首页 > 文献资料
-
宫内发育迟缓:胰腺发育编程改变及其可遗传效应
宫内发育迟缓(IUGR)是成年期糖耐量异常和2型糖尿病(T2DM)重要的独立危险因素之一,其机制与IUGR状态下胰腺β细胞发育编程改变有关,且个体代谢表型的变化往往能够波及至多代,具有一定的可遗传性.不良宫内环境所引起的IUGR胎胰腺β细胞存在发育、分化、增殖等多方面异常,由此导致了子代出生后糖代谢功能的编程改变.孕期糖皮质激素过暴露、表观遗传学修饰改变和β细胞线粒体氧化损伤可能参与了IUGR胰腺发育和糖代谢编程改变的发生机制.
-
Nkx2.2和 Nkx6.1在宫内发育迟缓新生大鼠胰腺中的表达及临床意义研究
目的观察宫内发育迟缓新生大鼠胰腺中Nkx2.2和Nkx6.1的表达。方法研究时间为2012年6月至2014年12月。清洁级Wistar 大鼠，低蛋白饮食法建立宫内发育迟缓（IUGR）模型，摘取胰腺组织，称重，应用免疫组织化学法检测新生大鼠胰腺组织中Nkx2.2和Nkx6.1的表达。结果 IUGR 组新生大鼠胰腺组织重量显著低于对照组（P<0.05）。与对照组相比，IUGR 组胰腺表现为组织松散，胰岛面积减少，胰腺中Nkx6.1的表达明显低于对照组（P<0.05）。IUGR 组 Nkx2.2的表达面积低于对照组，光密度值略低于正常组，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 IUGR 组Nkx6.1表达影响胰腺的发育，这可能是导致IUGR 大鼠成年期易罹患糖尿病的原因之一，对其进行深入研究将为新生儿胰腺功能发育障碍及先天性糖尿病的分子机制研究提供新的理论依据，并为开发新生儿胰腺功能发育障碍及先天性糖尿病的靶向药物提供了潜在的临床靶标。
-
microRNA与胰腺发育以及干细胞分化的研究进展
microRNA(miRNA)是一类参与基因转录后调控的非编码小分子RNA,其在胚胎发育、细胞命运决定、生长调控等方面发挥重要作用.业已证实,一些特定的miRNA通过靶向调控某些胰腺发育相关的重要转录因子而参与胰腺胚胎发育过程.通过模拟体内胰岛发育过程,可将干细胞在体外诱导定向分化为胰岛素分泌细胞.此外,miRNA在干细胞的维持和分化中也可能具有调控作用.因此,miRNA在胰腺发育和干细胞分化中的作用及其机制值得深入研究,这将为胰岛功能重建治疗糖尿病策略提供新的思路.
-
microRNA在胰腺发育及1型糖尿病中的研究进展
T1DM的发病机制至今尚未完全阐明，microRNA是一类在转录后水平上调控基因表达的小分子RNA。microRNA表达量或功能的变异参与调节胰岛β细胞的量和功能，与T1DM相关，本综述介绍microRNA在胰腺发育、胰岛素分泌及T1DM中的进展。
-
基于 CRISPR／Cas9研究 RFX6对斑马鱼胰腺发育的影响
目的：构建RFX6基因敲除斑马鱼动物模型及初步探究RFX6对斑马鱼胰腺发育的影响。方法应用CRISPR／Cas9技术，设计针对靶点的gRNA，诱导靶点突变，经测序鉴定得到突变体。结果成功构建了RFX6基因敲除斑马鱼动物模型，初步研究发现RFX6纯合突变体生长发育迟滞、体型瘦小、呈现糖尿病消瘦体型并且不能产生后代。结论 RFX6在斑马鱼胰腺的发育中占据重要地位，是控制斑马鱼胰腺发育的关键因子。
关键词： 基因敲除 CRISPR/Cas9 斑马鱼 胰腺发育 RFX6 -
Pdx1诱导胰岛素分泌细胞形成研究进展
Pdx1基因对胰腺发育胰岛功能的影响有着十分重要的作用,近年来利用Pdx1在体外细胞培养的转分化作用,将成体肝细胞、胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞、肠上皮细胞等诱导分化成胰岛素分泌细胞的试验研究已经成为糖尿病基因和细胞学治疗的研究热点之一.
-
胰腺发育和生物活性的主要调控因子--PDX-1
糖尿病,尤其是Ⅰ型糖尿病(juvenile-onset autoimmune diabetes 或者insulin-dependent diabetes mellitus)是世界上普遍危害人类健康的慢性疾病之一.据统计80%的糖尿病患者为Ⅰ型糖尿,发病初期症状不明显,临床期开始出现明显症状时其自身免疫系统及90%的胰岛β-细胞遭到破坏,导致胰岛素分泌不足,血糖升高和多系统累及并发症的发生.目前许多研究者正在探索新的途径替代胰岛素彻底治疗糖尿病,如:胰腺移植、胰岛组织移植、胰腺干细胞诱导分化替代疗法、其它来源干细胞替代疗法.前两种方法受到器官来源,移植条件和宿主移植物间的免疫排斥反应的限制,成体中的移植率和生存率都相对较低,因此近年来以干细胞为基础的研究迅速开展起来.本文主要阐述胰岛素特异性基因PDX-1对胰腺的发生、发育及胰岛素表达、合成、分泌的调控作用,为干细胞诱导分化替代胰岛素分泌β-细胞的临床应用提供理论参考.
