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放射配基受体结合实验方法文献资料
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大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合法
目的建立大鼠胃壁细胞胃泌素受体放射配基结合实验方法.方法以125 I-[Leu15]-gastrin17-I为标记配基,以大鼠胃壁细胞悬液为受体制备,反应体系总体积为200 μl,37℃恒温水浴振荡孵育30 min,以49型玻璃纤维滤膜分离结合和游离配基.结果胃泌素受体结合符合简单单位点结合模型,Scatchard作图求出胃泌素受体结合参数Bmax=4.4604×10-12 mol·L-1,Kd=1.249×10 -10 mol·L-1.单点法求出特异结合位点数703.2 sites·cell-1.细胞浓度在0.25×109～2×109 cells·L-1范围内,与标记配基特异性结合容量成正比.同一样品特异结合测定方法变异系数为7.04%.竞争抑制实验证明125I -Gastin与大鼠胃壁细胞结合特异性良好.结论大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合实验方法符合受体结合实验方法学要求.
关键词： 胃泌素受体 放射配基受体结合实验方法 壁细胞 大鼠
