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红杉醇抑制葡萄糖苷酶及改善糖耐量实验研究
目的 探讨红杉醇体外对葡萄糖苷酶的抑制作用以及对糖耐量的影响.方法 采用96孔板法,分别测定红杉醇对α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、蔗糖酶和海藻糖酶的抑制作用,以及抑制类型.对小鼠灌胃给予红杉醇后,考察其糖耐量.结果 红杉醇等化合物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,对β-半乳糖苷酶,α-淀粉酶,葡萄糖淀粉酶和海藻糖酶也有一定的抑制作用,且抑制类型多为竞争性抑制.结论 红杉醇在一定程度上具有降血糖的作用,其作用机制部分通过抑制-葡萄糖苷酶实现.红杉醇对糖尿病的预防与治疗具有一定作用.
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肌醇的天然单甲醚类衍生物研究进展
肌醇是自然界中广泛存在的一种六元醇,有广泛的生理、生化作用,特别是能够促进肝和其他组织中的脂肪代谢、降低血中胆固醇,临床用于治疗脂肪肝、肝硬化,动脉硬化及高血脂症。近年来,一些肌醇衍生物已被报道具有其他生物活性,包括降血糖、镇咳,抗炎等作用,其中,松醇、白坚木皮醇、红杉醇等肌醇单甲醚类衍生物的研究较为深入,本文重点对这些肌醇单甲醚类衍生物的生物活性、提取制备和开发应用等方面进行综述。
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红杉醇对2型糖尿病大鼠主动脉NOX4及eNOS表达的影响
观察红杉醇(sequoyitol,Seq)对2型糖尿病大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及NADPH氧化酶4 (NOX4)表达的影响.采用小剂量链脲佐菌素(STZ,35 mg·kg-1)加高脂高糖饮食诱导2型糖尿病动物模型,灌服Seq(12.5、25及50 mg·kg-1 ·d-1)治疗6周后,于末次给药后测定空腹血糖.使用离体主动脉环灌流法,观察主动脉环对乙酰胆碱和硝普钠的舒张反应,HE染色观察主动脉病理学变化,放射免疫法检测血清胰岛素水平;比色法测定主动脉总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量;real-time PCR、Westernblotting及免疫组化检测主动脉eNOS及NOX4 mRNA和蛋白表达.结果显示,红杉醇给药6周后能明显降低糖尿病大鼠空腹血糖,减轻胰岛素抵抗,改善主动脉内皮依赖性舒张功能,上调主动脉eNOS的表达,提高T-AOC及NO水平,降低NOX4的表达及MDA含量.上述结果表明,Seq可能通过下调NOX4表达、上调eNOS表达进而对糖尿病大鼠主动脉内皮功能损伤产生保护作用.
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红杉醇对2型糖尿病大鼠肝病NADPH氧化酶亚单位p22 phox和p47 phox表达的影响
探讨红杉醇对2型糖尿病大鼠肝病NADPH氧化酶亚单位p22 phox和p47 phox表达的影响.采用高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病大鼠肝病模型,红杉醇(50、25及12.5 mg·kg-1·d-1)治疗6周.于末次给药后测定血糖、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢(H202)、NO和胰岛素(Ins)的含量;real-time PCR测定肝脏p22 phox和p47phox mRNA表达;Western blotting法测定p22 phox和p47 phox蛋白表达,HE染色观察肝脏病理变化.结果发现,红杉醇各剂量组能降低模型大鼠空腹血糖、ALT、AST、Ins和H202含量,恢复胰岛素敏感指数(ISI)及体重,升高肝组织T-AOC和NO含量;降低肝组织NADPH氧化酶亚单位p22 phox和p47 phoxmRNA及蛋白表达,改善肝细胞病理改变(水肿、点状或灶状坏死及炎症细胞浸润).上述结果表明,红杉醇可通过降低NADPH氧化酶表达进而改善2型糖尿病大鼠肝病的氧化应激损伤.
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红杉醇对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞NOX4、eNOS表达的影响
目的:观察红杉醇(Seq)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及机制.方法:原代培养HUVECs,红杉醇(0.1,1,10 μmol/L)预处理1h后,30 mmol/L葡萄糖诱导内皮细胞损伤.5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,2'7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)免疫荧光法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,比色法检测细胞一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及过氧化氢(H2O2)水平,real-time PCR和Western blot检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及NADPH氧化酶4(NOX4) mRNA和蛋白表达.结果:Seq预处理1h后能明显减轻高糖诱导的血管内皮细胞损伤,促进细胞增殖,降低胞内NOX4的表达及ROS、MDA及H2O2水平,上调eNOS的表达及NO水平.结论:Seq对高糖诱导的内皮细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、上调eNOS的表达有关.
