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结核分枝杆菌的检验及结果分析
检出痰液中结核分枝杆菌一直是临床诊断肺结核或鉴别肺结核与其他肺病的主要依据,涂片法简单易行,但阳性率较低,罗氏培养法虽为金标准,但因周期较长,均难以满足临床需要.近年来,作为直接检测分枝杆菌种系的鉴定及药敏的许多分子生物学方法得到长足发展,这些方法能将诊断的时间从几周缩短到几天,其中实时荧光定量PCR(FO-PCR)因其技术成熟,具有较高的敏感性和特异性,已逐步应用于临床,我们用以上3种方法同时检测100例临床痰液标本结核杆菌,对结果进行分析.
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TaqMan-PCR技术定量检测脑脊髓液结核分枝杆菌DNA的研究
为了满足临床上更快、更准确地早期诊断结核性脑膜炎(TBM),以保证及早的、更合理地进行治疗,我们引入了一种荧光定量PCR技术--TaqMan-PCR技术定量检测脑脊髓液(CSF)结核分枝杆菌DNA,并与结核抗体斑点免疫金渗试验(DIGFA)、抗酸染色法及改良罗氏培养法(L-J培养法)进行比较,探讨其在TBM诊断和治疗中的价值.
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结核分枝杆菌快速培养的研究进展及其临床意义
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的一种传染性疾病,是单一病因传染病中病死率高的疾病.防治结核病的关键是早期诊断和早期治疗.目前结核病的实验室诊断主要有细菌学检验、免疫学检验及分子生物学诊断方法,后两种因为方法学还未完善,假阳性和假阴性率较高.结核分枝杆菌的培养分离仍然是诊断结核病的"金标准",是药物敏感性检测的基础.传统罗氏培养法灵敏度低,耗时、耗力,无法满足临床需要.结核分枝杆菌快速培养分离的研究是结核病领域中迫切需要解决的重要课题.现就近年来结核分枝杆菌快速培养方法的研究现状综述如下.
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荧光判读仪快速培养结核分枝杆菌方法的应用效果评价
目的 评价荧光判读仪对结核分枝杆菌快速培养法在结核病诊断中的应用价值.探讨建立一种经济、快速、有效的结核菌的培养方法.方法 对43例活动性肺结核确诊病人的痰液进行快速结核分枝杆菌培养,同时以改良的罗氏培养基对其进行结核分杆杆菌慢速培养作对照.对这2种方法所用时间、培养阳性率进行比较.结果 采用荧光判读仪快速培养法比罗氏培养法出结果提前15 d左右,培养阳性率高8.7%.结论 荧光判读仪测定法比常规结核分支杆菌培养方法用时短,阳性率高,相对于其他快速培养经济实用,适合基层结核病院使用推广,应用.
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结核菌检测技术联合运用于结核病诊断及耐药结核病诊断的研究
目的:探讨多技术联合检测用于结核病及耐多药结核病快速诊断的临床价值.方法:以改良罗氏培养法为对照,应用离心涂片荧光染色法、GEN-XPERT对我院2015.12-2017.01间722例临床诊断结核病(包括20例NTM感染病例)患者进行实验室快速诊断;以比例法药敏试验为对照,应用GEN-XPERT与线性探针GenoType MTBDRplu相结合对272例菌阳结核病人进行利福平和异烟肼的耐药检测,计算快速法对耐多药结核病的检出率.结果:以改良罗氏培养法为金标准,离心涂片荧光染色法与GEN-XPERT结合的快速法的敏感度为95.1%,特异度为99.8%;以传统比例法药敏实验为金标准,快速法对MDR结核病检出率为73.1%.结论:以离心涂片荧光染色镜检、GEN-XPERT、GenoType MTBDRplu为组合的多技术联合检测对快速诊断结核病及耐药结核病的敏感性好、特异性高,结果报告时间缩短为12天.具有快速准确的诊断价值.
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结核菌培养方法对照与效果分析
结核病病程长,病死率高,而结核菌分裂周期长,生长速度慢,给临床诊断和治疗带来许多困难.因此结核工作者高度关注和重视结核菌的培养.本文使用简易结核菌血清琼脂斜面培养法与传统罗氏培养法、BacT ALERT3D培养系统进行对照试验,现将结果分析报告如下.