-
C-MET在大鼠胰腺发育过程中的表达
目的:研究CMET在大鼠胰腺发育阶段的表达和细胞定位.方法:运用RT-PCR和WesternBlot技术分别检测C-MET在大鼠胰腺发育阶段的mRNA和蛋白表达水平;运用免疫组化和免疫荧光技术检测不同时期C-MET在胰腺的组织细胞学定位.结果:RT-PCR结果显示E18.5 C-METmRNA高表达.Western Blot结果显示其蛋白在P14,P21高表达,并存在两种亚型,分子量分别为190KD和170KD.免疫组化和免疫荧光结果显示在不同发育时期C-MET在胰岛B细胞和间充质细胞都有表达.结论:C-MET在大鼠胚胎发育后期及生后出现高表达,并表达于胰岛B细胞和间充质细胞,可能参与了胰岛形成、结构重塑和功能维持.
关键词： c-met 胰腺发育 RT-PCR Western blot -
WFS1在大鼠胰腺不同发育阶段的表达
目的:研究WFS1在胰腺发育不同阶段的表达和细胞定位.方法:运用Western Blot技术检测WFS1在大鼠胰腺发育不同阶段的蛋白表达水平;运用免疫荧光检测不同时期WFS1在胰腺的定位.结果:Western Blot结果显示WFSl的蛋白表达量胚胎后期高于新生期,成年期表达量上升;免疫荧光结果显示在不同发育时期WFS1与胰岛β细胞共表达.结论:WFS1在胚胎发育中后期的高表达可能与胰岛形成及功能完善有关,并且可能参与了胰岛重塑.
关键词： EWS1 Western blot 免疫荧光 胰腺发育 胰岛重塑 -
大鼠胰腺发育过程中AFP动态表达的意义
目的:探索大鼠胰腺发育过程中AFP动态表达的意义.方法:采用高密度寡核苷酸芯片对胚胎12.5天(E12.5)、E15.5、E18.5、初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析.结果:AFP显著高表达于E18.5大鼠胰腺,AFP在胚胎期的动态表达趋势与胰腺功能细胞标志物以及可能介导AFP促细胞增殖效应的有关信号系统成员的表达趋势一致.结论:AFP在大鼠胰腺发育过程中动态表达的生物学意义可能在于参与胰腺发育调控.
-
大鼠胚胎发育期NBC1在胰腺的表达与定位
目的:探讨碳酸氢钠协同转运载体(NBC1)在大鼠胰腺胚胎发育期不同阶段核酸、蛋白水平的动态变化以及在腺泡和β细胞的定位表达.方法:采用高密度寡核苷酸芯片对孕125d (E12.5)、E15.5、E18.5、新生和成年胰腺进行基因转录水平分析,用RT-PCR和Western blot分别验证了NBC1核酸和蛋白在E15.5、E18.5、新生和成年时期胰腺中的表达情况,用Double fluores-cence immunohistochemistry分析了NBC1在E18.5、新生和成年时期胰腺腺泡和β细胞的定位表达.结果:在大鼠胰腺胚胎发育过程中,NBC1核酸、蛋白在E18.5时特异高表达,新生下降直至成年低；在腺泡基底侧膜和β细胞膜有强烈的阳性信号,且在成年胰腺中8细胞膜阳性信号较腺泡基底侧膜强.NBC1的表达变化与其功能近似基因的表达趋势相反,而与其协同发挥作用的基因及胰腺特异基因的表达趋势一致.结论:NBC1在胰腺发育过程中不仅与结构形成而且与功能发挥相关.
-
人胚胎胰腺发育中微血管密度的变化
胚胎胰腺的发育经历了原始胰管的形成、胰岛原基的形成、胰腺外分泌部各级导管及腺泡的形成3个阶段,与血管的发育和分布密切相关.选用CD34标记血管内皮细胞,检测和量化组织中的微血管密度(Microvessel density, MVD),多用于推测实体肿瘤预后的指标.检测MVD来了解胚胎器官的发育很少见报道.本实验应用CD34抗体标记胚胎胰腺中的血管内皮细胞并计数,旨在探讨MVD与胚胎胰腺发育的关系.
-
Pax6基因突变与胰腺发育和糖尿病发生关系的研究进展
配对盒因子6(Pax6)基因是Pax多基因转录因子家族成员之一,是与胰腺发育、α细胞分化、高血糖素基因的转录和激活、β细胞功能以及胰岛素表达密切相关的关键转录因子,在众多调节β细胞发育的基因中发挥中心作用,其突变/变异已成为糖耐量异常和早发糖尿病的致病原因或易感位点.该文就Pax6基因突变与胰腺发育及糖尿病发病关系的研究进展进行综述.
