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  • 改良地黄散抑制TGF-β1-CTGF信号通路改善肾间质纤维化的研究

    作者:杨志超;杨建军;马军;胡向农;刘渊;张犁

    目的 研究改良地黄散对部分输尿管梗阻(PUUO)大鼠肾间质纤维化作用以及探讨其可能的机制.方法 80只SD大鼠,随机均分为对照组、模型组、低剂量组、高剂量组,每组20只.高低剂量组、模型组采用腰大肌管包埋法建立PUUO模型,对照组仅切除左侧肾.高剂量组(2 mL/d)和低剂量组(1 mL/d)予以改良地黄散煎剂灌胃,对照组和模型组予均给予等量生理盐水灌胃.分别于建模后4周、8周每组取10只采集血、尿样本,测定各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量.测量肾组织大小、肾皮质厚度.制备肾组织切片,通过HE染色、Masson染色,观察各组肾脏病理组织学改变,以及肾脏纤维化情况.采用免疫组织化学法检测各组大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾组织的表达情况;采用qPCR检测TGF-β1、CTGF mRNA表达.结果 4周时:模型组相大鼠炎性细胞浸润,局部灶状萎缩坏死,较多胶原纤维化形成.高低剂量组较模型组病理改变不明显,肾间质增宽仅有少许间质纤维化.8周后:模型组淋巴细胞浸润,肾小球坏死,结构彻底改变.间质纤维增生网状成片.高低剂量组较模型组炎性细胞浸润较轻,胶原染色较轻淡,高剂量组变化小.TGF-β1、CTGF、α-SMA蛋白平均阳性表达率两个药物治疗组与模型组相比,4周时低剂量组均无差异,8周时两个药物治疗组均有显著差异(P<0.01).比较TGF-β1、CTGF mRNA表达时发现,低剂量组4周时与模型组相比均无差异,8周时高剂量组与模型组相比均有差异(P<0.05).结论 改良地黄散可能通过影响TGF-β1-CTGF信号通路,下调α-SMA的阳性表达,减轻肾纤维化的病理变化,延缓肾纤维化的发展.

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