:9批不同组合的样品HPLC图谱有明显差异,从其共有模式中标定了16个特征峰.与模型组相比,9批波棱瓜子给药组小鼠血清中ALT,AST活性和肝匀浆中MDA含量明显降低.谱效相关性研究发现6,7,10,15,16号峰(分别代表化合物波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛)是与抗免疫性肝损伤作用关联性较大的正相关色谱峰.结论:各样品对免疫性肝损伤均具有治疗作用,其护肝作用主要活性成分为波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛.
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波棱瓜子的原植物和显微鉴别研究
目的:为藏药波棱瓜子的药材鉴定提供依据.方法:应用粉末制片、徒手切片和石蜡切片进行研究,找出组织和粉末特征.结果:商品调查表明,波棱瓜子各地用药品种基本一致,但也有用木鳖子、王瓜、西藏赤爬等葫芦科其他属植物种子误作波棱瓜子的情况.结论:通过药材性状、组织、粉末特征能将波棱瓜子、木鳖子、苦瓜子、西藏赤爬种子予以准确区分.
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藏药波棱瓜子的文献查考
通过对古代、现代藏医药文献的考察整理研究,发现波棱瓜子早在公元8世纪就有应用.文献记载表明,古今用药种类基本一致,少有混乱.但也有用木鳖子、王瓜、西藏赤NFEF8等葫芦科其他属植物种子误作波棱瓜子的情况.为藏药波棱瓜子的开发和临床应用提供了参考依据.
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高效液相色谱法测定九味獐牙菜胶囊中小檗碱的含量
九味獐牙菜胶囊是由獐牙菜、金腰草、榜嘎、木香、兔耳草、苦荬菜、小檗皮、波棱瓜子药物组成,具有清热、消炎、止痛功效.用于治疗胆囊炎、初期黄疸型肝炎等疾病.
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肝能滴丸的成型工艺
藏药波棱瓜子系葫芦科波棱瓜属植物波棱瓜Herpetospermum pedunculosum(Ser.) Baill.(H.caudigerum Wall.)的干燥成熟种子,藏药名色吉美多;产于中国四川、云南、西藏等地及印度、尼泊尔等国,主要为藏医院使用,用药历史悠久.藏医认为其能泻肝火、胆热、解毒,用于治疗赤巴病、肝病、胆病以及消化不良[1].
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砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响
为了研究砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响,该实验采用HPLC分析波棱瓜子砂炒前后有效成分波棱甲素与波棱素的含量差异;以稀便率和腹泻指数评价砂炒对波棱瓜子总木脂素(total lignans,TL)致泻情况的影响;以CCl4急性肝损伤模型评价砂炒对波棱瓜子TL保肝作用的影响.HPLC分析结果显示,波棱瓜子砂炒后波棱甲素含量降低40.9％(P＜0.01),波棱素含量无显著性变化.药效学结果显示,砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组稀便率与腹泻指数显著低于同剂量生品波棱瓜子TL组(P＜0.01或P＜0.05);砂炒及生品波棱瓜子TL高、中剂量组均能显著抑制CCl4致肝损伤小鼠血清中ALT,AST水平的升高(P＜0.01或P＜0.05),但砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组小鼠ALT,AST水平高于同剂量的生品波棱瓜子TL组(P＜0.05).结果表明,砂炒可有效缓解波棱瓜子TL致泻作用,但是同时也降低了波棱瓜子TL的保肝作用.
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超高效液相色谱法测定波棱瓜子中Herpetrione的含量
目的 用超高效液相色谱法测定波棱瓜子中Herpetrione的含量.方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1 mm ×50 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(21∶79),流速为0.5 ml/min,柱温:30℃,检测波长240nm.结果 Herpetrione在0.0095～0.1520 μg范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=2.68×106X-278.98,r=0.9999;平均回收率为99.57％,RSD为1.15％.结论 该方法操作简单,准确性和重复性好,建立了波棱瓜子的一种快速准确的含量检测方法.
关键词： 波棱瓜子 超高效液相色谱法 Herpetrione 质量控制 -
不同炮制工艺对波棱瓜子有效成分腹泻及保肝作用的影响
目的 比较砂炒和醋炙炮制工艺对波棱瓜子有效成分、腹泻及保肝作用的影响.方法 采用HPLC法分析波棱瓜子经砂炒(或)醋炙前后有效成分波棱甲素与波棱素的含量差异;以稀便率和腹泻指数评价砂炒和醋炙对波棱瓜子总木脂素致泻作用的影响;以CCl4急性肝损伤模型评价砂炒和醋炙对波棱瓜子总木脂素保肝作用的影响.结果 波棱瓜子经砂炒(或)醋炙后波棱甲素含量分别降低40.9％和12.0％(P＜0.01),波棱素含量无显著性变化(P＞0.05).在给药第4、6天,砂炒和醋炙波棱瓜子总木脂素高、中剂量组小鼠的稀便率和腹泻指数显著低于同剂量的生品组(P ＜0.01或P＜0.05);不同炮制品波棱瓜子总木脂素高、中剂量组均能显著抑制CCl4致肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平的升高(P＜0.01或P＜0.05);与同剂量的生品波棱瓜子总木脂素组相比,醋炙波棱瓜子总木脂素各组小鼠AST、ALT水平无显著差异,而砂炒波棱瓜子总木脂素高、中剂量组小鼠ALT、AST水平显著升高(P＜0.05).结论 砂炒和醋炙均可有效缓解波棱瓜子总木脂素的腹泻作用,但砂炒后波棱瓜子总木脂素的保肝降酶作用下降,醋炙对波棱瓜子总木脂素的保肝降酶作用无显著影响.就缓解腹泻和保肝降酶作用而言,醋炙工艺优于砂炒工艺.
