首页 > 文献资料
-
国境口岸猴痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立
[目的]建立快速、特异的猴痘病毒实时荧光PCR检测方法.[方法]制备猴痘病毒阳性样本,设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针,摸索佳反应条件.[结果]本方法对模拟猴痘病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应.本方法快速、灵敏,并具有较高的特异性和重复性,可在3h内准确检测出猴痘病毒核酸.[结论]本方法适合国境口岸猴痘病毒快速检测,对防止猴痘病毒传入我国,保障我国的国境口岸卫生安全具有重要意义.
-
猴痘病毒特异性单克隆抗体制备及鉴定
目的 制备猴痘病毒特异性单克隆抗体,建立猴痘病毒免疫荧光检测方法.方法 原核表达猴痘病毒A29蛋白及与之同源的痘苗病毒A27蛋白和牛痘病毒162蛋白,建立抗体筛选系统;使用人工合成的猴痘病毒A2917~49 多肽免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞通过融合、克隆和筛选等制备猴痘病毒单克隆抗体.通过ELISA法确定单克隆抗体的特异性及亚型.结果 在大肠埃希菌中成功表达A29、A27及162蛋白,经Western blot鉴定分子量与预期相符,带his标签的三种蛋白经His-Bind亲和层析柱纯化后纯度均大于90%;用纯化蛋白筛选获得8株A29蛋白特异的单克隆抗体,其中两株为IgG3型,其余为IgG1型.结论 本研究获得8株猴痘病毒特异性单克隆抗体,为进一步建立猴痘病毒免疫荧光检测奠定基础.
-
猴痘病毒感染血清抗体ELISA检测方法的建立
目的 建立猴痘病毒感染血清IgG抗体检测方法.方法 采用合成的猴痘病毒B21R蛋白上的2条混合多肽作为包被抗原,建立猴痘病毒感染人血清IgG抗体间接ELISA检测方法.选取正常成人血清、无关病毒感染血清和猴痘病毒感染者血清标本对多肽抗原特异性进行评价,并优化反应参数.结果 猴痘病毒B21R蛋白上的二肽混合抗原与正常血清和无关病毒感染血清均无明显交叉反应,具有较好的抗原特异性.经优化后,混合二肽抗原的佳包被浓度均为50 ng/孔,二抗稀释度为1:20000.在此条件下塞拉利昂猴痘患者血清在12 d和55 d的猴痘病毒IgG抗体滴度均为1:6400.结论 初步建立了猴痘病毒感染血清IgG抗体间接ELISA检测方法,为我国应对可能出现的猴痘输入病例提供技术储备.
-
猴痘病毒检测研究进展
猴痘是由猴痘病毒引起的人畜共患病,人类中出现的症状与过去在天花患者身上所看到的症状相似,但病情相对较轻,人群传播力弱于天花.但是自1980年世界上消灭天花以后,猴痘仍然威胁人类的健康.对疫情做出及时正确的反应依赖于有效的病毒检测方法.本文对近年来猴痘病毒的检测方法的发展做一综述,为我国应对可能出现的猴痘疫情以及生物反恐提供参考.
-
21世纪初期的传染性疾病的暴露
传染性疾病的出现包括许多相关的因素.全球旅行和贸易相互往来的增加,经济、政治和文化传播的相互作用,人类对人类、动物对人类的相互联系,这些都可使微生物在不经意间传播.21世纪初期新的因素已经被发现并且引发新的疾病爆发.控制传染性疾病传播的解决办法是要求全世界多学科、多方面合作.本文指出了出现的传染性疾病,概述了其发生的历史背景,探讨了出现这种疾病的因素.在21世纪初期已经出现了7种重要的病原体,主要包括:埃博拉和马尔堡出血热、猴痘、牛海绵状脑病、严重急性呼吸道征候群、西尼罗河病毒和禽流感.介绍了对每一种病原体的发生背景、病例分析及健康保健指导.
-
猴痘病毒LAMP检测方法的研究
目的:为了防止猴痘病毒传人我国,建立一种快速检测猴痘病毒的方法.方法:合成猴痘病毒的特异性基因,转入质粒作为阳性样本,运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)设计一套特异性引物,优化反应条件,在等温条件下特异性地快速检出猴痘病毒.结果:阳性质粒扩增产物电泳可见特异性阶梯状条带,离心后可见白色沉淀,对照组其他不同病毒均不能扩增出阳性反应；加入荧光染料后,阳性样本产生强绿色荧光,其他病毒株呈弱荧光信号.结论:该方法提供了一种检测猴痘病毒的技术手段,可在简便的实验环境中快速、特异、灵敏地检测猴痘病毒.
-
猴痘的临床与防治
猴痘是由猴痘病毒(Monkeypox virus)引起的一种通常发生在中非和西非的罕见的病毒性疾病.该病毒于1958年首先在哥本哈根的绿猴中发现,因此称之为猴痘病毒".猴痘主要在动物中流行,偶尔也可以感染人类,导致人与人之间传播.1970年首次报道人类感染猴痘,1996年首次在刚果民主共和国暴发人猴痘.该病传染性强,病死率为1%～10%.
-
猴痘病毒及其预防
猴痘是由猴痘病毒引起的一种罕见、散发的、天花样临床表现的急性传染病.猴痘病毒是一种动物源性病毒,与天花病毒同属正痘病毒科.该病毒一旦发生突变重组,将会在人类中更易传播,甚至取代早已消灭的天花病毒,填补已出现的生态链缺口.
-
猴痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立
[目的]建立快速、特异的猴痘病毒实时荧光PCR检测方法.[方法]制备猴痘病毒阳性核酸样本,设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针,摸索佳反应条件.[结果]本方法对模拟猴痘病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应,具有快速、灵敏、较高的特异性和重复性,可在3h内准确检测出猴痘病毒核酸的能力.[结论]本方法适合国境口岸猴痘病毒快速检测,对防止猴痘病毒传入我国,保障国境卫生安全具有重要意义.
-
美国猴痘疫情介绍
自美国卫生部门6月7日宣布威斯康星州、印第安纳州和伊利诺伊州等中部3个州有人感染猴痘病毒以来,猴痘病例数持续上升.截至6月10日,美国发现的可疑和确诊猴痘病毒感染者已上升到53人.
-
猴痘病毒快速检测方法的建立
目的 连州市被列为广东省2009年至2011年野生动物暴露人群中动物传染病调查研究监测方案中候痘监测重点之一,为了连州市输入性猴痘病毒检测的顺利开展,决定建立猴痘病毒快速检测方法.方法 根据GenBank发表的猴痘病毒(AF380138) F3L基因全序列,设计并合成了引物和Taq-Man、MGB探针,建立了F3L基因的荧光定量PCR检测方法.同时应用该方法可从人工合成的猴痘病毒F3L基因片段(48048～48509 bp)扩增典型的“S”型曲线,25μL反应体系检测灵敏度可达6.8拷贝.应用该方法对2009-2011年连州市采集的野生动物血液样品331份、密切接触人群的血液样品118份进行检测,结果 均未检测出阳性.结论 荧光定量PCR方法可特异、敏感、快速地检测猴痘病毒.
