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男性淋病患者合并生殖支原体感染的研究
生殖支原体(Mg)由于培养时间长,影响因素多,因此,培养成功率不高.Mg与人类疾病关系的研究进展,主要得益于DNA杂交和PCR基因扩增技术的问世.
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STD患者中四种难培养支原体的分离培养结果分析
本文报告了用病原学方法,了解我国STD患者中是否存在生殖支原体、发酵支原体、穿通支原体和梨支原体的感染.采集泌尿生殖道分泌物,接种在SP-4培养基作分离培养.阳性培养物用代谢抑制实验和聚合酶链反应等加以鉴定.292例标本中分离到了11株生殖支原体、2株发酵支原体和2株穿通支原体.从病原学上首次证实,江苏地区STD患者中存在生殖支原体、发酵支原体和穿通支原体的感染,在STD防治工作中应予以重视.
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生殖支原体母婴垂直传播的研究
为了解绍兴地区孕妇生殖支原体感染和母婴垂直传播状况.采用套式聚合酶链反应(nested PCR)技术,对877例孕妇宫颈拭子标本进行了生殖支原体检测.结果表明,检测出36例孕妇呈阳性,阳性率为4.1%(36/877),同时,对上述36例阳性孕妇中已分娩的32例新生儿咽拭子标本进行了检测,检测出8例呈阳性,阳性率(即母婴垂直传播率)为25%.孕妇生殖支原体感染及母婴垂直传播状况应引起围产和优生工作者的关注.
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广东省江门地区性病患者中生殖支原体感染状况
目的 了解2005年广东省江门地区性病患者生殖支原体(Mg)感染情况,为性病防治工作提供依据.方法 采集84例性病门诊患者泌尿生殖道分泌物,用聚合酶链反应(PCR)技术检测生殖支原体脱氧核糖核酸(Mg DNA).结果 性病门诊患者Mg阳性率为17.86%,男性患者阳性率为21.21%,女性为5.56%,两者差异无统计学意义(x2=1.42,P＞0.05).PCR对Mg标准菌株(G37)敏感度为10 ccu/ml.对10种其他支原体和10种相关微生物均未出现交叉反应.结论 江门地区性病患者中存在Mg感染并较为多见,在防治工作中应予重视.
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泌尿生殖道支原体感染的研究进展
自20世纪80年代以来,随着分子生物学的发展和诊断技术的不断提高,人们对支原体的认识不断深人,发现支原体感染与临床多种疾病的发生密切相关.泌尿生殖道支原体感染主要由解脲脲原体(UU)、人型支原体(Mh)和生殖支原体(Mg)所致,可引起非淋菌性尿道炎(NGU)、非特异性生殖道感染及围生期感染等多种疾病.
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输卵管妊娠者输卵管组织生殖支原体检测研究
应用套式聚合酶链反应(nPCR)检测了输卵管妊娠者之输卵管组织中的生殖支原体(Mg)DNA,目的在于探讨输卵管妊娠与Mg感染可能存在的关系.
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含内参基因的高灵敏度生殖支原体双重荧光PCR方法的建立
目的 建立一种含有人源性内参基因的高灵敏度双重荧光PCR方法, 以期用于生殖支原体感染的快速检测.方法 根据生殖支原体MgPar重复序列中保守区域设计并合成特异性扩增引物和探针, 添加人β-globin基因检测引物探针作为体系检测内参, 建立并优化荧光PCR方法, 使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价;用该方法检测62份临床标本, 并与Mg-Pa荧光PCR结果相比较.结果 建立的基于重复序列的荧光PCR方法对生殖支原体的检测限为0.5拷贝, Mg-Pa荧光PCR的检测限提高了一个数量级.该方法扩增16种其他支原体和常见生殖道致病菌均为阴性, 特异度为100％.62份临床标本β-globin基因扩增均阳性, 生殖支原体检测阳性率为3.2％ (2/62) .结论建立的带内参检测生殖支原体的双重荧光PCR方法快速、灵敏、特异, 并通过对标本进行质控, 减少了假阴性结果的产生, 提升了检测的准确性, 具有良好的应用前景.