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红杉醇对2型糖尿病大鼠心肌NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox及iNOS蛋白表达的影响
目的:探讨红杉醇(sequoyitol,Seq)对2型糖尿病大鼠心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox、p47phox及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响.方法:雄性SD大鼠100只,分为正常组、模型组、Seq(12.5、25、50 mg/kg)及阿卡波糖(Aca,20mg/kg)组,采用小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)联合高糖高脂饲料建立2型糖尿病大鼠模型,HE染色观察心肌病理变化,WesternBlot法检测心肌组织iNOS、p22phox及p47phox蛋白表达,比色法检测心肌组织一氧化氮(NO)、过氧化氢(H2O2)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的含量.结果:与对照组相比,模型组大鼠空腹血糖明显升高,心肌肥厚明显加重,心肌组织iNOS、p22phox及p47phox的表达水平及NO、H2O2含量显著升高,而SOD和T-AOC水平明显降低.与模型组相比,Seq各剂量组和Aca组能不同程度地降低大鼠血糖,改善糖尿病大鼠心肌损伤,下调心肌iNOS、p22phox和p47phox的表达,降低心肌NO、H2O2含量,升高SOD、T-AOC水平.结论:Seq可能通过抑制心肌p22phox、p47phox及iNOS所介导的氧化应激损伤,进而对糖尿病心肌损伤起到保护作用.
关键词: 红杉醇 糖尿病大鼠 诱导型一氧化氮合成酶 NADPH氧化酶 氧化应激 -
红杉醇对2型糖尿病大鼠脂代谢的影响
目的:观察红杉醇对2型糖尿病大鼠脂代谢的影响.方法:采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型35只,灌服红杉醇(50、25及12.5 mg·kg-1· d-1)6周,每天1次.全自动生化分析仪测定血清TG、TC、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量;ELISA法检测血浆游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)、肝脏载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,Apo-A1)和载脂蛋白B1(Apolipoprotein B1,Apo-B1)含量;放射免疫法测定肝组织瘦素(Leptin)含量;MASSON染色观察肝脏病理改变.结果:红杉醇能显著降低模型大鼠血脂、FFA含量,下调肝组织Apo-B1及Leptin水平,上调肝组织Apo-A1的含量,减轻肝细胞脂肪变性,减少肝细胞间质和血管旁胶原沉积.结论:红杉醇具有调节2型糖尿病大鼠脂代谢、减轻脂肪肝和肝脏胶原沉积的作用.
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红杉醇对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用
目的:探讨红杉醇(sequoyitol,Seq)对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法:采用高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素( STZ,30 mg/kg)腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型,灌服Seq[12.5、25、50 mg/(kg· d)]。治疗6周后,于末次给药后测定血糖及左心室质量指数、血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)活性、C-反应蛋白(CRP)水平及心肌一氧化氮( NO)、丙二醛( MDA)含量;Masson染色观察大鼠心肌胶原纤维变化;免疫组化检测心肌诱导型一氧化氮合酶( iNOS)蛋白表达。结果:Seq各剂量组能降低模型大鼠血糖及左心室质量指数,改善心肌纤维化,降低CK、LDH、CRP水平,下调心肌iNOS蛋白表达,降低心肌NO及MDA含量( P<0.05或P<0.01)。结论:Seq可能通过抗氧化机制,下调心肌iNOS表达,进而对糖尿病大鼠心肌损伤产生保护作用。
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正交试验优选肾蕨中红杉醇的醇提工艺
目的 优选肾蕨中红杉醇佳提取工艺.方法 以红杉醇含量为评价指标,采用高效液相色谱法测定红杉醇的含量,并用L9(34)正交试验法优化提取条件.结果 提取时间对红杉醇的含量有显著影响,佳提取工艺为:每次加4倍量75%乙醇,提取3次,时间分别为3.5、2.5、2 h.结论 优选得到的工艺稳定、合理、可行.
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红杉醇在植物种类中的分布
根据民间用药的效果,采用现代药学研究证明,红豆杉(Taxus chinensis)中的成分红杉醇(sequoyitol)在动物模型上有明显的降血糖作用,且毒性较低.由于红豆杉是保护植物,不能作为生产红杉醇的来源.因此,寻找红豆杉的替代资源,是继续开发红杉醇的一项重要工作.本文调研了1957年到2005年的文献资料发现,在裸子植物、被子植物和蕨类植物中均有红杉醇存在的文献报道.