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结核分枝杆菌固液双相培养基的研究
结核病是严重危及全球的公共卫生问题之一,高耐药性结核病的流行,成为结核病诊断和治疗的难点.结核菌的培养和药敏结果,在结核病的防治中起着重要作用[1].目前公认的结核分枝杆菌培养方法有两种,一是液体培养基快速检测法,其营养成分高,培养速度快,一般仅需10-20天,药敏仅需10天.缺点是价格昂贵,不能客观观察结果,需特殊仪器(设备与培养基均需进口),其次是药敏试验种类少.二是改良罗氏培养法,是我国普及通用的结核分枝杆菌培养方法,为固相培养方法,是利用自制培养基在直视观察下,结核杆菌的菌落生长情况.其优点是药敏试验种类广泛,可以选择出敏感药物,以指导临床化疗方案的制定、价格低廉,但缺点是时间长,培养需6-8周,药敏时间一般又需4周.我们针对性地开展二者优势互补作用的探讨,研究结核分枝杆菌固液双向培养基.
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快速离心沉淀集菌涂片法与罗氏培养法检测痰内结核杆菌
直接镜检抗酸杆菌阳性可作为结核病的确诊方法之一,但痰直接涂片敏感性低,已知离心沉淀集菌涂片法可提高痰液抗酸杆菌的检出率.本研究采用快速离心沉淀集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌,同时以罗氏培养法为对照,其结果便于其他实验室借鉴与改进.
关键词: 快速离心沉淀集菌涂片法 抗酸杆菌 罗氏培养法 -
以噬菌体浸染实验检测结核菌的新技术及其临床应用
肺结核是一种因结核分枝杆菌(MTB)-鲜为牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌感染而引发的传染病,在低收入地区发病率相对较高.据WHO统计,全球约1/3的人口感染MTB,每年新增患者900万,并有300万人死于该病.目前,对于结核病诊断主要依靠实验室诊断,影像诊断临床体症相结合.而实验室诊断主要包括涂片法、培养法、分子生物学方法、免疫学方法和噬菌体法.痰涂片直接镜检是检测抗酸杆菌普遍的实验室诊断方法,特异性较高,但灵敏性较低,涂片中分枝杆菌要达到103-104/ml,才可检测出阳性结果,且仅能检出1/2-3/4的活动性结核患者,漏检率相当高.罗氏培养法是目前检测MTB的"金标准",但检测周期长达8周,导致无法及时确诊、及时治疗.近发展起来并广泛使用的快培检测技术,虽大大缩短了检测周期,但仍需3周才能确诊,依然无法达到结核病的快速诊疗要求[6].这就要求我们必须寻求一种快速、敏感、特异的检测方法尽快,尽早的发现结核病患者,为治疗争取时间.目前,FASTPLAUQUE TB试剂盒采用噬菌体扩增方法能使我们达到这一目的.
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BacT/ALERT 3 D系统在结核性脑膜炎诊断中的应用
目的:评价BacT/ALERT 3D系统在诊断结核性脑膜炎中的应用价值。方法:收集2009年1月~2014年6月间200例结核性脑膜炎患者早期脑脊液标本480份,每份标本分别用离心涂片法、罗氏培养法和BacT/ALERT 3D系统培养法检测,对其结果进行分析,总结3种方法对确诊结核性脑膜炎之间的差异。结果:480份脑脊液标本中,离心涂片法、罗氏培养法、BacT/ALERT 3D系统培养法的结核杆菌阳性检出率分别为3.13%、5.42%、10.63%,BacT/ALERT 3D系统培养法结核杆菌初代分离时间短于罗氏培养法。结论:BacT/ALERT 3D系统有较高的检出率、较快的检出时间,有助于提高结核性脑膜炎的发现率,值得临床推广应用。
关键词: 离心涂片法 罗氏培养法 BacT/Alert 3D系统 -
阿克苏地区噬菌体快速检测结核分支杆菌的临床应用及研究
结核分枝杆菌是结核病的病原菌.据中国防痨协会报道,我国结核病的发病率目前呈逐年上升趋势,而阿克苏地区亦不例外,是新疆结核病的高发区.寻求一种新的检测方法迅速提高结核菌的阳性检出率,对我区结核病的防控和治疗均有重要意义.我们用涂片法、噬菌体裂解法、改良罗氏培养法进行了对比试验,现将结果报告如下:
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两种方法培养结核分枝杆菌的比较
结核病是严重威胁人类健康的传染病.结核病的确诊有赖于病原学检查,而传统的改良罗氏培养法(L-J法)由于所需时间较长,不能满足临床需要.我院于2003年3月份引进生物梅里埃公司的BacT/ALERT3D 120型全自动细菌培养系统,能快速地培养出结核分枝杆菌.现与传统的L-J法比较如下:
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采用快速离心沉淀法检测初诊肺结核患者痰内抗酸杆菌
目的:与罗氏培养法进行比较,分析快速离心沉淀集菌涂片法,检测初诊肺结核患者痰液抗酸杆菌的效果,指导以后结核病的细菌学检查.方法:对90例来我院就诊且诊断为肺结核的初诊患者收集痰液,作快速离心沉淀集菌涂片和罗氏培养.结果:初诊病人离心沉淀集菌涂片法阳性率为73.3%,罗氏培养法阳性率为66.7%;两种方法检出率的差异无显著性(X2=0.95,P>0.05).结论:对于初诊病人,留取3份痰标本作快速离心沉淀集菌涂片可以达到和罗氏培养相接近的阳性检出率.