-
宫内发育迟缓对新生大鼠胰腺发育及功能的影响
目的:探讨母体营养不良对胎儿胰腺发育及功能的影响.方法:自妊娠11天起限制母鼠饮食(予正常50%)以建立宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)新生大鼠模型.观察其生长发育状况,行葡萄糖耐量及胰岛素释放试验及免疫组化形态和量化分析,以评估IUGR新生大鼠胰腺发育情况及其功能变化.结果:IUGR组新生大鼠出生时体重、胰重和胰重/体重比值均明显低于正常组(P<0.001).空腹血糖及胰岛素虽低于正常新生大鼠,但糖负荷后120 min和180 min血糖值下降慢于正常组[(18.95±2.63)mmol/L VS(16.92±1.30)mmol/L,(18.29±2.58)mmol/L VS(15.87±2.08)mmol/L,P均<0.05].同时,IUGR组胰腺组织中胰岛素阳性表达细胞面积[(M=1 530.98 um2,QU-L=2 961.98 um2)vs(M=3 146.24 um2,QU-L=4 633.73 um2)]及胰岛素染色阳性率[(M=2.03%,QU-L=2.67%)vs(M=5.44%,QU-L=4.34%)]亦小于正常组(P均<0.01).结论:母体营养不良导致IUGR新生大鼠胰腺发育受损,胰岛面积减少,血糖调节能力下降.
-
IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育
目的:探讨肌醇依赖性激酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)对非洲爪蟾胰腺发育的影响.方法:通过显微注射基因特异性反义寡核苷酸实现基因敲降；利用整体胚胎原位杂交方法检测基因表达.结果:IRE1α表达于爪蟾发育中的胰腺；利用基因特异性反义寡核苷酸敲降IRE1α后,非洲爪蟾肠道明显异常,胰腺内外分泌标志性基因胰岛素、淀粉酶表达显著减少；胰腺前体细胞的标志基因pdx1和p48表达明显减少；敲降IRE1 α下游基因X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)后,非洲爪蟾的胰岛素、淀粉酶表达也明显减少.结论:IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育,可能通过XBP1发挥作用.
-
ETS1/2对非洲爪蛙胰腺发育的影响
目的:探讨ETS1/2对非洲爪蛙胚胎胰腺发育的影响.方法:设计并合成特异性抑制ETS1/2表达的反义吗啉代寡核苷酸(morpholino oligonueleitide,MO),通过显微注射的方法将MO转入爪蛙胚胎,利用整胚原位杂交和定量RT-PCR检测标志性基因的表达变化.结果:单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,共同敲降ETS1/2后会使爪蛙胚胎发育异常,胰腺标志基因表达上升,肠道标志基因表达下降,肝脏和胃标志基因无明显变化;胰腺标志基因ngn3、igf1、foxa1的启动子区存在ETS1/2的结合位点.结论:单独敲降ETS1或ETS2对爪蛙胚胎发育无明显影响,敲降ETS1/2促进爪蛙胚胎胰腺发育,抑制肠道发育,对肝脏和胃的发育无明显影响.
-
大鼠胰腺不同发育时期胰岛素分泌相关基因的表达
目的 探讨与胰岛素分泌相关基因在大鼠发育不同阶段的表达趋势.方法 采用高密度寡核苷酸芯片和RT-PCR技术对孕12.5 d(E12.5)、E15.5 d(E15.5)、E18.5 d(E18.5)初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析.结果 在大鼠发育不同阶段胰岛素mRNA持续表达;调控胰岛素基因表达的相关转录因子多在E12.5或E15.5开始表达(分别占60%和20%);与胰岛素分泌相关的基因多在胚胎发育中后期开始表达(占66.7%),其中基因Rim1在胰腺发育不同时期呈现差异表达,于初生期达到表达高峰.结论 胚胎发育中后期是胰腺内分泌部发育的关键阶段.
-
宫内发育迟缓新生大鼠胰腺中MafA的表达
[目的]观察宫内发育迟缓(intrauterine growth restriction,IUGR)新生大鼠胰腺中MafA的表达. [方法]清洁级Wister大鼠,雌雄鼠5∶1合笼,孕鼠按受孕顺序随机分为两组(低蛋白组和对照组),低蛋白组自妊娠第1天至分娩给予低蛋白饲料,对照组妊娠全程给予标准饲料.测量IUGR组和对照组新生大鼠空腹血糖及糖负荷后的血糖,摘取胰腺组织,称重,采用HE染色,光镜观察胰腺形态学变化,应用免疫组织化学法检测新生大鼠胰腺组织中MafA的表达. [结果]IUGR组新生大鼠空腹血糖低于对照组,给予糖负荷后,IUGR组血糖下降较慢,至120 min仍明显高于对照组(P＜0.05)；胰重显著低于对照组(P＜0.05).与对照组相比,IUGR组胰腺表现为组织松散,胰岛数量及面积减少,胰腺中MafA的表达明显低于对照组(P＜0.05). [结论]宫内蛋白营养不良可致大鼠发生IUGR,IUGR新生大鼠胰腺中MafA的表达下降,这可能是影响新生大鼠胰腺发育和功能完善的机制之一.