关键词： 生殖支原体 实时荧光PCR 内参 人β-globin基因 -
生殖支原体TaqMan荧光PCR检测方法的建立
目的 建立一种快速、灵敏、特异的生殖支原体TaqMan荧光PCR检测方法. 方法 选取生殖支原体mg219基因保守区域设计、合成特异性扩增引物和TaqMan探针,建立并优化荧光PCR检测方法.对优化后的方法进行扩增效率、灵敏度及特异度评价,并与已报道的生殖支原体常规PCR方法进行比较. 结果 建立的荧光PCR方法对生殖支原体的检测限约为10 copies,高于常规PCR的102 copies,并缩短检测时间100 min.用该方法扩增20种病原菌染色体及人类染色体,结果均为阴性,特异度为100％. 结论 建立的荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测生殖支原体,有望用于临床标本检测.
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应用噬菌体展示肽库筛选生殖支原体黏附蛋白的模拟表位
目的 利用纯化的兔抗重组生殖支原体黏附素蛋白(rMgPa)的多克隆抗体(pAb)从噬菌体展示随机12肽库筛选MgPa的模拟表位.方法 用纯化的兔抗rMgPa的pAb对噬菌体随机12肽库进行生物淘洗,随机挑取噬菌体克隆进行DNA测序与分析,并用MIMOX对噬菌体克隆所展示的肽序列进行生物信息学分析.用ELISA、竞争性结合试验和Western blot检测噬菌体与pAb结合的特异性.结果 4轮生物淘洗后特异性噬菌体克隆得到了明显的富集.依据氨基酸组成的不同,74个噬菌体克隆所展示的肽序列可大致分为3组.经对肽序列进行比较分析以及用MIMOX进行生物信息学分析,结果表明这3组的核心序列分别为:P-S-A-A/V-X-R-F/W-E/S-L-S-P、A-K-I/L-T/Q-X-T-L-X-L和K-S-L-S-R-X-D-X-I.ELISA、竞争性结合试验和Western blot方法检测的结果表明噬菌体能与pAb发生特异性结合,说明其可能是MgPa的模拟表位.结论 成功筛选到MgPa的3个可能的模拟表位,为研制基于Mg抗原表位的诊断试剂与多肽疫苗奠定了一定的实验基础.
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生殖支原体黏附蛋白MgPa特异结合多肽的筛选与鉴定
目的：利用噬菌体展示随机12肽库筛选生殖支原体黏附蛋白( MgPa)的特异结合多肽，以了解MgPa的生物学功能及其可能的致病机制。方法以纯化的重组生殖支原体黏附蛋白( rMgPa)为靶分子，对噬菌体展示随机12肽库进行3轮生物淘选，收集淘选后的噬菌体进行扩增培养，利用碘化钠法提取其单链DNA进行测序分析。用ELISA、竞争性结合试验和斑点免疫印迹试验检测阳性噬菌体与rMgPa结合的特异性。结果进行3轮生物淘选后，噬菌体克隆有明显富集。随机挑取的38个噬菌体克隆中，共出现11种不同的外源性多肽序列( P1~P11)。根据11条多肽序列中氨基酸出现的重复次数，推导出两条核心序列，即：V-H-W-D-F-R-Q-W-W-Q-P-S和D-W-S-S-W-V-H/Y-R-D-P-Q-T/S。 ELISA、竞争性结合试验和斑点免疫印迹试验的结果表明：11个代表性克隆中，有10个(P1~P10)能与rMgPa发生特异结合。结论成功筛选到了能与rMgPa发生特异结合的2条多肽，为了解MgPa的生物学功能，从而进一步了解Mg可能的致病机制提供前期实验基础。
关键词： 生殖支原体 黏附蛋白 噬菌体展示随机12肽库 特异结合多肽 -
生殖支原体培养在临床的应用
目的 探讨生殖支原体培养试剂在临床的应用价值.方法 取自2011年6-12月在河南省人民医院泌尿科及性病门诊516例患者样本,用培养试剂和PCR试剂同时进行生殖支原体检测,对结果进行统计学分析.结果 516例标本中,培养试剂检出生殖支原体69例,阳性率13.37％,PCR试剂检出生殖支原体阳性63例,阳性率12.21％,两种检测方法无统计显著性差异.结论 培养试剂可以有效检出生殖支原体的感染与否,可作为基础医院检测生殖支原体的有效手段之一.