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波棱瓜子提取物对小鼠抗疲劳耐缺氧作用
目的 研究波棱瓜子提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧的作用.方法 按设定剂量(复方丹参组0.84 g/kg,波棱低、中、高剂量组分别为1、2、4 g/kg)连续灌胃给药7d后,观察小鼠疲劳游泳时间及耐缺氧存活时间,探索波棱瓜子提取物对小鼠抗疲劳耐缺氧的作用.结果 疲劳游泳实验中,复方丹参片组、波棱高、中、低剂量组疲劳游泳时间与空白对照组比较均有显著性差异；常压耐缺氧实验中,波棱高、中剂量组耐缺氧存活时间与空白组比较有显著性差异,而复方丹参片组、波棱低剂量组与空白组相比无显著性差异.结论 波棱瓜子提取物能显著提高小鼠抗疲劳耐缺氧能力.
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藏药波棱瓜子中一个新的倍半降木脂素
目的研究藏药波棱瓜子治疗肝病有效部位乙酸乙酯提取物的化学成分.方法采用反复常压硅胶柱色谱及高效液相制备色谱进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果从该部位分离鉴定了2个木脂素类化合物,分别鉴定为波棱酮(Ⅰ),去氢双松柏醇(Ⅱ).结论化合物Ⅰ为新化合物,且为少见的倍半降木脂素类型.化合物Ⅱ为首次从该属植物中得到.
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波棱内酯川:藏药波棱瓜子中分离到的一个新的联芳基七元内酯类化合物
采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、半制备HPLC等柱色谱技术,从藏药波棱瓜子中分离得到4个化合物,通过化合物的理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构分别为:2,11-dimethoxy-3,9-dihydroxy-7 H-dibenzo[c,e]oxepin-5-one (1)、7,8’-didehydroherpetotriol (2)、herpetotriol (3)和kaempferitrin (4).其中,化合物1为一个新的联芳基七元内酯类化合物,命名为波棱内酯Ⅲ.
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波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊的保肝作用评价
目的 制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊(NSC)及评价其保肝降酶的药效学性质,并与医院制剂肝能滴丸做比较.方法 采用高压均质法制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂(HTL-NS),采用冻干工艺将其固化后装胶囊,并对波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂、冻干粉和波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊进行表征.采用腹腔注射30％ (v/v)四氯化碳制备大鼠急性肝损伤模型,依法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;同时测定肝匀浆组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的活性,并在光学显微镜下观察肝脏病理学变化.结果 波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊复溶后粒径、多分散指数及Zeta电位分别为(332±15) nm、(0.263±0.010)及(-23.8±3.8)mV.在等剂量时波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊降低丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶的水平,提高超氧化物歧化酶活性,降低丙二醛含量和改变肝脏病理变化程度明显优于肝能滴丸.结论 波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂胶囊保肝作用显著优于肝能滴丸,为波棱瓜子总木脂素剂型的进一步开发和临床运用提供了一定的参考价值.
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藏药色吉美多对小鼠实验性肝损伤的保护作用
藏医药已有2 000多年的历史,在吸收中医药、印度医学和阿拉伯医学的基础上自成体系.近年来,作为传统医学的一部分,其独特疗效日益受到国内外的关注.色吉美多,是藏药波棱瓜子的藏药名,始载于现存早的藏药学著作<月王药诊>"波棱瓜子与纤毛婆婆纳、藏茵陈、止泻木煎汤,治疗‘赤巴'炎症;波棱瓜子与玉石等配伍治疗各种肝病",著名藏医著作<晶珠本草><四部医典>均有记载,<中华人民共和国药典>1985-2000年版附录和<中华人民共和国卫生部药品标准>(藏药)第一册均有收载,色吉美多主产于西藏、云南、四川,亦产于印度、尼泊尔,其性寒,味苦,具清胆热、泻肝火、解毒的功效.临床用于黄疸性肝炎.本实验研究其氯仿及水提取物对小鼠急性肝损伤的影响.