关键词: 快速离心沉淀集菌涂片法 抗酸杆菌 罗氏培养法 初诊病人 -
结核菌及其耐药性不同检测方法的临床应用评价
目的 对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义.方法 对标准菌株(H37 Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、低检出限方面对不同方法进行评价.结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×102cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType(R)MTB-DRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×102 cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType(R)MTBDRplus检测3×104cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType(R)MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果.结论 目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径.
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3种结核分枝杆菌检测方法的比较研究
目的 比较沉淀集菌法、罗氏培养法和聚合酶链反应(PCR)方法检测结核分枝杆菌的临床价值.方法 收集2012年6月至2013年5月张家港市第一人民医院临床确诊且经抗结核治疗两月后结核患者的痰标本102份,用以上3种方法进行平行检查.结果 102份标本中,沉淀集菌法检测结果阳性标本92份,阳性率90.19%,罗氏培养法阳性48份,阳性率47.06%,PCR法阳性77份,阳性率75.49%.沉淀集菌法与罗氏培养法的符合率为56.86%,而PCR法与沉淀集菌法符合率为81.37%,与罗氏培养法符合率为61.76%.结论 3种方法联合运用,可弥补单独采用一种方法阳性率低的缺点,从而提高检测的准确度.
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3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究
目的 对比3种检测方法 在H IV合并结核分枝杆菌感染中的诊断价值,以期找到优的检测方法 或检测方法 组合.方法 收集2013年1月至2015年12月确诊为HIV合并结核分枝杆菌感染患者的各类标本115份.每例患者均用相同类型的标本进行直接涂片抗酸染色镜检、罗氏培养和实时荧光定性PCR法检测.结果 以任意1种标本检出阳性计算阳性率,115例H IV合并结核分枝杆菌感染患者的标本直接涂片抗酸染色法与罗氏培养法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=19.865,P=0.001);直接涂片抗酸染色法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=0.028,P=0.001);罗氏培养法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=21.261,P=0.868).应用罗氏培养法来检测脓液、粪便和尿液,其检出率都达到了100.0%.实时荧光定性PCR法检测脑脊液、胸腔积液及腹水等含菌量较少的标本,检出率达到100.0%.罗氏培养法与实时荧光定性PCR法在检测痰液标本时检出率也较高(>80.0%).而从标本类型上来看,脓液标本3种方法 均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法 检测结核分枝杆菌阳性率均为100.0%.支气管肺泡灌洗液的检出率也较高,均大于70.0%.结论 实时荧光定性PCR在检测低排菌量标本如脑脊液、胸腔积液及腹水时具有明显优势;脓液标本3种方法 均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法 均能100.0%检测出结核分枝杆菌.
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噬菌体裂解法鉴定结核分枝杆菌的分析
目的通过对噬菌体裂解法与罗氏培养法检测结核分枝杆菌的情况进行比较,探索简便、快速、灵敏的结核分枝杆菌检测方法.方法对2004年9~12月在奉贤区疾病预防控制中心结核病门诊就诊的297位患者的痰标本用涂片法进行筛选,对筛选出的40份阳性标本分别用噬菌体裂解法和罗氏培养法进行检测.结果罗氏培养法检测到阳性标本32份,噬菌体裂解法检测到阳性标本31份,二者检出的阳性率比较,无显著性差异(χ2=0.0747,P=0.785).噬菌体裂解法的灵敏度为84.4%,特异度为50.0%.结论噬菌体裂解法可以快速、简便地检测结核分枝杆菌,并且具有较高的敏感性和一定的特异性.