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在性传播疾病患者中四种支原体的分离与核酸检测
国外学者曾认为生殖支原体(Mg)、发酵支原体(Mf)、穿通支原体(Mpe)、梨支原体(Mpi).4种支原体可能是人体免疫缺陷病毒(HIV)感染的协同因子和获得性免疫功能缺陷综合征(AIDS)发病的诱发因素[1].为证实我国性传播疾病(STD)患者中是否存在这4种支原体感染,我们对292例STD患者的泌尿生殖道分泌物做了分离和核酸检测,报道如下.
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盘锦地区泌尿生殖道支原体感染患者药敏试验结果分析
非淋菌性尿道炎（ nongonococcal urethritis ， NGU）是一种常见的性传播疾病，多由衣原体、解脲脲原体（ Ureaplasma ure-alyticum，Uu）、人型支原体（ Mycoplasmahominis ，Mh）及生殖支原体（ Mycoplasmagenitalium ，Mg）感染引起。为了解盘锦地区临床支原体对常用抗生素的敏感性，2011年5月～2014年1月笔者对所在医院皮肤性病科、泌尿科及妇产科门诊就诊的疑为泌尿生殖道感染的3294例患者进行支原体检测，并对培养阳性标本进行药物敏感试验分析，现将结果报告如下。
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前列腺炎患者生殖支原体感染检测的临床评价
目的：探讨在慢性非细菌性前列腺炎患者中检测生殖支原体感染的临床价值。方法采集医院2011年1月-2013年8月门诊及住院共计683份慢性非细菌性前列腺炎患者的前列腺液标本，作为观察组，采用聚合酶链反应（PCR）技术以及培养法检测标本中的生殖支原体是否为阳性，另采集正常的前列腺液标本287份作为对照组，用同样方法测定标本中的生殖支原体。结果在683份慢性非细菌性前列腺炎患者的前列腺液标本中，生殖支原体阳性的共有276份，阳性率40．41％；在287份正常人的前列腺液标本中，生殖支原体阳性的共有9份，阳性率3．14％，两组前列腺液标本的生殖支原体阳性率比较，差异有统计学意义（ P＜0．05）；观察组合并有其他病原菌感染的共145例，占52．54％，其中解脲脲支原体（U u ）感染102例，沙眼衣原体（C T ）感染12例，人支原体（Mh）感染5例，Uu＋CT感染14例，Uu＋Mh感染5例，Mh＋CT感染3例，Uu＋CT＋Mh感染4例。结论慢性非细菌性前列腺炎患者的生殖支原体感染率明显高于正常人，因此生殖支原体很可能是慢性非细菌性前列腺炎的发病原因之一。
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人工流产后生殖支原体感染与盆腔炎的相关性分析
目的 分析人工流产(TOP)后生殖支原体(Mg)感染与盆腔炎(PID)的相关性,为临床预防和治疗流产后PID提供参考.方法 以2007年3月-2012年3月医院收治的TOP患者为对象,筛查Mg和沙眼衣原体(CT)感染情况,单纯Mg感染的患者作为感染组,Mg和CT检测均阴性患者作为对照组；剔除发生CT感染的病例、随访资料不完整、患生殖器畸形和急、慢性疾病的病例；术后对所有患者随访6周,观察其术后PID的发病情况,分析Mg感染与人工流产术后PID发病率的相关性.结果 5年中共收集984例患者,其中Mg感染110例,感染率为11.18％,CT感染51例感染率为5.18％,同时感染Mg和CT的患者6例,感染率为0.61％,20～30岁年龄段感染率显著高于其他年龄段(P＜0.01)；随访发现Mg感染患者中出现PID共有15例,发病率为13.63％,而未感染患者中诊断为PID共有17例,发病率为3.53％；通过logistic回归分析可见总体在流产患者中Mg感染与PID的发病率差异有统计学意义(OR 6.29,95％CI1.56～25.2),在药物流产患者中Mg感染与PID的发病率差异无统计学意义(OR 8.68,95％CI0.58～14.84),在手术流产患者中Mg感染与PID的发病率显著相关(OR 5.78,95％CI 1.02～32.80),手术流产后盆腔炎的发病率显著高于药物流产(P＜0.01).结论 Mg感染与手术流产后PID的发病率有显著相关性,推荐对手术流产患者进行Mg感染筛查并进行治疗,预防术后PID的发生.