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藏药波棱瓜子药理活性及其在藏药方中应用研究进展
目的:综述藏药波棱瓜子的药理活性及其在藏药方中的应用研究.方法:采用文献法、比较法和归纳法.结果:作为治疗肝胆疾病的常用藏药材,波棱瓜子具有良好的抗氧化、保肝利胆、抗缺氧、致腹泻等药理活性,藏医临床用于治疗赤巴病、肝病、胆病及消化不良等症.常配以多味其他药材组成药方,用于清热解毒、疏肝利胆、健胃消食、温胃止吐、利尿、化瘀、愈溃疡、止痛、消炎、防疫等.查阅千余个藏药方,归纳出以波棱瓜子入方的计48方,大致分为清肝利胆、健胃消食、利尿、化瘀、愈溃疡、消炎等6类.结论:藏药波棱瓜子中含有多种活性成分,且具有显著的保肝利胆药理活性,拥有广阔的研究空间和应用前景.
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制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂
目的 制备波棱瓜子(Herpetospermum caudigerum)总木脂素纳米混悬剂,优化其处方并考察其体外溶出行为.方法 采用pH依赖的溶解-沉淀法联合高压均质技术制备纳米混悬剂,Box-Behnken设计-响应面法优化处方,同时对其形态、粒径及晶型结构进行表征.然后,采用桨法测定总木脂素纳米混悬剂的体外溶出度.结果 以总木脂素10 mg/mL,PVP K30 3.3 mg/mL,SDS 2.1 mg/mL制得的波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂的平均粒径为(306.15±7.06)nm,扫描电镜显示,其呈不规则球形,大小较均匀;X射线衍射图表明,总木脂素在纳米混悬前后,晶型无显著变化,以无定型状态存在;体外溶出实验表明,该纳米混悬剂的溶出量明显高于其物理混合物.结论 该制备工艺简单、稳定,适用于弱酸弱碱类难溶性药物纳米混悬剂的制备.
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波棱瓜子化学成分的研究
目的 研究波棱瓜子Herpetospermum caudigerum Wall的化学成分.方法 波棱瓜子95％乙醇提取物的石油醚部位采用硅胶、Sephedex LH-20、制备薄层TLC和半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到9个化合物,分别鉴定为亚麻酸(1)、亚油酸(2)、9,11,15-十八碳三烯酸(3)、甘油三亚油酸酯(4)、9-十八碳烯酸(5)、1-O-二十六烷酰基甘油酯(6)、(+)-(7'S,7"S,8'R,8"R)-4,4',4"-trihydroxy-3,5',3"-trimethoxy-7-oxo-8-ene[8-3',7'-O-9",8'-8",9'-O-7"]lignoid (7)、α-菠甾醇(8)、波棱甲素(9).结论 化合物3、4、6、8首次从该植物中分离得到.
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藏药波棱瓜子RP-HPLC指纹图谱研究
目的:研究藏药波棱瓜子RP-HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量奠定基础.方法:采用梯度洗脱的方法进行色谱分离,测定了10批不同产地批次的波棱瓜子样品.结果:不同批次产地的波棱瓜子药材指纹图谱相似度较好,10批样品得到的色谱指纹图谱有36个共有峰.结论:采用RP-HPLC方法控制药材的指纹图谱,方法重现性好,用于波棱瓜子的质量评价切实可行.不同产地批次波棱瓜子药材化学组成相似,其相对比例较稳定.
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GC-MS同时测定波棱瓜子脂肪油中4种脂肪酸含量
目的:建立GC-MS同时测定波棱瓜子脂肪油中4种脂肪酸棕榈酸、亚油酸、油酸和硬脂酸含量的方法.方法:采用HP-5MS毛细管色谱柱(0.25μm×0.25mm × 30m),MS检测器,程序升温,初温180℃,保持5min,以2℃/min升至200℃,然后以15℃/min升至260℃,保持24min.进样口温度280℃,分流比20∶1,流速1mL/min,载气为高纯度氦气,选样量1μL.结果:4种脂肪酸线性范围分别为30.45～174.00μg/mL、10.01～57.20μg/mL、216.44～1236.80μg/mL、25.76～147.20(相关系数均为0.9999);平均回收率(n=6)分别为98.50％、98.82％、99.16％和97.57％,RSD分别为1.1％、1.8％、1.1％和1.4％.4种脂肪酸含量测定结果(n=3)分别为0.76～3.88mg/g、0.20～1.06mg/g、1.49～24.33mg/g、0.54～3.22mg/g.结论:该含量测定方法准确、专属,重复性好,适用于波棱瓜子脂肪酸的含量测定.
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波棱瓜子多糖含量测定方法研究
目的:建立波棱瓜子多糖的含量测定方法,并测定不同产地波棱瓜子药材中多糖的含量.方法:采用水提醇沉法提取多糖,以葡萄糖标准液绘制标准曲线,用苯酚-硫酸法测定波棱瓜子多糖的含量,通过单因素实验,对显色条件进行优选,并对该法的精密度、加样回收率等进行了研究.结果:优化后的测定条件为显色波长488nm,5％苯酚的用量0.2mL、浓硫酸用量4.0mL、60℃水浴15min.该条件下,平均加样回收率为100.74％,RSD=2.23％,测得不同产地波棱瓜子药材中多糖含量为1.15％～2.16％.结论:该含量测定方法准确、简便、经济,适用于波棱瓜子多糖的含量测定.