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生殖支原体与生殖健康关系的研究进展
支原体（mycoplasma）是1类无细胞壁、形态上多态、可通过常用的除菌滤器、能在无生命培养基上生长繁殖的小的原核细胞型微生物。支原体科含支原体属和脲原体属两个属。脲原体属主要包括解脲脲原体和微小脲原体，支原体属中对人类致病的主要是肺炎支原体、人型支原体和生殖支原体（mycoplasma genitalium）。支原体感染可导致女性生殖道感染性疾病的发生；人型支原体和解脲脲原体与女性生殖健康密切相关[1]。生殖支原体作为近年新发现的性传播疾病（STD）的病原体，由于检测方法受限，故国内外的相关研究较少。本文对生殖支原体在生殖健康中的致病性以及生殖支原体与生殖健康的关系进行阐述。
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输卵管妊娠患者输卵管病灶组织支原体核酸的检测
为探讨输卵管妊娠与输卵管支原体感染的关系,我们采用巢式聚合酶链反应(nPCR)技术对56例输卵管妊娠患者的输卵管病灶内膜组织和34例非输卵管妊娠者的正常输卵管内膜组织中的人型支原体(M.hominis,Mh)、生殖支原体(M.geuitalium,Mg)和发酵支原体(M.fermentans,Mf)的核酸进行检测.现报道如下.
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130例妊娠妇女生殖道的生殖支原体检测
生殖支原体(Mycoplasma genitalium Mg)于1981年首次发现,其形态似烧瓶,靠末端的粘附素(pa蛋白)粘附于宿主细胞而致病.近10年来,实验室和临床方面研究已取得了很大进展,但其致病性方面的研究尚少.作者对130例妊娠妇女进行检测,旨在了解Mg在孕妇中的分布情况,寻找研究Mg的合适途径.
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正常及异常妊娠妇女生殖支原体的核酸检测
生殖支原体(mycoplasma genitalium,MG)是泌尿生殖道和呼吸道新发现的支原体,为非淋菌性尿道炎(NGU)和肺炎的潜在病原体[1-4].为了解妊娠妇女生殖道的MG定植和母儿传播状况,应用套式(Nested)聚合酶链反应(PCR)方法检测117例妊娠妇女宫颈、羊水和新生儿咽拭子标本的MG特异性DNA(MG-DNA),现将结果报告如下.
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生殖支原体在不同场所暗娼人群中的流行及相关因素初探
目的 了解广西梧州市暗娼(FSW)人群中生殖支原体(Mg)的流行情况,并对感染相关因素进行分析.方法 采用方便抽样方法,对梧州市宾馆/酒店/夜总会、KTV/美容美发及出租屋/路边店/站街等三类娱乐场所的FSW收集宫颈拭子标本,检测Mg,并对人口社会学、行为学等进行问卷调查.结果 采集到407份宫颈拭子标本,Mg总检出率为14.3％.其中宾馆/酒店/夜总会185人(45.5％),Mg检出率为8.1％；KTV/美容美发175人(43.0％),Mg检出率为17.7％;出租屋/路边店/站街47人(11.5％),Mg检出率高,为25.5％.Mg感染与年龄、户籍、工作场所有关,年龄＜20岁者Mg感染风险是＞30岁的9.17倍(AOR=9.17,95％CI:3.28～25.63),来自外省的流动FSW感染Mg的风险是本市的2.58倍(AOR=2.58,95％CI:1.20～5.57),出租屋/路边店/站街FSW Mg感染的风险是宾馆/酒店/夜总会FSW的7.20倍(AOR=7.20,95％CI:2.59～19.99).结论 出租屋、路边店及站街暗娼Mg检出率高,应作为监测的重点亚人群.
